產(chǎn)前診斷中心oweroinresenai

產(chǎn)前診斷中絨毛、臍血、羊水取樣及標本培養(yǎng)南京大學附屬鼓樓醫(yī)院婦產(chǎn)科產(chǎn)前診斷中心李潔副主任醫(yī)生2006年11月產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院產(chǎn)前診斷指征夫婦任一方有染色體異常；曾生育過染色體病患者；夫婦任一方為單基因病患者；曾生育過單基因病患者；有不明原因的自然流產(chǎn)史、畸胎史、死產(chǎn)或新生兒死亡史；產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院產(chǎn)前診斷指征羊水過多的孕婦；夫婦任一方曾接觸致畸因素；孕婦年齡大于35歲；有遺傳病家族史的近親婚配的夫婦。產(chǎn)前篩查高風險的孕婦超聲胎兒結(jié)構(gòu)篩查胎兒有結(jié)構(gòu)異常的孕婦產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院產(chǎn)前診斷的方法羊膜腔穿刺取樣（amniocentesis）絨毛穿刺取樣（chorionvillussampling,cvs）臍帶血取樣（periumbilicalcordbloodsampling,PUBS）植入前診斷（preimplantatongeneticdiagnosis,PGD）產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院產(chǎn)前診斷的方法胎兒組織取樣（皮膚、肝臟）胎兒鏡（fetoscope）胚胎鏡（embryoscope）胎兒超聲波圖象（fetalultrasoundimaging）母體外周血胎兒細胞檢測（cell-storing）產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院絨毛穿刺取樣—歷史1975年我國鞍山鋼鐵公司鐵東醫(yī)院首次問世（經(jīng)宮頸盲吸法，準確率95%，自然流產(chǎn)率9.3%，出生嬰兒未發(fā)現(xiàn)異常）莫斯科產(chǎn)科研究所（超聲引導下經(jīng)宮頸吸樣）1983您Ward和Brambati分別于英國和意大利發(fā)表文章介紹絨毛取樣及核型分析產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院絨毛穿刺取樣—時間妊娠9—11周產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院絨毛穿刺取樣—抽取量20mg左右（染色體核型分析約需10mg，DNA分析約需5mg，生化測定約需5-10mg）產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院絨毛穿刺取樣—并發(fā)癥胎兒丟失胎兒肢體發(fā)育缺陷（LRD）產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院CVS并發(fā)癥—胎兒丟失CVS的流產(chǎn)率不比amniocentesis高經(jīng)宮頸和經(jīng)腹取樣安全性相同（Jackson,1992）多胎取樣高于單胎取樣（Pergament,1992）產(chǎn)前診斷中心南京鼓樓醫(yī)院CVS并發(fā)癥－LRD1999年年WHO發(fā)發(fā)布CVS綜合性資資料認為CVS與LRD無關(guān)關(guān)（216，381例CVS中115例出現(xiàn)LRD發(fā)生生率1：1881，，總的人群群發(fā)生率1：1642）世界各地相相關(guān)資料綜綜合，9周周以下CVS出現(xiàn)LRD的機機會高，但但原因尚不不清楚CVS不應(yīng)應(yīng)在小于孕孕10周的的條件下進進行產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院絨毛穿刺取取樣—方法經(jīng)宮頸（transcervical）經(jīng)腹（transabdorminal）產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院CVS方法—經(jīng)宮頸取樣樣B超采用高高分辨的扇扇掃式或凸凸陣式實時時超聲診斷斷儀，經(jīng)腹腹探頭頻率率3.5MHz,經(jīng)經(jīng)陰道探頭頭頻率5-7MHz。采用用特特制制較較細細的的滋滋養(yǎng)養(yǎng)層層活活檢檢導導管管（（多多聚聚乙乙烯烯導導管管）），，其其塑塑料料導導管管外外徑徑1.4––1.6mm,長長20cm,帶帶有有導導管管芯芯，，導導管管前前端端稍稍彎彎，，外外形形似似宮宮腔腔探探子子。。導管管另另一一端端連連接接10-20ml含含有有2-4ml生生理理鹽鹽水水的的注注射射器器產(chǎn)前前診診斷斷中中心心南京京鼓鼓樓樓醫(yī)醫(yī)院院CVS方法法—經(jīng)腹腹取取樣樣雙針針活活檢檢系系統(tǒng)統(tǒng)由由1根根長長15cm、外徑1.2mm的18號引導導套針，及1根長20cm、外徑0.8mm的22號活檢檢針組成。在超聲引導下下，先將引導導套針經(jīng)腹壁壁及子宮穿刺刺入胎盤絨毛毛邊緣部分，，拔出針芯，，然后將活檢檢針經(jīng)引導套套針內(nèi)送入胎胎盤絨毛組織織,連接含2-4ml生理鹽水的20ml注射器，以5ml的負壓上下移移動活檢針吸吸取絨毛組織織產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院CVS注意事項動作要輕柔穿刺部位在胎胎盤絨毛葉抽吸次數(shù)不宜宜過多產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院羊膜腔穿刺—歷史1956年Fucks進行羊膜腔腔穿刺行胎兒兒性別鑒定及及胎兒Rh溶溶血診斷1966年Marksteele和RoyBreg從羊水中分分離出羊水細細胞培養(yǎng)成功功并行胎兒核核型分析產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院羊膜腔穿刺—時間16—20周產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院羊膜腔穿刺—抽取量20—30ml產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院抽取的羊水用用途核型分析———診斷染色體體病DNA分析———診斷單基基因病生化測定———診斷NTD、代謝性疾疾病產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院羊水穿刺穿刺前孕婦俯俯臥位搖動腹腹部超聲波定位引引導導采用22號或21號帶芯長腰穿穿刺針頭垂直、快速進進針抽取羊水2ml棄置，換空針針抽取羊水產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院羊膜腔穿刺—并發(fā)癥胎兒丟失羊膜腔感染羊水滲漏穿刺部位的出出血、血腫產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院羊穿并發(fā)癥---胎兒丟失1976年，，NihdRegistry報報道流產(chǎn)率3.5%1986年，，Taboretal報道流流產(chǎn)率1.7%1995年，，Bombardetal報報道流產(chǎn)率1.3%2000年,Antsaklis報道流流產(chǎn)率2.1%產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院臍帶血穿刺—歷史1972年，Valenti用兒科膀胱鏡鏡在中期妊娠娠孕婦行子宮宮切開術(shù)插入入羊膜腔，獲獲取臍血標本本。1979年，Rodeck和Campell應(yīng)用胎兒鏡行行臍帶血管穿穿刺，但由于于并發(fā)癥高，，應(yīng)用受到限限制。1983年，TernandDaffos超聲引導下經(jīng)經(jīng)皮臍血管穿穿刺取血（Cordocentesis）產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院臍帶血穿刺—時間16周—分娩（最佳24—28周）產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院臍帶血穿刺—取血量3—5ml20周后抽取取6—8ml對胎兒循環(huán)環(huán)無不良影響響產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院臍帶血穿刺—適應(yīng)癥胎兒核型分析析或基因檢測測（胎兒畸形形、嚴重的FGR、羊水或絨毛毛細胞培養(yǎng)失失敗、羊水或或絨毛培養(yǎng)結(jié)結(jié)果為嵌合體體、非免疫性性胎兒水腫、、脆性X綜合癥等）胎兒血液疾病病分析（血型型、血小板計計數(shù)等）胎兒感染（弓弓形蟲、病毒毒感染等）胎兒情況評估估（酸堿平衡衡、甲功等））遺傳性疾?。ǎ▎位虿　?、凝血障礙、、血紅蛋白病病、代謝性疾疾病等）胎兒治療（宮宮內(nèi)輸血、宮宮內(nèi)藥物治療療等）產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院臍帶血穿刺—并發(fā)癥穿刺部位的出出血臍帶血腫短暫性胎心減減慢宮內(nèi)感染胎兒丟失（流流產(chǎn)、早產(chǎn)））大多數(shù)并發(fā)癥癥為短暫性和和非致命性產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)院院臍帶血穿刺并并發(fā)癥—胎兒丟失Maxwell1991年報道胎胎兒超聲結(jié)構(gòu)構(gòu)篩查示正常常超聲者臍穿穿的流產(chǎn)率為為1%（1/76）；異異常超聲者流流產(chǎn)率為7%（5/76）；胎兒結(jié)結(jié)構(gòu)明顯異常常者流產(chǎn)率為為25%（9/36）Antsaklis1998年報報道胎兒超聲聲結(jié)構(gòu)篩查示示正常超聲者者臍穿的流產(chǎn)產(chǎn)率1%（2/191））；異常超聲聲者流產(chǎn)率為為13%（11/84））產(chǎn)前診斷中心心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院臍帶穿刺部部位產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院臍血穿刺—確定胎兒血血樣血紅蛋白電電泳Kleihauer-Betke試驗：胎兒兒紅細胞在在酸中穩(wěn)定定APT試驗：NaOH中胎兒血為為粉紅色有核紅細胞胞的出現(xiàn)產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院臍血穿刺—排除臍血中中母血污染染X染色體DMD基因內(nèi)部5對CA重復序列的的連鎖分析析產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院絨毛組織、、羊水細胞胞、臍血細細胞培養(yǎng)產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院絨毛組織的的培養(yǎng)直接法培養(yǎng)法（懸懸浮培養(yǎng)、、貼壁培養(yǎng)養(yǎng)）產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院絨毛組織的的染色體檢檢查—直接法孕早期Langhan’s細胞有較高高的有絲分分裂活性，，能提供足足以分析的的良好有絲絲分裂相，，較絨毛培培養(yǎng)簡易可可靠、操作作簡單快速速產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院絨毛組織的的染色體檢檢查—直接法絨毛組織的的分離洗脫脫加秋水仙素素（終濃度度2ug/ml，可一次加加，也可分分次少量加加）37OC5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)養(yǎng)45分鐘低滲（1%枸櫞酸鈉低低滲10分鐘或1%枸櫞酸鈉和和0.075mol/l1：1低滲40分鐘）預固定（甲甲醇：冰醋醋酸3：1）10分鐘固定（甲醇醇：冰醋酸酸3：1）10-20分鐘冰醋酸解離離絨毛細胞胞（輕吹打打）制片產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院絨毛組織的的染色體檢檢查—懸浮培養(yǎng)法法絨毛挑選洗洗脫絨毛組織剪剪成小塊入入培養(yǎng)瓶（（25ml培養(yǎng)瓶每每瓶10mg）加特定培養(yǎng)養(yǎng)液3ml培養(yǎng)3-6天收獲（加秋秋素、低滲滲、固定、、制片）產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院絨毛組織的的染色體檢檢查—貼壁培養(yǎng)法法絨毛組織挑挑選洗脫絨毛組織剪剪成小塊加0.25%+0.02%EDTA5ml37OC搖床中20分鐘加培養(yǎng)基終終止消化，，離心后棄棄上清加培培養(yǎng)基接種種培養(yǎng)5-10天收獲產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院羊水細胞培培養(yǎng)—細胞類型成纖維樣細細胞（F細細胞）上皮樣細胞胞（密集型型上皮樣細細胞-E細細胞、鐮刀刀樣上皮細細胞、圓形形上皮細胞胞）羊水樣細胞胞（AF細細胞）產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院羊水細胞培培養(yǎng)—收獲方法原位法消化法刮取法產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院羊水細胞培培養(yǎng)中存在在的問題——污染細菌真菌支原體病毒其他細胞產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院羊水細胞培培養(yǎng)中存在在的問題——母體細胞污污染若胎兒為男男性，由于于母體細胞胞污染誤將將胎兒診斷斷為嵌合體體母體細胞在在培養(yǎng)中占占優(yōu)勢產(chǎn)前診斷中中心南京鼓樓醫(yī)醫(yī)院羊水細胞培培養(yǎng)中存在在的問題——母體細胞污污染的預防防羊水穿刺時時，把最先先抽得的1-2ml羊水棄掉掉染色體多多態(tài)現(xiàn)象象的測試試羊水細胞胞、母體體細胞的的HLA組織織定型鑒鑒別產(chǎn)前診斷斷中心南京鼓樓樓醫(yī)院羊水細胞胞培養(yǎng)中中存在的的問題——細胞不生生長、不不貼壁最常見的的原因是是支原體體污染培養(yǎng)基PH不適適當，偏偏酸（＜＜6.4或偏堿堿＞7.4均不不利最合適的的穿刺時時間16-20周產(chǎn)前診斷斷中心南京鼓樓樓醫(yī)院羊水細胞胞培養(yǎng)中中存在的的問題——細胞及染染色體收收獲少每天觀察察細胞生生長（梭梭形細胞胞背景上上有透明明透亮的的圓形細細胞）滾圓的細細胞與有有絲分裂裂的圓形形細胞鑒鑒別操作應(yīng)輕輕柔，胰胰酶消化化法要掌掌握好胰胰酶消化化的時間間羊水中胎胎脂多時時3-5天可輕輕輕動一動動，減少少胎脂貼貼壁占據(jù)據(jù)空間低滲時間間短于外外周血（（一般3-5分鐘）產(chǎn)前診斷斷中心南京鼓樓樓醫(yī)院臍帶血細細胞培養(yǎng)養(yǎng)量少于外外周血（（一般5ml注注射器小小于14滴）其他同外外周血產(chǎn)前診斷斷中心南京鼓樓樓醫(yī)院Thanks!產(chǎn)前診斷斷中心南京鼓樓樓醫(yī)院9、靜夜四無無鄰，荒居居舊業(yè)貧。。。12月-2212月-22Tuesday,December20,202210、雨中黃葉葉樹，燈下下白頭人。。。23:37:3123:37:3123:3712/20/202211:37:31PM11、以我獨沈久久，愧君相見見頻。。12月-2223:37:3123:37Dec-2220-Dec-2212、故人江海別別，幾度隔山山川。。23:37:3123:37:3123:37Tuesday,December20,202213、乍見翻疑疑夢，相悲悲各問年。。。12月-2212月-2223:37:3123:37:31December20,202214、他他鄉(xiāng)鄉(xiāng)生生白白發(fā)發(fā)，，舊舊國國見見青青山山。。。。20十十二二月月202211:37:31下下午午23:37:3112月月-2215、比比不不了了得得就就不不比比，，得得不不到到的的就就不不要要。。。。。。十二二月月2211:37下下午午12月月-2223:37December20,202216、行動出成果果，工作出財財富。。2022/12/2023:37:3123:37:3120December202217、做前，能能夠環(huán)視四四周；做時時，你只能能或者最好好沿著以腳腳為起點的的射線向前前。。11:37:31下下午11:37下午23:37:3112月-229、沒有失敗敗，只有暫暫時停止成成功！。12月-2212月-22Tuesday,December20,202210、很多事情情努力了未未必有結(jié)果果，但是不不努力卻什什么改變也也沒有。。。23:37:3123:37:3123:3712/20/202211:37:31PM11、成功就就是日復復一日那那一點點點小小努努力的積積累。。。12月-2223:37:3123:37Dec-2220-Dec-2212、世間成成事，不不求其絕絕對圓滿滿，留一一份不足足，可得得無限完完美。。。23:37:3123:37:3123:37Tuesday,December20,202213、不知香香積寺，，數(shù)里入入云峰。。。12月-2212月-2223:37:3123:37:31December20,202214、意志堅堅強的人人能把世世界放在在手中像像泥塊一一樣任意意揉捏。。20十十二月202211:37:31下下午23:37:3112月-2215、楚塞三湘湘接，荊門門九派通。。。。十二月2211:37下午12月-2223:37December20,202216、少年十五二二十時，步行行奪得胡馬騎騎。。2022/12/2023:37:3123:37:3120December202217、空山新雨后后，天氣晚來來秋。。11:37:31下午午11:37下下午23:37:3112月-229、楊柳散和和風，青山山澹吾慮。。。12月-2212月-22Tuesday,December20,202210、閱讀一切切好書如同同和過去最最杰出的人人談話。23:37:3123:37:3123:3712/20/202211:37:31PM11、越越是是沒沒有有本本領(lǐng)領(lǐng)的的就就越越加