臨床真菌檢驗(yàn)新進(jìn)展及少見病例

及少見真菌病例HuashanHuashanPAGE5真菌的分類與命真菌的概念真菌是正的細(xì)胞核,沒有葉綠素的有機(jī)體能產(chǎn)生孢子進(jìn)行有性或無性繁殖典型以具有甲殼質(zhì)或真菌的分類與命真菌界分現(xiàn)多采用AinsworthGC真菌界:粘菌門、結(jié)合菌亞真菌 子囊菌亞半知菌亞門

絲孢菌

該亞門中主要的醫(yī)學(xué)真真菌的分類與命真菌術(shù)語(1)界(Kingdom是生物界系統(tǒng)中最高的一級(jí)(2)門(Phylum,Division):詞尾-mycota(3)綱(Class):詞尾-mycetes(4)目(Order):詞尾-ales(5)科(Family):詞尾-aceae(6)屬(Genus):沒有標(biāo)準(zhǔn)詞尾(7)種(Species沒有標(biāo)準(zhǔn)詞尾舉例：新生隱球菌的分半知菌亞芽生菌隱球酵母隱球酵母隱球酵母新生隱球菌HuashanHuashanPAGE7真菌的基本形態(tài)和分按菌落形態(tài)分類霉菌：皮膚癬菌、曲酵母：念珠菌、隱球雙相型真菌：組織胞漿HuashanHuashanPAGE8 HuashanHuashan真菌的基本形態(tài)和分按致病性分按致病范圍分常規(guī)真菌學(xué)檢真菌直接鏡檢：標(biāo)本于載玻片上，加真菌培養(yǎng)：將標(biāo)本直接接種于培養(yǎng)基中，在特定的溫度中孵育一定的時(shí)間，對(duì)生長(zhǎng)的菌落作出鑒定。HuashanHuashan真菌直接鏡 在組織、分泌物、膿液中，代表該菌的根據(jù)菌絲、孢子的形態(tài),部分可確定病原新生隱球菌：墨汁涂片中可顯厚的透亮念珠菌：假菌絲及芽馬拉色菌：短粗如香蕉狀的菌絲和圓形的真菌：金黃色的厚壁毛霉：粗大而不分隔的菌鼻孢子菌：含大量?jī)?nèi)孢子的孢子囊孢真菌直接鏡檢的臨床意是最簡(jiǎn)單也是最實(shí)用的方陽性結(jié)果可確定或提示真菌，結(jié)對(duì)于淺表和皮下真菌最有幫新生隱球菌標(biāo)本直接鏡新生隱球菌的格特變痰真菌涂挑取性或膿性部分于載玻片，加1滴10%KOH，念珠菌、曲霉、毛霉及隱球菌在鏡下具有特征部分與侵襲性曲霉有關(guān)HuashanHuashan念珠菌的直接鏡檢與組織念珠菌直接鏡假假菌絲和芽真菌培養(yǎng)鑒真菌培養(yǎng)鑒定：真菌培養(yǎng)鑒定目的是提高病原體檢出的陽性率，確定致病菌的種類，為臨床及治療提供依據(jù)。發(fā)現(xiàn)肯定的致病原如新生隱球菌時(shí)，分離出條件致病菌如白念珠菌或煙曲霉等，應(yīng)結(jié)合臨床情況進(jìn)行判斷。真菌培養(yǎng)鑒馬內(nèi)菲青霉的雙相馬內(nèi)菲青霉病的皮膚表馬內(nèi)菲青霉病的皮膚表馬內(nèi)菲青真菌的組織病理這是深部真菌病的金標(biāo)準(zhǔn)，其能初步確定真菌的種、屬，如隱球菌、念珠菌、曲霉、真菌等，可根據(jù)其鏡下的形態(tài)作出初步的鑒定，但確切的菌種還是要依靠真菌培養(yǎng)，二者互相補(bǔ)充、完善。由于病變組織的取材具有性，臨組織病理學(xué)表現(xiàn)緊密真孢子絲菌病的組織病 Huashan HuashanHuashan曲 隱球病例患者:，44歲，，增多，伴脫屑病例資皮膚科檢查：右耳廓及耳屏可見密集分布針尖至小米粒大小紅色毛囊性丘疹，質(zhì)地中等，部分融合，部分丘疹頂端有少許結(jié)痂?；颊邚氖吗B(yǎng)兔史7足癬、甲癬及股癬病史多真菌學(xué)檢組織病理與分子生物學(xué)鑒多細(xì)胞肉芽菌株核糖體保守區(qū)Trichophytonrubrum及治療隨最后：Majocchi肉芽治療：2012.3.130.2g口服，連續(xù)3平；1月后基本消退，僅見少數(shù)斑丘疹；1月半后皮損全部消退，遺留明顯色素沉著。日隨訪無復(fù)發(fā)，色素沉著稍減退。肝功能監(jiān)測(cè)無異常。抗真菌治療低下低下Huashan皮膚癬菌肉芽，首次于1883年由DomenicoMajocchi報(bào)告并命機(jī)體免疫力低下或菌株毒力較強(qiáng)的情況下，皮膚癬菌可侵襲真皮及皮下組織或內(nèi)臟發(fā)病部位多有局部外傷臨床表現(xiàn)毛周丘疹及皮下結(jié)節(jié)，較淺表，見于免疫系統(tǒng)正常的患者，多有小的史。深在的堅(jiān)實(shí)或波動(dòng)感的結(jié)節(jié)性或斑塊性損害，分布于頭皮、面部及四肢，多伴有免疫系統(tǒng)紊亂及55HuashanHuashan孢子絲病例真菌直接鏡檢與培養(yǎng)鑒組織病理檢 治療病例HuashanHuashan病史患者男，70歲，江蘇無錫，務(wù)農(nóng)詳），效果不佳患者下肢癱瘓，下頜淋腫病史檢查P74.7％，PLT398×109IgG27.9g/L(7～16g/L)，IgA和IgM均在正真菌直接鏡檢與培養(yǎng)鑒真菌培養(yǎng)鑒定與藥顯色培養(yǎng)基上菌落呈翠綠色，采用API20CAUXRosco真菌藥片擴(kuò)散法顯示該菌株對(duì)伏立康組織病理學(xué)檢與治根據(jù)臨床表現(xiàn)、病史，并結(jié)合檢查，為但后來因家屬放棄積極治療,致患者發(fā)生性休克而在家中。深在型皮膚念珠菌根據(jù)臨床表現(xiàn)，深在型皮膚念珠菌病可分為兩型，即念珠菌肉芽腫和慢性皮膚粘膜念珠菌病。前者臨床表現(xiàn)不同于一般的泛發(fā)性皮膚念珠菌病，病變處有增殖、結(jié)節(jié)、潰瘍或肉芽腫形成。后者是一組少見的由念珠菌引起的慢性、復(fù)發(fā)性疾病?；颊叨嘤啄臧l(fā)病，病程數(shù)年到數(shù)十年，特征為慢性口腔粘膜念珠菌病、慢性皮膚念珠菌病和慢性 ）念珠菌病根據(jù)臨床表現(xiàn)、真菌檢查陽性，多次培養(yǎng)獲白念珠菌或其他念珠菌，結(jié)合組織病理即可確診深在型皮膚念珠菌病。 鵝口隱球菌概述與鑒新生隱球菌是隱球菌屬的重要致病菌，屬環(huán)境腐生菌，可從土壤和鴿糞中分離到，并被認(rèn)為是人和動(dòng)物最主要的傳染源。隱球菌的生物學(xué)地新生隱球菌種名與型/分子分型C.neoformansvarAVNI,VNII,VN格特隱球菌C.BVGI,VGII,VGIII,VG熱帶/帶/溫格特隱球菌C.CVGI,VGII,VGIII,VG熱帶/帶/溫DVN新生隱球菌ADVN新生隱球菌新生隱球菌A型、D型、AD型主要免疫缺陷新生隱球菌B/C型主要免疫正常人群，次要隱球菌新生隱球菌所致的系統(tǒng)性疾病。主及淋等臟器，中樞神經(jīng)系統(tǒng)隱球菌約占誘發(fā)因素：細(xì)胞免疫功能低下，見、素AIDS（最常見的并發(fā)癥及原因）、素移植、大劑量糖皮質(zhì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)隱球菌腦膜炎型：頭痛、發(fā)熱伴、， 皮膚黏膜隱球菌約有10－15皮損表現(xiàn)多樣性，為丘疹、水皰、膿皰、傳染性樣丘疹、痤瘡樣膿皰、皮下組織腫塊、浸潤(rùn)性結(jié)節(jié)、膿腫、蜂窩組織炎、水痘樣皮疹、癤腫樣損害、紫斑、疣狀增殖、潰瘍黏膜損害為結(jié)節(jié)、肉芽腫、慢性潰性皮膚隱球菌隱球菌的病理檢皮膚隱球菌病的組織病理阿申阿申藍(lán)染肺隱球菌病近年來，該病急劇上升，其原因尚待該病的相對(duì)較難,因?yàn)閮H20%的患者有癥狀,且無明顯體征隱球菌膠乳凝集試驗(yàn)具有決定性意肺隱球菌病性癥狀較輕，可以無癥狀，也有自傾向，或發(fā)展為播散性隱球菌表現(xiàn)為支氣管炎或，痰中有菌體，支氣管液的培養(yǎng)或乳膠凝集試驗(yàn)陽性率肺隱球PAS染色菌體呈紅HE染色:肺隱球HuashanHuashan系統(tǒng)性隱球菌該病所累及的主要是腦、肺和皮膚，且主隱球菌時(shí)，腦部的病變是其發(fā)展的必然結(jié)果，乳膠凝集試驗(yàn)、組織病理或培養(yǎng)等。皮膚呈多樣性，為傳染性樣、痤瘡樣、結(jié)節(jié)斑塊多數(shù)患者都存在著免疫低下的基礎(chǔ)疾隱球菌病的治療兩性霉素B或其脂：首5－FC:與兩性霉素B聯(lián)合應(yīng)氟康唑、伊曲康唑、伏立康新生隱球菌的標(biāo)本檢標(biāo)本來源：CSF、血、組織、痰、膿、尿、糞、3－5mlCSF離心后取沉淀蓋玻片鏡檢，可見圓形厚壁孢子，有一透光國際市場(chǎng)上的隱球抗原檢測(cè)產(chǎn)IMMY(Immuno-Mycologics,IncUSA)Bio-RadBio-RadLaboratories,IncUSA)ELISA法方方法學(xué)靈敏度：ELISA法>膠體金法>乳膠凝隱球菌乳膠抗原凝集試驗(yàn)以乳膠顆粒為載將新生隱球菌抗體球蛋白標(biāo)記在其表制成致敏乳膠懸當(dāng)與患者腦脊液或作用時(shí)，如標(biāo)本隱球菌乳膠抗原凝集試驗(yàn)及推測(cè)隱球菌病的預(yù)99%中樞神經(jīng)系統(tǒng)隱球菌者為陽90%非中樞神經(jīng)系統(tǒng)(肺﹑腎)隱球菌者為檢測(cè)其滴度可反映治療效果及其預(yù)新生隱球菌乳膠凝集試臨床?抗真菌治療的患者CSF或陽性滴度1：4往往提示新生隱球菌當(dāng)大于1：8時(shí)提示具病情在發(fā)展或活動(dòng)抗原陽性的滴度與呈正相當(dāng)用于判斷療效劑預(yù)后時(shí)，須使用同一種試劑盒清型A/B/D可在0.5ng/ml時(shí)就可檢出，而型C卻需在25ng/ml時(shí)才可檢出假陽性與假的常見原假陽HIV者非特異性

假隱球菌膠體金免疫試劑條含金標(biāo)記的抗隱球菌單克隆抗方法簡(jiǎn)單、快速，加入樣本后10分鐘可出結(jié)可以作半定量滴度檢測(cè)已經(jīng)FDA批準(zhǔn)，國內(nèi)已獲定性檢測(cè)操作步簡(jiǎn)單5步，10分鐘得到結(jié)注意：膠體金法和乳膠凝集法對(duì)10清,腦脊液,隱球菌的藥敏試目前主要參照念珠菌的相關(guān)折點(diǎn):JMed球ARTEMIS監(jiān)測(cè)新生隱球菌對(duì)氟康唑的耐藥率有上升趨1997-2000年2001-2004年2005-2007年對(duì)伏立康唑的耐藥率低(1.7-1.8PfallerMA,JClinMicrobiol,2009,47(1):117-病例病史患者女，13歲，福建福鼎市人，面部皮損1年半，疼痛，伴咳嗽反復(fù)發(fā)燒38～39℃。近期又在外院使用皮質(zhì)激素治2008.9.6皮膚病理報(bào)告：臨床：深部我院真菌室檢皮損膿液：真菌直接鏡檢：隱球菌培養(yǎng)：新生隱球菌痰：真菌直接鏡檢：隱球培養(yǎng)：新生隱球菌血真菌培養(yǎng)：新生隱球菌生血隱球菌乳膠凝集試驗(yàn)：陽性，定量滴度大于復(fù)查2008.9.6病理片：見大量新生隱球與治治療：口服氟康唑膠囊：200mg經(jīng)抗真菌治療2天后熱轉(zhuǎn)兒科醫(yī)院傳染科入院治治療后皮菌種菌種Huashan血漿?－1、3－D葡聚糖檢測(cè)（G試驗(yàn)試驗(yàn)原理為?1，3D葡聚糖（BG）是酵母和絲狀真菌細(xì)胞壁的多聚糖成分，原核生物、病毒和細(xì)胞都不存在此成分。因此，它在血液及無菌體液中的存在可以很大程度上視為IFB的標(biāo)志，如念珠菌、曲霉、鐮刀霉、酵母和絲孢酵母等，但對(duì)定植的念珠菌顯示。接合菌（毛霉）、隱球菌屬的由于其細(xì)胞GM試驗(yàn)和G試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)能提高曲霉檢出的陽分出定植和，缺點(diǎn)是不能知體的HuashanHuashanG試驗(yàn)的臨床應(yīng)用與意判斷標(biāo)真菌定植深部真菌意早期除結(jié)合菌、隱球菌外的深部真菌，敏感性與特異性為80％以上G試驗(yàn)的臨床應(yīng)用評(píng)FDA于2004年批準(zhǔn)于應(yīng)用侵襲性真菌的早期輔助檢測(cè)方法快速、簡(jiǎn)便，1.5小時(shí)就能目前主要用于深部念珠菌和曲霉的、高的預(yù)測(cè)值參考價(jià)值較高（連續(xù)2次抗真菌藥物治療不影響檢測(cè)結(jié)G試驗(yàn)的應(yīng)用與評(píng)對(duì)于念珠菌對(duì)于念珠菌血癥,G試驗(yàn)檢測(cè)是首選Pazos等5例確診IFI及3例臨床的IFI患者，肺部HRCT檢查發(fā)現(xiàn)以前。平均早于發(fā)熱ClinMicrobiol，2005，43(1):299—G試驗(yàn)的應(yīng)用與評(píng)ClinInfectDis，2004，39(2)：199—G試驗(yàn)的影響因避免污染：試管等器具無菌、無熱含有葡聚糖成分或類似結(jié)構(gòu)血液透析、腹膜紗布或其他醫(yī)療物品（外科手術(shù) 某些品牌的靜脈制劑（等）抗腫瘤藥物（香菇多糖，裂殖菌糖某些細(xì)菌敗血癥患者（尤其是鏈球菌敗血癥G試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果判葡聚糖參考結(jié)觀察期，有能很可可能性極對(duì)抗真菌治的建不推存在宿主因建議搶先治建議治建議治檢測(cè)周存在宿主因存在宿主因48小時(shí)后檢6-24確G試驗(yàn)動(dòng)態(tài)測(cè)一周兩AndnoleVT.JAndnoleVT.JAntimicrob/41999:44:151-曲霉：日益嚴(yán)重的問題真菌的顯著升-免疫抑制患者的顯著升-侵襲方式增曲霉是僅次于念珠菌的常見病原性真，初期癥狀不明HuashanHuashan侵襲性曲霉病的未能，未治療病程10天以上（癥狀，X線經(jīng)驗(yàn)性早期診治有效藥物治療Lancet355:423,2000,CID23:608,1996,EurJClinInf曲霉的真菌學(xué)檢鑒定依賴于形態(tài)學(xué)特直接鏡檢：痰、膿、痂皮、耵聹、甲屑、糞、曲霉菌絲：呈45°分枝反復(fù)分枝現(xiàn)象，排列成放松射菌絲形態(tài)鑒念珠菌菌絲較有芽孢及假菌毛霉菌菌絲粗，約為曲霉菌絲的2～3菌絲多不分念珠菌菌絲:PAS陽毛霉菌菌絲:PAS陽曲霉培各種標(biāo)本接種于SDA斜面，置25或37℃，一般48～72h開始有少量生長(zhǎng)，培養(yǎng)時(shí)間4～7鑒定曲霉的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基-察氏培養(yǎng)基（Czapekagar）及麥芽浸汁瓊相關(guān)的臨床經(jīng)驗(yàn)顯示在監(jiān)護(hù)患者呼吸道分泌中發(fā)現(xiàn)的曲霉,大部分與侵襲性曲霉有,應(yīng)作為曲霉病的標(biāo)記Program softheInterscienceConferenceAntimicrobialAgentsandChemotherapy,2004:K-組織病理學(xué)檢侵襲性曲霉—血管，引起病變部位的栓塞、及壞－非特異性炎癥、化膿性改變或肉芽腫形組織內(nèi)曲霉勻,直徑約3～6μm有菌絲反復(fù)分枝現(xiàn)象，排－有些慢性損害中菌絲常呈不規(guī)則—特征性的菌絲：曲霉最可靠的依曲霉在組織病理片中的表曲霉半乳甘露聚糖抗原測(cè)定(GM試驗(yàn) 甘露聚糖(galacto-mannanGM),其釋放量與菌量成正比，可以反映程度。標(biāo)本：、尿液、腦脊液及BAL液 GM在曲霉后24h即可檢測(cè)出，與病情嚴(yán)重程HuashanHuashan曲霉半乳甘露聚糖抗原測(cè)定(GM試驗(yàn)中GM在早期能被檢測(cè),常常在有2/3的患者在其他方法侵襲性曲霉病前6～14d即可檢測(cè)到GM。曲霉抗原檢測(cè)的優(yōu)結(jié)果穩(wěn)定響敏感性強(qiáng)：在臨床癥狀出現(xiàn)同時(shí)或之前,便可在體液中檢測(cè)出異抗原,BAL則比 更早地檢測(cè)到，適于期 改預(yù)后可判斷預(yù)后及療效：抗原濃度可隨病情活動(dòng)而變化,有助于療效判定,液系統(tǒng)及造血干細(xì)胞移植等免疫受損者侵襲性曲霉的。HuashanHuashan臨床意GM驗(yàn)陽性是侵襲性曲霉菌病臨床可實(shí)現(xiàn)侵襲性曲霉菌的早可實(shí)現(xiàn)對(duì)高危人群曲霉菌的動(dòng)態(tài)監(jiān)可對(duì)抗真菌治療提供用藥依據(jù)和進(jìn)行效學(xué)評(píng)出現(xiàn)假陽性因新生兒和兒童血液透自身免疫性肝炎等出現(xiàn)假因以前使用了抗真菌藥物病情不嚴(yán)重非粒細(xì)胞缺乏的患者常見曲霉的鑒煙曲菌落特征生長(zhǎng)快，絨毛狀或絮狀，背面蒼白色或淡48℃生長(zhǎng)良鏡下特征分生孢子頭短柱狀，分生孢子梗壁光滑，呈淡綠頂囊呈燒瓶小梗單層、分布分生孢子球形、綠色、有小煙曲霉菌煙曲霉分生孢子頭(棉蘭染色HuashanHuashan常見曲霉的鑒黃曲菌落特征生長(zhǎng)快，羊毛狀或棉毛狀，表面黃綠色或棕綠背面無色或淡黃鏡下特征分生孢子頭放射狀或疏松狀，分生孢子梗壁厚粗頂囊呈球形或近球小梗單層、雙層或同時(shí)存在、布滿頂囊表黃曲黃曲霉分生孢子頭(棉蘭染色性皮膚曲霉黃曲HuashanHuashan常見曲霉的鑒黑曲菌落特征生長(zhǎng)快，羊毛狀或絨毛狀，表面白色→黃色→黑背面無色或淡黃鏡下特征分生孢子頭放射狀，或列柱分生孢子梗壁光滑，較黑曲黑曲Huashan分分生孢子梗無色光Huashan常見曲霉的鑒土曲菌落特征生長(zhǎng)快，絨毛狀，有淺放射狀溝表面肉桂色或黃褐色；培養(yǎng)基可呈污褐色，背面淡黃色到棕色鏡下特征分生孢子頭致密圓柱HuashanHuashan土曲土曲霉分生孢子頭(棉蘭染色常見曲霉的鑒構(gòu)巢曲菌落特征中等速度生長(zhǎng)，絨毛狀→粉末表面：綠色或黃褐背面：紫色或橄欖鏡下特征分生孢子頭呈密短圓柱分生孢子梗短，彎曲，光滑無頂囊呈半球形或燒瓶形，雙層小分生孢子球形，粗糙，有小刺或小殼細(xì)胞較多（球形、膜厚較大），可見閉囊殼（灰白紫紅色構(gòu)巢曲構(gòu)巢曲霉分生孢子頭(棉蘭染色常見曲霉的鑒雜色曲菌落特征中等速度生長(zhǎng)，絨毛狀或絮表面：深綠、灰綠、淡黃、粉紅色，體現(xiàn)雜背面：蒼白色或淡黃色、橙色、紫鏡下特征分生孢子頭呈疏松放射分生孢子梗壁光滑、無頂囊呈半球形，雙層小梗分布于頂囊4/5分生孢子球形，粗糙有深部真菌檢測(cè)現(xiàn)真菌目前仍以常規(guī)方法為主,輔以真曲霉抗原半乳甘露聚糖的測(cè)定1-3-β-D葡聚糖檢測(cè)（G試驗(yàn)隱球菌膠乳凝集試驗(yàn)直接鏡檢、培養(yǎng)、組織病涵蓋這些檢查方規(guī)范是深部真菌病的最可靠方法。真菌藥敏試藥敏試驗(yàn)近年來由于真菌的臨床和標(biāo)準(zhǔn)（ClinicalandLaboratoryStandards2005年1月NCCLS改名為CLSI今頒布了下列?酵母菌液基稀釋法抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)?（CLSIM27-?產(chǎn)孢絲狀真菌抗真菌藥敏試驗(yàn)?（CLSIM38-?酵母菌紙片擴(kuò)散法敏感試驗(yàn)?(CLSIM44-?非皮膚癬菌絲狀真菌紙片擴(kuò)散法敏感試驗(yàn)?(CLSIM51-HuashanHuashan酵母肉湯稀釋法抗真菌敏感試CLSIM27－A3方案(2008適用于念珠菌、隱球菌及其他酵母，但不包括雙相型菌肉湯稀釋方法（微量法制定了兩性霉素B(AmB)、酮康唑Ketoconazole）、伊曲康唑（Itraconazole）、氟康唑(fluconazole)、帕沙康唑(posaconazole)、伏立康唑(voriconazole)、雷夫康唑(Ravuconazole)、卡泊芬凈（caspofungin）、阿尼芬凈（Anidulafungin）、咪卡芬凈（Micafungi）、氟胞嘧啶（5FC）及質(zhì)控株的參考范圍。研究證實(shí)對(duì)念珠菌藥敏試驗(yàn)有較好的重復(fù)性，可準(zhǔn)確地檢測(cè)其對(duì)上述抗真菌制劑的敏感性。濁度未減濁度未減Huashan判讀標(biāo)014：與對(duì)照孔比較

折棘白菌素唑類HuashanHuashan案M38－A2（2008年）肉湯稀釋法（微量液基稀釋法35℃96h觀察結(jié)酵母菌紙片擴(kuò)散法敏感試驗(yàn)方CLSIM44－A2（2009年僅適合于念珠菌制定了氟康唑(fluonazol)、沃爾康唑(voriconazle)、卡泊芬凈（caspfungin）及帕沙康唑(osaconzole)質(zhì)控株的參考范圍及抑菌環(huán)解釋標(biāo)準(zhǔn)。20－24h觀察結(jié)果，研究證實(shí)對(duì)念珠菌藥敏驗(yàn)絲狀真菌紙片擴(kuò)散法敏感試CLSIM51－A（2010年培養(yǎng)時(shí)間：接合菌1624h,曲霉24h，其他曲霉48，鏈隔孢、鐮刀霉、擬青霉及波氏假阿利什菌4—72h觀察結(jié)果。E-test是一種商品化的抗真菌藥物敏感性方采用被不同量的抗真菌藥物包被的特殊試劑條，受試藥物包括氟康唑、伊曲康唑和兩性霉素B等該方法操作簡(jiǎn)單、直觀，與CLSI法有較好的一致性缺點(diǎn)：結(jié)果判定需有一定經(jīng)驗(yàn)，價(jià)格昂E-test抗真菌藥兩性霉素5氟胞嘧啶(5-酮康唑伊曲康唑氟康唑卡泊芬起始濃度:32mg/L，終末濃度絲狀真菌的E-test藥敏試ATBFUNGUS3由Bio-Merieux公司開與微量稀釋法條件相近，培養(yǎng)基為半固受試藥物有ITC，F(xiàn)C，兩性霉素B和5-FC，VRC定量包被在試劑條上受試菌為念珠菌和新生隱球菌，定量接將含有一定量抗真菌藥物的紙片置于接種有一定量真菌的平皿中，在一定的溫度下經(jīng)過一定時(shí)間孵育后，通過測(cè)量抑菌圈的大小來判斷受試真菌對(duì)于該藥物的敏感性該方法簡(jiǎn)單直觀，已有商品缺點(diǎn)：不能精確量ROSCONeo-酵母菌紙片擴(kuò)散法藥敏試改良Shadomy瓊脂或RPMI1640瓊脂加熱溶解后倒入9cm皿新鮮具的純化的酵母菌落以生理鹽水制成CFU/ml(配制成0.5麥?zhǔn)蠞岫群笤僖陨睇}水接種：平皿先置35℃干燥20－25分鐘，傾注0.5ml菌懸液于平皿表面，均勻涂布，用移液管吸除多余的菌液。35℃干燥15分鐘后貼上藥物紙片培養(yǎng)：3518－24小時(shí)，如未見明顯生長(zhǎng)，再放24小時(shí)。隱球菌：30℃42－48小時(shí)RoscoNeo-sensitab抗真菌藥片（2011版藥物名效簡(jiǎn)抑菌圈直徑SID氟康18-伏立康16-兩性霉B14-伊曲康22-酮康27-卡泊芬15-泊沙康16-與體內(nèi)療效的一致NCCLSM27-600余株念珠菌MIC值：分離自10余例ADSMIC64g/ml90-60原則—MICMahmoudA.G,MahmoudA.G,JCM1996,34:489-495；RexJ,CID2002,982-HuashanHuashan藥敏試驗(yàn)結(jié)果與臨床療效的關(guān)念珠菌病及隱球菌病13藥敏結(jié)病例治療有效P敏耐HuashanHuashan病例介紹病史資料，，24“頭痛、發(fā)9”于20044月初出差后出現(xiàn)發(fā)熱3熱退，但出現(xiàn)陣發(fā)性頭痛，持續(xù)時(shí)間逐漸5跌倒數(shù)次。體液及細(xì)胞免疫指標(biāo)均正常，、TP及V抗體均CSF真菌學(xué)檢查真菌學(xué)檢API20CAUX：小型無分子生物學(xué)鑒Protothecazopfiivar.portoricensis（同源性Protothecazopfiivar.hydrocarbonea（同源性動(dòng) 模型建見大量無綠藻（PAS染色400倍與治療根據(jù)臨床癥狀及真菌學(xué)檢查結(jié)果為無治療方案續(xù)伊曲康唑口服液200mgq12h連續(xù)3個(gè)月HuashanHuashan病例介紹 病史資男，38歲，左頸部淋腫大7個(gè)月，不痛，血常規(guī)中WBC5.78x109/L，N40.1%L40.7%，M10.2%，P1.0%細(xì)胞免疫：CD3、CD4、CD8基本正HIV、RPR、TPPA正 活真菌培

RapidIDYeastPlus鑒定為Prototheca同源性為100％長(zhǎng)長(zhǎng)與治療varportoricensis）變種所致的炎靜脈滴注伊曲康唑200mgb.i.dX2d，繼之200mgqdX12d,此后采用口服液200mgbidX3m. 與治療的淋大，大小約1.5cm×2cm，不壓痛患者無發(fā)熱及其他不適再給于AMB靜滴，劑量逐遞增，連10d，累計(jì)劑量108與治療 出院隨病例資患