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瘦肉精的分離提純及分析CHEMISTRY
瘦肉精目錄什么是瘦肉精1瘦肉精的作用及危害2樣品處理方法4檢測(cè)方法及儀器5CompanyLogo在中國(guó),通常所說(shuō)的“瘦肉精”則是指鹽酸克倫羅。它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘,后由于其副作用太大而遭禁用。其它這樣類(lèi)似藥物還有沙丁胺醇(Salbutamol)和特布他林(Terbutaline)等,同樣能起到“瘦肉”作用、卻對(duì)人體健康危害過(guò)大,因而造成安全隱患。它們也因而在全球遭到禁用。什么是瘦肉精CompanyLogo肥豬飼喂瘦肉精后,逐漸發(fā)生四肢震顫無(wú)力,心肌肥大心力衰竭等毒副作用。屠宰后,肉色鮮紅,脂肪層極薄,往往是皮貼著瘦肉,瘦肉豐滿(mǎn)?!笆萑饩蹦苁关i提高生長(zhǎng)速度,增加瘦肉率,豬毛色紅潤(rùn)光亮,收腹,賣(mài)相好;瘦肉精的作用
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CompanyLogo豬食用后在代謝過(guò)程中促進(jìn)蛋白質(zhì)合成,加速脂肪的轉(zhuǎn)化和分解,提高了豬肉的瘦肉率,因此稱(chēng)為瘦肉精。它用量大、使用的時(shí)間長(zhǎng)、代謝慢,所以在屠宰前到上市,在豬體內(nèi)的殘留量都很大。這個(gè)殘留量通過(guò)食物進(jìn)入人體,就使人體漸漸地中毒,積蓄中毒。如果一次攝入量過(guò)大,就會(huì)產(chǎn)生異常生理反應(yīng)的中毒現(xiàn)象,因此而被禁用。瘦肉精的作用CompanyLogo1.急性中毒有心悸,面頸、四肢肌肉顫動(dòng),有手抖甚至不能站立,頭暈,乏力。2.原有交感神經(jīng)功能亢進(jìn)的患者,如有高血壓、冠心病、甲狀腺功能亢進(jìn)者上述癥狀更易發(fā)生。3.與糖皮質(zhì)激素合用可引起低血鉀,從而導(dǎo)致心律失常。瘦肉精的危害三二
一
CompanyLogo一檢測(cè)方法瘦肉精的檢測(cè)方法二
三四
五感官識(shí)別法生物傳感技術(shù)色譜檢測(cè)技術(shù)酶聯(lián)免疫法化學(xué)分析法CompanyLogo感官識(shí)別法優(yōu)缺點(diǎn)不能夠定性和定量的測(cè)定瘦肉精的含量,并且無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)量含量的多少??梢钥焖?、簡(jiǎn)單、定性對(duì)動(dòng)物性食品中有無(wú)瘦肉精作出初步判定,但主觀性較強(qiáng),可為消費(fèi)者購(gòu)買(mǎi)放心肉提供一定的參考。CompanyLogo化學(xué)分析法1.紫外可見(jiàn)分光度計(jì)
在243nm與296nm的波長(zhǎng)出能得到最大的吸收2.酸堿法(pH試紙)
正常新鮮肉用試紙測(cè)試其酸堿度多呈中性或弱堿性,宰后1h后,用pH試紙測(cè)得pH值為6.2—6.3,當(dāng)在自然條件下冷卻6h以上時(shí)pH值為5.6—6.0,而含有鹽酸克倫特羅的豬肉則偏酸性,pH值明顯小于正常范圍,所以酸堿度法也能測(cè)。化學(xué)分析法CompanyLogo化學(xué)分析法優(yōu)缺點(diǎn)雜質(zhì)干擾、靈敏度低、重現(xiàn)性差等缺點(diǎn),只能作為初篩鹽酸克倫特羅的方法;不需要昂貴的儀器與試劑,也無(wú)復(fù)雜的樣品前處理,操作簡(jiǎn)單,CompanyLogo酶聯(lián)免疫法酶聯(lián)免疫法酶標(biāo)克倫特羅結(jié)合物、標(biāo)準(zhǔn)溶液或者樣液結(jié)合的酶標(biāo)克倫特羅的結(jié)合物(無(wú)色底物)藍(lán)色物質(zhì)
黃色物質(zhì)終止劑
酶底物吸附在固相載體表面的克倫特羅特異性抗體酶標(biāo)檢測(cè)儀
洗滌
結(jié)合酶的催化CompanyLogo優(yōu)缺點(diǎn)操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、投資小、成本低、速度快、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單,適合對(duì)活體動(dòng)物做大批量樣品的快速分析,但不能實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
酶聯(lián)免疫法CompanyLogo色譜檢測(cè)技術(shù)色譜檢測(cè)技術(shù)色譜技術(shù)包括高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)、氣相色譜-傅里葉紅外聯(lián)用法(GC-FTIR)及薄層色譜法(TLC)等。目前,應(yīng)用最多的是高效液相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。為了更準(zhǔn)確的檢測(cè)出瘦肉精,在這里我們主要介紹氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。CompanyLogo液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物源性食品肌肉和內(nèi)臟中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測(cè)。試樣中的藥物殘留采用pH5.2的乙酸銨緩沖液提取,同時(shí)加入β-鹽酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶進(jìn)行酶解后,提取液經(jīng)C18和SCX雙SPE柱凈化,液相色譜—質(zhì)譜進(jìn)行測(cè)定,內(nèi)標(biāo)法定量CompanyLogo高效液相色譜法(HPLC)HPLC適合測(cè)定熱不穩(wěn)定和強(qiáng)極性的β-激動(dòng)劑及其代謝產(chǎn)物,而且,HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應(yīng)和質(zhì)譜(MS)等系統(tǒng)聯(lián)用,容易實(shí)現(xiàn)分析過(guò)程的自動(dòng)化。黃士新等(1995)應(yīng)用紫外檢測(cè)器,在λ=243nm,色譜柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,柱溫:室溫30℃的條件下檢測(cè)豬肝臟和豬肉中的CLB殘留,最低檢測(cè)限可達(dá)2ng/g[4]。國(guó)外有人應(yīng)用HPLC(二極管陣列檢測(cè)器)測(cè)定動(dòng)物性食品中CLB殘留,測(cè)得最低檢測(cè)限為1.26ng/g,回收率達(dá)98.9%[5]。目前,我國(guó)已將HPLC法作為檢測(cè)CLB殘留的半確證性方法,最低檢測(cè)限范圍為1~15ng/g,其優(yōu)點(diǎn)是專(zhuān)屬性好、選擇性強(qiáng)、檢測(cè)精確度較高,而且假陽(yáng)性率低;缺點(diǎn)是樣品處理時(shí)間長(zhǎng),檢測(cè)過(guò)程煩瑣、難于操作,需貴重儀器,在實(shí)際應(yīng)用中受到一定的限制。CompanyLogo生物傳感技術(shù)生物傳感器是一門(mén)有多種學(xué)科互相滲透成長(zhǎng)起來(lái)的新興學(xué)科,已引起世界各國(guó)的重視。其原理為待測(cè)物與分子識(shí)別元件特異性的結(jié)合后,所產(chǎn)生的復(fù)合物(或光、熱等)通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢暂敵龅碾娦盘?hào)、光信號(hào)等,從而達(dá)到分析檢測(cè)的目的。用它檢測(cè)鹽酸克倫特羅的原理與酶聯(lián)免疫法幾乎相同,只是將酶與底物反應(yīng)的化
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