生理實(shí)驗(yàn)五 蛙坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制作及刺激與反應(yīng)的關(guān)系課件

實(shí)驗(yàn)五蛙坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本的制備及刺激與反應(yīng)的關(guān)系實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

掌握蛙類坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備方法。應(yīng)用電刺激方法測出肌肉閾刺激、閾上刺激與最適刺激的強(qiáng)度值了解刺激與肌肉收縮的關(guān)系實(shí)驗(yàn)原理兩棲類動(dòng)物的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似，其離體組織器官所需的生活條件比較簡單，并且易于控制和掌握，因此在生理試驗(yàn)中常用蟾蜍或蛙類的離體組織器官作為試驗(yàn)標(biāo)本。蛙類坐骨神經(jīng)－腓腸肌標(biāo)本是研究神經(jīng)沖動(dòng)和肌肉收縮機(jī)能等生理試驗(yàn)最常用的試驗(yàn)材料，制備此標(biāo)本是生理試驗(yàn)的一項(xiàng)基本但又非常重要的操作技術(shù)。刺激包括三方面的內(nèi)容：刺激強(qiáng)度、刺激時(shí)間、刺激強(qiáng)度-時(shí)間變化率。其中，刺激強(qiáng)度就是電刺激的脈沖電壓，刺激時(shí)間就是某個(gè)單刺激所持續(xù)的時(shí)間。刺激強(qiáng)度對骨骼肌收縮形式的影響（固定刺激的時(shí)間和刺激強(qiáng)度-時(shí)間變化率）：單根神經(jīng)纖維或肌纖維對刺激的反應(yīng)是“全或無”式的。但在神經(jīng)纖維肌肉標(biāo)本中，則表現(xiàn)為當(dāng)刺激強(qiáng)度很小時(shí)（閾下刺激），不能引起神經(jīng)纖維動(dòng)作電位的產(chǎn)生和肌肉的收縮；當(dāng)刺激強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)變動(dòng)時(shí)，肌肉收縮的幅度與之成正比。因?yàn)樽巧窠?jīng)干中含有數(shù)千萬條粗細(xì)不等的神經(jīng)纖維，其興奮性各不相同。弱刺激只能使其中少量興奮性高的神經(jīng)纖維先興奮，并引起它所支配的少量肌纖維收縮。隨著刺激強(qiáng)度逐漸增大，發(fā)生興奮的神經(jīng)纖維數(shù)目逐漸增多，其所引起收縮的肌纖維數(shù)目亦增多，結(jié)果肌肉收縮幅度隨刺激強(qiáng)度的增加而增強(qiáng)。當(dāng)刺激達(dá)到某一強(qiáng)度時(shí)，神經(jīng)干中全部神經(jīng)纖維興奮，它們所支配的全部肌纖維也都發(fā)生興奮和收縮，從而引起肌肉的最大收縮。此后，若再增加刺激強(qiáng)度，肌肉收縮幅度將不再增加。我們把引起肌肉產(chǎn)生最大收縮時(shí)的最小刺激強(qiáng)度叫最適刺激強(qiáng)度。刺激頻率對骨骼肌收縮形式的影響（把刺激強(qiáng)度固定在最適刺激強(qiáng)度，把單刺激改為連續(xù)單刺激）：刺激頻率就是單位時(shí)間內(nèi)連續(xù)刺激的次數(shù)。隨著刺激頻率的增高，肌肉的反應(yīng)依次表現(xiàn)為單收縮、不完全強(qiáng)直收縮和完全強(qiáng)直收縮：⑴如果刺激頻率很小時(shí)，每相鄰兩個(gè)刺激的間隔時(shí)間很大，當(dāng)其大于肌肉收縮的收縮期和舒張期之和時(shí)，肌肉表現(xiàn)為一個(gè)個(gè)的單收縮。單收縮包括收縮期及舒張期。前者占時(shí)較后者為短。⑵當(dāng)逐漸增加刺激頻率，使新的刺激引起的肌肉收縮落在前一個(gè)刺激引起肌肉收縮的舒張期，這樣，肌肉在連續(xù)未完全舒張的基礎(chǔ)上就開始新的收縮，形成鋸齒樣的不完全強(qiáng)直收縮張力曲線。⑶當(dāng)刺激頻率繼續(xù)增大時(shí)，新的刺激引起肌肉收縮落在前一次刺激引起肌肉收縮的收縮期，這樣，肌肉在連續(xù)收縮不全的基礎(chǔ)上出現(xiàn)新的收縮，形成一個(gè)類似方波的完全強(qiáng)直收縮張力曲線。實(shí)驗(yàn)用品實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：蟾蜍試劑與器材：計(jì)算機(jī)、BL-420F生物信號處理系

統(tǒng)、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、玻璃分針、蛙板、鋅銅弓、張力換能器、

連接導(dǎo)線、刺激輸出、燒杯、任氏液、棉球、棉線等。實(shí)驗(yàn)步驟：㈠坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備1、破壞腦和脊髓2、去除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟左手捏住蟾蜍的脊柱，右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚、腹肌、脊柱一并剪斷，然后左手握住蟾蜍后肢，僅靠脊柱兩側(cè)將腹壁及內(nèi)臟剪去（注意避開坐骨神經(jīng)）。并剪去肛門周圍的皮膚，留下脊柱和后肢。5、辨認(rèn)蛙后肢主要肌肉，找出腓腸肌。7、剪去其他不用的組織在坐骨神經(jīng)兩端各留一塊骨頭和肌肉，以便于固定。注意：剝離時(shí)一定要保持標(biāo)本完整性；盡可能用玻璃分針，少用鑷子，避免刺激神經(jīng)。8、標(biāo)本檢驗(yàn)完整的標(biāo)本應(yīng)包括四部分：一段脊柱骨、坐骨神經(jīng)、腓腸肌、一段股骨頭。用鑷子輕輕提起結(jié)扎神經(jīng)線，經(jīng)任氏液沾濕的鋅銅弓短暫輕觸坐骨神經(jīng)，如腓腸肌發(fā)生迅速的收縮反應(yīng)，則表明機(jī)能完好。將標(biāo)本置于任氏液中，穩(wěn)定其興奮性15－20min，即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目刺激強(qiáng)度與反應(yīng)關(guān)系刺激腓腸?。赫{(diào)節(jié)刺激參數(shù)，選擇單刺激，改變刺激強(qiáng)度（從弱到強(qiáng)），觀察刺激強(qiáng)度變化對肌肉收縮的影響；找出閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度；刺激神經(jīng)：調(diào)節(jié)刺激參數(shù)，選擇單刺激，改變刺激強(qiáng)度（從弱到強(qiáng)），觀察刺激強(qiáng)度變化對肌肉收縮的影響；找出閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度；比較腓腸肌與神經(jīng)的興奮性刺激頻率與反應(yīng)的關(guān)系：調(diào)節(jié)刺激參數(shù)，固定最適刺激強(qiáng)度，改變刺激頻率（從低到高），用連續(xù)單刺激刺激腓腸肌，觀察刺激頻率變化對肌肉收縮的影響。單收縮曲線復(fù)合收縮強(qiáng)直收縮

注意事項(xiàng)

在制備標(biāo)本時(shí)，避免過度牽拉、手或金屬器械觸碰神經(jīng)干；不能使動(dòng)物皮膚分泌物，血液等污染神經(jīng)和肌肉，不可用水沖洗，以免影響組織機(jī)能。制備標(biāo)本及實(shí)驗(yàn)中，隨時(shí)用任氏液潤濕神經(jīng)和肌肉，防止干燥。刺激參數(shù)確認(rèn)后，再進(jìn)行刺激，防止神經(jīng)肌肉損傷。每改變一次刺激頻率后，應(yīng)休息0.5-1min,每次刺激不要超過3-4秒，以免標(biāo)本疲勞。選擇刺激時(shí)，選程控刺激刺激時(shí)注意觀察肌肉的反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄肌肉與神經(jīng)的閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度，并比較二者的興奮性；記錄在最適刺激強(qiáng)度下，刺激頻率與肌肉收縮的關(guān)系思考題制備好的神經(jīng)肌肉標(biāo)本為何要放在任氏液中？為什么刺激頻率增高肌肉收縮的幅度也增大？隨著刺激頻率的增高，各次刺激引起的收縮過程發(fā)生融合而疊加起來，這時(shí)肌肉