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文檔簡介

熒光法測定維生素B2一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康臒晒夤舛确y定多維葡萄糖粉中維生素B2學(xué)會使用熒光光度計(jì)二、實(shí)驗(yàn)原理維生素B2（又叫核黃素，VB2）是橘黃色無臭的針狀結(jié)晶易溶于水而不溶于乙醚等有機(jī)溶劑在中性或酸性溶液中穩(wěn)定光照易分解，對熱穩(wěn)定基本性質(zhì)二、實(shí)驗(yàn)原理在430～440nm藍(lán)光的照射下，發(fā)出綠色熒光，熒光峰在535nm。維生素B2在pH=6～7的溶液中熒光強(qiáng)度最大，在pH=11的堿性溶液中熒光消失，熒光分光光度法定量測定三、實(shí)驗(yàn)試劑、儀器熒光光度計(jì)5ml吸量管1只，2ml吸量管1只，50ml容量瓶6只,100ml容量瓶1只10.0μg/ml維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液，冰乙酸，多維葡萄糖粉試樣.四、實(shí)驗(yàn)步驟了解熒光光度計(jì)的基本操作，調(diào)節(jié)儀器到工作狀態(tài)。設(shè)置激發(fā)波長為440nm，發(fā)射波長為540nm，靈敏度＝2，入射縫寬和出射縫寬均為10nm。四、實(shí)驗(yàn)步驟(1)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)溶液熒光強(qiáng)度的測定：

標(biāo)準(zhǔn)液：0.50、1.00、1.50，2.00，2.50，3.00ml冰醋酸：2.00ml濃度：0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ug/ml從稀到濃測量系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理以維生素B2的濃度為橫坐標(biāo)，相對熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)測

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