2023學(xué)年河南省安陽(yáng)市林州一中高考沖刺押題（最后一卷）生物試卷含解析

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請(qǐng)務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫(xiě)在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對(duì)應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動(dòng)，請(qǐng)用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無(wú)效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫(xiě)清楚，線條、符號(hào)等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于病毒的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A．沒(méi)有獨(dú)立的代謝活動(dòng)，因此不能直接在培養(yǎng)液?jiǎn)为?dú)培養(yǎng)B．人體被免疫缺陷病毒感染，可導(dǎo)致獲得性免疫缺陷綜合癥C．逆轉(zhuǎn)錄病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖，需要由宿主細(xì)胞提供的逆轉(zhuǎn)錄酶D．病毒作為基因工程的運(yùn)載體，利用了病毒的侵染特性2．用同位素標(biāo)記法追蹤元素及物質(zhì)的去向是生物學(xué)研究的重要手段之一。下列結(jié)果正確的是（）A．用18O標(biāo)記的水培養(yǎng)植物細(xì)胞，短時(shí)間內(nèi)生成的O2和CO2均可能存在放射性B．用含有放射性碘的飼料飼喂蝌蚪，體內(nèi)促甲狀腺激素中可能檢測(cè)到放射性C．用無(wú)放射性噬菌體侵染被32P和35S標(biāo)記的大腸桿菌，子代噬菌體中含有32P，不含35SD．用14C標(biāo)記的CO2培養(yǎng)植物細(xì)胞，可在葉綠體生成的淀粉、蔗糖等物質(zhì)中檢測(cè)到放射性3．人體被蝎子蜇傷后將引發(fā)如圖所示的免疫過(guò)程，其中a～e表示不同的細(xì)胞，下列敘述正確的是（）A．細(xì)胞a與b的表面均含有抗原-MHC復(fù)合體的受體B．細(xì)胞c的增殖分化需要兩方面信號(hào)的刺激C．若無(wú)抗原進(jìn)入機(jī)體，則B淋巴細(xì)胞無(wú)法產(chǎn)生抗體D．圖中的細(xì)胞e的表面不存在特異性受體4．近年來(lái),單核細(xì)胞增多性李斯特菌腦膜炎的發(fā)病率正在不斷增加。李斯特氏菌屬于致死食源性細(xì)菌，會(huì)在人體細(xì)胞之間快速傳遞，使人患腦膜炎。原因是該菌的一種InIc蛋白可通過(guò)阻礙人體細(xì)胞中Tuba蛋白的活性，使細(xì)胞膜更易變形而有利于細(xì)菌的轉(zhuǎn)移。下列敘述正確的是（）①與酵母菌細(xì)胞的最大差別是該菌無(wú)核膜包被的細(xì)胞核②該細(xì)菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，所以其細(xì)胞增殖方式為無(wú)絲分裂③該菌以胞吞方式進(jìn)入人體細(xì)胞④Tuba蛋白和InIc蛋白的合成均需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的加工⑤該菌使人類細(xì)胞膜發(fā)生變形，說(shuō)明細(xì)胞膜具有選擇透過(guò)性A．①② B．①③ C．②④ D．②⑤5．下列關(guān)于種群和群落的描述中，正確的是（）A．樣方法能調(diào)查植物的種群密度，不能調(diào)查動(dòng)物的種群密度B．群落的垂直結(jié)構(gòu)有利于群落中生物充分利用環(huán)境資源C．調(diào)查群落的邊界不屬于群落水平研究的問(wèn)題D．調(diào)查某種植物的種群密度能反映該植物種群數(shù)量變化的趨勢(shì)6．植物群落在垂直方向上常表現(xiàn)出分層現(xiàn)象。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．這種垂直結(jié)構(gòu)提高了群落利用陽(yáng)光等環(huán)境資源的能力B．種植某種農(nóng)作物時(shí)，因植物群落分層現(xiàn)象的存在，所以要合理密植C．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，應(yīng)充分利用這一現(xiàn)象，合理搭配種植的作物品種D．從生物進(jìn)化的角度來(lái)看，群落結(jié)構(gòu)的形成是自然選擇的結(jié)果7．蛋白質(zhì)分子的功能與其結(jié)構(gòu)相關(guān)，下列敘述正確的是（）A．酶與底物結(jié)合后，兩者的形狀均發(fā)生改變B．酶在最適溫度下其空間結(jié)構(gòu)最穩(wěn)定C．受體與遞質(zhì)結(jié)合后形狀不會(huì)發(fā)生改變D．載體與被轉(zhuǎn)運(yùn)分子結(jié)合后發(fā)生形狀改變需要消耗ATP8．（10分）研究者連續(xù)培養(yǎng)乳腺癌細(xì)胞，取樣測(cè)定擁有不同DNA含量的細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果如右圖所示。長(zhǎng)春花堿阻礙紡錘體微管的形成，從而阻斷細(xì)胞分裂。若向乳腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)液中長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)添加長(zhǎng)春花堿，用相同方法測(cè)定每個(gè)細(xì)胞DNA含量與細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果最可能是下圖中的（）A． B． C． D．二、非選擇題9．（10分）研究發(fā)現(xiàn)，牛的瘤胃中含有多種纖維素分解菌，這些纖維素分解菌可用于分解秸稈等廢棄物。某科研小組按以下實(shí)驗(yàn)流程分離獲取了牛瘤胃中的纖維素酶高產(chǎn)菌株。（1）纖維素酶是由多種酶組成的復(fù)合酶，其中能催化纖維二糖水解的是________。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的_______進(jìn)行定量測(cè)定。（2）步驟A是_____________，可以通過(guò)此步驟增加______________________。（3）科研小組的某個(gè)同學(xué)將瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養(yǎng)液中，調(diào)節(jié)pH及溫度至適宜條件，并持續(xù)通入無(wú)菌空氣，結(jié)果一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中幾乎沒(méi)有菌種，原因是_________。（4）按照修正后的實(shí)驗(yàn)方法，研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明圈的菌落（如圖）。圖中透明圈的大小與纖維素酶的________有關(guān)；圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是____________。（5）現(xiàn)利用稀釋涂布平板法測(cè)定該目的菌的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下4個(gè)平板上均接種0.1ml樣品溶液，菌落數(shù)分別為156、178、486、191，通過(guò)計(jì)算得知原樣品溶液中每毫升含有目的菌1.75×108個(gè)，則稀釋倍數(shù)是________________。10．（14分）咔唑（含N有機(jī)物）具有潛在致癌性，且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定難以清除。為了獲得高效降解咔唑的微生物，研究人員設(shè)計(jì)了如圖所示的實(shí)驗(yàn)方案（①～⑦表示相應(yīng)的標(biāo)注操作過(guò)程）。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。（1）圖示所用的“CNFM+咔唑”培養(yǎng)基，屬于_________培養(yǎng)基。（2）②操作的接種采用______（實(shí)驗(yàn)器具）。（3）④操作的接種采用_______方法，其中平板培養(yǎng)的目的是________。（4）在相同、適應(yīng)環(huán)境中進(jìn)行上述“多瓶培養(yǎng)”操作，可以初步確定_________的錐形瓶中含有高效降解咔唑的微生物。（5）為鑒定下圖1平板中的微生物種類，可作為鑒定依據(jù)的有______。（6）為了將圖1培養(yǎng)基中的真菌與細(xì)菌分離，新制了PDA培養(yǎng)基（含馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、蒸餾水）并加入青霉素（抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成）。接種時(shí)用絨布輕按圖1培養(yǎng)基表面，使絨布面沾上菌落，再將絨布輕按在新制培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)結(jié)果如圖2所示①比較圖1、2可知，圖1中菌落______（填編號(hào)）為細(xì)菌，判斷理由是______。②圖2中出現(xiàn)菌落5的原因可能是______（寫(xiě)出三種）。11．（14分）人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價(jià)值。下圖是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑，其中報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。回答下列問(wèn)題。（1）基因工程中可通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是___________；在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是___________上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA分子雙鏈間的___________。（2）已知堿性磷酸酶能除去核苷酸末端的5磷酸，構(gòu)建表達(dá)載體的過(guò)程中用該酶處理Ti質(zhì)粒，但HSA基因不用堿性磷酸酶處理，這樣做的目的是___________，經(jīng)過(guò)上述處理后的Ti質(zhì)粒在DNA連接酶的作用下可與HSA基因之間形成___________個(gè)磷酸二酯鍵，再經(jīng)相關(guān)處理獲得結(jié)構(gòu)完整的重組DNA分子。（3）過(guò)程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)后，還應(yīng)轉(zhuǎn)接到含___________的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。③過(guò)程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，采用最多，也是最為有效的方法是___________，還可以使用動(dòng)物病毒作為載體，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。（4）為檢測(cè)HSA基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的___________，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。12．番茄紅素具有一定的藥用價(jià)值，但普通番茄合成的番茄紅素易發(fā)生轉(zhuǎn)化（如圖甲），科學(xué)家設(shè)計(jì)了一種重組DNA（質(zhì)粒三），該DNA能表達(dá)出雙鏈RNA（發(fā)卡），番茄細(xì)胞能識(shí)別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及具有相同序列的單鏈RNA一起降解，從而提高果實(shí)中番茄紅素的含量（如圖乙）。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：（1）在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用___________技術(shù)，該技術(shù)的原理是________________________。

（2）根據(jù)圖甲推知，轉(zhuǎn)錄出“發(fā)卡”的DNA片段實(shí)際上是兩個(gè)反向連接的________________基因，上述過(guò)程通過(guò)阻止該基因在細(xì)胞內(nèi)的_______________（填“轉(zhuǎn)錄”或“翻譯”），提高了果實(shí)中番茄紅素的含量。（3）為保證圖中的片段A反向連接，處理已開(kāi)環(huán)質(zhì)粒所用的兩種限制酶是______________________。（4）去磷酸化是去掉黏性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)。對(duì)已開(kāi)環(huán)的質(zhì)粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其_____________，該DNA分子仍可以和目的基因連接，形成缺少___________個(gè)磷酸二酯鍵的重組質(zhì)粒，隨后在細(xì)胞中被修復(fù)。（5）可利用___________________法將質(zhì)粒三導(dǎo)入植物細(xì)胞。

參考答案（含詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【答案解析】

病毒是非細(xì)胞生物，專性寄生在活細(xì)胞內(nèi)。病毒依據(jù)宿主細(xì)胞的種類可分為植物病毒、動(dòng)物病毒和噬菌體；根據(jù)遺傳物質(zhì)來(lái)分，分為DNA病毒和RNA病毒；病毒由核酸和蛋白質(zhì)組成?！绢}目詳解】A、病毒是專性寄生物，沒(méi)有獨(dú)立的代謝活動(dòng)，因此不能直接在培養(yǎng)液?jiǎn)为?dú)培養(yǎng)，A正確；B、人體被免疫缺陷病毒如HIV感染，可導(dǎo)致獲得性免疫缺陷綜合癥，B正確；C、逆轉(zhuǎn)錄病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖，需要的逆轉(zhuǎn)錄酶是在宿主細(xì)胞內(nèi)合成的，C錯(cuò)誤；D、因?yàn)椴《揪哂星秩咎匦裕誓軌蜃鳛榛蚬こ痰倪\(yùn)載體，D正確。故選C。2、A【答案解析】

放射性同位素標(biāo)記法在生物學(xué)中具有廣泛的應(yīng)用：（1）用35S標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，用32P標(biāo)記噬菌體的DNA，分別侵染細(xì)菌，最終證明DNA是遺傳物質(zhì)；（2）用3H標(biāo)記氨基酸，探明分泌蛋白的合成與分泌過(guò)程；（3）15N標(biāo)記DNA分子，證明了DNA分子的復(fù)制方式是半保留復(fù)制；（4）卡爾文用14C標(biāo)記CO2，研究出碳原子在光合作用中的轉(zhuǎn)移途徑，即CO2→C3→有機(jī)物；（5）魯賓和卡門(mén)用18O標(biāo)記水，證明光合作用所釋放的氧氣全部來(lái)自于水。【題目詳解】A、用18O標(biāo)記的水培養(yǎng)植物細(xì)胞，光反應(yīng)過(guò)程中H218O光解可產(chǎn)生18O2，有氧呼吸第二階段H218O與丙酮酸反應(yīng)可產(chǎn)生C18O2，A正確；B、碘是合成甲狀腺激素的原料，用含有放射性碘的飼料飼喂蝌蚪，體內(nèi)甲狀腺激素中可能檢測(cè)到放射性，B錯(cuò)誤；C、噬菌體的蛋白質(zhì)外殼含S，DNA含P，噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖時(shí)，利用自身遺傳物質(zhì)做模板、以大腸桿菌內(nèi)的原料和能量等合成噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)外殼，所以用無(wú)放射性噬菌體侵染被32P和35S標(biāo)記的大腸桿菌，子代噬菌體的DNA中含有32P，蛋白質(zhì)外殼含35S，C錯(cuò)誤；D、蔗糖是在葉綠體外生成的，D錯(cuò)誤。故選A。3、B【答案解析】

據(jù)圖分析，圖示免疫過(guò)程產(chǎn)生了抗體，因此為體液免疫過(guò)程，其中a是吞噬細(xì)胞，b是T細(xì)胞，c是B細(xì)胞，d是記憶細(xì)胞，e是漿細(xì)胞。【題目詳解】A、細(xì)胞a與b的表面不都含有抗原-MHC復(fù)合體的受體，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞c是B細(xì)胞，期增殖分化需要淋巴因子和抗原的刺激，B正確；C、漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體不需要抗原的刺激，C錯(cuò)誤；D、圖中的細(xì)胞e是漿細(xì)胞，其表面不存在抗原的特異性受體，但是存在其他物質(zhì)如胰島素的特異性受體，D錯(cuò)誤。故選B?！敬鸢更c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握體液免疫和細(xì)胞免疫的過(guò)程，以抗體為突破口判斷特異性免疫的種類以及圖中各個(gè)字母代表的細(xì)胞的名稱，進(jìn)而利用所學(xué)知識(shí)結(jié)合題干要求分析答題。4、B【答案解析】

①李斯特氏菌屬于致死食源性細(xì)菌，為原核生物，由原核細(xì)胞組成，酵母菌是真核生物，由真核細(xì)胞組成，因此與酵母菌細(xì)胞的最大差別是該菌無(wú)核膜包被的細(xì)胞核，①正確；②有絲分裂屬于真核細(xì)胞的增殖方式之一，②錯(cuò)誤；③該菌通過(guò)抑制人類細(xì)胞中的Tuba蛋白的活性，使細(xì)胞膜變形并將細(xì)菌包起來(lái)而進(jìn)入細(xì)胞，所以該菌以胞吞方式進(jìn)入人體細(xì)胞，③正確；④InIC是該細(xì)菌合成的一種蛋白質(zhì)，而該菌沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，④錯(cuò)誤；⑤該菌使人類細(xì)胞膜更易變形，說(shuō)明細(xì)胞膜具有一定流動(dòng)性，⑤錯(cuò)誤。綜上所述，供選答案組合，B項(xiàng)正確，A、C、D三項(xiàng)均錯(cuò)誤。故選B?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞的物質(zhì)輸入與輸出、蛋白質(zhì)的合成的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。5、B【答案解析】

1、群落指生活在一定的自然區(qū)域內(nèi)，相互之間具有直接或間接關(guān)系的各種生物的總和。群落的空間結(jié)構(gòu)包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)。2、種群數(shù)量特征包括種群密度、出生率和死亡率、遷入率和遷出率、年齡組成和性別比例；出生率和死亡率都會(huì)影響種群數(shù)量的變化，但年齡組成是通過(guò)影響出生率和死亡率影響數(shù)量變化的，性別比例通過(guò)影響出生率影響數(shù)量變化的?！绢}目詳解】A、對(duì)于像昆蟲(chóng)卵、跳蝻等活動(dòng)范圍比較小的動(dòng)物，調(diào)查動(dòng)物種群密度可以采用樣方法，A錯(cuò)誤；B、在群落的垂直結(jié)構(gòu)中，不同種類的生物分布于垂直空間的不同位置，有利于充分利用環(huán)境資源，B正確；C、調(diào)查群落的邊界屬于群落水平研究的問(wèn)題，C錯(cuò)誤；D、年齡組成預(yù)測(cè)種群數(shù)量的變化趨勢(shì)，D錯(cuò)誤。故選B。6、B【答案解析】

垂直結(jié)構(gòu)具有明顯的分層現(xiàn)象，植物的垂直結(jié)構(gòu)提高了群落利用陽(yáng)光等環(huán)境資源能力。植物的垂直結(jié)構(gòu)又為動(dòng)物創(chuàng)造了多種多樣的棲息空間和食物條件，所以動(dòng)物也有分層現(xiàn)象。【題目詳解】A、植物的垂直分層可充分利用光能，提高了群落利用陽(yáng)光等環(huán)境資源的能力，A正確；B、某種農(nóng)作物構(gòu)成的是一個(gè)種群，不存在植物群落的分層現(xiàn)象，合理密植是為了充分利用光照，B錯(cuò)誤；C、利用植物分層現(xiàn)象進(jìn)行套種，提高農(nóng)作物產(chǎn)量，C正確；D、垂直結(jié)構(gòu)是在長(zhǎng)期自然選擇基礎(chǔ)上形成的，D正確。故選B。7、A【答案解析】

蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)多樣性決定了蛋白質(zhì)功能的多樣性，蛋白質(zhì)的功能包括：①構(gòu)成細(xì)胞和生物體的重要物質(zhì)，即結(jié)構(gòu)蛋白，如羽毛、頭發(fā)、蛛絲、肌動(dòng)蛋白；②催化作用：如絕大多數(shù)酶；③傳遞信息，即調(diào)節(jié)作用：如胰島素、生長(zhǎng)激素；④免疫作用：如免疫球蛋白（抗體）；⑤運(yùn)輸作用：如紅細(xì)胞中的血紅蛋白?！绢}目詳解】A、酶與底物結(jié)合后，酶和底物的形狀均會(huì)發(fā)生改變，A正確；B、最適宜溫度條件下，酶活性最高，但是穩(wěn)定性較低，而較低溫度下酶的結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定，B錯(cuò)誤；C、受體與遞質(zhì)結(jié)合后形狀會(huì)發(fā)生改變，C錯(cuò)誤；D、載體與被轉(zhuǎn)運(yùn)分子結(jié)合后發(fā)生形狀改變不需要消耗ATP，D錯(cuò)誤。故選A。8、D【答案解析】根據(jù)題干信息分析，長(zhǎng)春花堿阻礙紡錘體微管的形成，從而阻斷細(xì)胞分裂。根據(jù)有絲分裂過(guò)程可知，紡錘體微管形成于前期，所以若向乳腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)液中長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)添加長(zhǎng)春花堿，則最終所以細(xì)胞將處于有絲分裂前期，即所有細(xì)胞中DNA的相對(duì)值都是2，故選D。二、非選擇題9、葡萄糖苷酶葡萄糖選擇培養(yǎng)纖維素分解菌的濃度瘤胃中的微生物為厭氧型，不能在有氧環(huán)境中生存、繁殖產(chǎn)量和活性菌2105【答案解析】

纖維素分解菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖。纖維素分解菌常采用剛果紅染液進(jìn)行鑒定，剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色物質(zhì)，纖維素分解菌由于能夠?qū)⒗w維素分解而在平板上的菌落周?chē)霈F(xiàn)無(wú)色的透明圈，透明圈的大小可以反應(yīng)纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少。微生物培養(yǎng)基的滅菌方法常采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，接種方法常用稀釋涂布平板法和平板劃線法。微生物的培養(yǎng)基的主要成分包括碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽，有的還有特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(生長(zhǎng)因子、維生素)?！绢}目詳解】（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三種，其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是葡萄糖苷酶。一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。（2）牛胃取樣后，使用選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)，目的是增加纖維素分解菌(或目的菌)的濃度，因此步驟A是選擇培養(yǎng)。（3）由于瘤胃中的微生物為厭氧型，不能在有氧環(huán)境中生存、繁殖，所以將瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養(yǎng)液中，調(diào)節(jié)pH及溫度至適宜條件，并持續(xù)通入無(wú)菌空氣，一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中幾乎沒(méi)有菌種。（4）按照修正后的實(shí)驗(yàn)方法，研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明圈的菌落（如圖）。圖中透明圈的大小可以反應(yīng)纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少（產(chǎn)量）及酶的活性；圖中菌2周?chē)耐该魅ψ畲?，降解纖維素能力最強(qiáng)。（5）用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落的常用方法是稀釋涂布平板法，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30~300之間，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)，每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對(duì)應(yīng)的應(yīng)該是每毫升菌液中的細(xì)菌數(shù)目，所以每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為(156+178+191)÷3÷0.1稀釋倍數(shù)=1.75×108，因此稀釋倍數(shù)=105?！敬鸢更c(diǎn)睛】結(jié)合培養(yǎng)基的配制、菌株的篩選與鑒定等分析題意和題圖。10、選擇移液管稀釋涂布平板法篩選出高效降解咔唑的微生物含咔唑濃度最低的菌落的大小、形狀、顏色和表面情況等3、4細(xì)菌無(wú)法在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)絨布未滅菌、被抗青霉素細(xì)菌污染、培養(yǎng)基滅菌不徹底【答案解析】

閱讀題干和題圖可知，本題是利用微生物培養(yǎng)的知識(shí)分離高效降解有機(jī)污染物的細(xì)菌，先分析題圖了解分離高效降解有機(jī)污染物的內(nèi)容，然后根據(jù)問(wèn)題的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識(shí)點(diǎn)分析解答?！绢}目詳解】（1）圖示所用的“CNFM+咔唑”培養(yǎng)基，只允許分解咔唑的微生物生長(zhǎng)，具有選擇性，屬于選擇培養(yǎng)基；（2）從三角錐形瓶中準(zhǔn)確移取一定體積的液體所用的儀器為移液管；（3）從錐形瓶中取菌液接種，用稀釋涂布平板法可使接種細(xì)菌逐漸稀釋，經(jīng)適宜條件培養(yǎng)，可能形成單個(gè)、獨(dú)立的菌落；再利用含咔唑的固體培養(yǎng)基進(jìn)行二次篩選，可以獲得高效降解咔唑的微生物；（4）在相同、適應(yīng)環(huán)境中進(jìn)行多瓶培養(yǎng)操作，瓶中咔唑的剩余量可以初步反應(yīng)篩選的微生物對(duì)咔唑的降解能力，剩余咔唑量最低的錐形瓶中，篩選的微生物的降解能力最高；（5）菌落特征是細(xì)菌分類的依據(jù)之一，所以可以通過(guò)觀察菌落特征鑒定或區(qū)分不同的菌種，如顏色、大小、干濕、氣味、表面情況等；（6）①由于細(xì)菌無(wú)法在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，所圖1中的菌落3、4為細(xì)菌。②圖2中出現(xiàn)新菌落5的原因可能是絨布未滅菌、或被抗青霉素細(xì)菌污染、或培養(yǎng)基滅菌不徹底?！敬鸢更c(diǎn)睛】識(shí)記微生物常用的接種方法，掌握培養(yǎng)基的分類，根據(jù)題干情境準(zhǔn)確作答。11、解旋酶加熱至90~95℃氫鍵防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接2無(wú)色物質(zhì)K顯微注射技術(shù)蛋白質(zhì)【答案解析】

由圖可知，①表示將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，②表示植物組織培養(yǎng)，③表示將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞，④需要經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植等?！绢}目詳解】（1）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，在解旋酶的作用下可以解開(kāi)DNA雙鏈；在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，加熱至90~95℃引起模板DNA解鏈為單鏈，上述兩個(gè)解鏈過(guò)程均破壞了DNA分子雙鏈間的氫鍵。（2）為了防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接，構(gòu)建表達(dá)載體的過(guò)程中用該酶處理Ti質(zhì)粒，但HSA基因不用堿性磷酸酶處理。目的基因兩端的序列均與質(zhì)粒連接，故在DNA連接酶的作用下可與HSA基因之間形成2個(gè)磷酸二酯鍵，再經(jīng)相關(guān)處理獲得結(jié)構(gòu)完整的重組DNA分子。（3）由于報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色，故過(guò)程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)后，還應(yīng)轉(zhuǎn)接到含無(wú)色物質(zhì)K的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。③過(guò)程常用顯微注射法將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，還可以使用動(dòng)物病毒作為載體，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。（4）為檢測(cè)HSA基因的表達(dá)情況，看其是否表達(dá)出HAS，可提取受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)，看是否出現(xiàn)雜交帶?！敬鸢更c(diǎn)睛】將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法。