白假絲酵母菌課件

第二十二章

白假絲酵母菌

12/11/20221真菌重點1.白色假絲酵母菌的生物學(xué)特性2.白色假絲酵母菌的微生物學(xué)檢查12/11/20222真菌真菌學(xué)概述

概念：是一類有典型的細胞核和完善的細胞器，不含葉綠素，無根、莖、葉分化的真核細胞型微生物。

12/11/20223真菌單細胞真菌酵母菌：孢子，無菌絲類酵母菌：芽生孢子，假菌絲多細胞真菌

絲狀菌（霉菌）：孢子和菌絲菌絲和孢子的形態(tài)因菌而異，是鑒定真菌的重要依據(jù)。孢子又分為多種，如葉狀孢子、分生孢子和孢子囊孢子等。真菌的形態(tài)特性12/11/20225真菌單細胞真菌形態(tài)12/11/20226真菌類酵母菌—白假絲酵母菌孢子假菌絲12/11/20227真菌多細胞真菌形態(tài)12/11/20228真菌酵母型菌落12/11/202210真菌

霉菌型菌落菌12/11/202212真菌變異性抵抗力易發(fā)生變異形態(tài)、培養(yǎng)性狀和毒力等抵抗力較強對干燥、紫外線及一般消毒劑抵抗力強對熱敏感，60℃1小時菌絲、孢子均被殺死對2%石炭酸、0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感對作用于細菌抗生素不敏感，對二性霉素B制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感。12/11/202214真菌致病性與免疫性致病性1.致病性真菌感染：淺部真菌：角蛋白酶、機械刺激、代謝產(chǎn)物深部真菌：慢性肉芽腫、組織潰瘍2.條件致病性真菌：假絲酵母菌3.真菌超敏反應(yīng)性疾病4.真菌性中毒癥5.真菌毒素與腫瘤免疫性天然免疫獲得性免疫：體液免疫、細胞免疫12/11/202215真菌真菌感染的病原學(xué)診斷標本的采集臨床標本類別：1．皮膚的角質(zhì)性物質(zhì)：毛發(fā)、指(趾)甲、皮屑等。2．各種分泌物和排泄物：生殖道、分泌物、耳垢、痰、糞便、尿液等。

3．血液和體液：體液包括胸水、腹水、腦脊液、淋巴穿刺液等。4．膿汁及滲出物。12/11/202216真菌采集標本注意事項：1.采集的標本要適宜不同真菌感染應(yīng)采取不同的臨床標本。懷疑為淺部真菌感染如體癬，應(yīng)刮取病變邊緣的痂、皮屑，發(fā)癬應(yīng)取病發(fā)。深部真菌感染應(yīng)取血液、腦脊液、膿汁等。2．在用藥前采集標本一般真菌標本須在用藥前采集，對已用藥者則需停藥一段時間后再采集標本。3．采集的標本量要足血液和腦脊液5ml，胸腔液20ml，皮屑標本兩塊，活體組織兩份(一份病理檢查，一份鏡檢和培養(yǎng))。4．嚴格無菌操作并進行消毒處理，尤其是采集血液和腦脊液標本，要避免污染雜菌。5．采集標本立即送檢深部真菌標本最長不得超過2h。12/11/202217真菌檢驗程序P354檢驗方法直接檢查不染色和染色鏡檢

12/11/202218真菌抗原檢測常用的方法有膠乳凝集試驗、ELISA、半定量放射免疫法。均應(yīng)設(shè)對照，防止發(fā)生假陽性和假陰性。動物實驗實驗的目的是分離病原性真菌、確定真菌菌種的致病性、研究藥物對真菌的作用等。如假絲酵母菌接種家兔或小白鼠，腎臟明顯腫脹，腎皮質(zhì)部位有白色膿瘍。核酸檢測從核酸堿基G+Cmol％分析、限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)、Southern印跡分析到脈沖場凝膠電泳(PFGE)、PCR指紋、隨機擴增多態(tài)性DNA(RAPD)以及DNA特殊片段測序等。12/11/202220真菌主要致病性真菌真菌按其侵犯部位和臨床表現(xiàn)分為：

表面感染真菌

淺部感染真菌皮膚癬真菌皮下組織真菌感染深部感染真菌：新生隱球菌條件致病性真菌：假絲酵母菌12/11/202221真菌假絲酵母菌俗稱念珠菌，有81個種，其中有11種對人有致病性：白假絲酵母菌、為最常見的致病菌。此外，熱帶假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌也較多引起疾病。白假絲酵母菌（canidiaAlbicans）又稱白色念珠菌，廣泛存在于自然界，也存在于正常人口腔，上呼吸道，腸道及陰道，一般在正常機體中數(shù)量少，不引起疾病。為條件致病性真菌。12/11/202223真菌1．微生物特性白假絲酵母菌呈圓形或卵圓形，直徑2-4μm。革蘭陽性。出芽方式繁殖，在組織內(nèi)可見芽生孢子、假菌絲，孢子可伸長成芽管，如不與母細胞脫離而形成假菌絲。12/11/202224真菌條件致?。浩つw粘膜感染鵝口瘡，陰道炎內(nèi)臟感染：肺炎、關(guān)節(jié)炎、膀胱炎，腎盂腎炎中樞神經(jīng)感染：腦膜（腦）炎、腦膿腫2．致病性和免疫性本菌可侵犯人體許多部位，機體也可它產(chǎn)生的免疫力過敏12/11/202226真菌3．微生物檢驗

1.標本采集：所致疾病不同，取不同標本。

2.檢驗程序P354

3.檢驗方法及鑒定1）直接顯微鏡檢查：取膿汁、痰和局部炎癥性分泌物直接涂片，有些標本需用KOH先消化，革蘭染色后鏡檢，顯微鏡見到革蘭陽性(著色不均勻)、圓形或卵圓形菌體或孢子及假菌絲，厚膜孢子較少見。12/11/202227真菌2）培養(yǎng)檢查：將標本接種在沙氏培養(yǎng)基上，25℃或37℃培養(yǎng)1～2d后，可出現(xiàn)奶油色類酵母型菌落。鏡檢可見假菌絲和芽生孢子。12/11/202228真菌厚膜孢子形成試驗：將假絲酵母菌接種于玉米粉培養(yǎng)基25℃孵育1-2d后，白假絲酵母菌在菌絲頂端、側(cè)緣或中間形成厚膜孢子。厚膜孢子12/11/202230真菌糖同化和糖發(fā)酵試驗：

凡發(fā)酵某種糖一定能同化該糖，故只需做那些不發(fā)酵糖的同化試驗。將假絲酵母菌接種糖發(fā)酵管，25℃孵育，一般觀察2～3d，對不發(fā)酵或弱發(fā)酵管可延長至10d或2—4周。觀察有無酵母生長或液體培養(yǎng)基是否變混濁?，F(xiàn)在商品化的產(chǎn)色培養(yǎng)基可快速鑒定白假絲酵母菌和其他假絲酵母菌。12/11/202231真菌TZC試驗：將白色念珠菌接種于含0.005％氯化三本四氮唑的沙保培養(yǎng)基中，經(jīng)22～25℃，24～48h培養(yǎng)，白色念珠菌不變色或僅淡紅色，其他念珠菌或酵母菌呈紅色或深紅色(被還原為紅色的三苯甲)。血清學(xué)試驗：取病人血清作ELISA、免疫印跡法等檢測白假絲酵母菌抗原。核酸檢測：用PCR法將白假絲酵母菌DNA分子擴增后以分子探針檢測，具有較好的敏性和特異性。動物試驗：12/11/202232真菌新型隱球菌新型隱球菌又名溶組織酵母菌，是土壤，鴿類，牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。可侵犯人和動物，一般為外源性感染，但也可能為內(nèi)源性感染，對人類而言，它通常是條件致病菌。

12/11/202233真菌較大球形，直徑可達5～20um，有肥厚的莢膜，折光性強，一般染料不易著色，難以發(fā)現(xiàn)，稱隱球菌，用墨汁陰性顯影法鏡檢，可見到透明莢膜包裹著菌細胞，菌細胞常有出芽，但不生成假菌絲。

生物學(xué)特性12/11/202234真菌在沙保氏瓊脂及血瓊脂培養(yǎng)基上，于25及37℃皆可生長，而非病原性隱球菌在37℃不能繁殖。酵母型菌落，呈白色。本菌能分解尿素，以此與酵母菌和念珠菌鑒別。

12/11/202235真菌致病性本菌大多由呼吸道轉(zhuǎn)入，在肺部引起輕度炎癥，或隱性傳染。侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)，發(fā)生腦膜炎、腦炎、腦肉芽腫等。此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴結(jié)、皮膚粘膜引起慢性炎癥和膿腫。

12/11/202236真菌微生物學(xué)檢驗1．直接鏡檢：常用墨汁涂片法。2．分離培養(yǎng)：

在沙保培養(yǎng)基上，室溫、37℃2～3天即可長出典型酵母型菌落。有莢膜者菌落粘稠。

12/11/202237真菌3．糖同化及發(fā)酵試驗：本菌不發(fā)酵各種糖類，但能同化葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、半乳糖、肌醇，不同化乳糖。4．酚氧化酶試驗：在含Ｌ－多巴橘櫞酸鐵和咖啡酸培養(yǎng)基中，經(jīng)２～５天培養(yǎng)，新型隱球菌出現(xiàn)棕黑色菌落。５．尿素酶試驗：新型隱球菌產(chǎn)生尿素酶，在尿素培養(yǎng)基（含尿素及酚紅指示劑）中分解尿素形成氨和CO2，以致培養(yǎng)基的pH值升高，使酚紅由黃變?yōu)榉奂t色為陽性，而白色念珠菌為陰性。

12/11/202238真菌謝謝12/11/202239真菌臨床標本直接檢查分離培養(yǎng)其它方法核酸直接25℃35℃檢測檢測動物檢測鏡檢抗原抗體試驗菌落觀察固定標墨汁KOH法本染色染色