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..現(xiàn)代生物科技專題基因工程一、DNA重組技術(shù)的基本工具(填空)1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”。(1)本源:主要從________中分別純化出來的。(2)作用特點:能夠鑒別雙鏈DNA分子__________________,并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的______斷開。(3)作用結(jié)果:產(chǎn)生________或________。答案:1.(1)原核細(xì)胞(2)特定核苷酸序列磷酸二酯鍵(3)黏性尾端平尾端2.DNA連接酶——“分子縫合針”。(1)作用:將________拼接成新的DNA分子。(2)種類:E·coliDNA連接酶:只能連接_____T4DNA連接酶:既能連接又能連接答案:2.(1)DNA片段(2)黏性尾端黏性尾端平尾端3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運輸車”。(1)作用:將________送入受體細(xì)胞中。(2)常用種類:______、λ噬菌體的衍生物、______。(3)特點:含有__________、______________切點,能在受體細(xì)胞中________________。DOC版...答案:3.(1)目的基因(2)質(zhì)粒動植物病毒(3)標(biāo)記基因多個限制酶復(fù)制并牢固保存二、基因工程的基本操作程序(填空)目的基因主要指編碼蛋白的第一步①從基因文庫中獲取目的基因目的基因方法②利用擴(kuò)增目的基因的獲?、塾弥苯尤斯ず息賳幼游挥诨蚴锥?,是鑒別和結(jié)合部位第二步②停止子位于基因,使轉(zhuǎn)錄在所需地方停止基因表達(dá)③標(biāo)記基因鑒別受體細(xì)胞中可否含有,載體成立從而將含的細(xì)胞精選出來④目的基因是插入的外源基因①導(dǎo)入植物細(xì)胞常用方法、基因第三步槍法和將目的基因②導(dǎo)入動物細(xì)胞常用方法導(dǎo)入受體細(xì)胞③導(dǎo)入微生物細(xì)胞常用方法①檢測目的基因可否插入到染色體DNA上常用第四步技術(shù)目的基因②檢測目的基因可否轉(zhuǎn)錄出了mRNA可用的檢測與技術(shù)DOC版...表達(dá)③檢測目的基因可否翻譯成蛋白質(zhì)可用雜交④檢測轉(zhuǎn)基因植物可否擁有抗蟲或抗病特點,可做的接種實驗答案:結(jié)構(gòu)基因PCR技術(shù)化學(xué)方法RNA聚合酶尾端目的基因目的基因農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變法花粉管通道法顯微注射法2+辦理法DNA分子雜交分子雜交抗Ca原—抗體抗蟲或抗病三、基因工程的應(yīng)用(填表)技術(shù)名稱應(yīng)用動物基提高動物__________來提高產(chǎn)品產(chǎn)量;改進(jìn)畜產(chǎn)質(zhì)量量;用轉(zhuǎn)基因動因工程物生產(chǎn)______;用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的供體植物基培育__________植物、抗病轉(zhuǎn)基因植物和________植物;利用轉(zhuǎn)基因因工程改進(jìn)植物的質(zhì)量基因把________導(dǎo)入病人體內(nèi),使______________發(fā)揮功能,從而達(dá)到治治療療疾病的目的,分為______基因治療和______基因治療答案:生長速率藥物抗蟲轉(zhuǎn)基因抗逆轉(zhuǎn)基因正常基因該基因的表達(dá)產(chǎn)物體外體內(nèi)四、蛋白質(zhì)工程的盛行(判斷正誤)1.蛋白質(zhì)工程是對組成蛋白質(zhì)的氨基酸或蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)進(jìn)行操作,來改造蛋白質(zhì)的技術(shù)。( )2.蛋白質(zhì)工程的流程是:預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預(yù)期蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸DOC版...序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)。( )答案:1.×2.√1.(2013·蘇卷,江22)(多項選擇)小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應(yīng),為了戰(zhàn)勝這個弊端,可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因(目的基因)后再重組表達(dá)。以下相關(guān)表達(dá)正確的選項是( )A.設(shè)計擴(kuò)增目的基因的引物時不用考慮表達(dá)載體的序列B.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時不用知道基因的全部序列C.PCR系統(tǒng)中必然要增加從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶D.必然要依照目的基因編碼產(chǎn)物的特點選擇合適的受體細(xì)胞解析:設(shè)計引物時應(yīng)當(dāng)與表達(dá)載體兩端的序列進(jìn)行互補配對A錯誤;PCR法擴(kuò)增目的基因只需要知道基因兩端的序列設(shè)計合適的引物即可,而不用知道其全部序列,B正確;PCR中應(yīng)用耐高溫的DNA聚合酶C錯誤;依照目的基因的編碼產(chǎn)物選擇合適的受體細(xì)胞,以有利于基因的表達(dá),D正確,因此答案為BD。答案:BD2.(2013·徽卷,安6)以下列圖為經(jīng)過DNA分子雜交判斷含有某特定DNA的細(xì)菌克隆表示圖。以下表達(dá)正確的選項是( )DOC版....依照培育皿中菌落數(shù)能夠正確計算樣品中含有的活菌實質(zhì)數(shù)量B.外源DNA必定位于重組質(zhì)粒的啟動子和停止子之間才能進(jìn)行復(fù)制C.重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是由于DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接D.放射自顯影結(jié)果能夠顯示原培育皿中含有特定DNA的細(xì)菌菌落地址解析:依照菌落數(shù)只能大體推測出活菌數(shù),A錯誤;外源DNA作為一個完滿的基因,自己含有啟動子和停止子,B錯誤;DNA雜交是利用堿基互補配對原則進(jìn)行的,C錯誤;由于放射性標(biāo)記的DNA探針能與相應(yīng)的DNA雜交,而產(chǎn)生放射自顯影,而只有特定的DNA才與探針相結(jié)合,因此能夠顯示原培育皿中含有特定DNA的細(xì)菌菌落地址,D正確。答案:D3.將ada(腺苷酸脫氨酶基因)經(jīng)過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。以下表達(dá)錯誤的選項是( ).每個大腸桿菌細(xì)胞最少含一個重組質(zhì)粒B.每個重組質(zhì)粒最少含一個限制性核酸內(nèi)切酶鑒別位點C.每個限制性核酸內(nèi)切酶鑒別位點最少插入一個adaD.每個插入的ada最少表達(dá)一個腺苷酸脫氨酶分子解析:將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中并成功表達(dá),說明大腸桿菌內(nèi)最少含有一個重組質(zhì)粒;DOC版...每個重組質(zhì)粒都含有目的基因ada,則該重組質(zhì)粒最少含一個能被該限制性核酸內(nèi)切酶切割的位點;限制性核酸內(nèi)切酶擁有特異性,種類不同樣,識其余位點不同樣,切割出的黏性尾端也就不同樣,因此其實不是每個位點都能插入ada;依照題干信息,導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌成功表達(dá)出腺苷酸脫氨酶,說明插入的ada最少表達(dá)出一個腺苷酸脫氨酶分子。答案:C4.北極比目魚中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白擁有11個氨基酸的重復(fù)序列,該序列重復(fù)次數(shù)越多,抗凍能力越強。以下列圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程表示圖,相關(guān)表達(dá)正確的是( ).過程①獲取的目的基因,可用于基因工程和比目魚基因組測序B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因,不能夠獲取抗凍性增強的抗凍蛋白C.過程②組成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行精選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù),能夠檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完滿表達(dá)解析:將多個抗凍基因編碼區(qū)相連成能表達(dá)的新基因,合成的蛋白質(zhì)為新的蛋白質(zhì),不能獲取抗凍性增強的抗凍蛋白,應(yīng)選項B正確;過程①是利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因,由于沒有非編碼區(qū)和編碼區(qū)中的內(nèi)含子,不能夠用于比目魚基因組測序;用作載體的質(zhì)粒,必定擁有標(biāo)記基因才能便于檢測和精選;應(yīng)用DNA探針技術(shù),可檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄中目的基DOC版...因的存在和轉(zhuǎn)錄,但不能夠檢測可否成功表達(dá),應(yīng)選項A、C、D錯誤。答案:B5.(2013·京卷,北30)斑馬魚的酶D由17號染色體上的D基因編碼。擁有純合突變基因(dd)的斑馬魚胚胎會發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白(G)基因整合到斑馬魚17號染色體上,帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對應(yīng)位點表示為g。用個體M和N進(jìn)行以下雜交實驗。在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炛校瑢基因與質(zhì)粒重組,需要的兩類酶是_____________和_____________。將重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚______________中,整合到染色體上的G基因_____________后,使胚胎發(fā)出綠色熒光。(2)依照上述雜交實驗推測:①親代M的基因型是______(選填選項前的符號)。a.DDggb.Ddgg②子代中只發(fā)出綠色熒光的胚胎基因型包括______(選填選項前的符號)。a.DDGGb.DDGgc.DdGGd.DdGg(3)雜交后,出現(xiàn)紅·綠熒光(既有紅色又有綠色熒光)胚胎的原因是親代________(填“M”或“N”)的初級精(卵)母細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中,同源染色體的________________發(fā)生了互換,以致染色體上的基因重組。經(jīng)過記錄子代中紅·綠熒光胚胎數(shù)量與胚胎總數(shù),可計算獲取該親本產(chǎn)生的重組配子占其全部配子的比率,算式為_____________________。DOC版...解析:(1)基因工程操作過程中需要兩類工具酶:限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶。動物細(xì)胞工程的受體細(xì)胞一般是受精卵。(2)由于出現(xiàn)了綠色熒光(D_G_)和紅色熒光(ddgg)的子代胚胎,則親代M中必然均含有d基因,同時可推出M和N的基因型是:Ddgg、DdGg,由此可知第一問選b,第二問選b、d。(3)由題可知,D與G是連鎖遺傳的,再由第(2)題的分析可知,其基因解析以以下列圖(左)所示,因此正常情況不會產(chǎn)生紅·綠熒光胚胎,除非親代N的在減數(shù)分裂過程中同源染色體發(fā)生了交織互換,形成以以下列圖(右)所示的情況。若親代N產(chǎn)生的配子中重組的配子(
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