實驗四-細菌質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移課件_第1頁
實驗四-細菌質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移課件_第2頁
實驗四-細菌質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移課件_第3頁
實驗四-細菌質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移課件_第4頁
實驗四-細菌質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移課件_第5頁
已閱讀5頁，還剩10頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

實驗四細菌質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移

李曉華程國軍一：目的要求了解在自然條件下微生物遺傳信息傳遞的方式；掌握細菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)移的原理和流程。

二：基本原理在質(zhì)粒轉(zhuǎn)移過程中，供體菌與受體菌細胞通過結(jié)合作用緊密接觸，質(zhì)粒從供體細胞向受體轉(zhuǎn)移，同時進行質(zhì)粒復(fù)制，這就是結(jié)合轉(zhuǎn)移的過程。按能否自主轉(zhuǎn)移，將天然存在的質(zhì)粒分為兩大類。

1．轉(zhuǎn)移型質(zhì)粒：多為低拷貝的大質(zhì)粒，含有完整的轉(zhuǎn)移操縱子基因（tra）和轉(zhuǎn)移起始位點。能在同種或親緣關(guān)系近的菌體細胞間進行轉(zhuǎn)移。例如：

大腸桿菌：F因子、R1、R100、R6K、RP4……天藍色鏈霉菌：致育性因子pSCP1、pSCP2……2．非轉(zhuǎn)移型質(zhì)粒：多為高拷貝的小質(zhì)粒，如大腸桿菌的ColE1、RSF1010等。由于缺少轉(zhuǎn)移基因（tra），不能自主轉(zhuǎn)移，但由于含有與F質(zhì)粒類似的bom（或nic）位點或誘動基因mob（mobilization），因而能被帶有tra基因的轉(zhuǎn)移性質(zhì)粒誘動而發(fā)生轉(zhuǎn)移。轉(zhuǎn)移子的篩選篩選培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+抗生素；

供體和輔助大腸桿菌均營養(yǎng)缺陷型，不能在基本培養(yǎng)基上生長；未轉(zhuǎn)化成功的受體菌不能在有抗生素的平板上生長。四：實驗內(nèi)容

準(zhǔn)備將受體、供體、輔助菌分別培養(yǎng)到對數(shù)期：供體菌：E.coliDH5α(pTR102)(TcR)，LB+Tc20μg/ml，37℃震蕩培養(yǎng)1夜；受體菌:Sinorhizobiumfredii(TcS)，TY,28℃震蕩培養(yǎng)2天；輔助菌:E.coliMM294(pPK2073)（SpeR），LB+Spe50μg/ml37℃震蕩培養(yǎng)1夜倒SM平板將基本培養(yǎng)基（SM）溶化，加千分之一的維生素混合液，然后加相應(yīng)量的四環(huán)素（15U/ml），每2人1皿。另準(zhǔn)備1瓶基本培養(yǎng)基，不加抗生素，用于對照。將倒好的平板用報紙包好后放入4℃冰箱，備用。（注：四環(huán)素在強光下易分解）五：實驗報告內(nèi)容轉(zhuǎn)移頻率=SM+Tc平板的單菌落數(shù)/純SM平板的單菌落數(shù)

SM+Tc平板

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論