實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件

艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化管理及質(zhì)量控制艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室葉黎艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化管理及質(zhì)量控制艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室1管理的精髓：減少或預(yù)防失誤的發(fā)生概率失誤帶來(lái)的成本增加>用于管理的成本管理的精髓：2艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理依據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法》《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》……艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理依據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法》3艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理一、人員管理“工欲善其事，必先利其器”艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理一、人員管理4一、人員管理1、檢驗(yàn)人員必須接受過(guò)省級(jí)以上艾滋病檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)，并獲得培訓(xùn)證書。2、檢測(cè)人員應(yīng)分為檢測(cè)人、復(fù)核人、簽發(fā)人。復(fù)核人、簽發(fā)人都應(yīng)具備對(duì)檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析和解決問(wèn)題的能力。2、參加職能考核和能力驗(yàn)證。3、復(fù)訓(xùn)和提高……一、人員管理1、檢驗(yàn)人員必須接受過(guò)省級(jí)以上艾滋病檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)5二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境1、應(yīng)劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，并有明顯標(biāo)記，有充足的操作空間。符合2級(jí)生物安全要求有生物安全標(biāo)識(shí)。門要有可視窗，并達(dá)到適當(dāng)?shù)姆阑鸬燃?jí)。墻、天花板、地板光滑易清潔并耐腐蝕，地板防滑。實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)防水、耐腐蝕、適當(dāng)耐熱。每個(gè)房間應(yīng)有洗手池（感應(yīng)式或腳踏式，安裝在出口處）、洗眼器。窗戶應(yīng)有防蚊蠅、防裂齒類動(dòng)物設(shè)施，窗簾要能便于消毒。盡量減少使用玻璃器皿。要有消毒設(shè)備或設(shè)施?！?、實(shí)驗(yàn)環(huán)境1、應(yīng)劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，并有明顯標(biāo)記6二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境

二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境7二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境2、保持實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格的清潔度二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境2、保持實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格的清潔度8二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境

二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境9二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境

二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境10實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件11辦公室辦公室12實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件13二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境3、控制實(shí)驗(yàn)溫度實(shí)驗(yàn)室應(yīng)裝置恒溫設(shè)備，室溫保持在18-23℃。二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境3、控制實(shí)驗(yàn)溫度14三、儀器設(shè)備管理1、儀器設(shè)備的選用。2、安裝、使用。3、唯一性標(biāo)識(shí)。4、撰寫作業(yè)指導(dǎo)書。4、儀器設(shè)備的使用、保養(yǎng)、維護(hù)記錄。5、計(jì)量?jī)x器的校準(zhǔn)。三、儀器設(shè)備管理1、儀器設(shè)備的選用。15三、儀器設(shè)備管理必須經(jīng)國(guó)家法定部門定期（每年至少一次）校準(zhǔn)的儀器包括：酶標(biāo)儀、加樣器、溫度計(jì)、高壓滅菌器。其它儀器也必須定期校準(zhǔn)（每年一次），可請(qǐng)廠家校準(zhǔn)，如:生物安全柜、離心機(jī)等。三、儀器設(shè)備管理必須經(jīng)國(guó)家法定部門定期（每年至少一次）校準(zhǔn)的16三、儀器設(shè)備管理生物安全柜

年檢合格，實(shí)驗(yàn)完畢后不要把消毒劑放在生物安全柜內(nèi)。移液器

必須使用校準(zhǔn)過(guò)的移液器，移液器每年至少校準(zhǔn)一次。酶標(biāo)儀

每年必須檢定一次，平常注意防塵，檢查、清洗濾光片。洗板機(jī)

每次用后一定要沖洗，在洗滌時(shí)觀察下高低是否合適，灌注液體是否適當(dāng)，是否有管道堵塞，是否有漏液。冰箱孵箱溫度記錄三、儀器設(shè)備管理生物安全柜17移液器的校準(zhǔn)在室溫22℃無(wú)風(fēng)的工作室中，在萬(wàn)分之一級(jí)別天平上放置一個(gè)小三角燒瓶，用待校準(zhǔn)的移液器吸取存放過(guò)夜的蒸餾水加入燒瓶底部，稱重并計(jì)算整餾水重量，連續(xù)稱重10次。加蒸餾水的量根據(jù)待校準(zhǔn)移液器的規(guī)格而不同，10次校準(zhǔn)稱量均在要求的重量范圍內(nèi)為合格。移液器的校準(zhǔn)在室溫22℃無(wú)風(fēng)的工作室中，在萬(wàn)分之一級(jí)別天平上18稱重法校準(zhǔn)移液器方案移液器規(guī)格蒸餾水量要求重量范圍0.5～5ul2ul1.75～2.25mg1～10ul10ul9.8～10.2mg40～200ul70ul69.4～70.6mg200～1000ul300ul298.0～302.0mg1～5ml2000ul1990.0～2010.0mg2～10ml3500ul3485.0～3515.0mg稱重法校準(zhǔn)移液器方案移液器規(guī)格蒸餾水量要求重量范圍0.5～519四、文件管理

四、文件管理20四、文件管理文件包括：程序文件、作業(yè)指導(dǎo)、標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）、記錄和報(bào)告、各種制度等等……。四、文件管理文件包括：程序文件、作業(yè)指導(dǎo)、標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SO21艾滋病實(shí)驗(yàn)室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件至少應(yīng)包括：1）、樣品接收、登記、處理、保存和運(yùn)輸；2）、檢測(cè)方法和步驟；3）、試劑使用和保存；4）、儀器的使用維護(hù)和校準(zhǔn)5）、實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存；6）、結(jié)果解釋與報(bào)告等；艾滋病實(shí)驗(yàn)室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)22記錄和報(bào)告儀器使用記錄的放置和使用。送樣時(shí)，名字、地址書寫問(wèn)題。改報(bào)告現(xiàn)在很困難記錄和報(bào)告儀器使用記錄的放置和使用。23SOP通常包括以下類型檢測(cè)細(xì)則：ELISA、快速檢測(cè)等儀器操作維護(hù)規(guī)程：酶標(biāo)儀、洗扳機(jī)、移液器、天平、溫度計(jì)等檢測(cè)流程實(shí)驗(yàn)原始記錄實(shí)驗(yàn)報(bào)告根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室需求添加其他種類，如試劑評(píng)估規(guī)程、實(shí)驗(yàn)室樣本流轉(zhuǎn)單等SOP通常包括以下類型檢測(cè)細(xì)則：ELISA、快速檢測(cè)等24SOP編寫通常包括以下內(nèi)容1）、標(biāo)題和編號(hào)；2）、編寫和修訂日期；3）、編寫和修訂人員姓名；4）、方法、目的和應(yīng)用范圍；5）、檢測(cè)設(shè)備；6）、試劑及有效期；7）、安全防護(hù)相關(guān)步驟；8）、附錄，包括相關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒說(shuō)明書等。SOP編寫通常包括以下內(nèi)容1）、標(biāo)題和編號(hào)；25SOP的編寫及修訂：由各崗位工作人員起草，實(shí)驗(yàn)室主任審定，每年修訂一次。注：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),不得擅自修改！SOP的編寫及修訂：26建立實(shí)驗(yàn)原始記錄系統(tǒng)樣本接收登記表（數(shù)據(jù)庫(kù)）實(shí)驗(yàn)原始記錄血清存放記錄配液記錄儀器設(shè)備使用記錄儀器設(shè)備維修記錄冰箱、孵箱、環(huán)境溫度記錄等建立實(shí)驗(yàn)原始記錄系統(tǒng)樣本接收登記表（數(shù)據(jù)庫(kù)）27填寫檢測(cè)結(jié)果表字跡清楚，逐項(xiàng)填寫，不應(yīng)有空缺盡量核實(shí)身份證號(hào)碼實(shí)事求是

陽(yáng)性復(fù)檢單應(yīng)蓋上公章填寫檢測(cè)結(jié)果表字跡清楚，逐項(xiàng)填寫，不應(yīng)有空缺28文件存檔專人管理嚴(yán)格遵守保密制度

文件存檔專人管理29五、試劑、樣本管理試劑要有進(jìn)出登記，并妥善保存。操作人員本底樣本要每年保存，陽(yáng)性待送檢樣本的保存……（一定要有登記）。陰性樣本目前沒(méi)有規(guī)定保存多久。五、試劑、樣本管理試劑要有進(jìn)出登記，并妥善保存。30六、污染物的處理應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002版）處置實(shí)驗(yàn)室廢棄物。艾滋病實(shí)驗(yàn)室所產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其他物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理廢棄。六、污染物的處理應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19431艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法1、物理消毒：高壓蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;2、化學(xué)消毒：1）、含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000～5000mg/L；2）、75%乙醇3）、2%戊二醛3、實(shí)驗(yàn)室物品常用的消毒方法：1）、廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉；2）、生物安全柜臺(tái)面和儀器表面：75%乙醇；3）、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉4）、污染的臺(tái)面和器具：2000mg/L次氯酸鈉，也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法1、物理消毒：高壓蒸汽消毒，132樣本管理樣本管理33實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件34六、質(zhì)量管理

質(zhì)量管理的必要性和重要性？六、質(zhì)量管理

質(zhì)量管理的必要性和重要性？35六、質(zhì)量管理要點(diǎn)1、思路要清晰一個(gè)樣本從來(lái)到實(shí)驗(yàn)室到報(bào)告的發(fā)放都要有據(jù)可尋——“溯源”。2、保證生物安全后就該考慮結(jié)果的準(zhǔn)確性。3、多學(xué)習(xí)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》4、參加職能考核和能力驗(yàn)證（PT）六、質(zhì)量管理要點(diǎn)1、思路要清晰36質(zhì)量管理體系（質(zhì)控）包括質(zhì)量保證（QA）質(zhì)量控制（QC）室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）質(zhì)量管理體系（質(zhì)控）包括質(zhì)量保證（QA）37實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證實(shí)驗(yàn)室的全部效能和聲譽(yù)依賴于其工作質(zhì)量：工作人員的技術(shù)能力；試劑盒和儀器的質(zhì)量；標(biāo)本條件；操作中的對(duì)照；數(shù)據(jù)的解釋；結(jié)果的描述。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證實(shí)驗(yàn)室的全部效能和聲譽(yù)依賴于其工作質(zhì)量：38質(zhì)量控制定義質(zhì)量控制是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行而在每一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取的各種措施。質(zhì)量控制定義39質(zhì)量控制的目的可以了解本次實(shí)驗(yàn)是否有效。所有試驗(yàn)條件是否正常最終結(jié)果是否可靠。質(zhì)量控制的目的40實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的基本要求樣品的質(zhì)量規(guī)范化操作試劑做好實(shí)驗(yàn)的內(nèi)、外部對(duì)照實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的基本要求樣品的質(zhì)量41質(zhì)量控制內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清（試劑盒的對(duì)照）外部質(zhì)控血清的來(lái)源和選擇通過(guò)實(shí)驗(yàn)室制備獲得（比較經(jīng)濟(jì)的方法）通過(guò)向有關(guān)機(jī)構(gòu)購(gòu)買獲得外部對(duì)照質(zhì)控血清的保存質(zhì)量控制內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清（試劑盒的對(duì)照）42外部對(duì)照質(zhì)控血清的作用以及質(zhì)量要求1、每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部對(duì)照質(zhì)控血清，其作用是監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性，同時(shí)可以了解各批試劑盒的批間或孔間差異，繪制質(zhì)孔圖2、質(zhì)控物的管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測(cè)系統(tǒng)預(yù)期變異（cv<20％），并且質(zhì)控物的成份應(yīng)在穩(wěn)定狀態(tài)中。質(zhì)控物應(yīng)無(wú)菌，并不含有影響ELISA反應(yīng)的防腐劑。外部對(duì)照質(zhì)控血清的作用以及質(zhì)量要求1、每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部43質(zhì)控品的制備——選擇稀釋濃度用本室常用的一種或兩種試劑對(duì)制備好的梯度樣本進(jìn)行檢測(cè)，得出S/CO值選擇S/CO值結(jié)果為3-5的稀釋濃度做為該種試劑外部質(zhì)控品的配備濃度。質(zhì)控品的制備——選擇稀釋濃度用本室常用的一種或兩種試劑對(duì)制備44質(zhì)控品的制備——制備和分裝按照選擇的濃度大量配制后，最好再次進(jìn)行檢測(cè)，調(diào)整質(zhì)控品濃度，直至合適。按照每次檢測(cè)用量進(jìn)行分裝:50-100ul/管保存溫度<=20攝氏度，切忌反復(fù)凍融質(zhì)控品的制備——制備和分裝按照選擇的濃度大量配制后，最好再次45質(zhì)控圖的制備質(zhì)控圖的定義——把檢驗(yàn)性能的數(shù)據(jù)與計(jì)算出的“控制線”進(jìn)行比較的圖。建立質(zhì)控圖，以便監(jiān)控試驗(yàn)操作的一致性和結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)可以了解試劑盒的批間差異。質(zhì)控圖的制備質(zhì)控圖的定義——46質(zhì)控圖的制作質(zhì)控框架圖的制作每次實(shí)驗(yàn)帶1－5孔外部對(duì)照樣本，直至做滿20孔；或者一次性做20孔外部對(duì)照(不推薦)。取外部對(duì)照的S/CO值制作框架圖。用S/CO值計(jì)算出：標(biāo)準(zhǔn)差（S）：是描述樣本與均數(shù)之間離散程度的一個(gè)指標(biāo)，是與對(duì)照值的均值有關(guān)的預(yù)期范圍。一組S/CO值標(biāo)準(zhǔn)差以S代表均值(x)：一組數(shù)據(jù)的算術(shù)平均值質(zhì)控圖的制作質(zhì)控框架圖的制作473.算得標(biāo)準(zhǔn)差后，均值加減一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差便會(huì)出現(xiàn)一個(gè)以均值為中心的范圍，約有68％的S/CO值應(yīng)該落在這個(gè)范圍內(nèi)；同樣，約有95％和99％的S/CO值應(yīng)該落在均值加減2個(gè)和3給標(biāo)準(zhǔn)差范圍內(nèi)。這樣表示實(shí)驗(yàn)在控制范圍內(nèi)。4、描點(diǎn)框架圖制備好以后，每次實(shí)驗(yàn)均帶外部對(duì)照一孔，并用外部對(duì)照孔S/CO值在框架圖上描點(diǎn)。3.算得標(biāo)準(zhǔn)差后，均值加減一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差便會(huì)出現(xiàn)一個(gè)以均值為中心48外部對(duì)照及質(zhì)控圖的作用外部對(duì)照做為弱陽(yáng)性樣本，可直接檢驗(yàn)本次實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性；在質(zhì)控圖中可以反映3種失控狀態(tài)：1.質(zhì)控對(duì)照值超出正負(fù)兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差2.位移：3-5個(gè)點(diǎn)（S/CO值）落在均值的一邊3.趨勢(shì)：5-7個(gè)（S/CO值）一個(gè)方向分布。失控及處理記錄外部對(duì)照及質(zhì)控圖的作用外部對(duì)照做為弱陽(yáng)性樣本，可直接檢驗(yàn)本次49實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件50“即刻法”質(zhì)控概念：在對(duì)同一批外部質(zhì)控血清聯(lián)系測(cè)定3次后，即可對(duì)第3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控?！凹纯谭ā辟|(zhì)控概念：在對(duì)同一批外部質(zhì)控血清聯(lián)系測(cè)定3次后，即511、將質(zhì)控血清的測(cè)定值從小到大排列：x1，x2，x3……xn(x1為最小值，xn為最大值)2、計(jì)算X平均值和s3、計(jì)算SI上限值和SI下限值SI上限=(X最大值-X平均值)/sSI下限=(X平均值-X最小值)/s4、將SI上限、SI下限與SI值表（表4）中的數(shù)字比較1、將質(zhì)控血清的測(cè)定值從小到大排列：x1，x2，x3……xn52n n3s n2s n n3s n2s

3 1.16 1.15 12 2.552.29 4 1.49 1.46 13 2.612.33 5 1.75 1.67 14 2.662.37 6 1.94 1.82 15 2.712.41 7 2.10 1.94 162.752.44 8 2.22 2.03 17 2.792.47 9 2.32 2.11 182.822.50 10 2.41 2.18 19 2.852.53 11 2.48 2.23 20 2.882.56 n n3s n2s n n3s n2s 53（1）當(dāng)SI上限和SI下限<n2s時(shí)表示處于控制范圍內(nèi)，可以繼續(xù)測(cè)定。繼續(xù)重復(fù)以上各項(xiàng)計(jì)算；（2）當(dāng)SI上限和SI下限有一值處于n2s～n3s值之間時(shí)說(shuō)明該值在2s-3s范圍，處于“告警”狀態(tài)；（3）當(dāng)SI上限和SI下限有一值>n3s值時(shí)說(shuō)明該值已在3s范圍之外，屬“失控”。數(shù)值處于“告警”和“失控”狀態(tài)應(yīng)舍去，需重新測(cè)定該質(zhì)控血清和病人樣品。舍去的只是失控的這次數(shù)值，其他測(cè)定值仍可繼續(xù)使用。（1）當(dāng)SI上限和SI下限<n2s時(shí)表示處于控制范圍內(nèi)，可以54管理制度SOP外部對(duì)照酶標(biāo)儀洗板機(jī)移液器生物安全柜差錯(cuò)登記SOP的修改失控記錄及分析健康監(jiān)護(hù)醫(yī)療廢棄物存在問(wèn)題單位數(shù)216210611839501318607272007年質(zhì)控考核中存在問(wèn)題管理制度SOP外部對(duì)照酶標(biāo)儀洗板機(jī)移液器生物安全柜差錯(cuò)登記S55

建議長(zhǎng)期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量較好地試劑盒，更換不同廠家地試劑盒后，必須重新繪制質(zhì)控圖。改用新批號(hào)試劑盒也因重新制作質(zhì)控圖。使用新批號(hào)或不同廠家地試劑盒必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。建議長(zhǎng)期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量較好地試劑盒，更56室間質(zhì)量評(píng)價(jià)定義質(zhì)量評(píng)價(jià)是一種用于判定實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果質(zhì)量的手段。通常使用有關(guān)權(quán)威機(jī)構(gòu)提供的一套質(zhì)控品（質(zhì)量控制參比血清）從外部來(lái)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的工作，即對(duì)數(shù)個(gè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和評(píng)價(jià)。這種評(píng)價(jià)方式常稱為室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）。室間質(zhì)量評(píng)價(jià)定義57室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的作用檢查實(shí)驗(yàn)室整體檢驗(yàn)?zāi)芰z查實(shí)驗(yàn)室工作人員個(gè)人檢驗(yàn)?zāi)芰Υ_定檢驗(yàn)方法的效果確定樣本某一特定的準(zhǔn)確度的特性

一個(gè)好的QC/QA程序在某些情況下可以替代質(zhì)量評(píng)估，然而質(zhì)量評(píng)估不可能替代好的QC/QA室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的作用檢查實(shí)驗(yàn)室整體檢驗(yàn)?zāi)芰?8當(dāng)我們實(shí)驗(yàn)前所有準(zhǔn)備工作做好了，坐下來(lái)開始實(shí)驗(yàn)前，我們應(yīng)該做什么？問(wèn)題！當(dāng)我們實(shí)驗(yàn)前所有準(zhǔn)備工作做好了，坐下來(lái)開始實(shí)驗(yàn)前，我們應(yīng)該做59七、安全管理安全管理與職業(yè)暴露是緊密相關(guān)的！七、安全管理安全管理與職業(yè)暴露是緊密相關(guān)的！60七、安全管理1、防火、防盜2、防生物安全事故七、安全管理1、防火、防盜61七、安全管理建立應(yīng)急反應(yīng)機(jī)制和意外事故預(yù)案。建立工作人員健康檔案。人員培訓(xùn)。足夠的一次性手套、口罩、隔離服和防護(hù)眼鏡。有害物的消毒、凈化和滅菌并做好記錄。事故調(diào)查處理記錄。職業(yè)暴露處理。七、安全管理建立應(yīng)急反應(yīng)機(jī)制和意外事故預(yù)案。62七、安全管理七、安全管理63七、安全管理七、安全管理64實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件65預(yù)祝大家都取得上崗證書謝謝預(yù)祝大家都取得上崗證書謝謝66艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化管理及質(zhì)量控制艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室葉黎艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化管理及質(zhì)量控制艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室67管理的精髓：減少或預(yù)防失誤的發(fā)生概率失誤帶來(lái)的成本增加>用于管理的成本管理的精髓：68艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理依據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法》《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》……艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理依據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法》69艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理一、人員管理“工欲善其事，必先利其器”艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理一、人員管理70一、人員管理1、檢驗(yàn)人員必須接受過(guò)省級(jí)以上艾滋病檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)，并獲得培訓(xùn)證書。2、檢測(cè)人員應(yīng)分為檢測(cè)人、復(fù)核人、簽發(fā)人。復(fù)核人、簽發(fā)人都應(yīng)具備對(duì)檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析和解決問(wèn)題的能力。2、參加職能考核和能力驗(yàn)證。3、復(fù)訓(xùn)和提高……一、人員管理1、檢驗(yàn)人員必須接受過(guò)省級(jí)以上艾滋病檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)71二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境1、應(yīng)劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，并有明顯標(biāo)記，有充足的操作空間。符合2級(jí)生物安全要求有生物安全標(biāo)識(shí)。門要有可視窗，并達(dá)到適當(dāng)?shù)姆阑鸬燃?jí)。墻、天花板、地板光滑易清潔并耐腐蝕，地板防滑。實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)防水、耐腐蝕、適當(dāng)耐熱。每個(gè)房間應(yīng)有洗手池（感應(yīng)式或腳踏式，安裝在出口處）、洗眼器。窗戶應(yīng)有防蚊蠅、防裂齒類動(dòng)物設(shè)施，窗簾要能便于消毒。盡量減少使用玻璃器皿。要有消毒設(shè)備或設(shè)施?！?、實(shí)驗(yàn)環(huán)境1、應(yīng)劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，并有明顯標(biāo)記72二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境

二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境73二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境2、保持實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格的清潔度二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境2、保持實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格的清潔度74二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境

二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境75二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境

二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境76實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件77辦公室辦公室78實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件79二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境3、控制實(shí)驗(yàn)溫度實(shí)驗(yàn)室應(yīng)裝置恒溫設(shè)備，室溫保持在18-23℃。二、實(shí)驗(yàn)環(huán)境3、控制實(shí)驗(yàn)溫度80三、儀器設(shè)備管理1、儀器設(shè)備的選用。2、安裝、使用。3、唯一性標(biāo)識(shí)。4、撰寫作業(yè)指導(dǎo)書。4、儀器設(shè)備的使用、保養(yǎng)、維護(hù)記錄。5、計(jì)量?jī)x器的校準(zhǔn)。三、儀器設(shè)備管理1、儀器設(shè)備的選用。81三、儀器設(shè)備管理必須經(jīng)國(guó)家法定部門定期（每年至少一次）校準(zhǔn)的儀器包括：酶標(biāo)儀、加樣器、溫度計(jì)、高壓滅菌器。其它儀器也必須定期校準(zhǔn)（每年一次），可請(qǐng)廠家校準(zhǔn)，如:生物安全柜、離心機(jī)等。三、儀器設(shè)備管理必須經(jīng)國(guó)家法定部門定期（每年至少一次）校準(zhǔn)的82三、儀器設(shè)備管理生物安全柜

年檢合格，實(shí)驗(yàn)完畢后不要把消毒劑放在生物安全柜內(nèi)。移液器

必須使用校準(zhǔn)過(guò)的移液器，移液器每年至少校準(zhǔn)一次。酶標(biāo)儀

每年必須檢定一次，平常注意防塵，檢查、清洗濾光片。洗板機(jī)

每次用后一定要沖洗，在洗滌時(shí)觀察下高低是否合適，灌注液體是否適當(dāng)，是否有管道堵塞，是否有漏液。冰箱孵箱溫度記錄三、儀器設(shè)備管理生物安全柜83移液器的校準(zhǔn)在室溫22℃無(wú)風(fēng)的工作室中，在萬(wàn)分之一級(jí)別天平上放置一個(gè)小三角燒瓶，用待校準(zhǔn)的移液器吸取存放過(guò)夜的蒸餾水加入燒瓶底部，稱重并計(jì)算整餾水重量，連續(xù)稱重10次。加蒸餾水的量根據(jù)待校準(zhǔn)移液器的規(guī)格而不同，10次校準(zhǔn)稱量均在要求的重量范圍內(nèi)為合格。移液器的校準(zhǔn)在室溫22℃無(wú)風(fēng)的工作室中，在萬(wàn)分之一級(jí)別天平上84稱重法校準(zhǔn)移液器方案移液器規(guī)格蒸餾水量要求重量范圍0.5～5ul2ul1.75～2.25mg1～10ul10ul9.8～10.2mg40～200ul70ul69.4～70.6mg200～1000ul300ul298.0～302.0mg1～5ml2000ul1990.0～2010.0mg2～10ml3500ul3485.0～3515.0mg稱重法校準(zhǔn)移液器方案移液器規(guī)格蒸餾水量要求重量范圍0.5～585四、文件管理

四、文件管理86四、文件管理文件包括：程序文件、作業(yè)指導(dǎo)、標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）、記錄和報(bào)告、各種制度等等……。四、文件管理文件包括：程序文件、作業(yè)指導(dǎo)、標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SO87艾滋病實(shí)驗(yàn)室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件至少應(yīng)包括：1）、樣品接收、登記、處理、保存和運(yùn)輸；2）、檢測(cè)方法和步驟；3）、試劑使用和保存；4）、儀器的使用維護(hù)和校準(zhǔn)5）、實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存；6）、結(jié)果解釋與報(bào)告等；艾滋病實(shí)驗(yàn)室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)88記錄和報(bào)告儀器使用記錄的放置和使用。送樣時(shí)，名字、地址書寫問(wèn)題。改報(bào)告現(xiàn)在很困難記錄和報(bào)告儀器使用記錄的放置和使用。89SOP通常包括以下類型檢測(cè)細(xì)則：ELISA、快速檢測(cè)等儀器操作維護(hù)規(guī)程：酶標(biāo)儀、洗扳機(jī)、移液器、天平、溫度計(jì)等檢測(cè)流程實(shí)驗(yàn)原始記錄實(shí)驗(yàn)報(bào)告根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室需求添加其他種類，如試劑評(píng)估規(guī)程、實(shí)驗(yàn)室樣本流轉(zhuǎn)單等SOP通常包括以下類型檢測(cè)細(xì)則：ELISA、快速檢測(cè)等90SOP編寫通常包括以下內(nèi)容1）、標(biāo)題和編號(hào)；2）、編寫和修訂日期；3）、編寫和修訂人員姓名；4）、方法、目的和應(yīng)用范圍；5）、檢測(cè)設(shè)備；6）、試劑及有效期；7）、安全防護(hù)相關(guān)步驟；8）、附錄，包括相關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒說(shuō)明書等。SOP編寫通常包括以下內(nèi)容1）、標(biāo)題和編號(hào)；91SOP的編寫及修訂：由各崗位工作人員起草，實(shí)驗(yàn)室主任審定，每年修訂一次。注：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),不得擅自修改！SOP的編寫及修訂：92建立實(shí)驗(yàn)原始記錄系統(tǒng)樣本接收登記表（數(shù)據(jù)庫(kù)）實(shí)驗(yàn)原始記錄血清存放記錄配液記錄儀器設(shè)備使用記錄儀器設(shè)備維修記錄冰箱、孵箱、環(huán)境溫度記錄等建立實(shí)驗(yàn)原始記錄系統(tǒng)樣本接收登記表（數(shù)據(jù)庫(kù)）93填寫檢測(cè)結(jié)果表字跡清楚，逐項(xiàng)填寫，不應(yīng)有空缺盡量核實(shí)身份證號(hào)碼實(shí)事求是

陽(yáng)性復(fù)檢單應(yīng)蓋上公章填寫檢測(cè)結(jié)果表字跡清楚，逐項(xiàng)填寫，不應(yīng)有空缺94文件存檔專人管理嚴(yán)格遵守保密制度

文件存檔專人管理95五、試劑、樣本管理試劑要有進(jìn)出登記，并妥善保存。操作人員本底樣本要每年保存，陽(yáng)性待送檢樣本的保存……（一定要有登記）。陰性樣本目前沒(méi)有規(guī)定保存多久。五、試劑、樣本管理試劑要有進(jìn)出登記，并妥善保存。96六、污染物的處理應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002版）處置實(shí)驗(yàn)室廢棄物。艾滋病實(shí)驗(yàn)室所產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其他物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理廢棄。六、污染物的處理應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19497艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法1、物理消毒：高壓蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;2、化學(xué)消毒：1）、含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000～5000mg/L；2）、75%乙醇3）、2%戊二醛3、實(shí)驗(yàn)室物品常用的消毒方法：1）、廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉；2）、生物安全柜臺(tái)面和儀器表面：75%乙醇；3）、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉4）、污染的臺(tái)面和器具：2000mg/L次氯酸鈉，也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法1、物理消毒：高壓蒸汽消毒，198樣本管理樣本管理99實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件100六、質(zhì)量管理

質(zhì)量管理的必要性和重要性？六、質(zhì)量管理

質(zhì)量管理的必要性和重要性？101六、質(zhì)量管理要點(diǎn)1、思路要清晰一個(gè)樣本從來(lái)到實(shí)驗(yàn)室到報(bào)告的發(fā)放都要有據(jù)可尋——“溯源”。2、保證生物安全后就該考慮結(jié)果的準(zhǔn)確性。3、多學(xué)習(xí)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》4、參加職能考核和能力驗(yàn)證（PT）六、質(zhì)量管理要點(diǎn)1、思路要清晰102質(zhì)量管理體系（質(zhì)控）包括質(zhì)量保證（QA）質(zhì)量控制（QC）室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）質(zhì)量管理體系（質(zhì)控）包括質(zhì)量保證（QA）103實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證實(shí)驗(yàn)室的全部效能和聲譽(yù)依賴于其工作質(zhì)量：工作人員的技術(shù)能力；試劑盒和儀器的質(zhì)量；標(biāo)本條件；操作中的對(duì)照；數(shù)據(jù)的解釋；結(jié)果的描述。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證實(shí)驗(yàn)室的全部效能和聲譽(yù)依賴于其工作質(zhì)量：104質(zhì)量控制定義質(zhì)量控制是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行而在每一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取的各種措施。質(zhì)量控制定義105質(zhì)量控制的目的可以了解本次實(shí)驗(yàn)是否有效。所有試驗(yàn)條件是否正常最終結(jié)果是否可靠。質(zhì)量控制的目的106實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的基本要求樣品的質(zhì)量規(guī)范化操作試劑做好實(shí)驗(yàn)的內(nèi)、外部對(duì)照實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的基本要求樣品的質(zhì)量107質(zhì)量控制內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清（試劑盒的對(duì)照）外部質(zhì)控血清的來(lái)源和選擇通過(guò)實(shí)驗(yàn)室制備獲得（比較經(jīng)濟(jì)的方法）通過(guò)向有關(guān)機(jī)構(gòu)購(gòu)買獲得外部對(duì)照質(zhì)控血清的保存質(zhì)量控制內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清（試劑盒的對(duì)照）108外部對(duì)照質(zhì)控血清的作用以及質(zhì)量要求1、每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部對(duì)照質(zhì)控血清，其作用是監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性，同時(shí)可以了解各批試劑盒的批間或孔間差異，繪制質(zhì)孔圖2、質(zhì)控物的管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測(cè)系統(tǒng)預(yù)期變異（cv<20％），并且質(zhì)控物的成份應(yīng)在穩(wěn)定狀態(tài)中。質(zhì)控物應(yīng)無(wú)菌，并不含有影響ELISA反應(yīng)的防腐劑。外部對(duì)照質(zhì)控血清的作用以及質(zhì)量要求1、每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部109質(zhì)控品的制備——選擇稀釋濃度用本室常用的一種或兩種試劑對(duì)制備好的梯度樣本進(jìn)行檢測(cè)，得出S/CO值選擇S/CO值結(jié)果為3-5的稀釋濃度做為該種試劑外部質(zhì)控品的配備濃度。質(zhì)控品的制備——選擇稀釋濃度用本室常用的一種或兩種試劑對(duì)制備110質(zhì)控品的制備——制備和分裝按照選擇的濃度大量配制后，最好再次進(jìn)行檢測(cè)，調(diào)整質(zhì)控品濃度，直至合適。按照每次檢測(cè)用量進(jìn)行分裝:50-100ul/管保存溫度<=20攝氏度，切忌反復(fù)凍融質(zhì)控品的制備——制備和分裝按照選擇的濃度大量配制后，最好再次111質(zhì)控圖的制備質(zhì)控圖的定義——把檢驗(yàn)性能的數(shù)據(jù)與計(jì)算出的“控制線”進(jìn)行比較的圖。建立質(zhì)控圖，以便監(jiān)控試驗(yàn)操作的一致性和結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)可以了解試劑盒的批間差異。質(zhì)控圖的制備質(zhì)控圖的定義——112質(zhì)控圖的制作質(zhì)控框架圖的制作每次實(shí)驗(yàn)帶1－5孔外部對(duì)照樣本，直至做滿20孔；或者一次性做20孔外部對(duì)照(不推薦)。取外部對(duì)照的S/CO值制作框架圖。用S/CO值計(jì)算出：標(biāo)準(zhǔn)差（S）：是描述樣本與均數(shù)之間離散程度的一個(gè)指標(biāo)，是與對(duì)照值的均值有關(guān)的預(yù)期范圍。一組S/CO值標(biāo)準(zhǔn)差以S代表均值(x)：一組數(shù)據(jù)的算術(shù)平均值質(zhì)控圖的制作質(zhì)控框架圖的制作1133.算得標(biāo)準(zhǔn)差后，均值加減一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差便會(huì)出現(xiàn)一個(gè)以均值為中心的范圍，約有68％的S/CO值應(yīng)該落在這個(gè)范圍內(nèi)；同樣，約有95％和99％的S/CO值應(yīng)該落在均值加減2個(gè)和3給標(biāo)準(zhǔn)差范圍內(nèi)。這樣表示實(shí)驗(yàn)在控制范圍內(nèi)。4、描點(diǎn)框架圖制備好以后，每次實(shí)驗(yàn)均帶外部對(duì)照一孔，并用外部對(duì)照孔S/CO值在框架圖上描點(diǎn)。3.算得標(biāo)準(zhǔn)差后，均值加減一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差便會(huì)出現(xiàn)一個(gè)以均值為中心114外部對(duì)照及質(zhì)控圖的作用外部對(duì)照做為弱陽(yáng)性樣本，可直接檢驗(yàn)本次實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性；在質(zhì)控圖中可以反映3種失控狀態(tài)：1.質(zhì)控對(duì)照值超出正負(fù)兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差2.位移：3-5個(gè)點(diǎn)（S/CO值）落在均值的一邊3.趨勢(shì)：5-7個(gè)（S/CO值）一個(gè)方向分布。失控及處理記錄外部對(duì)照及質(zhì)控圖的作用外部對(duì)照做為弱陽(yáng)性樣本，可直接檢驗(yàn)本次115實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制及規(guī)范化管理課件116“即刻法”質(zhì)控概念：在對(duì)同一批外部質(zhì)控血清聯(lián)系測(cè)定3次后，即可對(duì)第3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控?！凹纯谭ā辟|(zhì)控概念：在對(duì)同一批外部質(zhì)控血清聯(lián)系測(cè)定3次后，即1171、將質(zhì)控血清的測(cè)定值從小到大排列：x1，x2，x3……xn(x1為最小值，xn為最大值)2、計(jì)算X平均值和s3、計(jì)算SI上限值和SI下限值SI上限=(X最大值-X平均值)/sSI下限=(X平均值-X最小值)/s4、將SI上限、SI下限與SI值表（表4）中的數(shù)字比較1、將質(zhì)控血清的測(cè)定值從小到大排列：x1，x2，x3……xn118n n3s n2s n n3s n2s

3 1.16 1.15 12 2.552.29 4 1.49 1.46 13 2.612.33 5 1.75 1.67 14 2.662.37 6 1.94 1.82 15 2.712.41 7 2.10 1.94 16