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關(guān)于微生物純培養(yǎng)的分離方法第一頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日微生物純種分離將多種混雜微生物,經(jīng)某種技術(shù)或方法分離成純種的過(guò)程純培養(yǎng)(pureculture)將在實(shí)驗(yàn)室條件下從一個(gè)細(xì)胞或一種細(xì)胞群繁殖得到的后代稱(chēng)為純培養(yǎng)。第二頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日微生物樣品多種混雜某種方法分散成單個(gè)微生物平板培養(yǎng)單菌落每個(gè)菌落為純種(純培養(yǎng))單菌落轉(zhuǎn)接培養(yǎng)純種(純培養(yǎng))微生物純種分離的原理和方法第三頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日單個(gè)微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體,稱(chēng)為菌落。菌落第四頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日一個(gè)菌落是一個(gè)純種,也是一個(gè)純培養(yǎng);單個(gè)微生物只在固體培養(yǎng)基上形成菌落;在液體培養(yǎng)基中不會(huì)形成菌落第五頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日同一細(xì)菌在不同的培養(yǎng)平板上形成不同的特征菌落第六頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日分區(qū)劃線法(蛇形線法)操作圖第一區(qū)劃線第二區(qū)劃線第三區(qū)劃線一、劃線法第七頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日分區(qū)劃線法適用范圍:
適用于濃度較大的樣品第八頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日連續(xù)劃線法操作圖連續(xù)劃線法適用范圍:適用于濃度較小的樣品第九頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日二、稀釋平板法從土壤中分離純微生物104/ml103/ml102/ml101/ml第十頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日1、稀釋傾注分離法第十一頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日涂布平板法稀釋倒平板法2、稀釋涂布分離法第十二頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日采用顯微分離法從混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以得到純培養(yǎng),稱(chēng)為單細(xì)胞(單孢子)分離法。第十三頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日個(gè)體較小的微生物需采用顯微操作儀分離難度與細(xì)胞或個(gè)體的大小成反比營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上不能形成菌落較大的微生物可使用毛細(xì)管提取三、單細(xì)胞挑取法五、小滴分離法第十四頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日Eachcolonywasexaminedmicroscopically第十五頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日四、選擇培養(yǎng)基分離法創(chuàng)造適于目的微生物生長(zhǎng)條件原理促使目的微生物快速生長(zhǎng)呈優(yōu)勢(shì)菌抑制非目的微生物生長(zhǎng)從混雜微生物中分離目的微生物第十六頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日1、利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行直接分離選擇培養(yǎng)基只允許特定微生物生長(zhǎng),而同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基第十七頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日土壤目的菌優(yōu)勢(shì)非目的菌選擇培養(yǎng)基直接分離單細(xì)胞選擇培養(yǎng)基平板(含牛奶或酪蛋白唯一C、N源)37℃培養(yǎng)目的菌落菌落周?chē)型该鞯鞍姿馊?、利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行直接分離例一:分離篩選蛋白酶產(chǎn)生細(xì)菌第十八頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日含牛奶選擇培養(yǎng)基目的菌生長(zhǎng)平板營(yíng)養(yǎng)選擇因子:牛奶或酪蛋白只允許分解利用蛋白質(zhì)的目的菌生長(zhǎng),淘汰非目的菌長(zhǎng)出的目的菌并不一定是同種細(xì)菌,但皆產(chǎn)蛋白酶例一:分離篩選蛋白酶產(chǎn)生細(xì)菌第十九頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日例二:分離篩選產(chǎn)高溫淀粉酶(65℃)細(xì)菌單細(xì)胞選擇培養(yǎng)基平板(淀粉為唯一C源)65℃培養(yǎng)淀粉水解透明圈目的菌菌落選擇因子:營(yíng)養(yǎng)選擇因子淀粉環(huán)境選擇因子65℃高溫第二十頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日人為創(chuàng)造一些條件只讓所需的微生物生長(zhǎng),在這些條件下,所需要的微生物能有效地與其他微生物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng),在生長(zhǎng)能力方面遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其他微生物。2、富集培養(yǎng)法富集培養(yǎng)是分離微生物菌種最強(qiáng)有力的技術(shù)之一營(yíng)養(yǎng)選擇因子和生理?xiàng)l件選擇因子可無(wú)窮盡組合,可從自然界選擇分離各類(lèi)特異微生物第二十一頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日例:從土壤中分離能產(chǎn)生?-半乳糖苷酶的微生物富集培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基分離目的菌驗(yàn)證第二十二頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日1.接種針2.接種環(huán)3.接種鉤4.接種鋤5.接種鏟6.接種匙7.接種刀8.接種刀9.剪刀10.鋼鉤11.鑷子12.彈簧接種槍13.接種、槍?zhuān)ㄈ毡臼剑┩坎及魪椈山臃N槍第二十三頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日接種環(huán)的滅菌接種環(huán)燒紅接種環(huán)稍冷卻接種工具第二十四頁(yè),共二十七頁(yè),2022年,8月28日挑選
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