2021-2022學年山東省泰安市高三第二次模擬考試生物試卷含解析

2021-2022學年高考生物模擬試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．植物群落在垂直方向上常表現出分層現象。下列敘述錯誤的是（）A．這種垂直結構提高了群落利用陽光等環(huán)境資源的能力B．種植某種農作物時，因植物群落分層現象的存在，所以要合理密植C．在農業(yè)生產上，應充分利用這一現象，合理搭配種植的作物品種D．從生物進化的角度來看，群落結構的形成是自然選擇的結果2．如圖①②③表示了真核細胞中遺傳信息的傳遞方向，有關說法正確的是（）A．①②③也能在線粒體、葉綠體及原核細胞中進行B．每種氨基酸均可由不止一種tRNA來轉運C．③是翻譯過程，方向是從b到aD．一條mRNA可與多個核糖體結合，多個核糖體共同合成一條多肽鏈，加快了翻譯的速率3．下列關于細胞代謝的敘述，正確的是（）A．類囊體薄膜上的類胡蘿卜素主要吸收紅光用于光合作用B．液泡主要存在于植物細胞中，可以調節(jié)植物細胞內的環(huán)境C．線粒體內[H]與O2結合的過程能使ADP含量增加D．核糖體能夠合成具有生物活性的分泌蛋白4．某同學用小球做孟德爾定律的模擬實驗，裝置如下圖所示。該同學操作如下：①從Ⅰ小桶中隨機抓取一個小球并記錄小球的字母；②從Ⅱ小桶中隨機抓取一個小球并記錄小球的字母；③將操作①②過程中的小球字母組合并記錄。抓取的小球分別放回原來小桶后再多次重復。下列敘述錯誤的是（）A．操作過程①和②均模擬了F1形成配子時，等位基因分離的過程B．操作③過程模擬了F1自交產生F2時，雌雄配子隨機結合的過程C．Ⅰ和Ⅱ桶內的小球總數相等，每只小桶內兩種小球的數量也相等D．重復300次，操作③理論上會出現四種字母組合，且每種約占1/45．我國科學家用秋水仙素處理二倍體西瓜的幼苗，獲得四倍體植株，發(fā)現四倍體植株上所結的西瓜少籽。再將萘乙酸（生長素類似物）涂抹在四倍體植株花的雌蕊上，誘導子房發(fā)育得到完全無籽西瓜。下列相關敘述不正確的是A．西瓜少籽可能是四倍體聯(lián)會出現紊亂造成B．完全無籽西瓜果肉細胞中只有2個染色體組C．涂抹萘乙酸前后應設法避免雌蕊接受花粉D．涂抹的萘乙酸促進了四倍體西瓜果實的發(fā)育6．下列有關生物多樣性與全球性生態(tài)環(huán)境問題的敘述正確的是A．解決糧食短缺問題的一個重要措施是大量開墾森林、草地等B．外來物種入侵會導致生物多樣性降低，引人其天敵是最有效的控制措施C．水資源短缺、土地荒漠化及霧霾等都屬于全球性生態(tài)環(huán)境問題D．我國實行的二孩政策可提高出生率，主要目的是調整年齡組成7．下列對實驗的相關敘述，正確的是（）A．觀察植物細胞有絲分裂實驗，染色后用鹽酸使細胞彼此分離，觀察到的都是死細胞B．放射性同位素標記法不能用于追蹤細胞內的物質代謝途徑C．將用標記DNA的大腸桿菌培養(yǎng)在普通（）培養(yǎng)基中，兩次分裂后，提取大腸桿菌DNA，經密度梯度離心，有一條中帶，一條輕帶，說明DNA復制方式是半保留復制D．用標記的噬菌體去感染未標記的大腸桿菌，短時間保溫、離心后獲得的上清液中放射性很高，說明DNA是遺傳物質8．（10分）下列關于變異、育種與生物進化的敘述，錯誤的是A．雜交育種過程中一定有基因頻率的改變B．雜交育種年限一定較單倍體育種年限長C．袁隆平培育高產雜交水稻的育種原理是基因重組D．單倍體育種的核心技術是花藥離體培養(yǎng)二、非選擇題9．（10分）Ⅰ．轉基因草莓中有能表達乙肝病毒表面抗原的基因，由此可獲得用來預防乙肝的一種新型疫苗，其培育過程如圖所示（①至④代表過程，A至C代表結構或細胞）。請據圖回答：（1）圖中①過程用到的酶是_____________，所形成的B叫做_____________。（2）②過程常用_____________處理農桿菌，使之成為____________細胞，利于完成轉化過程。（3）圖中③過程需要用到的激素是_____________。Ⅱ．黃瓜花葉病毒（CMV）是能侵染多種植物的RNA病毒，可危害番茄的正常生長并造成減產，研究人員通過農桿菌介導將該病毒外殼蛋白的cDNA導入番茄植株中，成功獲得抗CMV的番茄植株。（1）獲得CMV的RNA后，需在_____________的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。（2）獲得cDNA后，需先通過一定方法將其插入到農桿菌的________________片段中，然后將番茄子葉切段與該農桿菌共同培養(yǎng)，以實現對番茄細胞的轉化。（3）將經共同培養(yǎng)后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間，只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導入了cDNA，你認為他們做出以上判斷的理由是________________________________。（4）要想確定轉基因番茄已經成功表達出CMV外殼蛋白，需要進行_______________________實驗。（5）若要驗證轉基因番茄具有較好的抗CMV能力，請寫出實驗設計思路：_____________________。轉基因番茄自交，子代中抗性植株與敏感植株數量之比接近3：1，由此可以得出的結論是___________________（答出兩點）。10．（14分）自然界里有多種微生物，將其進行合理的篩選、培養(yǎng)和應用，能給醫(yī)藥和化工等生產領域帶來巨大經濟效益?；卮鹣铝袉栴}。（1）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取____________法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用____________法，若要將微生物采用平板劃線法進行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒____________次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的____________開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線____________。（2）將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中____________培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。其中，培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了____________。長期保存菌種時，應將培養(yǎng)的菌液與____________充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存。（3）甲、乙兩組同學用稀釋涂布平板法測定某種微生物的數量，在同一稀釋倍數下每隔一段時間記錄數據（統(tǒng)計時間內微生物總數小于環(huán)境容納量），得到以下結果：培養(yǎng)時間(小時)24487296甲組菌落均值(個)18253632乙組菌落均值(個)20283832計數時最好取培養(yǎng)____________小時記錄的菌落數作為實驗結果，一方面是由于培養(yǎng)時間較短，會遺漏菌落數目，另一方面是由于____________。11．（14分）基因工程為培育抗病毒植物開辟了新途徑，下圖為研究人員培育轉花葉病毒外殼蛋白基因（CMV-CP基因，長度為740個堿基對）番茄的主要過程示意圖(Kanr為卡那霉素抗性基因)。請回答：（1）將CMV-CP基因導入番茄細胞后，培育的番茄植株具有抗CMV感染能力，這種現象屬于植物的特異性免疫，該免疫過程中抗原是____。（2）過程①接種的農桿菌細胞中，Kanr及CMV-CP基因應整合在Ti質粒的T-DNA內部，這是由于__。使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)農桿菌的目的是____。（3）為確定用于篩選的Kan適宜濃度，研究人員進行實驗，結果如右表。最終確定過程③④加入的Kan濃度為35mg·L-1，該濃度既可___，又不至于因Kan濃度過高影響導入重組DNA細胞的生長發(fā)育。Kan濃度/mg．L-1接種外植體數形成愈傷組織數外植體狀況05549正常形成愈傷組織25662只膨大、不易形成愈傷組織35660變褐色死亡50640變褐色死亡（4）過程③、④所需的培養(yǎng)基為__（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基。過程⑤再生植株抗性鑒定時，引物序列設計的主要依據是_____，引物序列長度及G+C比例直接影響著PCR過程中_______（填“變性”或“退火”或“延伸”）的溫度。（5）過程⑤電泳結果如圖，其中l(wèi)號為標準參照，2號為重組Ti質粒的PCR產物，3-6號為抗性植株DNA的PCR產物，可以確定3—6號再生植株中____號植株基因組中整合了CMV-CP基因。12．圖甲表示由磷脂分子合成的人工膜的結構示意圖，圖乙表示人的紅細胞膜的結構示意圖及葡萄糖和乳酸的跨膜運輸情況，圖丙中A為物質的量濃度1mol/L的葡萄糖溶液，B為物質的量濃度1mol/L的乳酸溶液，圖丁是信號分子作用于靶細胞的示意圖，請據圖回答下列問題。（1）某些藥物大分子不容易被細胞吸收，但如果用圖甲所示人工膜包裹后再注射則更容易進入細胞，此實例可說明細胞膜具有______性。（2）圖乙中，葡萄糖和乳酸跨膜運輸的共同點是都需_____________。如果將圖乙所示細胞放在無氧環(huán)境中，圖中________________（填“葡萄糖”、“乳酸”或“葡萄糖和乳酸”）的跨膜運輸不會受到影響。（3）如果用圖甲所示人工膜作為圖丙中的半透膜，則液面不再變化時，左側液面________(填“高于”“低于”或“等于”)右側液面;如果在圖甲所示人工膜上貫穿上圖乙的蛋白質①，再用作圖丙的半透膜，則液面不再變化時，左側液面_________右側液面；如果此時用圖乙的蛋白質②替換蛋白質①，再進行實驗，則液面不再變化時，左側液面__________右側液面。（4）圖丁中①為信號分子，與靶細胞細胞膜上的________________結合，結構②的組成成分是_________。（5）圖甲示人工膜兩側的離子存在濃度差，離子不能通過該膜。在人工膜中加入少量纈氨霉素，K+即可從高濃度一側通過該膜到達低濃度一側，其他離子不能通過，則K+通過該膜的方式______，纈氨霉素的化學本質是______。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

垂直結構具有明顯的分層現象，植物的垂直結構提高了群落利用陽光等環(huán)境資源能力。植物的垂直結構又為動物創(chuàng)造了多種多樣的棲息空間和食物條件，所以動物也有分層現象?！驹斀狻緼、植物的垂直分層可充分利用光能，提高了群落利用陽光等環(huán)境資源的能力，A正確；B、某種農作物構成的是一個種群，不存在植物群落的分層現象，合理密植是為了充分利用光照，B錯誤；C、利用植物分層現象進行套種，提高農作物產量，C正確；D、垂直結構是在長期自然選擇基礎上形成的，D正確。故選B。2、A【解析】

圖示表示真核細胞中遺傳信息的傳遞過程，其中①表示DNA的復制過程；②表示轉錄過程；③表示翻譯過程，需要mRNA、rRNA和tRNA的參與?！驹斀狻緼、線粒體、葉綠體和原核細胞中都含有DNA，也含有核糖體，能進行圖中①DNA的復制、②轉錄和③翻譯過程，A正確；B、一種氨基酸可以由一種或幾種tRNA來轉運，B錯誤；C、③是翻譯過程，根據肽鏈的長度可知，翻譯的方向是從a到b，C錯誤；D、一條mRNA上同時結合多個核糖體進行翻譯，這可提高翻譯的速度，但每個核糖體都能合成完成一條肽鏈，因此多個核糖體能同時進行多條肽鏈的合成，D錯誤。故選A?！军c睛】本題結合真核細胞中遺傳信息的傳遞過程圖解，考查遺傳信息的轉錄和翻譯，要求考生識記中心法則的主要內容，能準確判斷圖中各過程的名稱；識記遺傳信息轉錄和翻譯的場所、過程、條件和產物等，能結合圖中信息準確答題。3、B【解析】

各種細胞器的結構、功能細胞器分布形態(tài)結構功

能線粒體動植物細胞雙層膜結構有氧呼吸的主要場所

細胞的“動力車間”葉綠體植物葉肉細胞

雙層膜結構植物細胞進行光合作用的場所；植物細胞的“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉換站”。內質網動植物細胞

單層膜形成的網狀結構細胞內蛋白質的合成和加工，以及脂質合成的“車間”高爾

基體動植物細胞

單層膜構成的囊狀結構對來自內質網的蛋白質進行加工、分類和包裝的“車間”及“發(fā)送站”（動物細胞高爾基體與分泌有關；植物則參與細胞壁形成）核糖體動植物細胞無膜結構，有的附著在內質網上，有的游離在細胞質中合成蛋白質的場所

“生產蛋白質的機器”溶酶體動植物細胞

單層膜形成的泡狀結構“消化車間”，內含多種水解酶，能分解衰老、損傷的細胞器，吞噬并且殺死侵入細胞的病毒和細菌。液泡成熟植物細胞單層膜形成的泡狀結構；內含細胞液（有機酸、糖類、無機鹽、色素和蛋白質等）調節(jié)植物細胞內的環(huán)境，充盈的液泡使植物細胞保持堅挺中心體動物或某些低等植物細胞無膜結構；由兩個互相垂直的中心粒及其周圍物質組成與細胞的有絲分裂有關【詳解】類囊體薄膜上的類胡蘿卜素主要吸收藍紫光用于光合作用，A錯誤；液泡主要存在于植物細胞，內有細胞液，可以調節(jié)細胞內的環(huán)境，B正確；線粒體是有氧呼吸的主要場所，線粒體內[H]與O2結合的過程能使ATP含量增加，C錯誤；核糖體上直接合成的是多肽，還沒有生物活性，分泌蛋白一般經過內質網、高爾基體的加工后才具有生物活性，D錯誤。4、B【解析】

根據題干信息和圖形分析，Ⅰ小桶中小球上的字母代表一對等位基因A、a，Ⅱ小桶中小球上的字母代表一對等位基因B、b，減數分裂過程中，同源染色體上的等位基因分離的同時，非同源染色體上的非等位基因自由組合，因此兩個小桶中隨機取一個小球模擬的是基因的分離定律，而將兩個小桶中取的小球組合到一起，模擬的是基因的自由組合定律?！驹斀狻緼、兩個小桶中的兩種小球代表了等位基因，操作過程①和②都從各個小桶中隨機取一個小球，模擬的是F1形成配子時，同源染色體上的等位基因分離的過程，A正確；B、操作③過程將兩個小桶隨機取的小球組合到一起，模擬的是F1產生配子時，非同源染色體上的非等位基因隨機結合的過程，B錯誤；C、兩只小桶內小球總數量要相等，每只小桶內兩種小球的數量也要相等，C正確；D、按照基因的自由組合定律，兩對等位基因的雙雜合子產生四種比例相等的配子，因此重復300次，操作③理論上會出現四種字母組合，且每種約占1/4，D正確。故選B。5、B【解析】四倍體西瓜植株在減數分裂過程中，由于部分細胞內染色體聯(lián)會紊亂，不能產生正常配子，因此也無法通過受精作用形成種子，導致西瓜少籽，A正確；由于完全無籽西瓜是用萘乙酸（生長素類似物）涂抹在四倍體植株花的雌蕊形成的，而用萘乙酸涂抹在四倍體植株花的雌蕊只會促進果實的發(fā)育而不能改變其染色體及染色體組數目，因此完全無籽西瓜果肉細胞中有4個染色體組，B錯誤；萘乙酸（生長素類似物）可以促進四倍體西瓜果實的發(fā)育，但將萘乙酸（生長素類似物）涂抹在四倍體植株花的雌蕊獲得完全無籽西瓜時，需要對四倍體植株花做去雄套袋處理，否則如果接受了其他四倍體西瓜的花粉，會產生有籽西瓜，C、D正確。【點睛】本題考查無子西瓜的形成過程。注意與所學的三倍體無籽西瓜培育方法不同。解答本題需要學生正確分析所得的四倍體西瓜少籽的原因，還需要注意在用萘乙酸（生長素類似物）獲得無子果實時需要去雄處理，且此方法不會改變物種的染色體數目。6、D【解析】

大量開墾森林和草原會導致生態(tài)環(huán)境被破壞，不能用這種方式來解決人口增長過快造成糧食短缺的問題。引入外來物種可能會導致當地生物的多樣性受到威脅，進而導致生物多樣性銳減。二孩”政策的最終結果是調節(jié)人口年齡結構，緩解人口老齡化?！驹斀狻看罅块_墾森林、草地，發(fā)展糧食生產，會破壞生態(tài)環(huán)境，A錯誤；控制外來物種入侵不能盲目引入其天敵，引種不當會造成新的生態(tài)災難，B錯誤；全球生態(tài)環(huán)境問題包括土地荒漠化、溫室效應、水資源短缺等，霧霾不屬于全球生態(tài)環(huán)境問題，C錯誤；一孩政策調整為二孩政策，提高了人口出生率，使幼年個體增多，所占比例增大，有利于調節(jié)年齡組成，延緩人口老齡化的進程，D正確。故選D。7、C【解析】

有絲分裂裝片制作過程：解離→漂洗→染色→制片；放射性同位素標記法常用于追蹤細胞內的物質代謝途徑；用35S標記的噬菌體去感染未標記的大腸桿菌，短時間保溫、可能導致噬菌體的DNA并沒有導入細菌，離心獲得的上清液中的放射性很高，說明標記的噬菌體的蛋白質存在于上清液中，因此不能證明DNA就是遺傳物質?！驹斀狻緼、有絲分裂裝片制作過程：解離→漂洗→染色→制片，解離液由鹽酸和酒精混合而成，其作用是使組織中的細胞相互分離開來，在觀察植物細胞有絲分裂實驗時，應先解離再進行染色，并且觀察到的都是死細胞，A錯誤；B、放射性同位素標記法可以用于追蹤細胞內的物質代謝途徑，B錯誤；C、將已用15N標記DNA的大腸桿菌培養(yǎng)在含14N的培養(yǎng)基中，經兩次分裂后，提取大腸桿菌DNA，經密度梯度離心，如果有一條中帶，一條輕帶，則說明DNA復制方式是半保留復制，C正確。D、用35S標記的噬菌體去感染未標記的大腸桿菌，短時間保溫、可能導致噬菌體的DNA并沒有導入細菌，離心獲得的上清液中的放射性很高，說明標記的噬菌體的蛋白質存在于上清液中，因此不能證明DNA就是遺傳物質，D錯誤。故選C。8、B【解析】

本題考查的是變異、育種與生物進化的相關知識。人類不能創(chuàng)造變異，也不能防止變異的產生。但是，人們可以利用這些變異材料用選擇的方法培育新的品種。具體地說，人們根據自己的需要，把某些比較合乎要求的變異個體挑選出來，讓它們保留后代，把其他變異個體淘汰掉，不讓它們傳留后代。經過連續(xù)數代的選擇，人類所需要的變異被保存下來，微小變異因此積累成為顯著變異，從而培育出新的品種?！驹斀狻緼、雜交育種過程中需要有選擇過程，淘汰不符合要求的品種，這樣就會使一些基因被淘汰，從而導致種群基因頻率的改變，A正確；B、如利用雜種優(yōu)勢，雜交育種一年即可達到育種目的，年限不一定較單倍體育種年限長，B錯誤；C、培育高產雜交水稻的育種原理是基因重組，C正確；D、單倍體育種的核心技術是花藥離體培養(yǎng)，D正確。故選B。二、非選擇題9、DNA連接酶基因表達載體（或者重組質粒）CaCl2溶液（或者Ca2+）感受態(tài)生長素和細胞分裂素逆轉錄酶Ti質粒的T-DNA重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導入了重組質粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織抗原-抗體雜交用CMV分別感染轉基因番茄與未轉基因的番茄，一段時間后觀察結果，分析兩組番茄的抗性目的基因已經整合到受體細胞的染色體上、獲得的轉基因親本為雜合子【解析】

1、分析題圖：①表示基因表達載體的構建過程；②將目的基因導入受體細胞（農桿菌轉化法）；③④表示植物組織培養(yǎng)過程，其中③是脫分化過程、④是再分化過程．圖中A是目的基因、B是基因表達載體（由啟動子、終止子、目的基因和標記基因等部分構成）、C是愈傷組織。2、基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA—分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質—抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻竣瘢?）①表示基因表達載體的構建過程，需用DNA連接酶將目的基因和運載體（質粒）連接形成重組質粒。B是基因表達載體，由啟動子、終止子、目的基因和標記基因等部分構成。（2）將目的基因導入微生物細胞時，常用CaCl2（Ca2+）處理微生物細胞（農桿菌），使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞，利于重組質粒進入微生物細胞（農桿菌）。（3）圖中③過程為脫分化，需要用到的激素是生長素和細胞分裂素。Ⅱ．（1）以RNA為模板合成DNA的過程稱為逆轉錄，該過程需要逆轉錄酶的催化。（2）農桿菌轉化法的原理是：農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。因此獲得cDNA后，需先通過一定方法將其插入到農桿菌Ti質粒的T-DNA片段中，然后將番茄子葉切段與該農桿菌共同培養(yǎng)，以實現對番茄細胞的轉化。（3）重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導入了重組質粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織，據此可知生出愈傷組織的外植體都已成功導入了cDNA。（4）檢測目的基因是否表達產生相應的蛋白質，需要進行抗原-抗體雜交實驗。（5）若要驗證轉基因番茄具有較好的抗CMV能力，可用CMV分別感染轉基因番茄與未轉基因的番茄，一段時間后觀察結果，分析兩組番茄的抗性。轉基因番茄自交，子代中抗性植株與敏感植株數量之比接近3：1，符合基因分離定律，由此可以得出的結論是目的基因已經整合到受體細胞的染色體上，獲得的轉基因親本為雜合子?！军c睛】本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關知識，意在考查考生的識記能力和識圖能力；理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系的能力。10、高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌6末端相連（或相接、相交等意思正確）倒置作為對照組，排除培養(yǎng)基被雜菌污染甘油72培養(yǎng)時間過長，兩個或多個菌落連成一個菌落【解析】

1、微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌操作技術，無菌操作過程中的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法滅菌。高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌。干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基，都不能進行干熱滅菌。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌。2、平板劃線操作的基本步驟是：（一）右手持接種環(huán)，經火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口通過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口通過火焰并塞上棉塞。（二）左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面。（三）燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。（四）將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?！驹斀狻浚?）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取高壓蒸汽滅菌法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用灼燒滅菌法。接種環(huán)在每次接種前都要灼燒滅菌，最后一次接種完也要滅菌，所以在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒6次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的末端開始劃線，使菌體的數目隨著劃線次數的增加而逐漸減少，最終獲得由單個菌體形成的單個菌落。最后一次劃的線不能與第一次劃的線相連。（2）將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了作為對照組，排除培養(yǎng)基被雜菌污染。長期保存菌種時，應將培養(yǎng)的菌液與甘油充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱保存。（3）根據表中數據可知，甲組和乙組中的菌落數都在72時達到最大，由此推知最好取72小時記錄的菌落數作為實驗結果，原因是①培養(yǎng)時間不足會導致遺落菌落的數目；②培養(yǎng)時間過長會導致兩個或多個菌落連成一個菌落，使計數不準確?！军c睛】本題考查無菌技術和微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法；識記菌種保藏技術，能正確分析表格，再結合所學的知識準確答題。11、CMV-CP（花葉病毒外殼蛋白）Ti質粒中僅T-DNA片段可以進入植物細胞并整合到植物細胞染色體DNA中使農桿菌大量繁殖，重組Ti質粒擴增殺死沒有導入重組DNA的普通番茄細胞固體基因兩端的部分核苷酸序列退火3【解析】

將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法（原理：農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上；根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上?！驹斀狻浚?）據題干信息可知“將CMV-CP基因導入番茄細胞后，培育的番茄植株具有抗CMV感染能力”，故可推知該過程中抗原是CMV-CP（花葉病毒外殼蛋白）。（2）由以上分析可知：因Ti質粒中僅T-DNA片段可以進入植物細胞并整合到植物細胞染色體DNA中，故Kanr及CMV-CP基因應整合在Ti質粒的T-DNA內部；為使農桿菌大量繁殖，重組Ti質粒擴增，需要使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)農桿菌，液體培養(yǎng)基可使菌體與營養(yǎng)物質充分接觸。（3）據題干信息可知：Kanr為卡那霉素抗性基因，故若番茄細胞中成功導入重組質粒，則能在Kan培養(yǎng)基上存活，若未成功導入，則將被殺死，據表格數據可知，在Kan濃度為35mg·L-1時，既可將未導入重組DNA的普通番茄細胞全部被殺死（愈傷組織為0，外植體變褐色死亡），又不至于因Kan濃度過高影響導入重組DNA細胞的生長發(fā)育，故該濃度為適宜濃度。（4）過程③、④為植物組織培養(yǎng)中的過程，