2022-2023學(xué)年浙科版（2019）選擇必修三 1.1微生物的培養(yǎng)需要適宜條件(1) 課件（29張）

1.1微生物的培養(yǎng)需要適宜條件微生物的類群微生物原核類:真核類非細(xì)胞類生物——病毒細(xì)菌、支原體、放線菌、藍(lán)藻個體微小、結(jié)構(gòu)簡單酵母菌、霉菌真菌：原生生物◆微生物的共同特點(diǎn)：菌落單個或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，就會形成一個肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。如何獲得純凈培養(yǎng)物？①合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件②確保其他微生物無法混入培養(yǎng)基無菌技術(shù)⑴成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源、（生長因子）a.碳源無機(jī)碳源：有機(jī)碳源：CO2酵母提取物、蛋白胨等自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物b.氮源無機(jī)氮源：有機(jī)氮源：N2、NH3、NH4＋、NO3-等酵母提取物、蛋白胨、尿素等注：含C、H、O、N的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源2、培養(yǎng)基的成分：固氮菌硝化細(xì)菌1、概念

人們?yōu)闈M足微生物

的需求而配制的混合養(yǎng)料生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物一、

培養(yǎng)基維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等一、

培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物需要滿足的其他要求霉菌將pH調(diào)至_____細(xì)菌將pH調(diào)至_______厭氧微生物需要提供_____條件酸性堿性無氧喜葷喜素培養(yǎng)基的理化特征影響微生物的生長固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基（1）物理性質(zhì)：一、

培養(yǎng)基3、培養(yǎng)基的類型：有無凝固劑瓊脂瓊脂是由海藻中提取的多糖體,其特點(diǎn)是具有凝固性、穩(wěn)定性等物理化學(xué)性質(zhì).廣泛用于制造粒粒橙及各種飲料、果凍、冰淇淋、糕點(diǎn)、軟糖、罐頭、肉制品、八寶粥、銀耳燕窩、羹類食品、涼拌食品等等。一、

培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基大規(guī)?？焖俜敝衬撤N微生物，工業(yè)生產(chǎn)平板斜面微生物的分離、鑒定、活菌計數(shù)菌種保存固體培養(yǎng)基按化學(xué)成分合成培養(yǎng)基：成分明確；天然培養(yǎng)基：成分不明確；用于工業(yè)生產(chǎn)。天然培養(yǎng)基：培養(yǎng)多種細(xì)菌的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，培養(yǎng)酵母菌的麥芽汁培養(yǎng)基等。一、

培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基：高氏1號（常用于培養(yǎng)、分離放線菌）成分：可溶性淀粉20g、KNO31g、NaCl0.5g、K2HPO4·3H2O0.5g,MgSO4·7H2O0.5g,FeSO4·7H2O0.01g，瓊脂15~20g，蒸餾水1000mL,pH7.2~7.4。一、

培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)來源主要成分水氯化鈉蛋白胨用動、植物蛋白制成的粉末狀物質(zhì)富含有機(jī)氮化合物，也含有維生素和糖類酵母浸膏酵母細(xì)胞的水溶性提取物濃縮而成的膏狀物質(zhì)富含B族維生素，也含有機(jī)氮化合物和糖類等LB液體培養(yǎng)基的組成成分LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱天然培養(yǎng)基（一）目的對實(shí)驗操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒；將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌；為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；避免已滅菌處理的材料用具與周圍物品相接觸。

防止外來雜菌的入侵（非目標(biāo)微生物的干擾）

二、無菌技術(shù)（二）主要內(nèi)容有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個橢圓形的休眠體。芽孢的壁很厚，對干旱、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細(xì)菌。芽孢高壓蒸汽滅菌二、無菌技術(shù)要滅菌的器材培養(yǎng)皿試管三角瓶移液管三角刮刀接種環(huán)加棉花塞或塑料蓋用封口膜或6層紗布封口上端用鑷子放入少量棉花各種培養(yǎng)基用牛皮紙包好，放入滅菌鍋121℃（1kg/cm2壓力）滅菌15min-20min實(shí)驗中所需的棉花不能用脫脂棉，因脫脂棉易吸水，吸水后容易引起污染。二、無菌技術(shù)滅菌后，通常將實(shí)驗用具放入60~80℃的烘箱中烘干，以除去滅菌時的水分。二、無菌技術(shù)將有培養(yǎng)基的三角瓶和培養(yǎng)皿放到超凈臺上打開超凈臺的紫外燈和過濾風(fēng)，滅菌30min二、無菌技術(shù)注意1、如果培養(yǎng)基中有葡萄糖，為防止葡萄糖分解碳化，可采用112℃500g/cm2壓力30min。2、有些不能加熱滅菌的化合物，如尿素（加熱會分解）等，只能用G6玻璃砂漏斗過濾，但玻璃砂漏斗使用前也要在121℃下用紙包好滅菌。玻璃砂漏斗有6種，即G1~G6，G6孔徑最小，細(xì)菌不能過濾。二、無菌技術(shù)灼燒滅菌接種環(huán)涂布器試管口二、無菌技術(shù)使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物的過程（不包括芽孢或孢子）。（2）常用方法二、無菌技術(shù)（三）常用方法1.消毒（1）概念：煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min化學(xué)藥劑消毒法:如酒精擦拭雙手;氯氣消毒水源。（牛奶、果汁）（耐高溫）二、無菌技術(shù)常用方法對象滅菌灼燒滅菌：酒精燈火焰的充分燃燒層接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具、試管口或瓶口等干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具高壓蒸汽滅菌：壓力為100kPa，溫度為121℃下滅菌15-30min培養(yǎng)基、無菌水等（2）常用方法旁欄思考1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？2.請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗操作者的雙手答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。制備馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基三、配置可用于培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基配方去皮馬鈴薯絲

20g

蔗糖

2g

瓊脂1.5-2g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至100mL1.

計算2.配置20％馬鈴薯浸汁液三、配置可用于培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基培養(yǎng)基：高壓蒸汽滅菌；（裝入錐形瓶，加棉塞，包牛皮紙扎緊）防止污染和揮發(fā)滅菌時避免水蒸氣浸濕棉塞，取出培養(yǎng)基時，也起到隔絕空氣中雜菌的作用三、配置可用于培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基3、制備斜面、平板、液體培養(yǎng)基（一）液體培養(yǎng)基三、配置可用于培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基（二）固體培養(yǎng)基（平板）1、加入瓊脂，加熱融化2、高壓蒸汽滅菌3、倒平板三、配置可用于培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基（三）斜面三、配置可用于培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基1、加入瓊脂，加熱融化2、分裝3、高壓蒸汽滅菌4、擺斜面脫脂棉牛皮紙玻璃漏斗討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？答：用手觸摸錐形瓶，感覺剛剛不燙手時。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，影響微生