第五章食品微生物檢驗室及配置課件1

第二節(jié)、食品微生物檢驗室常用儀器一、培養(yǎng)箱二、普通冰箱三、低溫冰箱四、分光光度計五、離心機六、干燥箱或烘箱七、高壓蒸汽滅菌器八、電熱恒溫水浴鍋九、超凈工作臺十、細菌濾器十一、凍干機十二、顯微鏡第二節(jié)、食品微生物檢驗室常用儀器一、培養(yǎng)箱八、電熱恒溫水浴鍋1一、培養(yǎng)箱普通培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱恒溫恒濕箱厭氧培養(yǎng)箱一、培養(yǎng)箱普通培養(yǎng)箱2①電熱恒溫培養(yǎng)箱1、普通培養(yǎng)箱電熱恒溫培養(yǎng)箱適用于醫(yī)療衛(wèi)生、醫(yī)藥工業(yè)、生物化學和農業(yè)科學等科研和工業(yè)生產部門做細菌培養(yǎng)、發(fā)酵及恒電熱恒溫培養(yǎng)箱溫試驗用。①電熱恒溫培養(yǎng)箱1、普通培養(yǎng)箱電熱恒溫培養(yǎng)箱適34使用說明：1、當試驗物品放入培養(yǎng)箱內后，將箱門關上，并將箱頂上風頂活門適當旋開。2、接通電源，開啟電源開關。3、溫度設定：操作控溫儀版面上設定鍵，按控溫儀說明書上操作說明設定所需溫度。指示燈指示。培養(yǎng)箱加熱或恒溫狀態(tài)有綠燈指示燈指示。

4、使用時應防止較硬物件接觸、碰撞傳感器探頭，以免損壞。5、控溫儀詳細使用說明請閱控溫儀使用說明。4使用說明：45

恒溫振蕩培養(yǎng)箱

恒溫廣泛應用于對溫度、震蕩頻率有著較高要求的生物、化學反應、細菌培養(yǎng)、發(fā)酵、雜交以及酶、細胞組織研究等，可對微生物細胞與各類菌種作運動培養(yǎng)也可作靜態(tài)培養(yǎng)，在生物、分子、醫(yī)學、制藥、食品、環(huán)保等研究、應用領域有著廣泛而重要的應用。

5恒溫振蕩培養(yǎng)箱5隔水式恒溫培養(yǎng)箱

隔水式培養(yǎng)箱數(shù)字控溫，不銹鋼內膽，俗稱水夾套培養(yǎng)箱。溫度均勻，斷電后仍能保持較長時間恒溫。隔水式恒溫培養(yǎng)箱隔水式培養(yǎng)箱數(shù)字控溫，不銹鋼內膽，62、生化培養(yǎng)箱

適用于環(huán)境保護、衛(wèi)生防疫、藥檢、農畜、水產等研究、院校、生產部門、是細菌、霉菌、微生物的培養(yǎng)、保存、植物栽培、育種實驗的專用恒溫設備。工作室容積:70升、150升、250升、350升、500升溫度范圍：4～60℃控溫精度：0.1℃溫度均勻度：≤±1℃溫度波動度：≤±0.5℃2、生化培養(yǎng)箱適用于環(huán)境保護、衛(wèi)生防疫、藥檢、農畜73、恒溫恒濕箱可作為霉菌培養(yǎng)箱3、恒溫恒濕箱可作為霉菌培養(yǎng)箱84.厭氧培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng)4.厭氧培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng)95、培養(yǎng)箱的使用使用注意事項：(1)箱內不能放入過熱或過冷的物品，取放物品時應快速進行并做到隨手關閉箱門。(2)初用時檢查溫度調節(jié)器是否準確，箱內各部位的溫度是否均勻一致。(3)培養(yǎng)物不能放在最底層，也不得放置過于擁擠。(4)每月消毒一次，先用3%的來蘇爾液涂布消毒，再用清水擦凈。(5)不得當烘箱使用。培養(yǎng)箱的配置和使用

配置22℃，30℃和37℃培養(yǎng)箱各一個。5、培養(yǎng)箱的使用使用注意事項：培養(yǎng)箱的配置和使用10二、普通冰箱冰柜1、取用冰箱冰柜內物品盡可能快，取完后及時將有用物品放回原處；2、關冰柜門時應輕輕合上，同時將門輕輕往外拉一下檢查是否關好;3、冰柜內的不要樣品應及時清理。二、普通冰箱冰柜1、取用冰箱冰柜內物品盡可能快，取完后及時11冰箱&樣品冰箱&樣品12三、低溫冰箱常見的低溫冰箱一般分為-40度，-90度，-110度，-130度，還有-160度的等

三、低溫冰箱常見的低溫冰箱一般分為-40度，-90度，-111314分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析。

常用的波長范圍為：(1)200～400nm的紫外光區(qū)(2)400～760nm的可見光區(qū),(3)2.5～25μm（按波數(shù)計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。四、分光光度計所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計14分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一14四、分光光度計歷史問題1:石英比色皿和玻璃比色皿混亂使用。不及時歸還。歷史問題2:比色皿容易捏壞！歷史問題3:分光光度計拉桿下面的支座銹死，位置卡不準，完全不能修理。歷史問題4:比色皿被染色，玻璃塊接縫處尤其嚴重。歷史問題5:拉桿定位鋼珠容易拉壞。導致無法定位。沒有及時歸位，損壞拉桿。四、分光光度計歷史問題1:石英比色皿和玻璃比色皿混亂使用。15五、離心機離心機的類型：普通離心機高速離心機超速離心機（大于20000r/min）

離心機是借離心力分離液相的設備，根據(jù)物質的沉降系數(shù)、質量、密度等的不同，應用強大的離心力使物質分離、濃縮和提純的方法稱為離心五、離心機離心機的類型：離心機是借離心力分離液相的16類型普通離心機高速離心機超速離心機最大轉速(r/min)600025000可達75000以上最大RCF（g）600089000可達510000以上分離形式固液沉淀固液沉淀分離密度梯度區(qū)帶分離或差速沉降分離轉子角式和外擺式轉子角式、外擺式轉子等角式、外擺式、區(qū)帶轉子等儀器結構性能和特點速率不能嚴格控制，多數(shù)室溫下操作有消除空氣和轉子間摩擦熱的制冷裝置，速率和溫度控制較準確、嚴格。備有消除轉子與空氣摩擦熱的真空和冷卻系統(tǒng)，有更為精確的溫度和速度控制、監(jiān)測系統(tǒng)、有保證轉子正常運轉的傳動和制動裝置等。應用收集易沉降的大顆粒（如RBC、酵母細胞等）收集微生物、細胞碎片、大細胞器、硫酸銨沉淀物和免疫沉淀物等。但不能有效沉淀病毒、小細胞器（如核糖體）、蛋白質等大分子。主要分離細胞器、病毒、核酸、蛋白質、多糖等甚至能分開分子大小相近的同位素標記物15N-DNA和未標記的DNA。類型普通離心機高速離心機超速離心機最大轉速(r/min)6017臺式高速冷凍離心機臺式高速冷凍離心機18第五章食品微生物檢驗室及配置課件119第五章食品微生物檢驗室及配置課件120轉子許多離心機可以配用不同大小的離心管，只需要改變轉子或使用一個與不同的吊桶/適配器相配的轉子。1．水平轉子：盛樣品的離心管放在吊桶內，以轉子的加速度運轉。水平轉子用于低速離心機，其主要缺陷是延長了沉淀的路徑。同時，減速過程中產生的對流會引起沉淀物的重新懸浮。2．角式轉子：許多高速離心機及微量離心機安裝。由于沉降路徑短，沉淀顆粒時角式轉子比水平轉子的效率更高。3．垂直管轉子：用于高速及超高速離心機進行等密度梯度離心時。這種轉子在沉淀沒有形成之前不能用來收集懸浮液中的顆粒。轉子：（a）水平轉子；（b）固定轉角轉子；（c）垂直離心管轉子轉子許多離心機可以配用不同大小的離心管，只需要改變轉子或使用21滅菌器干熱滅菌器-六：干燥箱濕熱滅菌器-七：高壓蒸汽滅菌鍋滅菌器干熱滅菌器-六：干燥箱22六、干燥箱或烘箱用途：用于玻璃器皿等耐熱物品的烤干和滅菌。

玻璃器皿等物的滅菌，溫度160~165℃，滅菌2小時。六、干燥箱或烘箱用途：23第五章食品微生物檢驗室及配置課件124歷史問題一：燒爛的框子，烤扁的樣品瓶！歷史問題一：燒爛的框子，烤扁的樣品瓶！25歷史問題一：燒爛的框子，烤扁的樣品瓶！歷史問題二：放在烘箱里面，靠外的玻璃器皿容易打碎！歷史問題三（最最常見的一個問題）：烘箱上面堆積物品，容易打碎東西，不好看！而且落灰，又要重洗！歷史問題四：容量瓶、量筒、移液管等度量容器放進去烘，影響測量準確性！歷史問題五：烘箱105℃烘水分，一般2-4個小時就足夠了，烘了很長時間，引發(fā)安全問題！歷史問題一：燒爛的框子，烤扁的樣品瓶！26玻璃器材的干熱滅菌方法(1)將培養(yǎng)皿、吸管等玻璃器皿洗凈干燥后，用報紙包好，或裝入特制的鐵筒中。(2)將包裝好的玻璃儀器擺入電熱烘箱中，彼此間留有一定的空隙以便流通空氣。(3)關緊箱門，打開排氣孔接上電源。(4)待箱內空氣排出到一定程度時，關閉上排氣孔，繼續(xù)加熱至一定溫度后，調節(jié)溫度控制旋鈕固定溫度，在160℃—165℃保持2小時即可。(5)待自然降溫冷卻后(60℃以下)才能開門取出玻璃器皿。玻璃器材的干熱滅菌方法(1)將培養(yǎng)皿、吸管等玻璃器皿洗凈干27七、高壓蒸汽滅菌器種類：手提式、立式、臥式殺菌鍋用途：培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄物、采樣器、紗布、衣物的滅菌。

微生物實驗室的明星儀器??！七、高壓蒸汽滅菌器種類：手提式、立式、臥式殺菌鍋用途：培養(yǎng)基28滅菌原理：

在密閉的蒸鍋內，蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，是水的沸點不斷提高，鍋內溫度不斷上升，在0.1MPa壓力下，溫度達到121℃，可殺滅各種細菌極高度耐熱芽孢。滅菌原理：29不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器（電熱）臥式高壓滅菌鍋不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器（電熱）臥式高壓滅菌鍋3031立式高壓滅菌鍋31立式高壓滅菌鍋3132全自動高壓滅菌器32全自動高壓滅菌器32大型高壓蒸汽殺菌鍋的基本操作方法放干消毒鍋內的剩余水，加入純凈水至最高水位；放入物品，關上消毒鍋門；冷凝閥開1圈；消毒鈕順時針撥至“關”；選擇所需的殺菌壓力0.07、0.11或0.14Mpa后；開啟電源；當溫度達到100℃左右時就可將消毒鈕順時針撥至“消毒”及冷凝閥關至剛好有冷凝水和蒸氣冒出為止；當消毒室溫度達到所需溫度時開始計時，到時間后關閘。大型高壓蒸汽殺菌鍋的基本操作方法放干消毒鍋內的剩余水，加入純33使用高壓蒸汽殺菌鍋的注意事項A：為避免燙傷，只有當溫度降低到70℃以下時放可小心的打開消毒鍋門。B：為避免消毒鍋冷卻后消毒室內產生負壓而打不開消毒鍋門，所以當消毒室溫度低于70℃時就可慢慢把門打開。C：根據(jù)消毒物品選擇排氣方式：（1）.如有液體（營養(yǎng)液等）請選擇慢排。（2）.如只有廢品等可選擇快排。使用高壓蒸汽殺菌鍋的注意事項A：為避免燙傷，只有當溫度降低到34手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法（1）、關好排水閥門放入清水至標度為止。（2）、將要滅菌的物品用牛皮紙蓋好后放入滅菌鍋中，關上器蓋。（3）、通電加溫，同時打開排氣活門，排盡鍋內的空氣，再關閉活門。（4）、當達到所需溫度時開始計時，并在此溫度下保持所需的時間。手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法（1）、關好排水閥門放入清水35（5）、稍微打開一點排氣活門，使鍋內蒸氣緩慢排除。（6）、當壓力表指針降到零、鍋內蒸氣完全排盡時，立即打開鍋蓋取出物品。（7）、最后將高壓滅菌器內的剩余水排出。（5）、稍微打開一點排氣活門，使鍋內蒸氣緩慢排除。36八、電熱恒溫水浴鍋（1）37℃和42℃水浴鍋24小時工作；（2）其余水渦鍋用后關掉電源；（3）水浴鍋內應注加蒸餾水而非自來水，使用時請注意水位。用于溫漬化學藥品、熔化培養(yǎng)基等八、電熱恒溫水浴鍋（1）37℃和42℃水浴鍋24小時工作37第五章食品微生物檢驗室及配置課件138水浴鍋歷史問題1：水臭了，長蟲子，形成微型生物系統(tǒng)~~~原因：長時間不用，沒有及時清理，沒有放干水。

歷史問題2：水不夠，調高溫，導致干燒，冒煙原因1：高溫加熱，沒有及時加滿水；原因2：加了水，但溫度高，蒸發(fā)速度快，一下子就干了，導致燒壞了機子。建議：加好水再開始，要考慮到會蒸發(fā)，高溫水浴時多看看。

歷史問題3：水浴鍋漏電原因：沒有及時換水，因為水質太臟引起漏電。水浴鍋歷史問題1：水臭了，長蟲子，形成微型生物系統(tǒng)~~~39九、超凈工作臺垂直流水平流高效空氣過濾器、風機、超凈工作臺

工作原理為：通過風機將空氣吸入，經由靜壓箱通過高效過濾器過濾，將過濾后的潔凈空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出，使操作區(qū)域持續(xù)在潔凈空氣的控制下達到百級潔凈度，保證生產對環(huán)境潔凈度的要求。九、超凈工作臺垂直流高效空氣過濾器、風機、超凈工作臺4041

超凈工作臺是一種層流設備，是有經過高效過濾的清潔空氣的封閉的操作臺、柜，通常是作為清潔實驗室的一部分。近年來，超凈工作臺已經廣泛用于生物醫(yī)學研究、制藥、空間科學等需要潔凈空氣的操作環(huán)境。

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超凈工作臺是一種層流設備，是有經過高效過濾的清潔空41超凈工作臺操作:①、先經過清潔液浸泡的紗布（75%的酒精）擦拭臺面，然后用消毒劑擦拭消毒。②、使用工作臺時，接通電源，提前50分鐘開機，打開紫外燈照射消毒，處理凈化工作區(qū)內工作臺表面積累的微生物，30分鐘后，關閉紫外燈，開啟送風機③、使用中，有機玻璃罩受到污染，嚴禁用酒精棉球擦拭，請用含水棉布檫拭；④、不要存放不必要的物品，以保持工作區(qū)內的潔凈氣流不受干擾。⑤、操作區(qū)應盡量避免擾亂氣流流型的動作，操作區(qū)的使用溫度不可超過60℃。超凈工作臺操作:①、先經過清潔液浸泡的紗布（75%的酒精）擦42物品數(shù)量物品數(shù)量酒精燈1個滅菌營養(yǎng)瓊脂200ml打火機1個滅菌雙料發(fā)酵管6根接種針1個滅菌單料發(fā)酵管12根消毒面團1瓶滅菌平皿10塊洗耳球1個試管架2副鑷子1個2ml滅菌吸管5根油筆1支10ml滅菌吸管3根試管簍2個125ml滅菌燒杯2個

⑥、

操作結束后，清理工作臺面，收集各廢棄物，勿忘關閉煤氣開關或酒精燈；請做好使用記錄。關閉風機及照明開關，用清潔劑及消毒劑擦拭消毒。物品數(shù)量物品數(shù)量酒精燈1個滅菌營養(yǎng)瓊脂200ml打火43維護超凈工作臺的濾材每2年更換一次，并作好更換記錄。每二月用風速計測量一次工作區(qū)平均風速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術標準，應調節(jié)調壓器手柄，改變風機輸入電壓，使工作臺處于最佳狀況。每月進行一次維護檢查，并填寫維護記錄。每次使用完畢，立即清潔儀器，懸掛標識，并填寫儀器使用記錄。取樣結束后，先用毛刷刷去潔凈工作區(qū)的雜物和浮塵、用細軟布擦拭工作臺表面污跡、污垢目測無清潔劑殘留，用清潔布擦干；要經常用紗布沾上酒精將紫外線殺菌燈表面擦干凈,保持表面清潔,否則會影響殺菌能力；設備內外表面應該光亮整潔，沒有污跡。

維護超凈工作臺的濾材每2年更換一次，并作好更換記錄。44垂直流超凈工作臺垂直流超凈工作臺45水平單向流潔凈工作臺水平單向流潔凈工作臺46十、細菌濾器用來除去糖溶液、血清、腹水、某些藥物等不耐熱液體中的細菌，也可以用來分離病毒以及病毒顆粒的大小十、細菌濾器用來除去糖溶液、血清、腹水、某些藥物等47MF75快速抽濾器方便過濾1000ml容量的培養(yǎng)液、緩沖液等，可直接保存和分裝?？筛邷販缇?。Nalgene可反復用抽濾裝置MF75快速抽濾器方便過濾1000ml容量的培養(yǎng)液、緩沖液48十、凍干機組成：主要由干燥機、真空泵、壓力計、真空度檢驗槍組成原理：將物料中水分直接升華而干燥其主要優(yōu)點是：（1）干燥后的物料保持原來的化學組成和物理性質（如多孔結構、膠體性質等）；（2）熱量消耗比其他干燥方法少。缺點是費用較高，不能廣泛采用。用于干燥抗生素、蔬菜和水果等。十、凍干機組成：主要由干燥機、真空泵、壓力計、真空49普通顯微鏡的保養(yǎng)：1、觀察完后，移去觀察的載玻片標本。2、用過油浸鏡的，應先用擦鏡紙將鏡頭上的油擦去，再用擦鏡紙蘸著擦鏡液擦拭2—3次，最后再用擦鏡紙將二擦鏡液苯擦去。3、轉動物鏡轉換器，放在低倍鏡的位置。4、將鏡身下降到最低位置，調節(jié)好鏡臺上標本移動器的位置，罩上防塵套。十一、顯微鏡普通顯微鏡的保養(yǎng)：1、觀察完后，移去觀察的載玻片標本。十一、50數(shù)字顯微鏡

數(shù)字顯微鏡

51菌落計數(shù)器

自動細菌菌落測定分析儀其他儀器菌落計數(shù)器

自動細菌菌落測定分析儀其他儀器521、可直接測讀菌體本身在培養(yǎng)液中造成的導電度變化，或利用菌體在代謝過程中的產物所造成的導電度變化，快速測定樣品中細菌含量數(shù)目。

2、適用于各種食品，制藥，石化工廠的微生物品質管理，取代傳統(tǒng)方法將偵測時間由3-5天減到幾個小時。亦可用于做樣品的抗菌性試驗?？焖僮詣泳鷶?shù)導電測定儀1、可直接測讀菌體本身在培養(yǎng)液中造成的導電度變化，或利用菌體53細胞的總數(shù)、細胞的直徑、平均直徑、細胞濃度等。儀器全自動操作，避免人工操作的誤差，數(shù)據(jù)精確，省時省力。是您作細胞研究的好助手，是研究細胞的更高層次的選擇細胞/顆粒分析計數(shù)儀空氣微生物檢測儀細胞的總數(shù)、細胞的直徑、平均直徑、細胞濃度等。儀器全自動操作54適合CGMP藥廠,食品加工廠,醫(yī)院手術防,無塵無菌室室Class100~100000之等級微粒子落塵計數(shù)器

適合CGMP藥廠,食品加工廠,醫(yī)院手術防,無塵無菌室室55biolog自動微生物鑒定系統(tǒng)（MicrobialIdentificationSystem）

Biolog能鑒定常見的腸桿菌、芽胞桿菌、棒狀桿菌、嗜血桿菌、厭氧菌、酵母樣真菌、絲狀真菌等微生物，幾乎覆蓋了所有人體、動植物微生物和大部分環(huán)境微生物，被廣泛應用于各種領域。

biolog自動微生物鑒定系統(tǒng)（MicrobialIden56思考題干熱滅菌和高壓蒸汽法適用范圍如何?電熱烘箱和高壓鍋如何操作?各有哪些使用注意事項?思考題干熱滅菌和高壓蒸汽法適用范圍如何?57第三節(jié)食品微生物檢驗室常用的玻璃器皿第三節(jié)食品微生物檢驗室常用的玻璃器皿58一、常用玻璃器材的種類及用途二、玻璃器皿的清潔法三、玻璃器皿的滅菌一、常用玻璃器材的種類及用途591、移液管1ml，2ml，5ml，10ml，25ml

一、常用玻璃器材的種類及用途（一）量器類1、移液管1ml，2ml，5ml，10ml，25ml

一、602、容量瓶50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml2、容量瓶50ml，100ml，250ml，500ml，161固定體積移液器數(shù)字型可調移液器P型3、微量取樣器固定體積移液器數(shù)字型可調移液器P型3、微量取樣器62歷史問題1：旋轉太猛烈。歷史問題2:裝槍頭時在槍頭盒上敲打。導致彈簧變松。歷史問題3:吸取液體時，試劑沖到槍體內，染色、腐蝕槍體。歷史問題1：旋轉太猛烈。63歷史問題1：旋轉太猛烈。歷史問題2:裝槍頭時在槍頭盒上敲打。導致彈簧變松。歷史問題3:吸取液體時，試劑沖到槍體內，染色、腐蝕槍體。歷史問題4:移液管的不可替代性！在強酸強堿部分的使用。歷史問題5:沒有處理好槍頭，就直接平放，導致液體進入槍體內。歷史問題6：槍到處拿，找不到槍。歷史問題7：啪啪啪啪~~~槍掉落的次數(shù)比較多歷史問題8：5ml的移液槍放在2ml刻度過夜，彈簧都擠壓。歷史問題1：旋轉太猛烈。64（二）、其他常用玻璃器皿（二）、其他常用玻璃器皿653.5cm,7cm，9cm，15cm

1、培養(yǎng)皿3.5cm,7cm，9cm，15cm

1、培養(yǎng)皿662、試管2、試管67第五章食品微生物檢驗室及配置課件168各種試管的使用13mmX100mm：生化反應及凝集反應15mmX150mm：斜面培養(yǎng)18mmX180mm：檢樣稀釋各種試管的使用13mmX100mm：生化反應及凝集反應69型號150ml，200ml，250ml，500ml，1L，2L，3L

3、三角瓶型號150ml，200ml，250ml，500ml，1L，70燒杯容量（ml）：30、50、100、150、250、400、600、1000、2000、3000燒杯容量（ml）：71二、玻璃器皿的清洗(一)、新購的玻璃器皿1、先浸泡于２％的鹽酸中數(shù)小時，最后用流水沖凈。2、再用肥皂水刷洗，流水沖凈。二、玻璃器皿的清洗(一)、新購的玻璃器皿72(二)、用過的玻璃器皿

(二)、用過的玻璃器皿731、一般玻璃器皿（1）、高壓滅菌；（2）、趁熱倒去污物；（3）、5%肥皂水煮沸5min（4）、肥皂水刷洗干凈，烘干或晾干備用。1、一般玻璃器皿（1）、高壓滅菌；742、含菌吸管的清洗（1）、把含菌吸管投入2%的來蘇爾液內浸泡48h消毒；（2）、用肥皂水洗滌一次；（3）、最后用清水沖洗干凈即可。2、含菌吸管的清洗（1）、把含菌吸管投入2%的來蘇爾液內浸泡753.含有瓊脂培養(yǎng)基的玻璃器皿先用小刀或鑷子、玻璃棒將器皿中的瓊脂培養(yǎng)基刮下。如果瓊脂培養(yǎng)基已經干燥，可將器皿放在少量水中煮沸，使瓊脂熔化后趁熱倒出，然后用水洗滌，并用刷子沾洗滌劑擦洗內壁，然后用清水沖洗干凈。

3.含有瓊脂培養(yǎng)基的玻璃器皿先用小刀或鑷子、玻璃棒將器皿764.血球計數(shù)板的清洗

血球計數(shù)板（或PetrofHausser細菌計數(shù)板）使用后應立即在水龍頭下用水沖凈，必要時可用95％酒精浸泡，或用酒精棉輕輕擦拭，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網格刻度。洗滌完畢鏡檢計數(shù)區(qū)是否殘留菌體或其他沉淀物，若不干凈，則必須重復洗滌至潔凈為止。洗凈后自行晾干或用吹風機吹干，放入盒內保存。4.血球計數(shù)板的清洗血球計數(shù)板（或PetrofHa775、載玻片及蓋玻片的清洗（1）將載玻片及蓋玻片分別浸入2%的來蘇爾液內浸泡過夜，取出水洗干凈；（2）蓋片用軟布擦干即可；（3）染色用的載玻片要放入肥皂水中煮沸10min，再用肥皂水刷洗干凈，最后用95%的酒精中備用。5、載玻片及蓋玻片的清洗（1）將載玻片及蓋玻片分別浸入2%78三、玻璃器皿的滅菌（1）清洗后烘干；（2）加塞包扎；（3）滅菌:干熱滅菌:160~165℃烘箱中烤2h濕熱滅菌:121℃20min三、玻璃器皿的滅菌（1）清洗后烘干；79思考題1、無菌室的結構和要求是什么?無菌室無菌程度的測定方法是什么？2、在微生物實驗室中如何配置培養(yǎng)箱和水浴鍋,使用中要注意哪些問題?3、如何正確使用超凈臺?4、干熱滅菌和濕熱滅菌各適用于哪些物品的滅菌？5、如何正確使用干熱滅菌方法對玻璃器材進行滅菌?6、如何進行玻璃器皿的清洗和滅菌?思考題1、無菌室的結構和要求是什么?無菌室無菌程度的測定方法80第二節(jié)、食品微生物檢驗室常用儀器一、培養(yǎng)箱二、普通冰箱三、低溫冰箱四、分光光度計五、離心機六、干燥箱或烘箱七、高壓蒸汽滅菌器八、電熱恒溫水浴鍋九、超凈工作臺十、細菌濾器十一、凍干機十二、顯微鏡第二節(jié)、食品微生物檢驗室常用儀器一、培養(yǎng)箱八、電熱恒溫水浴鍋81一、培養(yǎng)箱普通培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱恒溫恒濕箱厭氧培養(yǎng)箱一、培養(yǎng)箱普通培養(yǎng)箱82①電熱恒溫培養(yǎng)箱1、普通培養(yǎng)箱電熱恒溫培養(yǎng)箱適用于醫(yī)療衛(wèi)生、醫(yī)藥工業(yè)、生物化學和農業(yè)科學等科研和工業(yè)生產部門做細菌培養(yǎng)、發(fā)酵及恒電熱恒溫培養(yǎng)箱溫試驗用。①電熱恒溫培養(yǎng)箱1、普通培養(yǎng)箱電熱恒溫培養(yǎng)箱適8384使用說明：1、當試驗物品放入培養(yǎng)箱內后，將箱門關上，并將箱頂上風頂活門適當旋開。2、接通電源，開啟電源開關。3、溫度設定：操作控溫儀版面上設定鍵，按控溫儀說明書上操作說明設定所需溫度。指示燈指示。培養(yǎng)箱加熱或恒溫狀態(tài)有綠燈指示燈指示。

4、使用時應防止較硬物件接觸、碰撞傳感器探頭，以免損壞。5、控溫儀詳細使用說明請閱控溫儀使用說明。4使用說明：8485

恒溫振蕩培養(yǎng)箱

恒溫廣泛應用于對溫度、震蕩頻率有著較高要求的生物、化學反應、細菌培養(yǎng)、發(fā)酵、雜交以及酶、細胞組織研究等，可對微生物細胞與各類菌種作運動培養(yǎng)也可作靜態(tài)培養(yǎng)，在生物、分子、醫(yī)學、制藥、食品、環(huán)保等研究、應用領域有著廣泛而重要的應用。

5恒溫振蕩培養(yǎng)箱85隔水式恒溫培養(yǎng)箱

隔水式培養(yǎng)箱數(shù)字控溫，不銹鋼內膽，俗稱水夾套培養(yǎng)箱。溫度均勻，斷電后仍能保持較長時間恒溫。隔水式恒溫培養(yǎng)箱隔水式培養(yǎng)箱數(shù)字控溫，不銹鋼內膽，862、生化培養(yǎng)箱

適用于環(huán)境保護、衛(wèi)生防疫、藥檢、農畜、水產等研究、院校、生產部門、是細菌、霉菌、微生物的培養(yǎng)、保存、植物栽培、育種實驗的專用恒溫設備。工作室容積:70升、150升、250升、350升、500升溫度范圍：4～60℃控溫精度：0.1℃溫度均勻度：≤±1℃溫度波動度：≤±0.5℃2、生化培養(yǎng)箱適用于環(huán)境保護、衛(wèi)生防疫、藥檢、農畜873、恒溫恒濕箱可作為霉菌培養(yǎng)箱3、恒溫恒濕箱可作為霉菌培養(yǎng)箱884.厭氧培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng)4.厭氧培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng)895、培養(yǎng)箱的使用使用注意事項：(1)箱內不能放入過熱或過冷的物品，取放物品時應快速進行并做到隨手關閉箱門。(2)初用時檢查溫度調節(jié)器是否準確，箱內各部位的溫度是否均勻一致。(3)培養(yǎng)物不能放在最底層，也不得放置過于擁擠。(4)每月消毒一次，先用3%的來蘇爾液涂布消毒，再用清水擦凈。(5)不得當烘箱使用。培養(yǎng)箱的配置和使用

配置22℃，30℃和37℃培養(yǎng)箱各一個。5、培養(yǎng)箱的使用使用注意事項：培養(yǎng)箱的配置和使用90二、普通冰箱冰柜1、取用冰箱冰柜內物品盡可能快，取完后及時將有用物品放回原處；2、關冰柜門時應輕輕合上，同時將門輕輕往外拉一下檢查是否關好;3、冰柜內的不要樣品應及時清理。二、普通冰箱冰柜1、取用冰箱冰柜內物品盡可能快，取完后及時91冰箱&樣品冰箱&樣品92三、低溫冰箱常見的低溫冰箱一般分為-40度，-90度，-110度，-130度，還有-160度的等

三、低溫冰箱常見的低溫冰箱一般分為-40度，-90度，-119394分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析。

常用的波長范圍為：(1)200～400nm的紫外光區(qū)(2)400～760nm的可見光區(qū),(3)2.5～25μm（按波數(shù)計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。四、分光光度計所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計14分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一94四、分光光度計歷史問題1:石英比色皿和玻璃比色皿混亂使用。不及時歸還。歷史問題2:比色皿容易捏壞！歷史問題3:分光光度計拉桿下面的支座銹死，位置卡不準，完全不能修理。歷史問題4:比色皿被染色，玻璃塊接縫處尤其嚴重。歷史問題5:拉桿定位鋼珠容易拉壞。導致無法定位。沒有及時歸位，損壞拉桿。四、分光光度計歷史問題1:石英比色皿和玻璃比色皿混亂使用。95五、離心機離心機的類型：普通離心機高速離心機超速離心機（大于20000r/min）

離心機是借離心力分離液相的設備，根據(jù)物質的沉降系數(shù)、質量、密度等的不同，應用強大的離心力使物質分離、濃縮和提純的方法稱為離心五、離心機離心機的類型：離心機是借離心力分離液相的96類型普通離心機高速離心機超速離心機最大轉速(r/min)600025000可達75000以上最大RCF（g）600089000可達510000以上分離形式固液沉淀固液沉淀分離密度梯度區(qū)帶分離或差速沉降分離轉子角式和外擺式轉子角式、外擺式轉子等角式、外擺式、區(qū)帶轉子等儀器結構性能和特點速率不能嚴格控制，多數(shù)室溫下操作有消除空氣和轉子間摩擦熱的制冷裝置，速率和溫度控制較準確、嚴格。備有消除轉子與空氣摩擦熱的真空和冷卻系統(tǒng)，有更為精確的溫度和速度控制、監(jiān)測系統(tǒng)、有保證轉子正常運轉的傳動和制動裝置等。應用收集易沉降的大顆粒（如RBC、酵母細胞等）收集微生物、細胞碎片、大細胞器、硫酸銨沉淀物和免疫沉淀物等。但不能有效沉淀病毒、小細胞器（如核糖體）、蛋白質等大分子。主要分離細胞器、病毒、核酸、蛋白質、多糖等甚至能分開分子大小相近的同位素標記物15N-DNA和未標記的DNA。類型普通離心機高速離心機超速離心機最大轉速(r/min)6097臺式高速冷凍離心機臺式高速冷凍離心機98第五章食品微生物檢驗室及配置課件199第五章食品微生物檢驗室及配置課件1100轉子許多離心機可以配用不同大小的離心管，只需要改變轉子或使用一個與不同的吊桶/適配器相配的轉子。1．水平轉子：盛樣品的離心管放在吊桶內，以轉子的加速度運轉。水平轉子用于低速離心機，其主要缺陷是延長了沉淀的路徑。同時，減速過程中產生的對流會引起沉淀物的重新懸浮。2．角式轉子：許多高速離心機及微量離心機安裝。由于沉降路徑短，沉淀顆粒時角式轉子比水平轉子的效率更高。3．垂直管轉子：用于高速及超高速離心機進行等密度梯度離心時。這種轉子在沉淀沒有形成之前不能用來收集懸浮液中的顆粒。轉子：（a）水平轉子；（b）固定轉角轉子；（c）垂直離心管轉子轉子許多離心機可以配用不同大小的離心管，只需要改變轉子或使用101滅菌器干熱滅菌器-六：干燥箱濕熱滅菌器-七：高壓蒸汽滅菌鍋滅菌器干熱滅菌器-六：干燥箱102六、干燥箱或烘箱用途：用于玻璃器皿等耐熱物品的烤干和滅菌。

玻璃器皿等物的滅菌，溫度160~165℃，滅菌2小時。六、干燥箱或烘箱用途：103第五章食品微生物檢驗室及配置課件1104歷史問題一：燒爛的框子，烤扁的樣品瓶！歷史問題一：燒爛的框子，烤扁的樣品瓶！105歷史問題一：燒爛的框子，烤扁的樣品瓶！歷史問題二：放在烘箱里面，靠外的玻璃器皿容易打碎！歷史問題三（最最常見的一個問題）：烘箱上面堆積物品，容易打碎東西，不好看！而且落灰，又要重洗！歷史問題四：容量瓶、量筒、移液管等度量容器放進去烘，影響測量準確性！歷史問題五：烘箱105℃烘水分，一般2-4個小時就足夠了，烘了很長時間，引發(fā)安全問題！歷史問題一：燒爛的框子，烤扁的樣品瓶！106玻璃器材的干熱滅菌方法(1)將培養(yǎng)皿、吸管等玻璃器皿洗凈干燥后，用報紙包好，或裝入特制的鐵筒中。(2)將包裝好的玻璃儀器擺入電熱烘箱中，彼此間留有一定的空隙以便流通空氣。(3)關緊箱門，打開排氣孔接上電源。(4)待箱內空氣排出到一定程度時，關閉上排氣孔，繼續(xù)加熱至一定溫度后，調節(jié)溫度控制旋鈕固定溫度，在160℃—165℃保持2小時即可。(5)待自然降溫冷卻后(60℃以下)才能開門取出玻璃器皿。玻璃器材的干熱滅菌方法(1)將培養(yǎng)皿、吸管等玻璃器皿洗凈干107七、高壓蒸汽滅菌器種類：手提式、立式、臥式殺菌鍋用途：培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄物、采樣器、紗布、衣物的滅菌。

微生物實驗室的明星儀器??！七、高壓蒸汽滅菌器種類：手提式、立式、臥式殺菌鍋用途：培養(yǎng)基108滅菌原理：

在密閉的蒸鍋內，蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，是水的沸點不斷提高，鍋內溫度不斷上升，在0.1MPa壓力下，溫度達到121℃，可殺滅各種細菌極高度耐熱芽孢。滅菌原理：109不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器（電熱）臥式高壓滅菌鍋不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器（電熱）臥式高壓滅菌鍋110111立式高壓滅菌鍋31立式高壓滅菌鍋111112全自動高壓滅菌器32全自動高壓滅菌器112大型高壓蒸汽殺菌鍋的基本操作方法放干消毒鍋內的剩余水，加入純凈水至最高水位；放入物品，關上消毒鍋門；冷凝閥開1圈；消毒鈕順時針撥至“關”；選擇所需的殺菌壓力0.07、0.11或0.14Mpa后；開啟電源；當溫度達到100℃左右時就可將消毒鈕順時針撥至“消毒”及冷凝閥關至剛好有冷凝水和蒸氣冒出為止；當消毒室溫度達到所需溫度時開始計時，到時間后關閘。大型高壓蒸汽殺菌鍋的基本操作方法放干消毒鍋內的剩余水，加入純113使用高壓蒸汽殺菌鍋的注意事項A：為避免燙傷，只有當溫度降低到70℃以下時放可小心的打開消毒鍋門。B：為避免消毒鍋冷卻后消毒室內產生負壓而打不開消毒鍋門，所以當消毒室溫度低于70℃時就可慢慢把門打開。C：根據(jù)消毒物品選擇排氣方式：（1）.如有液體（營養(yǎng)液等）請選擇慢排。（2）.如只有廢品等可選擇快排。使用高壓蒸汽殺菌鍋的注意事項A：為避免燙傷，只有當溫度降低到114手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法（1）、關好排水閥門放入清水至標度為止。（2）、將要滅菌的物品用牛皮紙蓋好后放入滅菌鍋中，關上器蓋。（3）、通電加溫，同時打開排氣活門，排盡鍋內的空氣，再關閉活門。（4）、當達到所需溫度時開始計時，并在此溫度下保持所需的時間。手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法（1）、關好排水閥門放入清水115（5）、稍微打開一點排氣活門，使鍋內蒸氣緩慢排除。（6）、當壓力表指針降到零、鍋內蒸氣完全排盡時，立即打開鍋蓋取出物品。（7）、最后將高壓滅菌器內的剩余水排出。（5）、稍微打開一點排氣活門，使鍋內蒸氣緩慢排除。116八、電熱恒溫水浴鍋（1）37℃和42℃水浴鍋24小時工作；（2）其余水渦鍋用后關掉電源；（3）水浴鍋內應注加蒸餾水而非自來水，使用時請注意水位。用于溫漬化學藥品、熔化培養(yǎng)基等八、電熱恒溫水浴鍋（1）37℃和42℃水浴鍋24小時工作117第五章食品微生物檢驗室及配置課件1118水浴鍋歷史問題1：水臭了，長蟲子，形成微型生物系統(tǒng)~~~原因：長時間不用，沒有及時清理，沒有放干水。

歷史問題2：水不夠，調高溫，導致干燒，冒煙原因1：高溫加熱，沒有及時加滿水；原因2：加了水，但溫度高，蒸發(fā)速度快，一下子就干了，導致燒壞了機子。建議：加好水再開始，要考慮到會蒸發(fā)，高溫水浴時多看看。

歷史問題3：水浴鍋漏電原因：沒有及時換水，因為水質太臟引起漏電。水浴鍋歷史問題1：水臭了，長蟲子，形成微型生物系統(tǒng)~~~119九、超凈工作臺垂直流水平流高效空氣過濾器、風機、超凈工作臺

工作原理為：通過風機將空氣吸入，經由靜壓箱通過高效過濾器過濾，將過濾后的潔凈空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出，使操作區(qū)域持續(xù)在潔凈空氣的控制下達到百級潔凈度，保證生產對環(huán)境潔凈度的要求。九、超凈工作臺垂直流高效空氣過濾器、風機、超凈工作臺120121

超凈工作臺是一種層流設備，是有經過高效過濾的清潔空氣的封閉的操作臺、柜，通常是作為清潔實驗室的一部分。近年來，超凈工作臺已經廣泛用于生物醫(yī)學研究、制藥、空間科學等需要潔凈空氣的操作環(huán)境。

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超凈工作臺是一種層流設備，是有經過高效過濾的清潔空121超凈工作臺操作:①、先經過清潔液浸泡的紗布（75%的酒精）擦拭臺面，然后用消毒劑擦拭消毒。②、使用工作臺時，接通電源，提前50分鐘開機，打開紫外燈照射消毒，處理凈化工作區(qū)內工作臺表面積累的微生物，30分鐘后，關閉紫外燈，開啟送風機③、使用中，有機玻璃罩受到污染，嚴禁用酒精棉球擦拭，請用含水棉布檫拭；④、不要存放不必要的物品，以保持工作區(qū)內的潔凈氣流不受干擾。⑤、操作區(qū)應盡量避免擾亂氣流流型的動作，操作區(qū)的使用溫度不可超過60℃。超凈工作臺操作:①、先經過清潔液浸泡的紗布（75%的酒精）擦122物品數(shù)量物品數(shù)量酒精燈1個滅菌營養(yǎng)瓊脂200ml打火機1個滅菌雙料發(fā)酵管6根接種針1個滅菌單料發(fā)酵管12根消毒面團1瓶滅菌平皿10塊洗耳球1個試管架2副鑷子1個2ml滅菌吸管5根油筆1支10ml滅菌吸管3根試管簍2個125ml滅菌燒杯2個

⑥、

操作結束后，清理工作臺面，收集各廢棄物，勿忘關閉煤氣開關或酒精燈；請做好使用記錄。關閉風機及照明開關，用清潔劑及消毒劑擦拭消毒。物品數(shù)量物品數(shù)量酒精燈1個滅菌營養(yǎng)瓊脂200ml打火123維護超凈工作臺的濾材每2年更換一次，并作好更換記錄。每二月用風速計測量一次工作區(qū)平均風速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術標準，應調節(jié)調壓器手柄，改變風機輸入電壓，使工作臺處于最佳狀況。每月進行一次維護檢查，并填寫維護記錄。每次使用完畢，立即清潔儀器，懸掛標識，并填寫儀器使用記錄。取樣結束后，先用毛刷刷去潔凈工作區(qū)的雜物和浮塵、用細軟布擦拭工作臺表面污跡、污垢目測無清潔劑殘留，用清潔布擦干；要經常用紗布沾上酒精將紫外線殺菌燈表面擦干凈,保持表面清潔,否則會影響殺菌能力；設備內外表面應該光亮整潔，沒有污跡。

維護超凈工作臺的濾材每2年更換一次，并作好更換記錄。124垂直流超凈工作臺垂直流超凈工作臺125水平單向流潔凈工作臺水平單向流潔凈工作臺126十、細菌濾器用來除去糖溶液、血清、腹水、某些藥物等不耐熱液體中的細菌，也可以用來分離病毒以及病毒顆粒的大小十、細菌濾器用來除去糖溶液、血清、腹水、某些藥物等127MF75快速抽濾器方便過濾1000ml容量的培養(yǎng)液、緩沖液等，可直接保存和分裝?？筛邷販缇algene可反復用抽濾裝置MF75快速抽濾器方便過濾1000ml容量的培養(yǎng)液、緩沖液128十、凍干機組成：主要由干燥機、真空泵、壓力計、真空度檢驗槍組成原理：將物料中水分直接升華而干燥其主要優(yōu)點是：（1）干燥后的物料保持原來的化學組成和物理性質（如多孔結構、膠體性質等）；（2）熱量消耗比其他干燥方法少。缺點是費用較高，不能廣泛采用。用于干燥抗生素、蔬菜和水果等。十、凍干機組成：主要由干燥機、真空泵、壓力計、真空129普通顯微鏡的保養(yǎng)：1、觀察完后，移去觀察的載玻片標本。2、用過油浸鏡的，應先用擦鏡紙將鏡頭上的油擦去，再用擦鏡紙蘸著擦鏡液擦拭2—3次，最后再用擦鏡紙將二擦鏡液苯擦去。3、轉動物鏡轉換器，放在低倍鏡的位置。4、將鏡身下降到最低位置，調節(jié)好鏡臺上標本移動器的位置，罩上防塵套。十一、顯微鏡普通顯微鏡的保養(yǎng)：1、觀察完后，移去觀察的載玻片標本。十一、130數(shù)字顯微鏡

數(shù)字顯微鏡

131菌落計數(shù)器

自動細菌菌落測定分析儀其他儀器菌落計數(shù)器

自動細菌菌落測定分析儀其他儀器1321、可直接測讀菌體本身在培養(yǎng)液中造成的導電度變化，或利用菌體在代謝過程中的產物所造成的導電度變化，快速測定樣品中細菌含量數(shù)目。

2、適用于各種食品，制藥，石化工廠的微生物品質管理，取代傳統(tǒng)方法將偵測時間由3-5天減到幾個小時。亦可用于做樣品的抗菌性試驗。快速自動菌數(shù)導電測定儀1、可直接測讀菌體本身在培養(yǎng)液中造成的導電度變化，或利用菌體133細胞的總數(shù)、細胞的直徑、平均直徑、細胞濃度等。儀器全自動操作，避免人工操作的誤差，數(shù)據(jù)精確，省時省力。是您作細胞研究的好助手，是研究細胞的更高層次的選擇細胞/顆粒分析計數(shù)儀空氣微生物檢測儀細胞的總數(shù)、細胞的直徑、平均直徑、細胞濃度等。儀器全自動操作134適合CGMP藥廠,食品加工廠,醫(yī)院手術防,無塵無菌室室Class100~100000之等級微粒子落塵計數(shù)器

適合CGMP藥廠,食品加工廠,醫(yī)院手術防,無塵無菌室室135biolog自動微生物鑒定系統(tǒng)（MicrobialIdentificationSystem）

Biolog能鑒定常見的腸桿菌、芽胞桿菌、棒狀桿菌、嗜血桿菌、厭氧菌、酵母樣真菌、絲狀真菌等微生物，幾乎覆蓋了所有人體、動植物微生物和大部分環(huán)境微生物，被廣泛應用于各種領域。

biolog自動微生物鑒定系統(tǒng)（MicrobialIden136思考題干熱滅菌和高壓蒸汽法適用范圍如何?電熱烘箱和高壓鍋如何操作?各有哪些使用注意事項?思考題干熱滅菌和高壓蒸汽法適用范圍如何?137第三節(jié)食品微生物檢驗室常用的玻璃器皿第三節(jié)食品微生物檢驗室常用的玻璃器皿138一、常用玻璃器材的種類及用途二、玻璃器皿的清潔法三、玻璃器皿的滅菌一、常用玻璃器材的種類及用途1391、移液管1ml，2ml，5ml，10ml，25ml

一、常用玻璃器材的種類及用途（一）量器類1、移液管1ml，2ml，5ml，10ml，25ml

一、1402、容量瓶50ml，100ml，