串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測項(xiàng)目介紹(可科內(nèi)會用)課件

串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測項(xiàng)目介紹

劉貞

——金域檢驗(yàn)

2010年3月

串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測目錄第一部分

：遺傳代謝病的介紹遺傳代謝病的定義遺傳代謝病的發(fā)病機(jī)制遺傳代謝病的臨床危害遺傳代謝病的臨床特點(diǎn)第二部分：串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在遺傳代謝病檢測中的應(yīng)用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)簡介串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)如何應(yīng)用于遺傳代謝病的檢測目錄第一部分：一、遺傳代謝病的定義

遺傳代謝?。↖nheritedMetabolicDisorders，英文縮寫IMD）是因維持機(jī)體正常代謝所必需的某些由多肽和（或）蛋白組成的酶、受體、載體及膜泵等生物合成發(fā)生遺傳缺陷而導(dǎo)致的疾病，多為單基因遺傳病，包括氨基酸、有機(jī)酸、脂肪酸等先天性的代謝缺陷。遺傳代謝病病種繁多，醫(yī)學(xué)界目前已發(fā)現(xiàn)近1000種單病發(fā)病率低，但總體發(fā)病率可達(dá)活產(chǎn)嬰兒的1／500；一、遺傳代謝病的定義遺傳代謝病（Inh二、遺傳代謝病的發(fā)病機(jī)制二、遺傳代謝病的發(fā)病機(jī)制遺傳代謝病發(fā)病機(jī)制之PKU遺傳代謝病發(fā)病機(jī)制之PKU三、遺傳代謝病的臨床危害

三、遺傳代謝病的臨床危害遺傳代謝病的臨床危害常見臨床癥狀具體描述神經(jīng)系統(tǒng)異常發(fā)育異常/倒退、智低、驚厥、共濟(jì)失調(diào)、椎體外系運(yùn)動障礙等，是遺傳代謝病最常見的臨床癥狀代謝性酸中毒表現(xiàn)為嗜睡，喂養(yǎng)困難，發(fā)作性嘔吐，呼吸異常等；嚴(yán)重嘔吐常與進(jìn)食蛋白質(zhì)有關(guān)，常見于氨基酸病、有機(jī)酸代謝病等肝臟腫大或功能不全見于糖原病、半乳糖血癥、粘多糖病、肝豆?fàn)詈俗冃缘忍厥鈿馕度纭笆竽蛭丁保≒KU，尿、汗排出苯乙酸增多）；“楓糖漿味”（楓糖尿癥）等，主要見于氨基酸和有機(jī)酸代謝異常皮膚和毛發(fā)異常如色素減少（苯丙酮尿癥、白化病、同型胱氨酸尿癥等），皮膚粘膜色素加深（腎上腺腦白質(zhì)營養(yǎng)不良）；脫發(fā)（多種羧化酶缺乏）等遺傳代謝病的臨床危害常見臨床癥狀具體描述神經(jīng)系統(tǒng)異常發(fā)育異常四、遺傳代謝病的臨床特點(diǎn)

四、遺傳代謝病的臨床特點(diǎn)

沒有癥狀之前的篩查性檢測新生兒遺傳代謝病的實(shí)驗(yàn)室檢測0～3個月3～12個月一歲以后蓄積期常無異常多數(shù)在此階段發(fā)病亦有發(fā)病對臨床疑似患者的診斷性檢測高危新生兒、嬰幼兒、兒童少年等世界上最先近的IMD檢測技術(shù)——串聯(lián)質(zhì)譜沒有癥狀之前的篩查性檢測遺傳代謝病的實(shí)驗(yàn)室檢測0第二部分：串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在遺傳代謝病檢測中的應(yīng)用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)簡介串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)如何應(yīng)用于遺傳代謝病的檢測第二部分：一、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)簡介

（tandemmassspectrometry，MS/MS)質(zhì)譜儀：通過檢測物質(zhì)的質(zhì)量與電荷比(m/z)，對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析儀器。MS/MS：

由2個質(zhì)譜儀經(jīng)1個碰撞室串聯(lián)而成。一、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)簡介（tandemmassspectro串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在臨床上的應(yīng)用范圍

新生兒遺傳代謝疾病篩查臨床疑似遺傳代謝病檢測

氨基酸營養(yǎng)評價脂肪酸氧化代謝評價維生素D檢測類固醇激素譜膽固醇譜溶酶體活性琥珀酸丙酮美國、加拿大、英國、德國、澳大利亞、日本、韓國、臺灣已成為國家法定的新生兒疾病技術(shù)上海、杭州為本市新生兒免費(fèi)開展串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病的檢測國內(nèi)掌握串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)不多，集中在北京、上海、廣州、武漢、杭州幾個城市金域檢驗(yàn)，2009年引進(jìn)串聯(lián)質(zhì)譜儀，成為國內(nèi)唯一一家掌握串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的第三方醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在臨床上的應(yīng)用范圍新生兒遺傳代謝疾病篩查美國、二、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)如何應(yīng)用于遺傳代謝病的檢測1、對體內(nèi)數(shù)十個代謝物質(zhì)進(jìn)行定性定量檢測，分析機(jī)體代謝狀態(tài)及其變異。（檢測A、B、C等物質(zhì)）2、進(jìn)行氨基酸、有機(jī)酸、脂肪酸、游離肉堿和酰基肉堿代謝評價，綜合判斷40余種遺傳代謝病的發(fā)病情況。

串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)為什么能檢測遺傳代謝??？二、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)如何應(yīng)用于遺傳代謝病的檢測1、對體內(nèi)數(shù)十個代結(jié)果評價

各指標(biāo)值串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測流程結(jié)果評價各指標(biāo)值串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測流程

新生兒（出生48h后）或臨床疑似者采血，制作濾紙干血片送實(shí)驗(yàn)室檢測

40余種IMD陰陽性結(jié)果報(bào)告（5個工作日）串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測流程串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測流程

標(biāo)本的采集1、確定采血部位2、按摩或熱敷采血部位3、消毒并拭干采血部位4、針刺采血，拭去第一滴血5、單面輕壓濾紙，取血浸透點(diǎn)樣環(huán)6、按采血卡要求連續(xù)采血說明：新生兒以外的對象可以是手指末梢血、靜脈血制成的濾紙干血片標(biāo)本標(biāo)本的采集1、確定采血部位2、按摩或熱敷采血部位3串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測的參數(shù)

氨基酸（22項(xiàng)）酰基肉堿（共43項(xiàng)）通過計(jì)算的指標(biāo)（35）丙氨酸(Ala)游離肉堿(C0)Arg/Orn精氨酸(Arg)乙?；鈮A(C2)Cit/Arg天冬氨酸(Asp)丙?；鈮A(C3)Orn/Cit瓜氨酸(Cit)丙二?；鈮A(C3DC)Met/Phe谷氨酸(Glu)丁?；鈮A(C4)Leu/Phe甘氨酸(Gly)丁二酰基肉堿(C4DC)……亮氨酸(Leu)異戊?；鈮A(C5)C3/C2甲硫氨酸(Met)3-羥基異戊?；鈮A(C5-OH)C3DC/C2鳥氨酸(Orn)異戊烯酰基肉堿(C5:1)C4/C2苯丙氨酸(Phe)戊二?；鈮A(C5DC)C4-OH/C2酪氨酸(Tyr)己酰基肉堿(C6)C5/C2………………串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測的參數(shù)氨基酸（22項(xiàng)）?；鈮A（共串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測的遺傳代謝病病種及對應(yīng)指標(biāo)

遺傳代謝病病種對應(yīng)的串聯(lián)質(zhì)譜檢測參數(shù)18種氨基酸代謝癥：

高苯丙氨酸血癥Phe，Phe/Tyr酪氨酸血癥I、II、III型Tyr，Met楓糖尿病Leu,Val

瓜氨酸血癥-ICit

瓜氨酸血癥II型Cit,Met,Tyr,Ser,Thr……………………14種有機(jī)酸血癥：

甲基丙二酸血癥C3,C3/C2丙酸血癥

C3,C3/C2異戊酸血癥C5,C5/C2……………………14種脂肪酸氧化缺陷疾病：

肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)障礙

C0降低肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶缺乏癥

I型C0肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶缺乏癥II型C16,C18,C14,C12……………………串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測的遺傳代謝病病種及對應(yīng)指標(biāo)遺傳代謝遺傳代謝病的治療原則

減少蓄積補(bǔ)充需要促進(jìn)排泄遺傳代謝病的治療原則治療手段舉例遺傳代謝病治療手段1．飲食治療——限制前驅(qū)物的攝人苯丙酮尿癥低苯丙氨酸飲食楓糖尿癥低支鏈氨基酸飲食高氨血癥低蛋白、高熱量飲食半乳糖血癥無乳糖、無半乳糖飲食家族性高膽固醇血癥限制膽固醇飲食有機(jī)酸血癥低蛋白、高熱量飲食脂肪酸代謝病低脂肪飲食，預(yù)防饑餓2．藥物——補(bǔ)充缺乏物質(zhì)或輔酶，促進(jìn)蓄積物的排泄四氫生物蝶呤缺乏癥四氫生物蝶呤、5羥色氨酸、左旋多巴酪氨酸血癥-1型尼體西農(nóng)甲基丙二酸血癥(維生素BI2反應(yīng)型)維生素Bl2肝豆?fàn)詈俗冃訢—青霉胺3．糾正酶缺陷、基因治療高雪氏病骨髓移植、酶替代治療等部分氨基酸、有機(jī)酸代謝異常肝移植治療手段舉例遺傳代謝病治療手段1．飲食治療——限制前驅(qū)物的攝謝謝！

謝謝！串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測項(xiàng)目介紹

劉貞

——金域檢驗(yàn)

2010年3月

串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測目錄第一部分

：遺傳代謝病的介紹遺傳代謝病的定義遺傳代謝病的發(fā)病機(jī)制遺傳代謝病的臨床危害遺傳代謝病的臨床特點(diǎn)第二部分：串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在遺傳代謝病檢測中的應(yīng)用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)簡介串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)如何應(yīng)用于遺傳代謝病的檢測目錄第一部分：一、遺傳代謝病的定義

遺傳代謝病（InheritedMetabolicDisorders，英文縮寫IMD）是因維持機(jī)體正常代謝所必需的某些由多肽和（或）蛋白組成的酶、受體、載體及膜泵等生物合成發(fā)生遺傳缺陷而導(dǎo)致的疾病，多為單基因遺傳病，包括氨基酸、有機(jī)酸、脂肪酸等先天性的代謝缺陷。遺傳代謝病病種繁多，醫(yī)學(xué)界目前已發(fā)現(xiàn)近1000種單病發(fā)病率低，但總體發(fā)病率可達(dá)活產(chǎn)嬰兒的1／500；一、遺傳代謝病的定義遺傳代謝病（Inh二、遺傳代謝病的發(fā)病機(jī)制二、遺傳代謝病的發(fā)病機(jī)制遺傳代謝病發(fā)病機(jī)制之PKU遺傳代謝病發(fā)病機(jī)制之PKU三、遺傳代謝病的臨床危害

三、遺傳代謝病的臨床危害遺傳代謝病的臨床危害常見臨床癥狀具體描述神經(jīng)系統(tǒng)異常發(fā)育異常/倒退、智低、驚厥、共濟(jì)失調(diào)、椎體外系運(yùn)動障礙等，是遺傳代謝病最常見的臨床癥狀代謝性酸中毒表現(xiàn)為嗜睡，喂養(yǎng)困難，發(fā)作性嘔吐，呼吸異常等；嚴(yán)重嘔吐常與進(jìn)食蛋白質(zhì)有關(guān)，常見于氨基酸病、有機(jī)酸代謝病等肝臟腫大或功能不全見于糖原病、半乳糖血癥、粘多糖病、肝豆?fàn)詈俗冃缘忍厥鈿馕度纭笆竽蛭丁保≒KU，尿、汗排出苯乙酸增多）；“楓糖漿味”（楓糖尿癥）等，主要見于氨基酸和有機(jī)酸代謝異常皮膚和毛發(fā)異常如色素減少（苯丙酮尿癥、白化病、同型胱氨酸尿癥等），皮膚粘膜色素加深（腎上腺腦白質(zhì)營養(yǎng)不良）；脫發(fā)（多種羧化酶缺乏）等遺傳代謝病的臨床危害常見臨床癥狀具體描述神經(jīng)系統(tǒng)異常發(fā)育異常四、遺傳代謝病的臨床特點(diǎn)

四、遺傳代謝病的臨床特點(diǎn)

沒有癥狀之前的篩查性檢測新生兒遺傳代謝病的實(shí)驗(yàn)室檢測0～3個月3～12個月一歲以后蓄積期常無異常多數(shù)在此階段發(fā)病亦有發(fā)病對臨床疑似患者的診斷性檢測高危新生兒、嬰幼兒、兒童少年等世界上最先近的IMD檢測技術(shù)——串聯(lián)質(zhì)譜沒有癥狀之前的篩查性檢測遺傳代謝病的實(shí)驗(yàn)室檢測0第二部分：串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在遺傳代謝病檢測中的應(yīng)用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)簡介串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)如何應(yīng)用于遺傳代謝病的檢測第二部分：一、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)簡介

（tandemmassspectrometry，MS/MS)質(zhì)譜儀：通過檢測物質(zhì)的質(zhì)量與電荷比(m/z)，對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析儀器。MS/MS：

由2個質(zhì)譜儀經(jīng)1個碰撞室串聯(lián)而成。一、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)簡介（tandemmassspectro串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在臨床上的應(yīng)用范圍

新生兒遺傳代謝疾病篩查臨床疑似遺傳代謝病檢測

氨基酸營養(yǎng)評價脂肪酸氧化代謝評價維生素D檢測類固醇激素譜膽固醇譜溶酶體活性琥珀酸丙酮美國、加拿大、英國、德國、澳大利亞、日本、韓國、臺灣已成為國家法定的新生兒疾病技術(shù)上海、杭州為本市新生兒免費(fèi)開展串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病的檢測國內(nèi)掌握串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)不多，集中在北京、上海、廣州、武漢、杭州幾個城市金域檢驗(yàn)，2009年引進(jìn)串聯(lián)質(zhì)譜儀，成為國內(nèi)唯一一家掌握串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的第三方醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在臨床上的應(yīng)用范圍新生兒遺傳代謝疾病篩查美國、二、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)如何應(yīng)用于遺傳代謝病的檢測1、對體內(nèi)數(shù)十個代謝物質(zhì)進(jìn)行定性定量檢測，分析機(jī)體代謝狀態(tài)及其變異。（檢測A、B、C等物質(zhì)）2、進(jìn)行氨基酸、有機(jī)酸、脂肪酸、游離肉堿和?；鈮A代謝評價，綜合判斷40余種遺傳代謝病的發(fā)病情況。

串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)為什么能檢測遺傳代謝病？二、串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)如何應(yīng)用于遺傳代謝病的檢測1、對體內(nèi)數(shù)十個代結(jié)果評價

各指標(biāo)值串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測流程結(jié)果評價各指標(biāo)值串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測流程

新生兒（出生48h后）或臨床疑似者采血，制作濾紙干血片送實(shí)驗(yàn)室檢測

40余種IMD陰陽性結(jié)果報(bào)告（5個工作日）串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測流程串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病檢測流程

標(biāo)本的采集1、確定采血部位2、按摩或熱敷采血部位3、消毒并拭干采血部位4、針刺采血，拭去第一滴血5、單面輕壓濾紙，取血浸透點(diǎn)樣環(huán)6、按采血卡要求連續(xù)采血說明：新生兒以外的對象可以是手指末梢血、靜脈血制成的濾紙干血片標(biāo)本標(biāo)本的采集1、確定采血部位2、按摩或熱敷采血部位3串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測的參數(shù)

氨基酸（22項(xiàng)）?；鈮A（共43項(xiàng)）通過計(jì)算的指標(biāo)（35）丙氨酸(Ala)游離肉堿(C0)Arg/Orn精氨酸(Arg)乙?；鈮A(C2)Cit/Arg天冬氨酸(Asp)丙酰基肉堿(C3)Orn/Cit瓜氨酸(Cit)丙二?；鈮A(C3DC)Met/Phe谷氨酸(Glu)丁酰基肉堿(C4)Leu/Phe甘氨酸(Gly)丁二?；鈮A(C4DC)……亮氨酸(Leu)異戊?；鈮A(C5)C3/C2甲硫氨酸(Met)3-羥基異戊?；鈮A(C5-OH)C3DC/C2鳥氨酸(Orn)異戊烯?；鈮A(C5:1)C4/C2苯丙氨酸(Phe)戊二?；鈮A(C5DC)C4-OH/C2酪氨酸(Tyr)己?；鈮A(C6)C5/C2………………串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測的參數(shù)氨基酸（22項(xiàng)）?；鈮A（共串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測的遺傳代謝病病種及對應(yīng)指標(biāo)

遺傳代謝病病種對應(yīng)的串聯(lián)質(zhì)譜檢測參數(shù)18種氨基酸代謝癥：

高苯丙