微工第1章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)課件

菌種：實(shí)現(xiàn)從原料→目的產(chǎn)物的關(guān)鍵

生產(chǎn)效率、產(chǎn)品成本、產(chǎn)品質(zhì)量第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)第一篇微生物工業(yè)菌種與培養(yǎng)基菌種：實(shí)現(xiàn)從原料→目的產(chǎn)物的關(guān)鍵第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)12022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?22022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?3微工第1章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)課件4微工第1章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)課件52022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?(1)待改良性狀的本質(zhì)及與發(fā)酵工藝的關(guān)系(2)對(duì)這一特定菌種的遺傳生化的認(rèn)識(shí)程度(3)經(jīng)濟(jì)費(fèi)用如，對(duì)特定菌種的基本性狀及其工藝知曉甚少，則多半采用隨機(jī)誘變、篩選及選育等技術(shù)；如，對(duì)其遺傳及生物化學(xué)方面的性狀已有較深的認(rèn)識(shí)，則可選擇基因重組等手段進(jìn)行定向育種。2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?(1)6抗生素生產(chǎn)有關(guān)的微生物放線菌（鏈霉素四環(huán)素；紅霉素等）真菌（青霉素、頭孢等）一些產(chǎn)芽孢的細(xì)菌植物或動(dòng)物來(lái)源2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?抗生素生產(chǎn)有關(guān)的微生物放線菌（鏈霉素四環(huán)素；紅霉素等）真菌7氨基酸生產(chǎn)菌的要求：代謝途徑比較清楚，代謝途徑比較簡(jiǎn)單谷氨酸發(fā)酵的菌種：其它氨基酸生產(chǎn)菌：棒桿菌屬，短桿菌屬、節(jié)桿菌屬或小桿菌屬的棒型細(xì)菌常規(guī)菌種一般也是以谷氨酸生產(chǎn)菌選育而成；工程菌，大腸桿菌，枯草芽孢桿菌氨基酸生產(chǎn)有關(guān)的微生物2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?氨基酸生產(chǎn)菌的要求：代謝途徑比較清楚，谷氨酸發(fā)酵的菌種：其它8食品工業(yè)微生物包括：釀造業(yè)，酶制劑等食品用的微生物需經(jīng)過嚴(yán)格的毒理試驗(yàn)，目前已同意使用的僅僅少數(shù)微生物能用于生產(chǎn)食品用酶。α—淀粉酶：黑曲霉、米曲霉、米根酶、枯草牙孢桿菌和地衣牙孢桿菌2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?食品工業(yè)微生物包括：釀造業(yè)，酶制劑等α—淀粉酶：黑曲霉9能在廉價(jià)原料制成的培養(yǎng)基上迅速生長(zhǎng)和大量合成目的產(chǎn)物----價(jià)值高能在要求不高、易控制的培養(yǎng)條件下迅速生長(zhǎng)和發(fā)酵，發(fā)酵周期短。----可操作性強(qiáng)根據(jù)代謝調(diào)控要求選擇高產(chǎn)菌株，如營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株或調(diào)節(jié)突變型菌株菌種抗噬菌體能力強(qiáng)，以防止感染噬菌體而造成“倒罐”現(xiàn)象的發(fā)生。菌種純粹，不易退化，可保證發(fā)酵生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。----遺傳穩(wěn)定性強(qiáng)菌種非病原菌，不產(chǎn)生任何有害的物質(zhì)和毒素，以保證產(chǎn)品的安全。----安全性強(qiáng)2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?工業(yè)微生物（菌種）的要求能在廉價(jià)原料制成的培養(yǎng)基上迅速生長(zhǎng)和大量合成目的產(chǎn)物102022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?112022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?目的：保證菌種在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)盡可能保持原有菌株優(yōu)良的生產(chǎn)性能。基本原理：根據(jù)菌種的生理生化特點(diǎn)，創(chuàng)造條件使菌種的代謝活動(dòng)處于不活潑的狀態(tài)?；驹瓌t：選用優(yōu)良純種和創(chuàng)造一個(gè)最有利于菌種休眠的環(huán)境。休眠環(huán)境：微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝受抑，不易突變的環(huán)境，一般要求低溫、缺氧、缺營(yíng)養(yǎng)、添加保護(hù)劑、干燥等。菌種保藏2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?目的：保122022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?保藏要求：保持菌種優(yōu)良特性，經(jīng)濟(jì)方便保藏后需再次檢測(cè)和確定保藏菌種的形態(tài)學(xué)和生化特征(如代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生、酶活力、遺傳特征及生化指標(biāo))。2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?132022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?方法溫度保護(hù)劑保藏時(shí)間適用菌種定期移植低溫保藏法4℃低溫?zé)o數(shù)月，短期各種微生物細(xì)胞液氮超低溫保藏法-196~-150℃甘油或DMSO長(zhǎng)期適用范圍最廣，微生物、動(dòng)物細(xì)胞甘油低溫保藏法-80~-70℃（-18℃）甘油1年以上特別適用于基因工程菌沙土保藏法室溫或低溫?cái)?shù)年芽孢桿菌、放線菌、曲霉菌等麩皮保藏法20℃長(zhǎng)期放線菌、霉菌等蒸餾水保藏法4~10℃較長(zhǎng)時(shí)間酵母、真菌冷凍干燥保藏法干燥后，4℃左右低溫避光處脫脂乳、蔗糖數(shù)年各種微生物細(xì)胞2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?方法溫度14液氮超低溫保藏法最有效，適用范圍最廣，多數(shù)國(guó)家級(jí)菌種保藏單位常用原則：

慢凍快溶原理：利用微生物在-130℃以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?液氮超低溫保藏法最有效，適用范圍最廣，多數(shù)國(guó)家級(jí)菌種保藏單位15液氮保藏法操作步驟將10%甘油或DMSO作為保護(hù)劑分裝與安培瓶（or凍干管）中將長(zhǎng)有菌落的瓊脂（or培養(yǎng)液）懸浮于已滅菌的保護(hù)劑中熔封安培瓶口（or蓋上凍干管的蓋子）以1min下降1℃的速度降至-35℃，使瓶?jī)?nèi)懸浮液體凍結(jié)，然后將安培瓶置液氮罐（or液氮冰箱）中，于-130℃以下儲(chǔ)藏恢復(fù)培養(yǎng)時(shí)，從液氮中取出安培瓶（or凍干管），立即于38~40℃水浴中搖動(dòng)，至瓶?jī)?nèi)冰全部融化，按常法進(jìn)行培養(yǎng)。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?液氮保藏法操作步驟將10%甘油或DMSO作為保護(hù)劑分裝與安培162022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?172022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?在超低溫冷藏柜（-70~-80℃）中保藏菌種的一般方法是：1．離心收獲對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期至后期的微生物細(xì)胞2．用新鮮培養(yǎng)基重新懸浮所收獲的細(xì)胞；3．加入等體積的20％甘油或10％二甲亞砜；4．混勻后分裝入冷凍指管或安瓿中，于-70-80℃超低溫冰箱中保藏。 超低溫冰箱的冷凍速度一般控制在1-2℃／min。一些細(xì)菌和真菌菌種可保藏5年而活力不受影響。2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?在超低溫182022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?超低溫冰箱2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?超低溫冰192022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?凍干保藏：是通過在減壓條件下使凍結(jié)的細(xì)胞懸液中的水分升華，使培養(yǎng)物干燥。此法是微生物菌種長(zhǎng)期保藏的非常有效的方法之一。2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?凍干保藏20冷凍干燥步驟：凍干樣品的準(zhǔn)備：準(zhǔn)備菌種，與保護(hù)劑混合均勻，分裝至安瓿管預(yù)凍：2小時(shí)以上，溫度達(dá)到-20℃到-35℃左右冷凍干燥：8-20小時(shí)

真空封口及真空檢驗(yàn)：安瓿管頸部用強(qiáng)火焰拉細(xì)熔封。氯化鈷溶液檢測(cè)真空度低溫避光保藏：4℃

2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?冷凍干燥步驟：2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)212022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?22菌種保藏機(jī)構(gòu)國(guó)外：1.ATCCAmericanTypeCultureCollection.Rockville．Maryland.U.S.A美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所，美國(guó)，馬里蘭洲，羅克維爾市。2.CSH（ColdSpringHarborLaboratory），U.S.A冷泉港研究室，美國(guó)。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?菌種保藏機(jī)構(gòu)2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?233.IAM(InstituteofAppliedMicrobiology),UniversityofTokyo,Japan日本東京大學(xué)應(yīng)用微生物研究所，日本東京。4.IFO(InstituteforFermentation),Osaka,Japan發(fā)酵研究所，日本大阪。5.KCC(KakenChemicalCompanyLtd,Tokyo,Japan科研化學(xué)有限公司，日本東京。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?3.IAM(InstituteofAppliedM246.NCTC(NationalCollectionofTypeCulture),LondonUnitedKingdom，國(guó)立標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所，英國(guó)倫敦。7.NIH(NationalInstitutesofHealth),Bethesda,Maryland,U.S.A國(guó)立衛(wèi)生研究所，美國(guó)，馬里蘭洲，貝塞斯達(dá)。8.NRRL

(NorthernUtilizationResearchandDevelopmentDivision),U.S.DepartmentofAgriculture,Peoria,

U.S.A美國(guó)農(nóng)業(yè)部、北方開發(fā)利用研究部，美國(guó)皮奧里亞市。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?6.NCTC(NationalCollectiono25

中國(guó)，1970年7月，中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)（CCCMS），中國(guó)科學(xué)院負(fù)責(zé)，下設(shè)六個(gè)菌種保藏管理中心。l）CCGMC

普通微生物菌種保臧管理中心；北京、武漢2）ACCC

農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心；北京3）CICC

工業(yè)微生物菌種保藏管理中心；北京4）CMCC

醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心；南京、北京5）CACC

抗生素菌種保藏管理中心；北京、成都、石家莊6）CVCC獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心；北京2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?中國(guó)，1970年7月，中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)（C262022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?菌種退化：

傳代→菌種發(fā)酵力、繁殖力、產(chǎn)物得率↓2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?菌種退化272022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?防止衰退的方法：分離復(fù)壯合理改變培養(yǎng)條件減少傳代次數(shù)誘變劑處理后重新分離單菌落復(fù)壯：分離單細(xì)胞，抗性篩選，苛刻條件2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?防止衰退28將保存在沙土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng),最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培養(yǎng)物稱為種子。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?將保存在沙土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌29菌種擴(kuò)培的目的提供相當(dāng)數(shù)量代謝旺盛的種子

----量、狀態(tài)的需要得到純、壯、多的培養(yǎng)物

----菌種的馴化

----縮短發(fā)酵時(shí)間、保證生產(chǎn)水平2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?菌種擴(kuò)培的任務(wù)菌種擴(kuò)培的目的提供相當(dāng)數(shù)量代謝旺盛的種子得到純、壯、多的30實(shí)驗(yàn)室階段：不用種子罐，所用的設(shè)備為培養(yǎng)箱、搖床等實(shí)驗(yàn)室常見設(shè)備，在工廠這些培養(yǎng)過程一般都在菌種室完成，因此將其稱為實(shí)驗(yàn)室階段的種子培養(yǎng)。培養(yǎng)基：保證培養(yǎng)基的質(zhì)量，有利于菌體的生長(zhǎng)減少傳代次數(shù)孢子培養(yǎng)時(shí)注意濕度，子斜面使用一般不超過1個(gè)月生產(chǎn)車間階段：種子培養(yǎng)在種子罐里面進(jìn)行，一般在工廠歸發(fā)酵車間管理，因此形象地稱這些培養(yǎng)過程為生產(chǎn)車間階段。

培養(yǎng)基：控制成本，馴化；營(yíng)養(yǎng)比發(fā)酵培養(yǎng)基豐富。種子擴(kuò)培的兩個(gè)階段2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?實(shí)驗(yàn)室階段：不用種子罐，所用的設(shè)備為培養(yǎng)箱、搖床等實(shí)驗(yàn)室常見312022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?三級(jí)發(fā)酵流程：斜面→一級(jí)種子→二級(jí)種子罐→三級(jí)種子罐→發(fā)酵罐2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?三級(jí)發(fā)酵32靜置培養(yǎng)法：嫌氣發(fā)酵通氣培養(yǎng)法固態(tài)培養(yǎng)法液體培養(yǎng)法2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?表面培養(yǎng)法靜置培養(yǎng)法：嫌氣發(fā)酵通氣培養(yǎng)法固態(tài)培養(yǎng)法液體培養(yǎng)法2022/33液體培養(yǎng)法2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?回轉(zhuǎn)式往復(fù)式液體培養(yǎng)法2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#34表面培養(yǎng)法2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?表面培養(yǎng)法2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#35固態(tài)培養(yǎng)法2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?固態(tài)培養(yǎng)法2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#36

解釋特點(diǎn)適用范圍固態(tài)培養(yǎng)即曲法培養(yǎng)，源于傳統(tǒng)制曲技術(shù)酶活力高可調(diào)溫濕度釀造業(yè)液體深層培養(yǎng)液體培養(yǎng)，深層通風(fēng)可調(diào)節(jié)各種環(huán)境因素：營(yíng)養(yǎng)物濃度，溫濕度等；無(wú)菌操作要求高幾乎所有好氣發(fā)酵：如有機(jī)酸、氨基酸等載體培養(yǎng)可重復(fù)使用的多孔材料，嚴(yán)格控制營(yíng)養(yǎng)條件，結(jié)束后擠壓培養(yǎng)液抽提產(chǎn)物兼具固體培養(yǎng)法與液體培養(yǎng)法的優(yōu)點(diǎn)可培養(yǎng)霉菌、酵母、放線菌等兩步法液體深層培養(yǎng)將營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期與生產(chǎn)期分開，分別控制不同條件工藝可達(dá)到最優(yōu)過程繁瑣氨基酸生產(chǎn)2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?

解釋特點(diǎn)適用范圍固態(tài)培養(yǎng)即曲法培養(yǎng)，源于傳統(tǒng)制曲技術(shù)酶活力372022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?種子的要求：總量及濃度能滿足要求生理狀況穩(wěn)定，個(gè)體與群體活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵后，能夠迅速生長(zhǎng)無(wú)雜菌污染種子的質(zhì)量控制：2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?種子的要382022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?影響因素2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?影響因素39種齡種齡是指種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間。種齡短：菌體太少；種齡長(zhǎng)：易老化。原則：對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末，細(xì)胞活力強(qiáng)，菌體濃度相對(duì)較大，但是最終由實(shí)驗(yàn)結(jié)果定。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?種齡種齡是指種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)40接種量的確定

移入種子的體積接種量＝—————————

接種后培養(yǎng)液的體積過大過小都不好，最終以實(shí)踐定，如大多數(shù)抗生素為7-15%。但是一般認(rèn)為大一點(diǎn)好。雙種：兩個(gè)種子罐接種到一個(gè)發(fā)酵罐中。倒種：一部分種子來(lái)源于種子罐，一部分來(lái)源于發(fā)酵罐。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?接種量的確定移入種子的體積41發(fā)酵級(jí)數(shù)的確定一般由菌絲體培養(yǎng)開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)，但有時(shí)，工廠從第一級(jí)種子罐開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)確定依據(jù)：發(fā)酵規(guī)模、菌體生長(zhǎng)特性、接種量級(jí)數(shù)大，難控制、易染菌、易變異，難管理，一般2-4級(jí)谷氨酸的三級(jí)發(fā)酵：一級(jí)種子（搖瓶）→二級(jí)種子（小罐）→發(fā)酵青霉素的三級(jí)發(fā)酵：一級(jí)種子（小罐）→二級(jí)種子（中罐）→發(fā)酵2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?發(fā)酵級(jí)數(shù)的確定一般由菌絲體培養(yǎng)開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)，但有時(shí)，工廠422.3種子擴(kuò)大培養(yǎng)舉例例一、谷氨酸生產(chǎn)的種子制備斜面菌種→一級(jí)種子培養(yǎng)→二級(jí)種子培養(yǎng)→發(fā)酵2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2.3種子擴(kuò)大培養(yǎng)舉例例一、谷氨酸生產(chǎn)的種子制備斜面菌種431、斜面(AS1.299)培養(yǎng)基：蛋白胨1%，牛肉膏1%，氯化鈉0.5

瓊脂2%，pH7.0-7.2培養(yǎng)基特點(diǎn)：有利于菌體的生長(zhǎng)，原料比較精細(xì)培養(yǎng)條件：32℃，生長(zhǎng)18-24小時(shí)生長(zhǎng)斜面要求：生長(zhǎng)良好，所使用斜面連續(xù)傳代不超過

3次2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?1、斜面(AS1.299)培養(yǎng)基：蛋白胨1%，牛肉膏1%442.一級(jí)種子（搖瓶）培養(yǎng)條件：于1000ml三角瓶中，裝液200-250ml,32℃培養(yǎng)12小時(shí)。培養(yǎng)基：葡萄糖2%，尿素0.5%，玉米漿2.5%，

K2HPO40.1%培養(yǎng)基特點(diǎn)：有利于菌體的生長(zhǎng)，所使用的原料已經(jīng)基本接近于發(fā)酵培養(yǎng)基2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2.一級(jí)種子（搖瓶）培養(yǎng)條件：于1000ml三角瓶中，裝液453.二級(jí)種子(種子罐)培養(yǎng)條件：在種子罐中培養(yǎng)（容積為發(fā)酵罐的1%），

32℃培養(yǎng)7-10個(gè)小時(shí)培養(yǎng)基：和一級(jí)種子相似，其中葡萄糖用水解糖代替，濃度為2.5%培養(yǎng)基的特點(diǎn)：長(zhǎng)菌體，更接近于發(fā)酵培養(yǎng)基2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?3.二級(jí)種子(種子罐)培養(yǎng)條件：在種子罐中培養(yǎng)（容積為發(fā)46種子的質(zhì)量要求：108-109個(gè)/ml大小均勻，呈單個(gè)或八字排列pH7.0-7.2時(shí)結(jié)束，6.8→8→7.0-7.2活力旺盛2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?種子的質(zhì)量要求：108-109個(gè)/ml2022/12/10第47二、青霉素生產(chǎn)的種子制備安瓿管→斜面孢子→大米孢子→一級(jí)種子→二級(jí)種子→發(fā)酵2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?二、青霉素生產(chǎn)的種子制備安瓿管→斜面孢子→大米孢子→48一、斜面孢子培養(yǎng)基：甘油、葡萄糖、蛋白胨等培養(yǎng)基特點(diǎn)：有利于長(zhǎng)孢子，用量少而精細(xì)培養(yǎng)條件：25℃、7天,注意濕度50%左右2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?一、斜面孢子培養(yǎng)基：甘油、葡萄糖、蛋白胨等培養(yǎng)基特點(diǎn)：有49二、大米孢子培養(yǎng)基：大米及氮源（玉米漿）培養(yǎng)基的特點(diǎn)：成本低、米粒之間結(jié)構(gòu)疏松提高比表面積和氧的傳質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)適當(dāng)（要求大米的白點(diǎn)?。┯欣阪咦拥纳L(zhǎng)。培養(yǎng)條件：25℃、7天，控制濕度大米孢子的要求：1粒米含1.4*106個(gè)孢子2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?二、大米孢子培養(yǎng)基：大米及氮源（玉米漿）培養(yǎng)基的特點(diǎn)：成本低503、一級(jí)種子培養(yǎng)基：（葡萄糖、乳糖、蔗糖）、玉米漿目的：長(zhǎng)菌體培養(yǎng)條件：27℃，40小時(shí)接種量：200億孢子/噸4、二級(jí)種子培養(yǎng)基：同上培養(yǎng)條件：27℃、10-14小時(shí)接種量：10%2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?3、一級(jí)種子培養(yǎng)基：（葡萄糖、乳糖、蔗糖）、玉米漿目的：長(zhǎng)菌51種子的質(zhì)量要求菌絲長(zhǎng)稠呈絲狀、菌絲團(tuán)很少，有中小空孢，處于Ⅲ—Ⅳ期青霉素發(fā)酵菌絲體的生長(zhǎng)共分為6個(gè)期，1-4為年青期，4-6期合成青霉素的能力最強(qiáng)2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?種子的質(zhì)量要求菌絲長(zhǎng)稠呈絲狀、菌絲團(tuán)很少，有中小空孢，處于Ⅲ52小節(jié)：常見工業(yè)微生物的種類和用途生產(chǎn)菌種的來(lái)源與保護(hù)控制種子質(zhì)量的基本方法和手段思考題：在生產(chǎn)過程中如何控制種子質(zhì)量？2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?小節(jié)：常見工業(yè)微生物的種類和用途生產(chǎn)菌種的來(lái)源與保護(hù)控制種子53菌種：實(shí)現(xiàn)從原料→目的產(chǎn)物的關(guān)鍵

生產(chǎn)效率、產(chǎn)品成本、產(chǎn)品質(zhì)量第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)第一篇微生物工業(yè)菌種與培養(yǎng)基菌種：實(shí)現(xiàn)從原料→目的產(chǎn)物的關(guān)鍵第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)542022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?552022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?56微工第1章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)課件57微工第1章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)課件582022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?(1)待改良性狀的本質(zhì)及與發(fā)酵工藝的關(guān)系(2)對(duì)這一特定菌種的遺傳生化的認(rèn)識(shí)程度(3)經(jīng)濟(jì)費(fèi)用如，對(duì)特定菌種的基本性狀及其工藝知曉甚少，則多半采用隨機(jī)誘變、篩選及選育等技術(shù)；如，對(duì)其遺傳及生物化學(xué)方面的性狀已有較深的認(rèn)識(shí)，則可選擇基因重組等手段進(jìn)行定向育種。2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?(1)59抗生素生產(chǎn)有關(guān)的微生物放線菌（鏈霉素四環(huán)素；紅霉素等）真菌（青霉素、頭孢等）一些產(chǎn)芽孢的細(xì)菌植物或動(dòng)物來(lái)源2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?抗生素生產(chǎn)有關(guān)的微生物放線菌（鏈霉素四環(huán)素；紅霉素等）真菌60氨基酸生產(chǎn)菌的要求：代謝途徑比較清楚，代謝途徑比較簡(jiǎn)單谷氨酸發(fā)酵的菌種：其它氨基酸生產(chǎn)菌：棒桿菌屬，短桿菌屬、節(jié)桿菌屬或小桿菌屬的棒型細(xì)菌常規(guī)菌種一般也是以谷氨酸生產(chǎn)菌選育而成；工程菌，大腸桿菌，枯草芽孢桿菌氨基酸生產(chǎn)有關(guān)的微生物2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?氨基酸生產(chǎn)菌的要求：代謝途徑比較清楚，谷氨酸發(fā)酵的菌種：其它61食品工業(yè)微生物包括：釀造業(yè)，酶制劑等食品用的微生物需經(jīng)過嚴(yán)格的毒理試驗(yàn)，目前已同意使用的僅僅少數(shù)微生物能用于生產(chǎn)食品用酶。α—淀粉酶：黑曲霉、米曲霉、米根酶、枯草牙孢桿菌和地衣牙孢桿菌2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?食品工業(yè)微生物包括：釀造業(yè)，酶制劑等α—淀粉酶：黑曲霉62能在廉價(jià)原料制成的培養(yǎng)基上迅速生長(zhǎng)和大量合成目的產(chǎn)物----價(jià)值高能在要求不高、易控制的培養(yǎng)條件下迅速生長(zhǎng)和發(fā)酵，發(fā)酵周期短。----可操作性強(qiáng)根據(jù)代謝調(diào)控要求選擇高產(chǎn)菌株，如營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株或調(diào)節(jié)突變型菌株菌種抗噬菌體能力強(qiáng)，以防止感染噬菌體而造成“倒罐”現(xiàn)象的發(fā)生。菌種純粹，不易退化，可保證發(fā)酵生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。----遺傳穩(wěn)定性強(qiáng)菌種非病原菌，不產(chǎn)生任何有害的物質(zhì)和毒素，以保證產(chǎn)品的安全。----安全性強(qiáng)2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?工業(yè)微生物（菌種）的要求能在廉價(jià)原料制成的培養(yǎng)基上迅速生長(zhǎng)和大量合成目的產(chǎn)物632022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?642022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?目的：保證菌種在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)盡可能保持原有菌株優(yōu)良的生產(chǎn)性能?；驹恚焊鶕?jù)菌種的生理生化特點(diǎn)，創(chuàng)造條件使菌種的代謝活動(dòng)處于不活潑的狀態(tài)。基本原則：選用優(yōu)良純種和創(chuàng)造一個(gè)最有利于菌種休眠的環(huán)境。休眠環(huán)境：微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝受抑，不易突變的環(huán)境，一般要求低溫、缺氧、缺營(yíng)養(yǎng)、添加保護(hù)劑、干燥等。菌種保藏2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?目的：保652022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?保藏要求：保持菌種優(yōu)良特性，經(jīng)濟(jì)方便保藏后需再次檢測(cè)和確定保藏菌種的形態(tài)學(xué)和生化特征(如代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生、酶活力、遺傳特征及生化指標(biāo))。2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?662022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?方法溫度保護(hù)劑保藏時(shí)間適用菌種定期移植低溫保藏法4℃低溫?zé)o數(shù)月，短期各種微生物細(xì)胞液氮超低溫保藏法-196~-150℃甘油或DMSO長(zhǎng)期適用范圍最廣，微生物、動(dòng)物細(xì)胞甘油低溫保藏法-80~-70℃（-18℃）甘油1年以上特別適用于基因工程菌沙土保藏法室溫或低溫?cái)?shù)年芽孢桿菌、放線菌、曲霉菌等麩皮保藏法20℃長(zhǎng)期放線菌、霉菌等蒸餾水保藏法4~10℃較長(zhǎng)時(shí)間酵母、真菌冷凍干燥保藏法干燥后，4℃左右低溫避光處脫脂乳、蔗糖數(shù)年各種微生物細(xì)胞2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?方法溫度67液氮超低溫保藏法最有效，適用范圍最廣，多數(shù)國(guó)家級(jí)菌種保藏單位常用原則：

慢凍快溶原理：利用微生物在-130℃以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?液氮超低溫保藏法最有效，適用范圍最廣，多數(shù)國(guó)家級(jí)菌種保藏單位68液氮保藏法操作步驟將10%甘油或DMSO作為保護(hù)劑分裝與安培瓶（or凍干管）中將長(zhǎng)有菌落的瓊脂（or培養(yǎng)液）懸浮于已滅菌的保護(hù)劑中熔封安培瓶口（or蓋上凍干管的蓋子）以1min下降1℃的速度降至-35℃，使瓶?jī)?nèi)懸浮液體凍結(jié)，然后將安培瓶置液氮罐（or液氮冰箱）中，于-130℃以下儲(chǔ)藏恢復(fù)培養(yǎng)時(shí)，從液氮中取出安培瓶（or凍干管），立即于38~40℃水浴中搖動(dòng)，至瓶?jī)?nèi)冰全部融化，按常法進(jìn)行培養(yǎng)。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?液氮保藏法操作步驟將10%甘油或DMSO作為保護(hù)劑分裝與安培692022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?702022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?在超低溫冷藏柜（-70~-80℃）中保藏菌種的一般方法是：1．離心收獲對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期至后期的微生物細(xì)胞2．用新鮮培養(yǎng)基重新懸浮所收獲的細(xì)胞；3．加入等體積的20％甘油或10％二甲亞砜；4．混勻后分裝入冷凍指管或安瓿中，于-70-80℃超低溫冰箱中保藏。 超低溫冰箱的冷凍速度一般控制在1-2℃／min。一些細(xì)菌和真菌菌種可保藏5年而活力不受影響。2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?在超低溫712022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?超低溫冰箱2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?超低溫冰722022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?凍干保藏：是通過在減壓條件下使凍結(jié)的細(xì)胞懸液中的水分升華，使培養(yǎng)物干燥。此法是微生物菌種長(zhǎng)期保藏的非常有效的方法之一。2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?凍干保藏73冷凍干燥步驟：凍干樣品的準(zhǔn)備：準(zhǔn)備菌種，與保護(hù)劑混合均勻，分裝至安瓿管預(yù)凍：2小時(shí)以上，溫度達(dá)到-20℃到-35℃左右冷凍干燥：8-20小時(shí)

真空封口及真空檢驗(yàn)：安瓿管頸部用強(qiáng)火焰拉細(xì)熔封。氯化鈷溶液檢測(cè)真空度低溫避光保藏：4℃

2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?冷凍干燥步驟：2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)742022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?75菌種保藏機(jī)構(gòu)國(guó)外：1.ATCCAmericanTypeCultureCollection.Rockville．Maryland.U.S.A美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所，美國(guó)，馬里蘭洲，羅克維爾市。2.CSH（ColdSpringHarborLaboratory），U.S.A冷泉港研究室，美國(guó)。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?菌種保藏機(jī)構(gòu)2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?763.IAM(InstituteofAppliedMicrobiology),UniversityofTokyo,Japan日本東京大學(xué)應(yīng)用微生物研究所，日本東京。4.IFO(InstituteforFermentation),Osaka,Japan發(fā)酵研究所，日本大阪。5.KCC(KakenChemicalCompanyLtd,Tokyo,Japan科研化學(xué)有限公司，日本東京。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?3.IAM(InstituteofAppliedM776.NCTC(NationalCollectionofTypeCulture),LondonUnitedKingdom，國(guó)立標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所，英國(guó)倫敦。7.NIH(NationalInstitutesofHealth),Bethesda,Maryland,U.S.A國(guó)立衛(wèi)生研究所，美國(guó)，馬里蘭洲，貝塞斯達(dá)。8.NRRL

(NorthernUtilizationResearchandDevelopmentDivision),U.S.DepartmentofAgriculture,Peoria,

U.S.A美國(guó)農(nóng)業(yè)部、北方開發(fā)利用研究部，美國(guó)皮奧里亞市。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?6.NCTC(NationalCollectiono78

中國(guó)，1970年7月，中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)（CCCMS），中國(guó)科學(xué)院負(fù)責(zé)，下設(shè)六個(gè)菌種保藏管理中心。l）CCGMC

普通微生物菌種保臧管理中心；北京、武漢2）ACCC

農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心；北京3）CICC

工業(yè)微生物菌種保藏管理中心；北京4）CMCC

醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心；南京、北京5）CACC

抗生素菌種保藏管理中心；北京、成都、石家莊6）CVCC獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心；北京2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?中國(guó)，1970年7月，中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)（C792022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?菌種退化：

傳代→菌種發(fā)酵力、繁殖力、產(chǎn)物得率↓2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?菌種退化802022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?防止衰退的方法：分離復(fù)壯合理改變培養(yǎng)條件減少傳代次數(shù)誘變劑處理后重新分離單菌落復(fù)壯：分離單細(xì)胞，抗性篩選，苛刻條件2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?防止衰退81將保存在沙土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng),最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培養(yǎng)物稱為種子。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?將保存在沙土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌82菌種擴(kuò)培的目的提供相當(dāng)數(shù)量代謝旺盛的種子

----量、狀態(tài)的需要得到純、壯、多的培養(yǎng)物

----菌種的馴化

----縮短發(fā)酵時(shí)間、保證生產(chǎn)水平2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?菌種擴(kuò)培的任務(wù)菌種擴(kuò)培的目的提供相當(dāng)數(shù)量代謝旺盛的種子得到純、壯、多的83實(shí)驗(yàn)室階段：不用種子罐，所用的設(shè)備為培養(yǎng)箱、搖床等實(shí)驗(yàn)室常見設(shè)備，在工廠這些培養(yǎng)過程一般都在菌種室完成，因此將其稱為實(shí)驗(yàn)室階段的種子培養(yǎng)。培養(yǎng)基：保證培養(yǎng)基的質(zhì)量，有利于菌體的生長(zhǎng)減少傳代次數(shù)孢子培養(yǎng)時(shí)注意濕度，子斜面使用一般不超過1個(gè)月生產(chǎn)車間階段：種子培養(yǎng)在種子罐里面進(jìn)行，一般在工廠歸發(fā)酵車間管理，因此形象地稱這些培養(yǎng)過程為生產(chǎn)車間階段。

培養(yǎng)基：控制成本，馴化；營(yíng)養(yǎng)比發(fā)酵培養(yǎng)基豐富。種子擴(kuò)培的兩個(gè)階段2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?實(shí)驗(yàn)室階段：不用種子罐，所用的設(shè)備為培養(yǎng)箱、搖床等實(shí)驗(yàn)室常見842022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?三級(jí)發(fā)酵流程：斜面→一級(jí)種子→二級(jí)種子罐→三級(jí)種子罐→發(fā)酵罐2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?三級(jí)發(fā)酵85靜置培養(yǎng)法：嫌氣發(fā)酵通氣培養(yǎng)法固態(tài)培養(yǎng)法液體培養(yǎng)法2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?表面培養(yǎng)法靜置培養(yǎng)法：嫌氣發(fā)酵通氣培養(yǎng)法固態(tài)培養(yǎng)法液體培養(yǎng)法2022/86液體培養(yǎng)法2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?回轉(zhuǎn)式往復(fù)式液體培養(yǎng)法2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#87表面培養(yǎng)法2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?表面培養(yǎng)法2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#88固態(tài)培養(yǎng)法2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?固態(tài)培養(yǎng)法2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#89

解釋特點(diǎn)適用范圍固態(tài)培養(yǎng)即曲法培養(yǎng)，源于傳統(tǒng)制曲技術(shù)酶活力高可調(diào)溫濕度釀造業(yè)液體深層培養(yǎng)液體培養(yǎng)，深層通風(fēng)可調(diào)節(jié)各種環(huán)境因素：營(yíng)養(yǎng)物濃度，溫濕度等；無(wú)菌操作要求高幾乎所有好氣發(fā)酵：如有機(jī)酸、氨基酸等載體培養(yǎng)可重復(fù)使用的多孔材料，嚴(yán)格控制營(yíng)養(yǎng)條件，結(jié)束后擠壓培養(yǎng)液抽提產(chǎn)物兼具固體培養(yǎng)法與液體培養(yǎng)法的優(yōu)點(diǎn)可培養(yǎng)霉菌、酵母、放線菌等兩步法液體深層培養(yǎng)將營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期與生產(chǎn)期分開，分別控制不同條件工藝可達(dá)到最優(yōu)過程繁瑣氨基酸生產(chǎn)2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?

解釋特點(diǎn)適用范圍固態(tài)培養(yǎng)即曲法培養(yǎng)，源于傳統(tǒng)制曲技術(shù)酶活力902022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?種子的要求：總量及濃度能滿足要求生理狀況穩(wěn)定，個(gè)體與群體活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵后，能夠迅速生長(zhǎng)無(wú)雜菌污染種子的質(zhì)量控制：2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?種子的要912022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?影響因素2022/12/10第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?影響因素92種齡種齡是指種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間。種齡短：菌體太少；種齡長(zhǎng)：易老化。原則：對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末，細(xì)胞活力強(qiáng)，菌體濃度相對(duì)較大，但是最終由實(shí)驗(yàn)結(jié)果定。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?種齡種齡是指種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)93接種量的確定

移入種子的體積接種量＝—————————

接種后培養(yǎng)液的體積過大過小都不好，最終以實(shí)踐定，如大多數(shù)抗生素為7-15%。但是一般認(rèn)為大一點(diǎn)好。雙種：兩個(gè)種子罐接種到一個(gè)發(fā)酵罐中。倒種：一部分種子來(lái)源于種子罐，一部分來(lái)源于發(fā)酵罐。2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?接種量的確定移入種子的體積94發(fā)酵級(jí)數(shù)的確定一般由菌絲體培養(yǎng)開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)，但有時(shí)，工廠從第一級(jí)種子罐開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)確定依據(jù)：發(fā)酵規(guī)模、菌體生長(zhǎng)特性、接種量級(jí)數(shù)大，難控制、易染菌、易變異，難管理，一般2-4級(jí)谷氨酸的三級(jí)發(fā)酵：一級(jí)種子（搖瓶）→二級(jí)種子（小罐）→發(fā)酵青霉素的三級(jí)發(fā)酵：一級(jí)種子（小罐）→二級(jí)種子（中罐）→發(fā)酵2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?發(fā)酵級(jí)數(shù)的確定一般由菌絲體培養(yǎng)開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)，但有時(shí)，工廠952.3種子擴(kuò)大培養(yǎng)舉例例一、谷氨酸生產(chǎn)的種子制備斜面菌種→一級(jí)種子培養(yǎng)→二級(jí)種子培養(yǎng)→發(fā)酵2022/12/11第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)?#?2.3種子擴(kuò)大培養(yǎng)舉例例一、谷氨酸生產(chǎn)的種子制備斜面菌種961、斜面(AS1.299)培