糖發(fā)酵實驗報告

糖發(fā)酵試驗一、目的了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重要作用。二、原理多糖?單糖?丙酮酸?酸性產(chǎn)物(或產(chǎn)酸產(chǎn)氣)?ph下降?指示劑呈酸性變色(若產(chǎn)氣者有氣泡出現(xiàn))。否產(chǎn)酸，可在糖發(fā)酵培養(yǎng)基中加入指示劑（b.c.p，其ph5.2ph在6.8以上呈紫色，經(jīng)培養(yǎng)后根據(jù)指示劑的顏色變化來判斷。是否產(chǎn)氣可在發(fā)酵培養(yǎng)基中放入倒置小倒管觀察。（醇氣，而傷寒桿菌則只產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣。(ph6.8(ph5.2)。氣體的產(chǎn)生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。三、器材1．菌種大腸桿菌,普通變形桿菌斜面各一支。23管)。3四、操作步驟1．用記號筆在各試管外壁上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的細菌菌名。3作為對照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3不接種，作為對照。在接種后，輕緩搖動試管，使其均勻，防止倒置的小管進入氣泡。63724～48h。4．觀察各試管顏色變化及德漢氏小管中有無氣泡。篇二：發(fā)酵實習(xí)實驗報告第一部分、實驗部分實驗一、酸乳的制作一、實驗?zāi)康?、掌握酸乳的制作方法、基本原理；2、了解發(fā)酵劑制備過程中的操作要點；3、對最終產(chǎn)品進行感官評定及理化檢測，并進行品質(zhì)比較。二、基本原理酸乳也成為酸牛奶，是人們喜歡的飲用發(fā)酵乳。所謂發(fā)酵乳、鮮乳或乳制品等主要原料添加乳酸菌，發(fā)酵以后形成的具有特殊風(fēng)味的乳制品。乳經(jīng)過發(fā)酵制成發(fā)酵乳以后營養(yǎng)價值提高，發(fā)酵乳中的蛋白質(zhì)、鈣鹽容易消化吸收，具有消化、抑制腸道內(nèi)異常的發(fā)酵和殺死腸道中的有害菌的作用。使牛奶中酪蛋白（2.985%）變性凝固而使整個奶液呈凝乳狀態(tài)。三、實驗材料1、材料：純牛奶、白糖、酸牛奶2、儀器：電爐、水浴鍋、電子天平、恒溫培養(yǎng)箱、相關(guān)玻璃器皿四、實驗步驟1、取2000ml純牛奶放入鍋中加熱；2、當(dāng)達到一定溫度后，按照8%的比例加入160g白糖，攪拌溶解3、將牛奶加熱到90℃；4、小組分裝，每個三角瓶中加入50ml的牛奶，5、將分裝好的牛奶放到95℃的水浴鍋中，滅菌5min；、冷卻到4℃，在酒精燈下，接種適量的酸牛奶（一勺，并攪拌均勻，封好口；7、在37℃的溫箱中保溫培養(yǎng)2-4h，8、轉(zhuǎn)入0-4℃冰箱中冷藏保存；9、品質(zhì)鑒定五、實驗結(jié)果品質(zhì)鑒定：1.色澤：色澤均勻一致，呈乳白色。味道。狀態(tài)：凝塊均勻，無氣泡，沒有乳清析出。實驗所制作的酸乳，質(zhì)量品質(zhì)和外觀色澤均非常好。六、思考題1、牛乳的殺菌工藝有哪幾種？牛乳的殺菌工藝中最經(jīng)典的就是巴氏殺菌法和超高溫滅菌法，還有煮沸殺菌法。2、乳酸菌在乳中發(fā)酵的原理是什么？牛乳為什么是凝固的？基本原理就是通過乳酸菌發(fā)酵牛奶中的乳糖產(chǎn)生乳酸，乳酸使牛奶中酪蛋白（約占全乳的2.9%，占乳蛋白的85%）變性凝固而使整個奶液呈凝乳狀態(tài)。實驗二、甜酒釀的制作一、實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)甜酒釀的發(fā)酵工藝；2、明確發(fā)酵的原理。二、實驗原理甜酒釀是以糯米為主要原料，通過微生物的發(fā)酵釀制而成的。由于酵母不能直接利用淀粉，因此必須先用糖化菌如根霉、毛霉等把淀粉分解成單糖或雙糖。因此，甜酒釀是在糖化菌和酵母菌共同作用下釀制而成的，甜酒釀的制作過程包括糖化和酒化兩個過程。糖化過程是在糖化菌如根霉分泌糖化酶的作用下，將淀粉水解成葡萄糖；酒化的過程是酵母菌利用葡萄糖經(jīng)過emp途徑生成丙酮酸，然后進入無氧呼吸將丙酮酸轉(zhuǎn)化為乙醇。三、實驗材料1、材料：糯米、酒藥2、器材：燒杯、錫箔紙、吸管、電子天平、電磁爐、不銹鋼匙、玻璃棒等四、實驗步驟1、選擇原料；選擇粒大飽滿、無蛀蟲、無雜物、色澤鮮亮、質(zhì)量好的新糯米共1100g，每小組大約有275g左右；2、淘洗浸泡；將米在水中浸泡12-24小時，后用自來水沖洗，浸米的目的是使米中的淀粉粒子吸水膨脹，便于蒸煮糊化；將浸泡好的米用自來水沖洗干凈，并瀝干。、蒸煮米飯；將洗凈瀝干的米在高壓鍋中隔水蒸煮10-2030-40求達到熟而不糊，外硬內(nèi)軟，內(nèi)無白心，疏松易散，透而不爛，均勻一致。4、淋飯降溫；用冷開水淋洗糯米飯，以達到降溫增水的目的，并使熟飯表面光滑，易于拌入酒藥，利于糖化發(fā)酵菌的繁殖；淋飯時要邊拌邊淋，使米飯快速降溫至35℃左右，避免因緩慢冷卻導(dǎo)致微生物污染。5、接入酒曲；將冷卻至30℃左右的米飯，按糯米量1%（約11g）接入酒藥，將大米平均分4（高，表面再撒上少許酒藥，用封口膜封口。6、保溫發(fā)酵；30℃培養(yǎng)48小時，待喇叭型凹窩內(nèi)有許多液體滲出，即可食用，但此時酒味淡泊，略有酸味，若要品嘗酒香濃郁的酒釀，可適當(dāng)延長發(fā)酵的時間。7、后熟發(fā)酵；在8-10℃下培養(yǎng)2-3天。8、質(zhì)量評估；酒香濃郁，液體清澈透明，酒液充沛。五、結(jié)果思考題結(jié)果分析：在保溫發(fā)酵48小時后，將燒杯移除后，看到在燒杯的底部出現(xiàn)少量的清澈的液體，在喇叭口的大米的表層出現(xiàn)了白色的霉菌。在后發(fā)酵過程中，燒杯底部的清澈的液體的量不斷增加。此時出現(xiàn)淡淡的酒精味，略有酸味。品鑒時，燒杯的底部出現(xiàn)了2cm厚的清澈的液體，酒精味濃郁，有一股淡淡的清香。1、甜酒釀制作過程中應(yīng)注意問題有哪些？在甜酒釀的制作過程中應(yīng)注意在挑選糯米的時候選取粒大飽滿的新糯米注意不要將米飯蒸糊，在淋飯降溫的時候用冷開水快速降溫，避免因為緩慢降溫冷卻導(dǎo)致其他微生物的污染。在接種酒曲之后要攪拌均勻，接入適量的酒藥，表面撒上少許酒藥，注意a430℃，培養(yǎng)的時間為482、說明甜酒釀制作的發(fā)酵原理？甜酒釀是在糖化菌和酵母菌共同作用下釀制而成的，甜酒釀的制作過程包括糖化和酒化兩個過程。糖化過程是在糖化菌如根霉分泌糖化酶的作用下，將淀粉水解成葡萄糖；酒化的過程是酵母菌利用葡萄糖經(jīng)過emp實驗三、槐耳粗多糖的提取一、實驗?zāi)康?、掌握發(fā)酵產(chǎn)物的精制過程；2、明確提取、濃縮、醇沉和干燥的原理。二、實驗原理ph可確定提取過程中溶劑ph溶液中，分次加入乙醇（速度。方法有空氣加熱干燥法、杰出加熱法和冷凍升華干燥法。三、實驗器材1、材料：槐耳2、器材：分液漏斗、電爐四、實驗步驟1、浸泡2、：250g槐耳，粉碎后加入8倍蒸餾水浸泡24h；3、熱浸提：ph自然，100℃，不時攪拌，2h；4、過濾，殘渣加入適量的水，重復(fù)抽提一次，合并兩次提取所得濾液；5、濃縮，采用蒸發(fā)濃縮法，加熱至小于150ml左右體積；6、去蛋白，連續(xù)2-3=4:1溶液去除蛋白sevag法，至不顯示蛋白反應(yīng)為止，離心收集上清液。（注：sevag法：加入0.2倍多糖體積的氯仿和乙醇的混合液，震蕩分離15min左右，直到氯仿和水的界面沒有沉淀為止，且重復(fù)處理2-3）7、本次實驗經(jīng)濃縮和抽提之后獲得80g的粗多糖提取液。將所得的多糖的粗提取液平均分成4份，依據(jù)每份的質(zhì)量體積按照70%、75%、80%、85%的乙醇濃度加入乙醇，室溫下靜止24h；、離心（濾紙過濾，切記不要震蕩；3600rpm10min9、收集沉淀，采用對流加熱干燥方法，60℃加熱干燥至恒重；10、稱重，按照下表記錄數(shù)據(jù)。六、思考題1、沉淀多糖最適乙醇用量是什么？沉淀多糖最適的乙醇用量是75%濃度，大約是粗多糖濃縮液的4倍體積乙醇。2、粗多糖的提取率是多少？75=1.02g/(250g/4)x100%=1.632酵實驗報告《發(fā)酵工程原理》綜合實驗——小型發(fā)酵罐的使用與發(fā)酵過程監(jiān)測與分析學(xué)院名稱：食品學(xué)院年級專業(yè)：09級生物工程實驗日期2011.11.23-25加熱、冷卻、保溫。罐體與上下填充頭（或雛形）均采用旋壓r空氣呼吸孔，cip本實驗通過控制合適的培養(yǎng)條件，使大腸桿菌迅速持續(xù)生長，在發(fā)酵過程中定時取樣測定不同時期發(fā)酵液的細菌濁度及殘留還原糖的變化了解發(fā)酵過程中菌體生長及對培養(yǎng)基的利用情況。關(guān)鍵詞：大腸桿菌液體發(fā)酵 最大比生長速率 平均細胞得率系目 錄前言...........................................................................................................................................................3材 料 與 設(shè)備...................................................................................................................................................4材料...................................................................................................................................................4菌種.......................................................................................................................................4培 養(yǎng)基...................................................................................................................................4其 他 材料...............................................................................................................................4設(shè)備...................................................................................................................................................4實 驗 方法.......................................................................................................................................................4流程...................................................................................................................................................4菌 種 準備...........................................................................................................................................5配 制 培 養(yǎng)基...........................................................................................................................5接 種 與 培養(yǎng)...........................................................................................................................5上 罐 前 的 準備...................................................................................................................................5實 罐 滅菌...........................................................................................................................................6發(fā) 酵 操作...........................................................................................................................................6取樣........................................................................................................................................6接種........................................................................................................................................7電 腦 監(jiān)控................................................................................................................................7發(fā) 酵 管理...............................................................................................................................7發(fā) 酵 過 程 中 各 項 生 理 指 標(biāo) 的 測定...................................................................................................7od 值 測定..............................................................................................................................7葡 萄 糖 測定...........................................................................................................................7放 罐 清洗...........................................................................................................................................8結(jié) 果 與 分析...................................................................................................................................................9菌 體 濃 度 與 吸 光 值 關(guān) 系 標(biāo) 準 曲線...................................................................................................9發(fā) 酵 過 程 各 參 數(shù) 變 化 規(guī)律...............................................................................................................9干 菌 體 濃度............................................................................................................................9葡 萄 糖 濃度.........................................................................................................................10ph 值 、 do 值 和 其 他 一 些 參數(shù)...........................................................................................10各 參 數(shù) 整 理 與 分析.........................................................................................................................11最 大 比 生 長 速率.............................................................................................................................13平 均 細 胞 得 率 系數(shù).........................................................................................................................15實 驗 操 作 對 實 驗 結(jié) 果 的 影響..........................................................................................................15菌種活化與一級菌種、二級菌種的制備 15搖床.....................................................................................................................................15上 罐 前 管理.........................................................................................................................15實 罐 滅菌.............................................................................................................................16接 種 時 管理.........................................................................................................................16發(fā) 酵 時 管理.........................................................................................................................16od 值 測定............................................................................................................................17還 原 糖 測定.........................................................................................................................17試 驗 中 遇 到 的 問 題 及 猜想.................................................................................................17參 考 文獻...................................................................................................................................................18前 言發(fā)酵罐是進行液體發(fā)酵的專用設(shè)備1l5lph大腸桿菌（e.coli）是遺傳工程研究過程中常用的受體菌，對大腸桿菌的遺傳背景和生理特性研究已相當(dāng)徹底，已有很多不同抗藥性、不同營養(yǎng)依賴型和不同校正突變型的菌種供選擇應(yīng)用，可以根據(jù)不同的載體而選擇不同的菌種。大腸桿菌在營養(yǎng)條件充足時，20～30min即可繁殖一代，而且大規(guī)模發(fā)酵成本低，具有巨大的生產(chǎn)潛力為了解發(fā)酵過程中菌體的生長及對培養(yǎng)基的利用情況，需在發(fā)酵過程中定時地取樣測定。包括對菌體進行鏡檢、測定不同時期發(fā)酵液的細菌濁度及殘留還原糖（rg）的變化等。材料與設(shè)備材料菌種大腸桿菌（e.coli）培養(yǎng)基10g，10g10g，5g5g1000ml。ph7.0。20g，10g10g，10g5g，5g1000mlph7.0。全部用自來水配制培養(yǎng)基。其他材料泡敵、斐林試劑、0.1%標(biāo)準葡萄糖溶液、40%氫氧化鈉等。設(shè)備biotech-7bgz1（ph(do分光光度計、旋轉(zhuǎn)式搖床、離心機、恒溫培養(yǎng)箱等。實驗方法流程菌種斜面一級種子37℃（250ml搖瓶)37℃培養(yǎng)10h二級種子(500ml搖罐取分析測定 發(fā)酵罐管路準備滅菌酵圖1發(fā)酵過程流程菌種準備配制培養(yǎng)基100ml滅菌20min種子培養(yǎng)液600m，分別分裝50ml于兩個250ml三角瓶中（作一級種子瓶，余下550ml均分裝于三個500ml三角瓶中（作二級種子用，同上滅菌備用。接種與培養(yǎng)菌種活化上罐前兩天，從冰箱中取出菌種轉(zhuǎn)接斜面，37℃培養(yǎng)24h。接一級種上罐前一天，由斜面菌種轉(zhuǎn)接一級種子瓶，37℃振蕩（125r/min）培養(yǎng)12h。分別測接種前和培養(yǎng)結(jié)束時的od值，計算出凈增od，并作記錄。接二級種將一級種轉(zhuǎn)接二級種子，接種量5%。之后，37℃振蕩（125r/min）培養(yǎng)10h。上罐前的準備洗凈發(fā)酵罐及各聯(lián)接膠管。配制發(fā)酵培養(yǎng)基5000ml，置發(fā)酵罐內(nèi)，加入幾滴泡敵。校正ph電極和溶氧(do)電極。安裝好發(fā)酵罐，把電極插口、取樣管、補料口、消泡劑料瓶等固定、密封好后，開夾套出、進水閥v2、w1，使夾套充滿水。篇四：微生物實驗報告膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢專業(yè)： 學(xué)號：姓名：一、實驗?zāi)康牡呐d趣。器材cx21（帶棉塞試劑藥品95%乙醇、稀釋復(fù)紅、葡萄糖微量發(fā)酵管、乳糖微量發(fā)酵管、青霉素抗菌素紙片、鏈霉素抗菌素紙片、慶大霉素抗菌素紙片、血漿、福氏志賀菌診斷血清三、方法與步驟干粉培養(yǎng)基→蒸餾水→加熱溶化→分裝→集中放在試管筐里→罩上硫酸紙橡皮筋扎好→放入講臺邊的滅菌桶或滅菌筐內(nèi)→送到高壓蒸汽滅菌室（洗刷室）→滅菌→10ml→貼上標(biāo)簽后滅菌使用。①空氣的細菌學(xué)檢查1（蓋朝下放置在平板旁邊→平板暴露于空氣中15min24h→觀察結(jié)果。②人體體表的細菌學(xué)檢查甲乙常規(guī)洗手，丙丁標(biāo)準洗手。甲和乙、丙和丁共用1個平板按規(guī)定在普通平板上接種手指上的細菌。第1234脂平板2份，糞便標(biāo)本接種于伊紅美藍平板2份）→接種環(huán)燒灼滅菌→將平板倒置3℃18～24h接種環(huán)燒灼滅菌→挑選平板上典型的四種單菌落（白色、黃色、紫黑色、粉紅色）進行斜面接種純培養(yǎng)→做好標(biāo)記→接種環(huán)燒灼滅菌→斜面培養(yǎng)基置于37℃培養(yǎng)過夜→保存?zhèn)溆芒俑锾m氏染色：取潔凈載玻片→用滅菌操作后的接種環(huán)取生理鹽水1-2環(huán)于玻片上→挑取細菌培養(yǎng)物少許與鹽水輕輕抹勻→待涂片干燥后在酒精燈火焰外側(cè)快速來回2-3回合→結(jié)晶紫初染1min→水洗→盧戈碘液媒染1min→水洗→95％乙醇脫色約20s→水洗→稀釋品紅→復(fù)染1min→水洗→吸干,鏡檢。②肉湯接種法:接種環(huán)燒灼滅菌→分別在斜面培養(yǎng)物中挑取菌苔少許→立即移入肉湯培養(yǎng)基管中→在接近液面的管壁上輕輕研磨→沾取少量肉湯調(diào)和→混勻→試管口通過火焰2-3次滅菌→塞好棉塞→35℃培養(yǎng)4~6h接種環(huán)燒灼滅菌→分別取之前實驗中得到的四種菌液在普通平板密集涂布→接種環(huán)燒灼滅菌→標(biāo)記:青、鏈、慶→鑷子火焰消毒→貼青霉素、鏈霉素、慶大霉素紙片→按壓→鑷子消毒→倒置37℃培養(yǎng)18～24h→觀察結(jié)果取干凈玻片一張→在左右兩邊分別滴加兔血漿1-2滴，生理鹽水1滴→接種環(huán)燒灼滅菌→冷卻→分別用接種環(huán)取之前實驗所得到的白色和黃色菌苔(2～3個菌落的菌量)與血漿研磨混合→邊混勻邊觀察結(jié)果→接種環(huán)燒灼滅菌→稍等片刻，觀察結(jié)果接種針燒灼滅菌→用滅菌接種針分別刮取實驗所得到的紫黑色和粉紅色菌苔→分別接種培養(yǎng)過夜后→觀察結(jié)果。接種針燒灼滅菌→分別用接種針在紫黑色和粉紅色的斜面取菌→從半固體培養(yǎng)基中心垂直刺入，可刺達近底管處，但不要到達管底→循原來的路線退出接種針→試管口迅速通過火焰2-3次滅菌→塞好棉塞→燒灼滅菌接種針→37℃培養(yǎng)24h→觀察結(jié)果取潔凈的載玻片一張→將磨面近端設(shè)為對照區(qū)→滴加生理鹽水15ul→遠端設(shè)為試驗區(qū)→滴加福氏志賀菌診斷血清15ul→接種環(huán)燒灼滅菌→用接種環(huán)分別取粉紅色菌苔→研磨于鹽水或血清內(nèi)，混合均勻→接種環(huán)燒灼滅菌→載玻片來回傾側(cè)→觀察結(jié)果四、結(jié)果與討論對膿汁中細菌的分析討論1、用普通平板，從膿汁標(biāo)本中分離出金黃色和白色兩種菌落。2、在顯微鏡下觀察時，這兩種細菌均為g+球菌，排列不規(guī)則，呈葡萄串狀，是典型的葡萄球菌。3、結(jié)合菌落的顏色，可以初步斷定，這是金黃色葡萄球菌和白色葡萄球菌。4酶陽性；白色菌落則沒有凝集反應(yīng)，說明其為凝固酶陰性。5其中青霉素對金黃色葡萄球菌最敏感。對糞便中細菌的分析討論粉紅色半透明菌落。2、在顯微鏡下觀察時，這兩種菌均為g-桿菌，排列不規(guī)則，從形態(tài)上不能鑒別是什么細菌。3粉紅色的細菌只能使葡萄糖的試管變色。4只在接種針插入的方向聚集。5、綜上所述，紫黑色的細菌為大腸埃希菌，粉紅色的細菌為志賀菌。6致病菌為金黃色葡萄球菌；糞便標(biāo)本中分離得紫黑色菌落為大腸埃希菌，粉紅菌落為福氏志賀菌，致病菌為福氏志賀菌。篇五：發(fā)酵實驗報告發(fā)酵工藝及設(shè)備實驗報告學(xué)院： 化學(xué)化工學(xué)院 專業(yè)：生物工程班級1201學(xué)號：201206030133 學(xué)生姓名： 程日期 2014年11月實驗一搖瓶發(fā)酵法制備糖化酶一、實驗?zāi)康恼莆論u床發(fā)酵法制備糖化酶的工藝流程及操作方法了解利用黑曲霉菌菌種發(fā)酵時的生長條件及注意事項二、實驗儀器及試劑菌種：黑曲霉儀器：錐形瓶50ml比色管、牛皮紙、紗布層、ph豆餅粉、麩皮三、實驗原理搖瓶發(fā)酵是實驗室常用的通風(fēng)發(fā)酵方法，通過將裝有液體發(fā)酵培養(yǎng)基的搖瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)，以滿足微生物生長、繁殖及產(chǎn)生許多代謝產(chǎn)物對氧的需求。它是實驗室篩選好氣性菌種，以及摸索種子培養(yǎng)工藝與發(fā)酵工藝的常用方法。葡萄糖淀粉酶（ec3.2.1.3）α-1,4α-1,4-1,3α-1,6α-1,4-葡萄糖苷鍵再用硫代硫酸鈉標(biāo)準溶液滴定，計算酶活力。四、實驗步驟培養(yǎng)步驟種子培養(yǎng)基制備及滅菌200~