細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件

支原體、衣原體、立克次體

主講老師：江振友

支原體、衣原體、立克次體

主講老師：江振友1支原體屬和脲原體屬

支原體屬和脲原體屬2支原體（Mycoplasma）

1.能在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)2.能獨(dú)立生活3.最小原核細(xì)胞型微生物4.無(wú)細(xì)胞壁5.二分裂繁殖

6.多形態(tài)性,“油煎蛋樣”菌落支原體（Mycoplasma）1.能在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)3分類

柔膜體綱(Mollicutes)支原體目(MycoPlasmatales)下分3個(gè)科：①支原體科（MycoPlasmataceae）；2個(gè)屬:支原體（Mycoplasma）脲原體（Ureaplasma）②無(wú)膽甾原體科（Acholeplasma-taceae），生長(zhǎng)時(shí)不需要外源性膽固醇；③螺原體科（Spiroplasmataceae），生長(zhǎng)至一定階段呈螺形。分類柔膜體綱(Mollicutes)4人體分離:20種，其中8種是致病或條件致病菌:肺炎支原體(M.pneumoniae,Mpn)生殖支原體(M.geuitalium,Mg)人型支原體(M.hominis,Mh)發(fā)酵支原體(M.fermentants,Mf)穿透支原體(M.penetrans,Mpe)梨支原體(M.pirum,Mpi)關(guān)節(jié)炎支原體(M.arthritidis,Mart)

解脲脲原體(U.urealyticum,Uu)

人體分離:20種，5支原體與細(xì)菌L型比較性狀支原體細(xì)菌L型濾過(guò)性有有細(xì)胞壁無(wú)無(wú)油煎蛋狀菌落形成形成對(duì)青霉素抵抗抵抗對(duì)膽固醇需要生長(zhǎng)需要不一定需要來(lái)源自然界、人與動(dòng)物由細(xì)菌在環(huán)境條件下誘導(dǎo)形成回復(fù)變成細(xì)菌不能能遺傳性與細(xì)菌無(wú)關(guān)與原細(xì)菌相同支原體與細(xì)菌L型比較性狀支原體細(xì)菌L型濾過(guò)性有有細(xì)胞壁無(wú)無(wú)油6肺炎支原體形態(tài)與結(jié)構(gòu)

大小:可通過(guò)濾器,光鏡下可觀察細(xì)胞壁:無(wú)形態(tài):球形、球桿形、分枝絲狀或念珠狀等細(xì)胞膜:三層:1.蛋白質(zhì)2.脂質(zhì)(膽固醇較多)3.蛋白質(zhì)染色:姬姆薩染色法:淡紫色或藍(lán)色核酸:二種(DNA和RNA)肺炎支原體形態(tài)與結(jié)構(gòu)7細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件8細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件9生長(zhǎng)繁殖繁殖方式:二分裂方式球體延伸、分節(jié)斷裂、出芽、分枝繁殖周期:3小時(shí)營(yíng)養(yǎng)要求:較高,含動(dòng)物血清、酵母浸液酸堿度:pH7.8～8．0氣體環(huán)境:5％CO2或5％CO2與95％N2溫度與時(shí)間:37℃,3d～10d菌落特征:“油煎蛋”狀菌落生長(zhǎng)繁殖繁殖方式:10細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件11表25—2支原體與脲原體的某些生物學(xué)特性

表25—212抗原構(gòu)造主要抗原成分:1.蛋白質(zhì)P1蛋白抗原:表面抗原致病:粘附2.脂質(zhì)中的糖脂抗體:產(chǎn)生補(bǔ)體結(jié)合抗體生長(zhǎng)抑制抗體代謝抑制抗體抗原構(gòu)造主要抗原成分:13抵抗力理化因素:比細(xì)菌敏感(因無(wú)細(xì)胞壁)熱:弱,50℃經(jīng)30min死亡－20℃可長(zhǎng)期保存耐堿酸和有機(jī)溶劑:較敏感(消毒劑、清潔劑)四環(huán)素族、紅霉素、卡那霉素、氯霉素:敏感青霉素:不敏感抵抗力理化因素:比細(xì)菌敏感(因無(wú)細(xì)胞壁)14致病性外源性感染上呼吸道感染:感冒、咽炎、氣管炎支原體性肺炎（Mycoplasmalpneumonia）(原發(fā)性非典型肺炎)（primaryatypicalpneumonia）臨床表現(xiàn)和胸部X線:肺炎鏈球菌引起的典型肺炎不同類似病毒性肺炎致病性外源性感染15世界各地,密集人群,兒童及青少年多見(jiàn)秋冬季發(fā)病率高,每隔3～5年出現(xiàn)一次流行飛沫傳播潛伏期2W～3W,感染起病緩慢臨床主要癥狀:發(fā)熱（約39℃）、頭痛、持續(xù)性頑固咳嗽、胸痛等。病人帶菌、排菌狀態(tài)可持續(xù)6W～8W肺外合并癥（神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及心臟等）發(fā)病率高，嚴(yán)重者可致死致病性:粘附是先決條件也和超敏反應(yīng)有關(guān)(共同抗原)世界各地,密集人群,兒童及青少年多見(jiàn)16免疫性抗體：多種(CF抗體、生長(zhǎng)抑制抗體、殺支原體抗體等)呼吸道sIgA:有一定作用非特異冷凝集素:1.和自身免疫有關(guān)2.患者陽(yáng)性率為50％，常用于輔助診斷。

免疫性抗體：多種(CF抗體、生長(zhǎng)抑制抗體、17微生物學(xué)檢查法病原分離特異核酸的檢測(cè)血清學(xué)診斷抗原檢測(cè)冷凝集試驗(yàn)微生物學(xué)檢查法病原分離18病原分離標(biāo)本：咽拭子或痰液培養(yǎng)基：雙相培養(yǎng)基（含馬血清、酵母浸液）

SP-4培養(yǎng)基（提高分離率30％～40％）氣體環(huán)境：5％～10％CO2溫度與時(shí)間：37℃，l～2W可疑菌落：1.糖發(fā)酵2.溶血性3.血細(xì)胞吸附4.特異抗血清生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)等

病原分離標(biāo)本：咽拭子或痰液19特異核酸的檢測(cè)（1）聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)：優(yōu)點(diǎn)：特異性好敏感性高快速、簡(jiǎn)便靶基因：16SRNA基因P1蛋白基因方法：套式PCR(nPCR)復(fù)合PCR限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(RFLP)隨機(jī)引物PCR(RAPD)（2）基因探針根據(jù)堿基嚴(yán)格互補(bǔ)配對(duì)的特性特異性強(qiáng)，敏感性不如PCR技術(shù)特異核酸的檢測(cè)（1）聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)：20血清學(xué)診斷

（1）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）：雙份抗體效價(jià)升高4倍以上診斷（2）間接血凝試驗(yàn)（IHA）：測(cè)抗體,2—3周高峰（3）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)：測(cè)IgM、IgG和IgA敏感性高（4）間接免疫熒光試驗(yàn)：檢測(cè)IgM、IgG特異性較強(qiáng)血清學(xué)診斷（1）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）：21抗原檢測(cè)

方法1:間接法或直接法抗體:熒光標(biāo)記多克隆抗體或單克隆抗體檢測(cè)標(biāo)本:呼吸道分泌物中抗原86%可陽(yáng)性方法2:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本:呼吸道分泌物中抗原可檢出105CFU/ml方法3:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)捕獲法抗體:抗P1單克隆抗體檢測(cè)標(biāo)本:P1蛋白可檢出104CFU/ml特異性強(qiáng),3小時(shí)即可抗原檢測(cè)方法1:間接法或直接法22冷凝集試驗(yàn)輔助診斷非典型肺炎針對(duì)紅細(xì)胞膜Ⅰ抗原冷凝集素屬IgM5d～10d出現(xiàn)，2W～3W高峰輔助診斷效價(jià):64～128倍以上雙份效價(jià)升高4倍以上特異性和敏感性較低冷凝集試驗(yàn)輔助診斷非典型肺炎23防

冶藥物:四環(huán)素類(近年來(lái)耐藥性增加)大環(huán)內(nèi)酯類:首選(紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素)喹諾酮類疫苗:減毒活疫苗基因工程疫苗防冶藥物:四環(huán)素類(近年來(lái)耐藥性增加)24其它支原體寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜屬于正常菌群,引起條件性感染口腔支原體:慢性呼吸道感染唾液支原體:齒槽溢膿生殖支原體:生殖道、呼吸道和關(guān)節(jié)腔的炎癥,流產(chǎn)、早產(chǎn)和新生兒肺炎發(fā)酵支原體:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎AIDS相關(guān)(分離率明顯升高)人型支原體:滲出性咽炎、非淋菌性尿道炎

(nongonococcalurithritis,NGU),卵巢膿腫、產(chǎn)褥敗血癥其它支原體寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜25脲原體屬(Ureaplasma)

從支原體分出的獨(dú)立的新屬正常菌群:絕大多數(shù)有致病性:解脲脲原體（U.urealyticum,Uu)

1954年從NGU患者的病灶處分離類似肺炎支原體能水解尿素脲原體屬(Ureaplasma)從支原體分出的獨(dú)立26生物學(xué)性狀

形態(tài):圓形或球桿狀染色:革蘭染色陰性溫度和酸堿度:37℃,pH6.0菌落:很小(15μm～60μm,放大200倍),稱T株（Tinycolonystrain）敏感性:敏感:四環(huán)素、氯霉素、慶大霉素、卡那霉素、0.05%醋酸鉈、125μg/ml5-碘-2’脫氧尿苷不敏感:青霉素生化特性:水解尿素產(chǎn)氨生物學(xué)性狀形態(tài):圓形或球桿狀27細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件28致病性

存在:人和動(dòng)物的口腔、呼吸道、泌尿生殖道血清型:解脲脲原體(Uu)有14個(gè)血清型傳播途徑:性接觸傳播、母嬰傳播所致疾病(STD)泌尿生殖道感染:NGU、盆腔感染、宮頸炎、陰道炎、輸卵管炎、慢性前列腺炎、附睪炎、男女不孕癥、反復(fù)流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎新生兒疾病:呼吸道病變、肺炎、腦膜炎致病性存在:人和動(dòng)物的口腔、呼吸道、29引起男性不孕的原因：①Uu吸附于精子表面，使其運(yùn)動(dòng)受阻，并蔽蓋了精子識(shí)別卵細(xì)胞的部位②Uu產(chǎn)生神經(jīng)氨酸樣物質(zhì)，干擾精子與卵細(xì)胞結(jié)合。③Uu與精子膜有共同抗原，從而產(chǎn)生抗精子抗體引起男性不孕的原因：30

立克次體屬和巴爾通體屬

立克次體屬和巴爾通體屬31立克次體屬立克次體特征：①比細(xì)菌小,能通過(guò)濾器,光鏡可見(jiàn)②以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介,有儲(chǔ)存宿主③專性細(xì)胞內(nèi)寄生(胞漿內(nèi)),原核細(xì)胞微生物④二分裂繁殖⑤有兩種核酸(DNA和RNA)，酶系統(tǒng)不完整⑥多數(shù)人畜共患⑦對(duì)抗生素敏感所致疾病:發(fā)熱出疹性疾病對(duì)人致病的:立克次體屬東方次體屬埃立克體屬柯克斯體屬立克次體屬立克次體特征：32立克次體分類及其致病情況見(jiàn)表26-1

立克次體分類及其致病情況見(jiàn)表26-133生物學(xué)性狀大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm-2.0μm)形態(tài):類似球桿菌,多形性(球形、啞鈴形、長(zhǎng)桿狀或絲狀等)染色:Giemsa染色法:紫色或藍(lán)色

馬氏染色法(Macchiavellostain):紅色排列:散在于細(xì)胞漿中、核旁成堆(斑點(diǎn)熱立克次體在胞漿或核內(nèi))培養(yǎng):專性細(xì)胞內(nèi)(活細(xì)胞內(nèi))寄生培養(yǎng)方法:雞胚卵黃囊內(nèi)接種組織細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物接種生物學(xué)性狀大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm34抵抗力:

熱、消毒劑:較弱(56℃,數(shù)分鐘,0.5%石碳酸、0.5%來(lái)蘇,75%酒精中數(shù)分鐘)抗生素:敏感:氯霉素和四環(huán)素不敏感:磺胺類低溫、干燥:較強(qiáng)(-20℃或冷凍干燥半年以上)抗原構(gòu)造：群特異性抗原,種特異性外膜抗原外斐反應(yīng)(Weil-Felixreaction):斑疹傷寒等立克次體與變形桿菌某些X菌株有共同的耐熱多糖類抗原。利用這些變形桿菌菌株代替立克次體抗原，進(jìn)行定量非特異凝集反應(yīng)（交叉凝集反應(yīng)），以檢測(cè)人或動(dòng)物血清中的相應(yīng)抗體。協(xié)助診斷斑疹傷寒,恙蟲病,滴度超過(guò)1:160有意義.抵抗力:35致病性傳播方式：普氏立克次體：頭虱和體虱（腸上皮細(xì)胞）人是唯一宿主斑點(diǎn)熱立克次體：第一宿主是蜱（唾液腺）第二宿主是嚙齒類動(dòng)物致病性傳播方式：36致病機(jī)理

過(guò)程:侵入->小血管內(nèi)皮細(xì)胞中繁殖->破壞細(xì)胞->細(xì)胞腫脹、浸潤(rùn)、堵塞血管腔形成血栓->皮膚:斑疹->實(shí)質(zhì)器官:相應(yīng)臨床表現(xiàn)

毒性物質(zhì):內(nèi)毒素

磷脂酶A致病機(jī)理37所致疾病1.流行性斑疹傷寒(epidimictyphus)

不屬于人畜共患病

病原體:普氏立克次體(R.prowazekii)

媒介:人虱宿主:人季節(jié):冬春季癥狀:5～21d潛伏期->高熱、頭痛、肌肉痛等->4～5d:皮疹->神經(jīng)、心血管和其他器官病后免疫:持久,與地方性斑疹傷寒有交叉免疫

所致疾病382.地方性斑疹傷寒(endemictyphus)

(鼠型斑疹傷寒)

屬于人畜共患病病原體:斑疹傷寒立克次體(R.typhus)宿主:鼠為天然貯存宿主傳播方式:鼠蚤或虱->鼠間->人->人虱->人疾病:較輕，緩慢，持續(xù)時(shí)間短，很少侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)病后免疫:持久，并與流行性斑疹傷寒有交叉免疫

2.地方性斑疹傷寒(endemictyphus)

393.恙蟲病(scrubtyphus)

病原體:恙蟲病東方次體(O.tsutsuganushi)傳播:寄生于恙螨體內(nèi)，可經(jīng)卵傳代。人若進(jìn)入恙螨的孳生地，可能受感染(亦稱“叢林熱”)癥狀:10～14d潛伏期->突然高熱，被叮咬處:發(fā)紅,丘疹,水皰,潰瘍，周圍紅暈，上有黑色痂皮，稱為焦痂(特征)。附近的淋巴結(jié)腫大，皮疹。治療拖延肺炎、腦炎、DIC。3.恙蟲病(scrubtyphus)病原體:恙蟲病東方次40微生物學(xué)檢查法

(一)血清學(xué)診斷1.外斐反應(yīng)(非特異性)診斷:立克次體和東方次體效價(jià)在1：160以上，或病程中效價(jià)增長(zhǎng)2.補(bǔ)體結(jié)合(CF)反應(yīng)(特異性)所用抗原:可溶性抗原(群特異抗原)洗滌過(guò)的顆粒抗原(種特異抗原)診斷:斑疹傷寒群、斑點(diǎn)熱群、恙蟲病、Q熱(二)立克次體分離鑒定

動(dòng)物:小鼠(恙蟲病)雄性豚鼠(斑疹傷寒)微生物學(xué)檢查法(一)血清學(xué)診斷41防治原則1.滅虱、滅蚤、滅鼠2.改進(jìn)環(huán)境、個(gè)人衛(wèi)生3.死疫苗4.廣譜抗生素有效

防治原則1.滅虱、滅蚤、滅鼠42巴爾通體屬(Bartonella)

特點(diǎn):1.形態(tài)結(jié)構(gòu)與立克次體相似2.可以人工培養(yǎng)而非嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生模式種:桿狀巴爾通體(B.bacilliformis)巴爾通體屬(Bartonella)特點(diǎn):43生物學(xué)性狀

形狀:1.血涂片:球形、橢圓形或弓形桿狀；單個(gè)或成群,偶見(jiàn)鏈狀2.組織中:內(nèi)皮細(xì)胞原漿中,單體或圓形團(tuán)塊，G-，常用Giemsa或鍍銀染色法。3.培養(yǎng)中:單鞭毛培養(yǎng)條件:1.需氧2.常用10%兔血清和0.5%血紅蛋白的半固體培養(yǎng)基3.可在無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)基中生長(zhǎng)4.28℃-37℃,10d以上生物學(xué)性狀形狀:44致病性

自然宿主:人媒介:節(jié)肢動(dòng)物（疣腫白蛉）所致疾病:1.奧羅亞熱-秘魯疣

(Oroyafever-verrucaperuviana)

病原體:桿狀巴爾通體階段:第1階段:發(fā)熱，貧血(奧羅亞熱)第2階段:以血管損害為基礎(chǔ)的肉芽腫(秘魯疣)診斷方法:1.血涂片2.用半固體培養(yǎng)基分離培養(yǎng)

致病性自然宿主:人452.細(xì)菌性血管瘤(bacillaryangiomatosis)病原體:亨氏巴爾通體(B.henselae)羅卡利馬巴爾通體(B.rochalimaea)

易感人群:免疫力低下（尤其AIDS）病變組織學(xué)特征:毛細(xì)血管增生等(血管瘤)培養(yǎng)基:巧克力色瓊脂含5%兔血的心腦浸汁瓊脂3.貓抓病(cat-scratchdisease)(貓抓熱)病原體:亨氏巴爾通體癥狀:貓抓傷后2w,發(fā)熱,淋巴結(jié)腫大，破潰排膿，亦可頭痛、咽痛或出現(xiàn)結(jié)膜炎特點(diǎn):自限性疾病檢查法:病變組織切片鍍銀染色免疫熒光染色2.細(xì)菌性血管瘤(bacillaryangiomatosi46

衣原體屬

衣原體屬47衣原體（Chamydia）特點(diǎn):1.能通過(guò)細(xì)菌濾器,光鏡下可觀察2.有獨(dú)特發(fā)育周期3.不能人工培養(yǎng),不能獨(dú)立生活,

為專性細(xì)胞內(nèi)寄生4.原核細(xì)胞型和病毒的區(qū)別:

⑴有細(xì)胞結(jié)構(gòu)⑵細(xì)胞壁類似G-⑶兩種類型的核酸(DNA和RNA)⑷有核糖體⑸以二分裂方式繁殖,有獨(dú)特的發(fā)育周期⑹對(duì)多種抗生素敏感(四環(huán)素和紅霉素)衣原體（Chamydia）特點(diǎn):1.能通過(guò)細(xì)菌濾器,光鏡下可48分類存在:人類、哺乳動(dòng)物及禽類體內(nèi)分類依據(jù):1.抗原構(gòu)造2.包涵體糖原的有無(wú)3.對(duì)磺胺類藥物的敏感性分類(4個(gè)種):1.沙眼衣原體（C.trachomatis）（人）亞種（1）沙眼生物變種（Biovartrachoma）14個(gè)血清型（2）性病淋巴肉芽腫變種(Biovar

lymphogranunlomavenereum,LGV)4個(gè)血清型（3）鼠生物變種（Biovarmouse）2.鸚鵡熱衣原體（C.psittaci）（人）3.肺炎衣原體（C.pneumonia）（人）4.家畜衣原體(C.pecorum)

分類存在:人類、哺乳動(dòng)物及禽類體內(nèi)49表27-13種致病性衣原體的比較

表27-13種致病性衣原體的比較50生物學(xué)性狀生活周期包括原體和始體兩階段光鏡下：兩種形態(tài)：

原體（elementarybody）

始體（initialbody）原體（elementarybody）1.形狀：球形，0.2～0.4μm電鏡下：核質(zhì)致密和少量核糖體細(xì)胞壁堅(jiān)韌

存在于細(xì)胞外2.功能:（1）有很強(qiáng)的感染性（吸附）（2）發(fā)育成始體：吸附->被吞噬->胞膜在原體周圍形成空泡->原體在空泡中增大->始體生物學(xué)性狀生活周期包括原體和始體兩階段51始體（initialbody）1.形狀：球形，較原體大(0.8～1.5μm)，無(wú)致密核質(zhì)，有纖細(xì)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)---

也稱為網(wǎng)狀體（reticulatebody）2.發(fā)育周期:原體->->始體->空泡內(nèi)->

二分裂->子代原體->包涵體（inclusionbody）->原體成熟->釋放->再感染(24～48h)(無(wú)細(xì)胞外周期)3.是繁殖型，無(wú)感染性染色：1.Macchiavello染色法或Giemsa染色法原體：紅色或紫色始體：深藍(lán)色2.碘染色法：沙眼衣原體原體：褐色（因包涵體含糖原）始體（initialbody）52細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件53細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件54培養(yǎng)

方法：1.雞胚卵黃囊2.各種傳代細(xì)胞(Hela細(xì)胞,McCog細(xì)胞)3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：某些可感染小鼠

培養(yǎng)時(shí)間：48～72h后觀察：包涵體原體顆粒始體顆粒培養(yǎng)方法：1.雞胚卵黃囊55抗原構(gòu)造

1．屬特異性抗原成分：脂多糖方法：CF試驗(yàn)和IF法2．種特異性抗原成分：外膜蛋白（MOMP）方法：IF法和中和試驗(yàn)(NT)3．血清型特異性抗原成分：MOMP方法：?jiǎn)慰寺】贵w微量免疫試驗(yàn)

血清型:(1)沙眼生物變種:14個(gè)（A-K、Ba、Da,Ia）(2)LGV:4個(gè)(L1、L2、L2a和L3)抗原構(gòu)造1．屬特異性抗原56抵抗力

熱:敏感，60℃10min或37℃48h寒冷：-50℃數(shù)年化學(xué)消毒劑：0.5%石炭酸，24h75%乙醇，半分鐘抗生素：利福平、四環(huán)素、紅霉素、磺胺敏感

青霉素:不敏感抵抗力熱:敏感，60℃10min或37℃57致病機(jī)理

致病物質(zhì)：內(nèi)毒素相似的物質(zhì)致病機(jī)理：1.抑制細(xì)胞代謝，使細(xì)胞溶解2.引起超敏反應(yīng)3.形成肉芽腫傳播途徑：眼－眼眼－手－眼性接觸傳播產(chǎn)道感染呼吸道感染

(不通過(guò)節(jié)肢動(dòng)物傳播)致病機(jī)理致病物質(zhì)：內(nèi)毒素相似的物質(zhì)58所致疾病

1.沙眼（trachoma）（慢性傳染性角結(jié)膜炎）病原體：沙眼生物變種的A、B、Ba、C血清型傳播途徑：眼—眼，眼—手—眼慢性炎癥,可致盲湯飛凡等（1956年，雞胚接種法）2.包涵體結(jié)膜炎(inclusionconjunctivitis)病原體：沙眼生物變種中除A和C以外好發(fā)人群：新生兒（產(chǎn)道感染）(母嬰間）

成人（接觸）所致疾病1.沙眼（trachoma）59

3.泌尿生殖道感染病原體：沙眼衣原體D-K血清型是性傳播疾?。╯exuallytransmiteddisease,STD）疾病：男性：非淋菌性尿道炎（NGU）女性：NGU、宮頸炎、盆腔炎嬰兒：肺炎（產(chǎn)道）

4.性病淋巴肉芽腫（lymphogranulomavenereum,LGV）是STD病原體：沙眼衣原體LGV生物變種

5.上呼吸道感染及衣原體肺炎

（chlamydiapneumonia）病原體：鸚鵡熱衣原體和肺炎衣原體

(除外沙眼衣原體)

自然宿主：鸚鵡，鳥類疾?。蝴W鵡熱（呼吸道感染）

肺炎衣原體引起的肺炎只限于人群間3.泌尿生殖道感染60免疫性

細(xì)胞免疫，體液免疫保護(hù)性不強(qiáng)持續(xù)、隱性和反復(fù)感染免疫性細(xì)胞免疫，體液免疫61微生物學(xué)檢查法

（一）直接涂片鏡檢

Giemsa染色，沙眼還要做碘液染色，查包涵體（二）酶抗體法檢查抗原用抗衣原體抗體、酶標(biāo)抗體IgG（三）分離衣原體小鼠腹腔、雞胚卵黃囊或培養(yǎng)細(xì)胞

（四）血清學(xué)診斷鸚鵡熱和LGV的診斷。常用CF試驗(yàn)?？贵w效價(jià)增高4倍或4倍以上（五）檢查核酸PCR，雜交等，特異性及敏感性高

微生物學(xué)檢查法（一）直接涂片鏡檢Giemsa染色，沙眼62防治原則

沙眼：改善衛(wèi)生狀況和普及衛(wèi)生知識(shí)生殖道：同其他STD鸚鵡熱肺炎：控制禽畜感染及減少接觸治療：利福平、強(qiáng)力霉素等

防治原則沙眼：改善衛(wèi)生狀況和普及衛(wèi)生知識(shí)63細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件64支原體、衣原體、立克次體

主講老師：江振友

支原體、衣原體、立克次體

主講老師：江振友65支原體屬和脲原體屬

支原體屬和脲原體屬66支原體（Mycoplasma）

1.能在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)2.能獨(dú)立生活3.最小原核細(xì)胞型微生物4.無(wú)細(xì)胞壁5.二分裂繁殖

6.多形態(tài)性,“油煎蛋樣”菌落支原體（Mycoplasma）1.能在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)67分類

柔膜體綱(Mollicutes)支原體目(MycoPlasmatales)下分3個(gè)科：①支原體科（MycoPlasmataceae）；2個(gè)屬:支原體（Mycoplasma）脲原體（Ureaplasma）②無(wú)膽甾原體科（Acholeplasma-taceae），生長(zhǎng)時(shí)不需要外源性膽固醇；③螺原體科（Spiroplasmataceae），生長(zhǎng)至一定階段呈螺形。分類柔膜體綱(Mollicutes)68人體分離:20種，其中8種是致病或條件致病菌:肺炎支原體(M.pneumoniae,Mpn)生殖支原體(M.geuitalium,Mg)人型支原體(M.hominis,Mh)發(fā)酵支原體(M.fermentants,Mf)穿透支原體(M.penetrans,Mpe)梨支原體(M.pirum,Mpi)關(guān)節(jié)炎支原體(M.arthritidis,Mart)

解脲脲原體(U.urealyticum,Uu)

人體分離:20種，69支原體與細(xì)菌L型比較性狀支原體細(xì)菌L型濾過(guò)性有有細(xì)胞壁無(wú)無(wú)油煎蛋狀菌落形成形成對(duì)青霉素抵抗抵抗對(duì)膽固醇需要生長(zhǎng)需要不一定需要來(lái)源自然界、人與動(dòng)物由細(xì)菌在環(huán)境條件下誘導(dǎo)形成回復(fù)變成細(xì)菌不能能遺傳性與細(xì)菌無(wú)關(guān)與原細(xì)菌相同支原體與細(xì)菌L型比較性狀支原體細(xì)菌L型濾過(guò)性有有細(xì)胞壁無(wú)無(wú)油70肺炎支原體形態(tài)與結(jié)構(gòu)

大小:可通過(guò)濾器,光鏡下可觀察細(xì)胞壁:無(wú)形態(tài):球形、球桿形、分枝絲狀或念珠狀等細(xì)胞膜:三層:1.蛋白質(zhì)2.脂質(zhì)(膽固醇較多)3.蛋白質(zhì)染色:姬姆薩染色法:淡紫色或藍(lán)色核酸:二種(DNA和RNA)肺炎支原體形態(tài)與結(jié)構(gòu)71細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件72細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件73生長(zhǎng)繁殖繁殖方式:二分裂方式球體延伸、分節(jié)斷裂、出芽、分枝繁殖周期:3小時(shí)營(yíng)養(yǎng)要求:較高,含動(dòng)物血清、酵母浸液酸堿度:pH7.8～8．0氣體環(huán)境:5％CO2或5％CO2與95％N2溫度與時(shí)間:37℃,3d～10d菌落特征:“油煎蛋”狀菌落生長(zhǎng)繁殖繁殖方式:74細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件75表25—2支原體與脲原體的某些生物學(xué)特性

表25—276抗原構(gòu)造主要抗原成分:1.蛋白質(zhì)P1蛋白抗原:表面抗原致病:粘附2.脂質(zhì)中的糖脂抗體:產(chǎn)生補(bǔ)體結(jié)合抗體生長(zhǎng)抑制抗體代謝抑制抗體抗原構(gòu)造主要抗原成分:77抵抗力理化因素:比細(xì)菌敏感(因無(wú)細(xì)胞壁)熱:弱,50℃經(jīng)30min死亡－20℃可長(zhǎng)期保存耐堿酸和有機(jī)溶劑:較敏感(消毒劑、清潔劑)四環(huán)素族、紅霉素、卡那霉素、氯霉素:敏感青霉素:不敏感抵抗力理化因素:比細(xì)菌敏感(因無(wú)細(xì)胞壁)78致病性外源性感染上呼吸道感染:感冒、咽炎、氣管炎支原體性肺炎（Mycoplasmalpneumonia）(原發(fā)性非典型肺炎)（primaryatypicalpneumonia）臨床表現(xiàn)和胸部X線:肺炎鏈球菌引起的典型肺炎不同類似病毒性肺炎致病性外源性感染79世界各地,密集人群,兒童及青少年多見(jiàn)秋冬季發(fā)病率高,每隔3～5年出現(xiàn)一次流行飛沫傳播潛伏期2W～3W,感染起病緩慢臨床主要癥狀:發(fā)熱（約39℃）、頭痛、持續(xù)性頑固咳嗽、胸痛等。病人帶菌、排菌狀態(tài)可持續(xù)6W～8W肺外合并癥（神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及心臟等）發(fā)病率高，嚴(yán)重者可致死致病性:粘附是先決條件也和超敏反應(yīng)有關(guān)(共同抗原)世界各地,密集人群,兒童及青少年多見(jiàn)80免疫性抗體：多種(CF抗體、生長(zhǎng)抑制抗體、殺支原體抗體等)呼吸道sIgA:有一定作用非特異冷凝集素:1.和自身免疫有關(guān)2.患者陽(yáng)性率為50％，常用于輔助診斷。

免疫性抗體：多種(CF抗體、生長(zhǎng)抑制抗體、81微生物學(xué)檢查法病原分離特異核酸的檢測(cè)血清學(xué)診斷抗原檢測(cè)冷凝集試驗(yàn)微生物學(xué)檢查法病原分離82病原分離標(biāo)本：咽拭子或痰液培養(yǎng)基：雙相培養(yǎng)基（含馬血清、酵母浸液）

SP-4培養(yǎng)基（提高分離率30％～40％）氣體環(huán)境：5％～10％CO2溫度與時(shí)間：37℃，l～2W可疑菌落：1.糖發(fā)酵2.溶血性3.血細(xì)胞吸附4.特異抗血清生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)等

病原分離標(biāo)本：咽拭子或痰液83特異核酸的檢測(cè)（1）聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)：優(yōu)點(diǎn)：特異性好敏感性高快速、簡(jiǎn)便靶基因：16SRNA基因P1蛋白基因方法：套式PCR(nPCR)復(fù)合PCR限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(RFLP)隨機(jī)引物PCR(RAPD)（2）基因探針根據(jù)堿基嚴(yán)格互補(bǔ)配對(duì)的特性特異性強(qiáng)，敏感性不如PCR技術(shù)特異核酸的檢測(cè)（1）聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)：84血清學(xué)診斷

（1）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）：雙份抗體效價(jià)升高4倍以上診斷（2）間接血凝試驗(yàn)（IHA）：測(cè)抗體,2—3周高峰（3）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)：測(cè)IgM、IgG和IgA敏感性高（4）間接免疫熒光試驗(yàn)：檢測(cè)IgM、IgG特異性較強(qiáng)血清學(xué)診斷（1）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）：85抗原檢測(cè)

方法1:間接法或直接法抗體:熒光標(biāo)記多克隆抗體或單克隆抗體檢測(cè)標(biāo)本:呼吸道分泌物中抗原86%可陽(yáng)性方法2:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本:呼吸道分泌物中抗原可檢出105CFU/ml方法3:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)捕獲法抗體:抗P1單克隆抗體檢測(cè)標(biāo)本:P1蛋白可檢出104CFU/ml特異性強(qiáng),3小時(shí)即可抗原檢測(cè)方法1:間接法或直接法86冷凝集試驗(yàn)輔助診斷非典型肺炎針對(duì)紅細(xì)胞膜Ⅰ抗原冷凝集素屬IgM5d～10d出現(xiàn)，2W～3W高峰輔助診斷效價(jià):64～128倍以上雙份效價(jià)升高4倍以上特異性和敏感性較低冷凝集試驗(yàn)輔助診斷非典型肺炎87防

冶藥物:四環(huán)素類(近年來(lái)耐藥性增加)大環(huán)內(nèi)酯類:首選(紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素)喹諾酮類疫苗:減毒活疫苗基因工程疫苗防冶藥物:四環(huán)素類(近年來(lái)耐藥性增加)88其它支原體寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜屬于正常菌群,引起條件性感染口腔支原體:慢性呼吸道感染唾液支原體:齒槽溢膿生殖支原體:生殖道、呼吸道和關(guān)節(jié)腔的炎癥,流產(chǎn)、早產(chǎn)和新生兒肺炎發(fā)酵支原體:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎AIDS相關(guān)(分離率明顯升高)人型支原體:滲出性咽炎、非淋菌性尿道炎

(nongonococcalurithritis,NGU),卵巢膿腫、產(chǎn)褥敗血癥其它支原體寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜89脲原體屬(Ureaplasma)

從支原體分出的獨(dú)立的新屬正常菌群:絕大多數(shù)有致病性:解脲脲原體（U.urealyticum,Uu)

1954年從NGU患者的病灶處分離類似肺炎支原體能水解尿素脲原體屬(Ureaplasma)從支原體分出的獨(dú)立90生物學(xué)性狀

形態(tài):圓形或球桿狀染色:革蘭染色陰性溫度和酸堿度:37℃,pH6.0菌落:很小(15μm～60μm,放大200倍),稱T株（Tinycolonystrain）敏感性:敏感:四環(huán)素、氯霉素、慶大霉素、卡那霉素、0.05%醋酸鉈、125μg/ml5-碘-2’脫氧尿苷不敏感:青霉素生化特性:水解尿素產(chǎn)氨生物學(xué)性狀形態(tài):圓形或球桿狀91細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則課件92致病性

存在:人和動(dòng)物的口腔、呼吸道、泌尿生殖道血清型:解脲脲原體(Uu)有14個(gè)血清型傳播途徑:性接觸傳播、母嬰傳播所致疾病(STD)泌尿生殖道感染:NGU、盆腔感染、宮頸炎、陰道炎、輸卵管炎、慢性前列腺炎、附睪炎、男女不孕癥、反復(fù)流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎新生兒疾病:呼吸道病變、肺炎、腦膜炎致病性存在:人和動(dòng)物的口腔、呼吸道、93引起男性不孕的原因：①Uu吸附于精子表面，使其運(yùn)動(dòng)受阻，并蔽蓋了精子識(shí)別卵細(xì)胞的部位②Uu產(chǎn)生神經(jīng)氨酸樣物質(zhì)，干擾精子與卵細(xì)胞結(jié)合。③Uu與精子膜有共同抗原，從而產(chǎn)生抗精子抗體引起男性不孕的原因：94

立克次體屬和巴爾通體屬

立克次體屬和巴爾通體屬95立克次體屬立克次體特征：①比細(xì)菌小,能通過(guò)濾器,光鏡可見(jiàn)②以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介,有儲(chǔ)存宿主③專性細(xì)胞內(nèi)寄生(胞漿內(nèi)),原核細(xì)胞微生物④二分裂繁殖⑤有兩種核酸(DNA和RNA)，酶系統(tǒng)不完整⑥多數(shù)人畜共患⑦對(duì)抗生素敏感所致疾病:發(fā)熱出疹性疾病對(duì)人致病的:立克次體屬東方次體屬埃立克體屬柯克斯體屬立克次體屬立克次體特征：96立克次體分類及其致病情況見(jiàn)表26-1

立克次體分類及其致病情況見(jiàn)表26-197生物學(xué)性狀大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm-2.0μm)形態(tài):類似球桿菌,多形性(球形、啞鈴形、長(zhǎng)桿狀或絲狀等)染色:Giemsa染色法:紫色或藍(lán)色

馬氏染色法(Macchiavellostain):紅色排列:散在于細(xì)胞漿中、核旁成堆(斑點(diǎn)熱立克次體在胞漿或核內(nèi))培養(yǎng):專性細(xì)胞內(nèi)(活細(xì)胞內(nèi))寄生培養(yǎng)方法:雞胚卵黃囊內(nèi)接種組織細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物接種生物學(xué)性狀大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm98抵抗力:

熱、消毒劑:較弱(56℃,數(shù)分鐘,0.5%石碳酸、0.5%來(lái)蘇,75%酒精中數(shù)分鐘)抗生素:敏感:氯霉素和四環(huán)素不敏感:磺胺類低溫、干燥:較強(qiáng)(-20℃或冷凍干燥半年以上)抗原構(gòu)造：群特異性抗原,種特異性外膜抗原外斐反應(yīng)(Weil-Felixreaction):斑疹傷寒等立克次體與變形桿菌某些X菌株有共同的耐熱多糖類抗原。利用這些變形桿菌菌株代替立克次體抗原，進(jìn)行定量非特異凝集反應(yīng)（交叉凝集反應(yīng)），以檢測(cè)人或動(dòng)物血清中的相應(yīng)抗體。協(xié)助診斷斑疹傷寒,恙蟲病,滴度超過(guò)1:160有意義.抵抗力:99致病性傳播方式：普氏立克次體：頭虱和體虱（腸上皮細(xì)胞）人是唯一宿主斑點(diǎn)熱立克次體：第一宿主是蜱（唾液腺）第二宿主是嚙齒類動(dòng)物致病性傳播方式：100致病機(jī)理

過(guò)程:侵入->小血管內(nèi)皮細(xì)胞中繁殖->破壞細(xì)胞->細(xì)胞腫脹、浸潤(rùn)、堵塞血管腔形成血栓->皮膚:斑疹->實(shí)質(zhì)器官:相應(yīng)臨床表現(xiàn)

毒性物質(zhì):內(nèi)毒素

磷脂酶A致病機(jī)理101所致疾病1.流行性斑疹傷寒(epidimictyphus)

不屬于人畜共患病

病原體:普氏立克次體(R.prowazekii)

媒介:人虱宿主:人季節(jié):冬春季癥狀:5～21d潛伏期->高熱、頭痛、肌肉痛等->4～5d:皮疹->神經(jīng)、心血管和其他器官病后免疫:持久,與地方性斑疹傷寒有交叉免疫

所致疾病1022.地方性斑疹傷寒(endemictyphus)

(鼠型斑疹傷寒)

屬于人畜共患病病原體:斑疹傷寒立克次體(R.typhus)宿主:鼠為天然貯存宿主傳播方式:鼠蚤或虱->鼠間->人->人虱->人疾病:較輕，緩慢，持續(xù)時(shí)間短，很少侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)病后免疫:持久，并與流行性斑疹傷寒有交叉免疫

2.地方性斑疹傷寒(endemictyphus)

1033.恙蟲病(scrubtyphus)

病原體:恙蟲病東方次體(O.tsutsuganushi)傳播:寄生于恙螨體內(nèi)，可經(jīng)卵傳代。人若進(jìn)入恙螨的孳生地，可能受感染(亦稱“叢林熱”)癥狀:10～14d潛伏期->突然高熱，被叮咬處:發(fā)紅,丘疹,水皰,潰瘍，周圍紅暈，上有黑色痂皮，稱為焦痂(特征)。附近的淋巴結(jié)腫大，皮疹。治療拖延肺炎、腦炎、DIC。3.恙蟲病(scrubtyphus)病原體:恙蟲病東方次104微生物學(xué)檢查法

(一)血清學(xué)診斷1.外斐反應(yīng)(非特異性)診斷:立克次體和東方次體效價(jià)在1：160以上，或病程中效價(jià)增長(zhǎng)2.補(bǔ)體結(jié)合(CF)反應(yīng)(特異性)所用抗原:可溶性抗原(群特異抗原)洗滌過(guò)的顆?？乖?種特異抗原)診斷:斑疹傷寒群、斑點(diǎn)熱群、恙蟲病、Q熱(二)立克次體分離鑒定

動(dòng)物:小鼠(恙蟲病)雄性豚鼠(斑疹傷寒)微生物學(xué)檢查法(一)血清學(xué)診斷105防治原則1.滅虱、滅蚤、滅鼠2.改進(jìn)環(huán)境、個(gè)人衛(wèi)生3.死疫苗4.廣譜抗生素有效

防治原則1.滅虱、滅蚤、滅鼠106巴爾通體屬(Bartonella)

特點(diǎn):1.形態(tài)結(jié)構(gòu)與立克次體相似2.可以人工培養(yǎng)而非嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生模式種:桿狀巴爾通體(B.bacilliformis)巴爾通體屬(Bartonella)特點(diǎn):107生物學(xué)性狀

形狀:1.血涂片:球形、橢圓形或弓形桿狀；單個(gè)或成群,偶見(jiàn)鏈狀2.組織中:內(nèi)皮細(xì)胞原漿中,單體或圓形團(tuán)塊，G-，常用Giemsa或鍍銀染色法。3.培養(yǎng)中:單鞭毛培養(yǎng)條件:1.需氧2.常用10%兔血清和0.5%血紅蛋白的半固體培養(yǎng)基3.可在無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)基中生長(zhǎng)4.28℃-37℃,10d以上生物學(xué)性狀形狀:108致病性

自然宿主:人媒介:節(jié)肢動(dòng)物（疣腫白蛉）所致疾病:1.奧羅亞熱-秘魯疣

(Oroyafever-verrucaperuviana)

病原體:桿狀巴爾通體階段:第1階段:發(fā)熱，貧血(奧羅亞熱)第2階段:以血管損害為基礎(chǔ)的肉芽腫(秘魯疣)診斷方法:1.血涂片2.用半固體培養(yǎng)基分離培養(yǎng)

致病性自然宿主:人1092.細(xì)菌性血管瘤(bacillaryangiomatosis)病原體:亨氏巴爾通體(B.henselae)羅卡利馬巴爾通體(B.rochalimaea)

易感人群:免疫力低下（尤其AIDS）病變組織學(xué)特征:毛細(xì)血管增生等(血管瘤)培養(yǎng)基:巧克力色瓊脂含5%兔血的心腦浸汁瓊脂3.貓抓病(cat-scratchdisease)(貓抓熱)病原體:亨氏巴爾通體癥狀:貓抓傷后2w,發(fā)熱,淋巴結(jié)腫大，破潰排膿，亦可頭痛、咽痛或出現(xiàn)結(jié)膜炎特點(diǎn):自限性疾病檢查法:病變組織切片鍍銀染色免疫熒光染色2.細(xì)菌性血管瘤(bacillaryangiomatosi110

衣原體屬

衣原體屬111衣原體（Chamydia）特點(diǎn):1.能通過(guò)細(xì)菌濾器,光鏡下可觀察2.有獨(dú)特發(fā)育周期3.不能人工培養(yǎng),不能獨(dú)立生活,

為專性細(xì)胞內(nèi)寄生4.原核細(xì)胞型和病毒的區(qū)別:

⑴有細(xì)胞結(jié)構(gòu)⑵細(xì)胞壁類似G-⑶兩種類型的核酸(DNA和RNA)⑷有核糖體⑸以二分裂方式繁殖,有獨(dú)特的發(fā)育周期⑹對(duì)多種抗生素敏感(四環(huán)素和紅霉素)衣原體（Chamydia）特點(diǎn):1.能通過(guò)細(xì)菌濾器,光鏡下可112分類存在:人類、哺乳動(dòng)物及禽類體內(nèi)分類依據(jù):1.抗原構(gòu)造2.包涵體糖原的有無(wú)3.對(duì)磺胺類藥物的敏感性分類(4個(gè)種):1.沙眼衣原體（C.trachomatis）（人）亞種（1）沙眼生物變種（Biovartrachoma）14個(gè)血清型（2）性病淋巴肉芽腫變種(Biovar

lymphogranunlomavenereum,LGV)4個(gè)血清型（3）鼠生物變種（Biovarmouse）2.鸚鵡熱衣原體（C.psittaci）（人）3.肺炎衣原體（C.pneumonia）（人）4.家畜衣原體(C.pecorum)

分類存在:人類、哺乳動(dòng)物及禽類體內(nèi)113表27-13種致病性衣原體的比較

表27-13種致病性衣原體的比較114生物學(xué)性狀生活周期包括原體和始體兩階段光鏡下：兩種形態(tài)：

原體（elementarybody）

始體（initialbody）原體（elementarybody）1.形狀：球形，0.2～0.4μm電鏡下：核質(zhì)致密和少量核糖體細(xì)胞壁堅(jiān)韌

存在于細(xì)胞外2.功能:（1）有很強(qiáng)的感染性（吸附）（2）發(fā)育成始體：吸附->被吞噬->胞膜在原體周圍形成空泡->原體在空泡中增大->始體生物學(xué)性狀生活周期包括原體和始體兩階段115始體（initialbody）1.形狀：球形，較原體大(0.8～1.5μm)，無(wú)致密核質(zhì)，有纖細(xì)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)---

也稱為網(wǎng)狀體（reticulatebody）2.發(fā)育周期:原體->->始體->空泡內(nèi)->