新冠肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(同名7)課件

新冠肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

新冠肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

一、標(biāo)本采集二、新型冠狀的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)三、病原生物安全實(shí)驗(yàn)活動(dòng)要求主要內(nèi)容一、標(biāo)本采集三、病原（一）采集對(duì)象．新型冠狀觀察病例及需要進(jìn)行新型冠狀診斷或鑒別診斷者；其它需要進(jìn)一步篩查檢測(cè)的研究材料（如溯源分析）。標(biāo)本采集（一）采集對(duì)象．標(biāo)本（二）標(biāo)本采集要求。從事新型冠狀檢測(cè)標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)（培訓(xùn)合格）。住院病例的標(biāo)本由所在醫(yī)院醫(yī)護(hù)人員在當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)專業(yè)人員指導(dǎo)下采集。密切接觸者標(biāo)本由當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)采集。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的需要，可結(jié)合病程及研究需求多次采樣。標(biāo)本采集（二）標(biāo)本采集要求。

根據(jù)新型冠狀病例特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室檢查：發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)正?；驕p低，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)減少。

部分患者出現(xiàn)肝酶、肌酶增高。多數(shù)患者C反應(yīng)蛋白和血沉升高，降鈣素原正常。嚴(yán)重者D-二聚體升高，血清淀粉樣蛋白應(yīng)該升高。以上檢測(cè)指標(biāo)的血樣護(hù)士采集后盡快送檢驗(yàn)科。根據(jù)新型冠狀病例特（三）標(biāo)本采集種類（針對(duì)新型冠狀疑似病例）

?采集的臨床標(biāo)本種類雖然有咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、深咳痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液等

鑒于生物安全考慮只采集病人的咽拭子和急性期血清，接診醫(yī)護(hù)人員在白銀區(qū)疾控中心專業(yè)人員指導(dǎo)下采集樣本，并由區(qū)疾控工作人員直接帶走送白銀市疾控。（三）標(biāo)本采集種類（四）標(biāo)本采集方法（限于咽拭子）

咽拭子：用2根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時(shí)擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將兩根拭子頭浸入含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。（四）標(biāo)本采集方法（（五）標(biāo)本包裝．標(biāo)本采集送達(dá)后應(yīng)在生物安全柜內(nèi)分裝成三份（由市疾控完成）。一份送省疾控中心檢測(cè)用，一份送國(guó)家疾控中心病預(yù)防控制所檢測(cè)，一份保存以備復(fù)核。所有標(biāo)本應(yīng)放在大小適合的帶螺旋蓋、耐冷凍的樣本采集管里，擰緊。容器外注明樣本編號(hào)、種類、姓名及采樣日期。將密閉后的標(biāo)本放入大小合適的塑料袋內(nèi)密封，每袋裝一份標(biāo)本。（五）標(biāo)本包裝．（六）標(biāo)本保存．用于分離和核酸檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè)，

1.24小時(shí)內(nèi)能檢測(cè)的標(biāo)本可置于4°C保存；

2.24小時(shí)內(nèi)無法檢測(cè)的標(biāo)本則應(yīng)置于-70°C或以下保存（如無-70°C保存條件，則于-20°C冰箱暫存）。

3.血清可在4°C存放3天，可在-20°C以下長(zhǎng)期保存。

4.標(biāo)本運(yùn)送期間應(yīng)避免反復(fù)凍融，并應(yīng)設(shè)立專柜單獨(dú)保存標(biāo)本。（六）標(biāo)本保存．（七）標(biāo)本送檢．樣本采集后應(yīng)盡快送往市疾控進(jìn)行核酸篩查檢測(cè)當(dāng)咽拭子或血清運(yùn)往實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)輸中出現(xiàn)耽擱時(shí)，適當(dāng)?shù)牡蜏乇４嫣幚硎欠浅Ｖ匾模ㄗh在能獲得干冰的地方采用干冰保藏運(yùn)輸樣本（七）標(biāo)本送檢．二、新型冠狀的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)目前監(jiān)測(cè)方法主要有：1.新型冠狀全基因測(cè)序鑒定2.實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR監(jiān)測(cè)技術(shù)3.的分離二、新型冠狀的實(shí)驗(yàn)室市疾控：實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR監(jiān)測(cè)（收到標(biāo)本后3小時(shí)完成）在實(shí)驗(yàn)室要確認(rèn)一個(gè)病例為陽性，滿足其中一個(gè)條件即可：（一）同一份標(biāo)本中新型冠狀市疾控：實(shí)時(shí)熒光定量（五）檢測(cè)項(xiàng)目．5.I、新型冠狀核酸測(cè)定(rRT-PCR方法）推薦選用針對(duì)新型冠狀的ORFlab、E、N引物和探針，具體可參考上海輝睿生物科技有限公司、上海捷諾生物科技有限公司、上海伯杰醫(yī)療科技有限公司的單通道、雙通道或多通道檢測(cè)試劑盒。5.2、結(jié)果判斷：陰性：無Ct值或Ct為40。陽性：Ct值(37, 可報(bào)告為陽性?？梢桑篊t值在37-40之間，建議重復(fù)實(shí)驗(yàn)，若重做結(jié)果Ct值<40,擴(kuò)增曲線有明顯起峰，該樣本判斷為陽性，否則為陰性。（五）檢測(cè)項(xiàng)目．根據(jù)目前掌握的新型冠狀的生物學(xué)性狀、傳播特性、致病性、臨床資料等信息，考慮到新型冠狀聚集性發(fā)病且有重癥病例，并有死亡病例的特點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)活動(dòng)暫時(shí)按照病原微生物危害程度分類中第二類病原微生物進(jìn)行管理，具體要求如下：三、病原生物安全實(shí)驗(yàn)活動(dòng)要求三、病原生物安全實(shí)驗(yàn)（一）培養(yǎng)。指的分離、培養(yǎng)、鑒定、中和試驗(yàn)、活及其蛋白純化、凍干以及產(chǎn)生活的重組試驗(yàn)等操作。利用活或其細(xì)胞（或細(xì)胞提取物），不經(jīng)滅活進(jìn)行的生化分析、血清學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)等操作視同培養(yǎng)。上述操作應(yīng)在BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。使用培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑的加入必須在與培養(yǎng)等同級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室和防護(hù)條件下進(jìn)行，裂解劑或滅活劑加入后可比照未經(jīng)培養(yǎng)的性材料的防護(hù)等級(jí)進(jìn)行操作。BSL-3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有開展相應(yīng)活動(dòng)的資質(zhì)。（一）培養(yǎng)。（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)．

指以活動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)。應(yīng)在ABSL-3實(shí)驗(yàn)室操作。ABSL-3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有開展相應(yīng)活動(dòng)的資質(zhì)。（三）未經(jīng)培養(yǎng)的性材料的操作．指未經(jīng)培養(yǎng)的性材料在采用可靠的方法滅活前進(jìn)行的抗原檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)、核酸檢瀏、生化分析等操作，應(yīng)在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作。如果疫情發(fā)生變化，出現(xiàn)死亡病例，該項(xiàng)檢測(cè)應(yīng)在加強(qiáng)型BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作。未經(jīng)可靠滅活或固定的人和動(dòng)物組織標(biāo)本因含量較高，其操作的防護(hù)級(jí)別應(yīng)比照培養(yǎng)。（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)．

（四）滅活材料的操作．指性材料或活在采用可靠的方法滅活后進(jìn)行的抗原檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)、核酸檢測(cè)、生化分析、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等不含致病性活的操作，應(yīng)在BSL-1實(shí)驗(yàn)室操作。（五）無性材料的操作．指針對(duì)確認(rèn)無性的材料的各種操作，包括但不限于無性的DNA或cDNA操作，應(yīng)在BSL-1實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。（四）滅活材料的操作謝謝！謝謝！新冠肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

新冠肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

一、標(biāo)本采集二、新型冠狀的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)三、病原生物安全實(shí)驗(yàn)活動(dòng)要求主要內(nèi)容一、標(biāo)本采集三、病原（一）采集對(duì)象．新型冠狀觀察病例及需要進(jìn)行新型冠狀診斷或鑒別診斷者；其它需要進(jìn)一步篩查檢測(cè)的研究材料（如溯源分析）。標(biāo)本采集（一）采集對(duì)象．標(biāo)本（二）標(biāo)本采集要求。從事新型冠狀檢測(cè)標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)（培訓(xùn)合格）。住院病例的標(biāo)本由所在醫(yī)院醫(yī)護(hù)人員在當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)專業(yè)人員指導(dǎo)下采集。密切接觸者標(biāo)本由當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)采集。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的需要，可結(jié)合病程及研究需求多次采樣。標(biāo)本采集（二）標(biāo)本采集要求。

根據(jù)新型冠狀病例特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室檢查：發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)正?；驕p低，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)減少。

部分患者出現(xiàn)肝酶、肌酶增高。多數(shù)患者C反應(yīng)蛋白和血沉升高，降鈣素原正常。嚴(yán)重者D-二聚體升高，血清淀粉樣蛋白應(yīng)該升高。以上檢測(cè)指標(biāo)的血樣護(hù)士采集后盡快送檢驗(yàn)科。根據(jù)新型冠狀病例特（三）標(biāo)本采集種類（針對(duì)新型冠狀疑似病例）

?采集的臨床標(biāo)本種類雖然有咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、深咳痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液等

鑒于生物安全考慮只采集病人的咽拭子和急性期血清，接診醫(yī)護(hù)人員在白銀區(qū)疾控中心專業(yè)人員指導(dǎo)下采集樣本，并由區(qū)疾控工作人員直接帶走送白銀市疾控。（三）標(biāo)本采集種類（四）標(biāo)本采集方法（限于咽拭子）

咽拭子：用2根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時(shí)擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將兩根拭子頭浸入含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。（四）標(biāo)本采集方法（（五）標(biāo)本包裝．標(biāo)本采集送達(dá)后應(yīng)在生物安全柜內(nèi)分裝成三份（由市疾控完成）。一份送省疾控中心檢測(cè)用，一份送國(guó)家疾控中心病預(yù)防控制所檢測(cè)，一份保存以備復(fù)核。所有標(biāo)本應(yīng)放在大小適合的帶螺旋蓋、耐冷凍的樣本采集管里，擰緊。容器外注明樣本編號(hào)、種類、姓名及采樣日期。將密閉后的標(biāo)本放入大小合適的塑料袋內(nèi)密封，每袋裝一份標(biāo)本。（五）標(biāo)本包裝．（六）標(biāo)本保存．用于分離和核酸檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè)，

1.24小時(shí)內(nèi)能檢測(cè)的標(biāo)本可置于4°C保存；

2.24小時(shí)內(nèi)無法檢測(cè)的標(biāo)本則應(yīng)置于-70°C或以下保存（如無-70°C保存條件，則于-20°C冰箱暫存）。

3.血清可在4°C存放3天，可在-20°C以下長(zhǎng)期保存。

4.標(biāo)本運(yùn)送期間應(yīng)避免反復(fù)凍融，并應(yīng)設(shè)立專柜單獨(dú)保存標(biāo)本。（六）標(biāo)本保存．（七）標(biāo)本送檢．樣本采集后應(yīng)盡快送往市疾控進(jìn)行核酸篩查檢測(cè)當(dāng)咽拭子或血清運(yùn)往實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)輸中出現(xiàn)耽擱時(shí)，適當(dāng)?shù)牡蜏乇４嫣幚硎欠浅Ｖ匾?，建議在能獲得干冰的地方采用干冰保藏運(yùn)輸樣本（七）標(biāo)本送檢．二、新型冠狀的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)目前監(jiān)測(cè)方法主要有：1.新型冠狀全基因測(cè)序鑒定2.實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR監(jiān)測(cè)技術(shù)3.的分離二、新型冠狀的實(shí)驗(yàn)室市疾控：實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR監(jiān)測(cè)（收到標(biāo)本后3小時(shí)完成）在實(shí)驗(yàn)室要確認(rèn)一個(gè)病例為陽性，滿足其中一個(gè)條件即可：（一）同一份標(biāo)本中新型冠狀市疾控：實(shí)時(shí)熒光定量（五）檢測(cè)項(xiàng)目．5.I、新型冠狀核酸測(cè)定(rRT-PCR方法）推薦選用針對(duì)新型冠狀的ORFlab、E、N引物和探針，具體可參考上海輝睿生物科技有限公司、上海捷諾生物科技有限公司、上海伯杰醫(yī)療科技有限公司的單通道、雙通道或多通道檢測(cè)試劑盒。5.2、結(jié)果判斷：陰性：無Ct值或Ct為40。陽性：Ct值(37, 可報(bào)告為陽性。可疑：Ct值在37-40之間，建議重復(fù)實(shí)驗(yàn)，若重做結(jié)果Ct值<40,擴(kuò)增曲線有明顯起峰，該樣本判斷為陽性，否則為陰性。（五）檢測(cè)項(xiàng)目．根據(jù)目前掌握的新型冠狀的生物學(xué)性狀、傳播特性、致病性、臨床資料等信息，考慮到新型冠狀聚集性發(fā)病且有重癥病例，并有死亡病例的特點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)活動(dòng)暫時(shí)按照病原微生物危害程度分類中第二類病原微生物進(jìn)行管理，具體要求如下：三、病原生物安全實(shí)驗(yàn)活動(dòng)要求三、病原生物安全實(shí)驗(yàn)（一）培養(yǎng)。指的分離、培養(yǎng)、鑒定、中和試驗(yàn)、活及其蛋白純化、凍干以及產(chǎn)生活的重組試驗(yàn)等操作。利用活或其細(xì)胞（或細(xì)胞提取物），不經(jīng)滅活進(jìn)行的生化分析、血清學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)等操作視同培養(yǎng)。上述操作應(yīng)在BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。使用培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑的加入必須在與培養(yǎng)等同級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室和防護(hù)條件下進(jìn)行，裂解劑或滅活劑加入后可比照未經(jīng)培養(yǎng)的性材料的防護(hù)等級(jí)進(jìn)行操作。BSL-3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有開展相應(yīng)活動(dòng)的資質(zhì)。（一）培養(yǎng)。（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)．

指以活動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)。應(yīng)在ABSL-3實(shí)驗(yàn)室操作。ABSL-3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有開展相應(yīng)活動(dòng)的資質(zhì)。（三）未經(jīng)培養(yǎng)的性材料的操作．指未經(jīng)培養(yǎng)的性材料在采用可靠的方法滅活前進(jìn)行的抗原檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)、核酸檢瀏、生化分析等操作，應(yīng)在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作。如果疫情發(fā)生變化，出現(xiàn)死亡病例，該項(xiàng)檢測(cè)應(yīng)在加強(qiáng)型B