薄層色譜對APC各組分的分離

薄層色譜對APC各組分的分離與鑒定前言背景：阿司匹林是歷史悠久的解熱鎮(zhèn)痛藥，它誕生于 1899年3月6日。早在1853年夏爾，弗雷德里克?熱拉爾(Gerhardt)就用水楊酸與醋酐合成了乙酰水楊酸，但沒能引起人們的重視；1898年德國化學(xué)家菲霍夫曼又進行了合成，并為他父親治療風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，療效極好；1899年由德萊塞介紹到臨床，并取名為阿司匹林(Aspirin)。至U目前為止，阿司匹林已應(yīng)用百年，成為醫(yī)藥史上三大經(jīng)典藥物之一，至今它仍是世界上應(yīng)用最廣泛的解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎藥，也是作為比較和評價其他藥物的標準制劑。在體內(nèi)具有抗血栓的作用，它能抑制血小板的釋放反應(yīng)，抑制血小板的聚集，這與TXA2生成的減少有關(guān)。 臨床上用于預(yù)防心腦血管疾病的發(fā)作。阿司匹林于1898年上市，近年來發(fā)現(xiàn)它還具有抗血小板凝聚的作用，于是重新引起了人們極大的興趣。將阿司匹林及其他水楊酸衍生物與聚乙烯醇、醋酸纖維素等含羥基聚合物進行熔融酯化，使其高分子化，所得產(chǎn)物的抗炎性和解熱止痛性比游離的阿司匹林更為長效。根據(jù)文獻記載，都說阿司匹林的發(fā)明人是德國的費利克斯 ?霍夫曼，但這項發(fā)明中，起著非常重要作用的還有一位猶太化學(xué)家阿圖爾?艾興格林。阿圖爾?艾興格林的辛酸故事發(fā)生在1934年至1949年間。1934年，費利克斯?霍夫曼宣稱是他本人發(fā)明了阿司匹林。當時的德國正處在納粹統(tǒng)治的黑暗時期，對猶太人的迫害已經(jīng)愈演愈烈。在這種情況下，狂妄的納粹統(tǒng)治者更不愿意承認阿司匹林的發(fā)明者有猶太人這個事實，于是便將錯就錯把發(fā)明家的桂冠戴到了費利克斯 ?霍夫曼一個人的頭上，為他們的“大日耳曼民族優(yōu)越論”貼金。納粹統(tǒng)治者為了堵住阿圖爾?艾興格林的嘴，還把他關(guān)進了集中營。第二次世界大戰(zhàn)結(jié)束后，大約在1949年前后，阿圖爾?艾興格林又提出這個問題，但不久他就去世了。從此這事便石沉大海。英國醫(yī)學(xué)家、史學(xué)家瓦爾特?斯尼德幾經(jīng)周折獲得德國拜爾公司的特許，查閱了拜爾公司實驗室的全部檔案，終于以確鑿的事實恢復(fù)了這項發(fā)明的歷史真面目。他指出：在阿司匹林的發(fā)明中，阿圖爾?艾興格林功不可沒。事實是在1897年，費利克斯?霍夫曼的確第一次合成了構(gòu)成阿司匹林的主要物質(zhì)，但他是在他的上司一知名的化學(xué)家阿圖爾?艾興格林的指導(dǎo)下，并且完全采用艾興格林提出的技術(shù)路線才獲得成功的。?！境煞帧勘酒窞閺?fù)方制劑，其組分為：“每片含阿司匹林(A)220mg、非那西丁(P)150mg和咖啡因(C)35mg”?！舅幚矶纠怼繛橐粡?fù)方解熱鎮(zhèn)痛藥。其中阿司匹林和非那西丁均具有解熱鎮(zhèn)痛作用，能抑制下丘腦前列腺素的合成和釋放，恢復(fù)體溫調(diào)節(jié)中樞感受神經(jīng)元的正常反應(yīng)性而起退熱鎮(zhèn)痛作用；阿司匹林還通過抑制外周前列腺素等的合成起鎮(zhèn)痛、抗炎和抗風(fēng)濕作用，阿司匹林還有抑制血小板聚集作用?？Х纫驗橹袠猩窠?jīng)興奮藥，能興奮大腦皮層，提高對外界的感應(yīng)性，并有收縮腦血管，加強前兩藥緩解頭痛的效果。急性毒性試驗結(jié)果：大鼠經(jīng)口LD50為1500mg/kg；小鼠經(jīng)口LD50為1100mg/kg。研究現(xiàn)狀：本藥臨床可用于下列情況。

可緩解輕度或中度的疼痛，如頭痛、牙痛、神經(jīng)痛、肌肉痛及月經(jīng)痛，也用于感冒、流感等退熱。本品僅能緩解癥狀，不能治療引起疼痛、發(fā)熱的病因，故需同時應(yīng)用其他藥物參因治療。■消炎、抗風(fēng)濕阿司匹林為治療風(fēng)濕熱的首選藥物，用藥后可解熱、減輕炎癥，使關(guān)節(jié)癥狀好轉(zhuǎn)，血沉下降，但不能去除風(fēng)濕的基本病理改變，也不能預(yù)防心臟損害及其他合并癥。如已有明顯心肌炎，一般都主張先用腎上腺皮質(zhì)激素，在風(fēng)濕癥狀控制之后、停用激素之前，加用本品治療，以減少停用激素后引起的反跳現(xiàn)象。■關(guān)節(jié)炎除風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎外，本品也用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，可改善癥狀，為進一步治療創(chuàng)造條件此外，本品用于骨關(guān)節(jié)炎、強直性脊椎炎、幼年型關(guān)節(jié)炎以及其他非風(fēng)濕性炎癥的骨骼肌肉疼痛，也能緩解癥狀。■抗血栓本品對血小板聚集有抑制作用，阻止血栓形成，臨床可用于預(yù)防暫時性腦缺血發(fā)作、心肌梗塞、心房顫動、人工心臟瓣膜、動靜脈瘺或其他手術(shù)后的血栓形成。也可用于治療不穩(wěn)定型心絞痛。正文■皮膚粘膜淋巴結(jié)綜合癥（川崎?。┗即ㄆ椴〉幕純簯?yīng)用阿斯匹林，目的是減少炎癥反應(yīng)和預(yù)防血管內(nèi)血栓的形成我們該怎么做：藥品雖能治病，亦能致病，我們應(yīng)當充分了解藥品的用法及用量，以免導(dǎo)致藥物中毒。正文結(jié)果與討論現(xiàn)在我們從市場上買回了復(fù)方阿司匹林，也知道了正品復(fù)方阿司匹林的有效成分。但手上的藥品真的是含有上述成分？或者說，手上的藥品是真藥還是假藥？對此，我們展開了一系列的討論。我們一致認為，可通過層析法將藥片中各組分分離，然后和實驗室中制得的較純的成分進行比較。因為薄層色譜法（TLC法）較簡單，易操作，故采用此法。因此我們要進行咖啡因的提取及TLC對APC各組分的分離至兩個實驗。實驗一、咖啡因的提取實驗?zāi)康耐ㄟ^從茶葉中提取咖啡因，掌握一種從天然產(chǎn)物中提取純有機物的方法。學(xué)習(xí)使用索氏提取器的原理和方法。學(xué)習(xí)升華的基本操作。實驗原理茶葉中含有多種生物堿，其中以咖啡堿（即咖啡因）為主，約占1?5%。咖啡因化學(xué)名稱：1,3,7-三甲基-2,6-二氧嘌呤，屬黃嘌呤衍生物。弱堿性化合物，味苦，能溶于氯仿、水、乙醇中含結(jié)晶水時為白色針狀結(jié)晶，在 100°C時失去結(jié)晶水，并開始升華，在120?178C時升華迅速。其分子式為C8H10N402。制藥工業(yè)多用合成方法來制取咖啡因。本實驗是用索氏提取器提取，通過回流，用乙醇提取出茶葉中的咖啡因，然后蒸餾

去大部分乙醇，最后利用升華得到咖啡因晶體。C?主要試劑及產(chǎn)物的物理常數(shù)名稱性狀分子量密度熔點沸點溶解度咖啡因caffeine白色針狀結(jié)晶194.201.23238易溶于熱水和大多數(shù)有機溶劑，難溶于石油醚。乙醇ethylalcohol;ethanol無色透明易揮發(fā)和易燃液體46.070.7893-117.378.4溶于水，甲醇、乙醚和氯仿。D.實驗步驟IWI稱取、研細茶葉）95%乙醇裝置加熱虹吸完抽提液（如圖）回流抽提停止加熱蒸餾F蒸餾F1剩余液趁熱倒入蒸發(fā)皿回收乙醇1蓋上濾紙和漏斗（如圖）粉狀物焙炒⑦1_'一-取樣定性檢驗加入生石灰粉蒸氣浴蒸干去水分升華⑧ 冷卻咖啡因E.粗產(chǎn)品的純化流程咖啡因、丹寧酸、色素、纖維素、蛋白

質(zhì)、葉綠素、水乙醇，水咖啡因，丹寧酸，色壷，葉綠壷，少量水，乙醇乙醇，水咖啡因，丹寧酸，色壷，葉綠壷，少量水，乙醇生石灰紛(除去水，中和酸)Ca(OH)2咖啡因丹寧酸鈣色素葉綠素殘渣 純的咖啡因F?實驗步驟及現(xiàn)象記錄實驗操作實驗現(xiàn)象備注稱取茶葉粉15g，加入95%乙醇，加熱萃取。提取液逐漸變成淡淡的青綠色，燒瓶內(nèi)的溶液顏色逐漸變深。使用的裝置為索氏提取器，見附圖。卸下萃取裝置，換上蒸餾裝置。將大部分乙醇蒸出，只留大約5ml提取液。提取液進一步濃縮，顏色加深，同時有大量乙醇流入接收瓶。乙醇進行回收。趁熱將剩余液倒入蒸發(fā)皿，加入生石灰，邊烘邊攪拌，烘干成干爽的粉末。剩余液變成漿狀，再變成塊狀，并且有濃濃的茶香。蓋上事先做好的穿孔的濾紙，再蓋上塞有棉花的漏斗，觀察咖啡因的升華。有濃濃的茶香，濾紙孔上結(jié)有較多的白色針狀晶體。溫度不要太高，漏斗內(nèi)壁不留水分。使用的裝置見附圖。G.產(chǎn)品重量：0.2g產(chǎn)率：0.2/15*100%=1.33%二.TLC對APC各組分的分離A■實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)色譜法的概念。掌握薄層色譜法的原理及應(yīng)用B.實驗原理

利用待分離混合物中的各組分在某一物質(zhì)(固定相)中的親和性差異，如吸附性差異、溶解性等，讓混合物溶液(流動相)流經(jīng)固定相，使混合物在流動相和固定相之間進行反復(fù)吸附或分配等作用，從而使混合物中的各組分得以分離。C■主要試劑及產(chǎn)物的物理常數(shù)表化合物Rf值久C■主要試劑及產(chǎn)物的物理常數(shù)表化合物Rf值久max熔點(°C)阿司匹林0.81276135-138非那西丁0.60249134-136咖啡因0.30273234-237展開劑：OCOCH33阿司匹林(A)結(jié)構(gòu)式 非那西丁(P)結(jié)構(gòu)式苯：乙醚：冰醋酸：甲醇=120:60:18:1D■實驗步驟制備咖啡因的樣品液及復(fù)方阿司匹林的樣品液制備展開劑。點樣，展開，顯色鑒定。F.實驗操作及現(xiàn)象記錄實驗操作實驗現(xiàn)象備注用毛細吸管粘上一些咖啡因，輕輕接觸吸有少量二氯甲烷溶液的吸管口即可。復(fù)方APC藥片研細，加同樣的試劑溶解、分液、過濾。藥品溶解，溶液無色?？Х纫驗樽灾频?。按照比例配好展開劑展開劑帶有油狀。展開劑有較大的揮發(fā)性。點樣，置于展開劑中展開，一段時間后顯色鑒定。用紫外燈照射，層析板上有橘紅色斑點。點樣時要注意量度。G確定組分圖5?各組分展開結(jié)果通過Rf圖5?各組分展開結(jié)果d阿司匹林d咖啡因dAPC(A)dAPC(P)dAPC(C)D2.451.051.051.982.453.10根據(jù)所得的實驗數(shù)據(jù)，確定鎮(zhèn)痛藥APC的成分。單位：cmRf咖啡因=d(C)/D=1.05/3.10=0.34Rf阿司匹林=d(A)/D=2.45/3.10=0.79復(fù)方APC：Rf(C)=1.05/3.10=0.34Rf(P)=1.98/3.10=0.64Rf(A)=2.45/3.10=0.79通過Rf值的比較，可知手上的藥物復(fù)方阿司匹林含有所要求成分及劑量，已經(jīng)符合列表的要求。結(jié)論通過數(shù)據(jù)的比較，我們很容易的發(fā)現(xiàn)了，復(fù)方阿司匹林各組分的Rf值與實驗室內(nèi)制得的

較純的組分的Rf值基本一致，且與列表提供的數(shù)據(jù)也基本一致。因此，我們可以斷定：我們手上的復(fù)方阿司匹林是正品。致謝化學(xué)化工學(xué)院陳國