ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病課件

ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

1共29頁ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病1共29頁輸血前免疫學(xué)檢測輸血前檢測：血型鑒定：ABO血型（正反定型）、RhD血型抗體篩選交叉配血：主側(cè)、次側(cè)目的：準(zhǔn)確定型，選擇相容血液。意義：輸血安全、及時(shí)、有效。2共29頁輸血前免疫學(xué)檢測輸血前檢測：2共29頁人類血型系統(tǒng)30個(gè)血型系統(tǒng)目前被識(shí)別的血型抗原的總數(shù)達(dá)到328個(gè)，其中有284個(gè)抗原分別屬于30個(gè)血型系統(tǒng)3共29頁人類血型系統(tǒng)30個(gè)血型系統(tǒng)3共29頁

紅細(xì)胞血型系統(tǒng)最具臨床意義：ABO、Rh臨床意義：輸血安全、器官移植、新生兒溶血病。急性溶血性輸血反應(yīng)：ABO抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，能夠激活補(bǔ)體，導(dǎo)致紅細(xì)胞在血管內(nèi)立即被破壞。輕癥：發(fā)熱、腰背痛、血紅蛋白尿或手術(shù)創(chuàng)口滲血。重癥：DIC、休克、急性腎衰竭，甚至死亡。4共29頁紅細(xì)胞血型系統(tǒng)最具臨床意義：ABO、Rh4共29頁ABO血型系統(tǒng)抗原抗體相對(duì)應(yīng)：紅細(xì)胞上缺乏相應(yīng)抗原，血清中有相應(yīng)抗體，組織細(xì)胞分泌液中有ABH抗原。其它血型系統(tǒng)沒有的特性。免疫原性最強(qiáng)的血型系統(tǒng)，抗體主要是IgM性質(zhì)，可引起急性溶血性輸血反應(yīng)，在臨床輸血中的作用最重要。

5共29頁ABO血型系統(tǒng)抗原抗體相對(duì)應(yīng)：紅細(xì)胞上缺乏相應(yīng)抗原，血清中有ABO血型分子基礎(chǔ)ABO基因組DNA長度約30Kb，由7個(gè)外顯子組成。A和B基因編碼的蛋白都是353個(gè)氨基酸，O基因編碼的蛋白只有115個(gè)氨基酸。B基因在cDNA上有七個(gè)核苷酸與A1基因不同，其中四個(gè)核苷酸的變化造成了氨基酸序列的變化。O基因有兩種：①O1基因：最常見的O基因，在cDNA的第261位G缺失，提前終止轉(zhuǎn)移酶的翻譯，使其編碼的蛋白只有115個(gè)氨基酸。②O2基因：261位G不缺失，很少見的O基因。6共29頁ABO血型分子基礎(chǔ)ABO基因組DNA長度約30Kb，由7個(gè)外ABO抗原的發(fā)育胚胎期開始產(chǎn)生，出生時(shí)還未發(fā)育完全，其抗原數(shù)只有成人的25～50％，與抗A和抗B血型試劑的反應(yīng)也較成人弱。新生兒ABO抗體也很弱，故新生兒定ABO血型是不需要反定型，通常在三個(gè)月后才進(jìn)行反定型。7共29頁ABO抗原的發(fā)育胚胎期開始產(chǎn)生，出生時(shí)還未發(fā)育完全，其抗原數(shù)

ABO血型鑒定方法玻片法：瓷板、紙片試管法：經(jīng)典的試管離心方法仍被認(rèn)為是最可靠的ABO定型方法。微量板法(U型或V型板)：大量標(biāo)本微柱凝膠法（卡式）：混合外觀mf分子生物學(xué)方法8共29頁ABO血型鑒定方法玻片法：瓷板、紙片8共29頁

ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗A1A1BOA1++++0++++0++++0++++0A/HA2++++0+++++++00/+++++0A/HAint+++0++++++++0++++0A/HA3mf0mf+++00++++0A/HAel000++++00/+++++0H9共29頁ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗A1A1BOAy000++++00++++0A/HAm0/±00/±++++00++++0A/HAx0/±0+++++00/+++++0HAendmf0mf++++00++++0HAfinn±0±++++0++++++0H10共29頁ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗A1

ABO亞型B亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗HABOB10++++++++++++++00B/HBint0++++++++++++++00B/HB30mfmf++++++++00B/HBx00/±0/+++++++++w0HBm00/±0/±+++++++00B/HBel000+++++++w0H11共29頁ABO亞型B亞型正定型反定型分泌抗A抗B抗AB抗HAB紅細(xì)胞混合凝集(mf)特征：有部分凝聚細(xì)胞，周圍有大量游離細(xì)胞類型：按抗原來源分，可分為外源性和內(nèi)源性ABO亞型：A3、B3嵌合體：孿生子、雙精嵌合造血干細(xì)胞移植、異型輸血、胎母出血檢測技術(shù)：分子生物學(xué)技術(shù)12共29頁紅細(xì)胞混合凝集(mf)特征：有部分凝聚細(xì)胞，周圍有大量游離cisABcisAB的血清學(xué)特征：與抗A的反應(yīng)強(qiáng)度：和A1細(xì)胞接近；與抗B的反應(yīng)強(qiáng)度：弱于正常B，易被誤定為B3/Bx,可顯混合外觀凝集血清常含有弱抗BH抗原性強(qiáng)家系調(diào)查和分子生物學(xué)方法確認(rèn)cisAB表型13共29頁cisABcisAB的血清學(xué)特征：13共29頁ABO正反定型不符合原因假陰性結(jié)果沒有加抗體試劑忽視溶血結(jié)果試劑和細(xì)胞比例不當(dāng)離心時(shí)間、速度不足試劑失效、用法錯(cuò)誤記錄或結(jié)果判讀錯(cuò)誤假陽性結(jié)果離心時(shí)間、速度過大試劑、細(xì)胞、鹽水污染實(shí)驗(yàn)容器不潔記錄或結(jié)果判讀錯(cuò)誤14共29頁ABO正反定型不符合原因假陰性結(jié)果14共29頁ABO正反定型不符合原因正定型：抗原ABO亞型、cisAB疾病致抗原減弱：白血病、淋巴瘤紅細(xì)胞被自身抗體致敏紅細(xì)胞被細(xì)菌污染造成多凝集現(xiàn)象獲得性B抗原：胃腸道疾病、酸化試劑臍帶血中有Wharton膠混合外觀凝集：亞型、骨髓移植、異型輸血、嵌合體15共29頁ABO正反定型不符合原因正定型：抗原15共29頁ABO正反定型不符合原因反定型：抗體緡錢狀凝集：球蛋白過高自身抗體：冷凝集素疾?。喊籽?、惡性淋巴瘤、骨髓移植、使用免疫抑制劑、免疫缺陷、低丙種球蛋白血癥年齡因素：新生兒、老年人近期內(nèi)血漿置換同種抗體：通常IgM性質(zhì)16共29頁ABO正反定型不符合原因反定型：抗體16共29頁ABO疑難血型鑒定方法了解樣本情況：病史、采樣進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)重新采樣紅細(xì)胞洗滌后配成3～5%濃度用試管法，實(shí)驗(yàn)管在室溫和4℃放置30分鐘，陰性者用顯微鏡觀察結(jié)果。更換新的試劑更換試驗(yàn)方法17共29頁ABO疑難血型鑒定方法了解樣本情況：病史、采樣17共29頁ABO疑難血型鑒定方法增加試劑：抗A1、抗H、抗AB增加細(xì)胞：自身、O細(xì)胞、臍血細(xì)胞(i抗原)唾液血型物質(zhì)鑒定吸收放散試驗(yàn)直接抗球蛋白試驗(yàn)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)18共29頁ABO疑難血型鑒定方法增加試劑：抗A1、抗H、抗AB1ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc04＋4＋000分析：血型可能是B型、A亞B型抗體：患者年齡（老人/嬰兒）、疾病診斷（白血病、MM、免疫球蛋白缺乏等）基因檢測

19共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗A1AcBcOc4+04+00/+4＋0分析：血型可能是A2亞型，血清中常有抗A1抗體。

20共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗A1ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc0/+0±/+04＋0分析：患者血型可能是A亞型。 如果是血液病患者，抗原減弱的可能性很大。21共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc2＋4＋4＋4＋2＋2＋分析：患者血型可能是B型。有自身抗體：冷凝集素22共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗HAcBcOc4＋2+/mf4＋3+0＋0分析：患者血型可能是cisAB型、AB亞型?；驒z測、家系分析

23共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗HABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc00/+0/+4＋0/+0分析：患者血型可能是B亞型。吸收放散試驗(yàn)、血型基因24共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc0004＋4＋2＋分析：患者血型可能是O型，血清中有意外抗體。25共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc自身4＋2＋4＋04＋00分析：患者血型可能是A型，獲得性B。了解疾病，酸化試劑26共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB2＋2＋2＋分析：患者是新生兒，只做正定型。血型可能是O型，臍帶血中有Wharton膠。洗滌被檢細(xì)胞。27共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc4＋04＋2＋4＋2＋分析：患者的血型可能是A型。緡錢狀凝集：多發(fā)性骨髓瘤或巨球蛋白血癥患者。28共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB新生兒溶血病新生兒溶血病(HDN)的定義HDN的主要分類HDN的檢測HDN的治療輸血指征輸血策略29共29頁新生兒溶血病新生兒溶血病(HDN)的定義29共29頁新生兒溶血病的定義

新生兒溶血病(hemolyticdiseaseofnewborn，HDN)是母嬰血型不合引起的同種免疫性溶血性疾病，胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體循環(huán)致使母體產(chǎn)生相應(yīng)的IgG類抗體，孕期母親的IgG血型抗體通過胎盤與胎兒紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生不同程度溶血的疾病。30共29頁新生兒溶血病的定義新生兒溶血病(hemol新生兒溶血病的癥狀流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎黃疸、貧血、肝脾腫大膽紅素腦病(核黃疸）：智力發(fā)育不全或死亡HDN檢測已被列為孕婦圍產(chǎn)期保健的重要內(nèi)容。31共29頁新生兒溶血病的癥狀流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎31共29頁高膽紅素血癥指新生兒血清總膽濃度超過220μmol/L(13mg/dL)，以間膽升高為主，是新生兒期常見疾病之一。重者產(chǎn)生核黃疸,可損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成智力發(fā)育不全甚至危及生命。按《實(shí)用新生兒學(xué)》的診斷標(biāo)準(zhǔn)分度:220～277μmol/L為輕度277～342μmol/L為中度>342μmol/L為重度32共29頁高膽紅素血癥指新生兒血清總膽濃度超過220μmol/L(13高膽紅素血癥感染、圍產(chǎn)因素、母乳性黃疸敗血癥、肺炎、早產(chǎn)、新生兒溶血病等33共29頁高膽紅素血癥感染、圍產(chǎn)因素、母乳性黃疸33共29頁新生兒溶血病的分類ABOHDN：第1胎即可發(fā)病，通常臨床癥狀較輕。RhHDN：一般發(fā)生在第2胎或多次妊娠后,黃疸出現(xiàn)早、發(fā)展迅速，臨床癥狀重。MNHDN：臨床上少見，病情較輕。

34共29頁新生兒溶血病的分類ABOHDN：第1胎即可發(fā)病，通常臨床ABO新生兒溶血病母嬰ABO血型不合母血清IgG抗A/抗B抗體效價(jià)越高，發(fā)病率越高，發(fā)生黃疸的時(shí)間越早。病情較輕：常用藍(lán)光照射、輸注白蛋白輸血：糾正貧血換血：極少35共29頁ABO新生兒溶血病母嬰ABO血型不合35共29頁ABO新生兒溶血病母血型子血型母抗體子抗體(IgG)OA/B抗A、抗B、抗AB抗A、抗AB/抗B、抗ABAB/AB抗B抗BBA/AB抗A抗A36共29頁ABO新生兒溶血病母血型子血型母抗體子抗體(IgG)OA

ABO新生兒溶血病ABO血型不合對(duì)Rh血型不合的妊娠有保護(hù)作用。Rh陰性母親的胎兒如同時(shí)ABO+Rh血型不合,胎兒Rh陽性紅細(xì)胞進(jìn)入母體后，立即被母親血中的抗A/抗B抗體致敏后破壞,就不能作為抗原刺激母體產(chǎn)生抗D抗體。37共29頁ABO新生兒溶血病ABO血型不合對(duì)Rh血型不合的妊娠有保護(hù)Rh血型系統(tǒng)概述ISBT符號(hào)：RH,數(shù)字：004Rh基因：主要是RHD和RHCE(高度同源、緊密連鎖)，均為10個(gè)外顯子編碼D和C、c、E、e抗原。染色體定位：1p36.13-34.3（短臂）38共29頁Rh血型系統(tǒng)概述ISBT符號(hào)：RH,數(shù)字：00438共2染色體上位置：

1p36.13-34.339共29頁染色體上位置：1p36.13-34.339共29頁Rh血型的遺傳主要抗原：D、C、E、c、e5種（其它：Cw、Cx、G、es、CG、Dw......）父母的基因組合決定了其子女的基因組合（孟德爾遺傳定律）遺傳的不對(duì)等性：某些組合比另一些組合常見CDe/CDe>cDE/cDE>cde/cde>CDE/CDE最重要的是有無D基因（D抗原最具免疫原性）40共29頁Rh血型的遺傳主要抗原：D、C、E、c、e5種（其它：CwRhD抗原RhD陽性：遺傳到了D基因，有D抗原，紅細(xì)胞與抗D試劑反應(yīng)陽性，稱為RhD陽性。RhD陰性：沒有遺傳到D基因或無效D基因，無D抗原，紅細(xì)胞與抗D試劑反應(yīng)陰性，稱為RhD陰性。不同說法：RhD陰性＝Rh陰性＝D陰性RhD陽性＝Rh陽性＝D陽性41共29頁RhD抗原RhD陽性：遺傳到了D基因，有D抗原，紅細(xì)胞與抗DRh抗原的發(fā)育和分布

與ABO抗原不同，Rh抗原在胎兒早期就得到了充分的發(fā)育，并在整個(gè)成年期都維持這種狀態(tài)。臍血或新生兒紅細(xì)胞的Rh血型與成人一樣強(qiáng)。只存在于紅細(xì)胞膜（包括臍血紅細(xì)胞）不存在于其它組織細(xì)胞、體液、分泌液血小板、白細(xì)胞上無Rh抗原42共29頁Rh抗原的發(fā)育和分布與ABO抗原不同，Rh抗原在胎兒早期就RhD血型的孟德爾遺傳43共29頁RhD血型的孟德爾遺傳43共29頁人群RhD陰性頻率中國人群大部分民族<1%中國漢族：0.3％--0.5%左右一些少數(shù)民族（哈薩克、烏茲別克、塔塔爾及柯爾克孜族）2-5%北歐白人：15%西非黑人：5％44共29頁人群RhD陰性頻率中國人群大部分民族<1%44共29頁Rh陰性表型頻率Rh表型數(shù)量頻率人群頻率Rh表型數(shù)量頻率人群頻率ccdee561(↑)55.3%0.22%Ccdee33232.7%0.13%CCdee535.22%21/十萬CcdEe201.97%8/十萬ccdEE20.2%8/十萬CCdEe20.2%8/十萬ccdEe44.33%16/十萬CCdEE///45共29頁Rh陰性表型頻率Rh表型數(shù)量頻率人群頻率Rh表型數(shù)量頻率人群Rh新生兒溶血病母嬰Rh血型不合常見抗體：抗D、抗E、抗c+抗E、抗D+抗C罕見：母親-D-，子CDe，血清中有抗Hro.常于生后24h內(nèi)出現(xiàn)黃疸并迅速加重,如不及時(shí)治療,可形成核黃疸而造成死亡。換血療法是治療Rh溶血病的最有效方法。46共29頁Rh新生兒溶血病母嬰Rh血型不合46共29頁新生兒溶血病的檢測父母嬰標(biāo)本進(jìn)行血型鑒定(ABO、Rh）母血清進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選患兒標(biāo)本進(jìn)行溶血三項(xiàng)試驗(yàn)直接抗人球蛋白試驗(yàn)血清游離試驗(yàn)

抗體釋放試驗(yàn)：3項(xiàng)試驗(yàn)中敏感度最高、是判斷HDN最有力的證據(jù)。47共29頁新生兒溶血病的檢測父母嬰標(biāo)本進(jìn)行血型鑒定(ABO、Rh）47ABO新生兒溶血病診斷標(biāo)準(zhǔn)

48共29頁ABO新生兒溶血病診斷標(biāo)準(zhǔn)48共29頁Rh新生兒溶血病診斷標(biāo)準(zhǔn)

49共29頁Rh新生兒溶血病診斷標(biāo)準(zhǔn)49共29頁新生兒溶血病的治療產(chǎn)前：孕婦抗體檢測、中藥、血漿置換藍(lán)光療法：最常用白蛋白輸注輸血：紅細(xì)胞、血漿換血療法：重癥RhHDN，是治療RhHDN最快速有效的方法。50共29頁新生兒溶血病的治療產(chǎn)前：孕婦抗體檢測、中藥、血漿置換50共2輸血指征貧血：血紅蛋白<120g/L換血：黃疸出現(xiàn)早發(fā)展迅速,貧血嚴(yán)重，血清總膽紅素>400μmol/L的RhHDN時(shí)可考慮換血治療。51共29頁輸血指征貧血：血紅蛋白<120g/L51共29頁換血療法原理治療重癥HDN最有效的方法換血量>180ml/kg:確保循環(huán)血內(nèi)70%～80%的膽紅素、致敏紅細(xì)胞、抗體被換出。減輕溶血程度、降低膽紅素、防止核黃疸發(fā)生糾正貧血，防止心力衰竭52共29頁換血療法原理治療重癥HDN最有效的方法52共29頁換血原理53共29頁換血原理53共29頁輸血策略ABOHDN:O型Rh陽性洗滌紅細(xì)胞+AB型血漿RhHDN：ABO血型同患兒，Rh血型同母親Rh+ABOHDN：O型，Rh血型同母親的洗滌紅細(xì)胞+AB型血漿綜合考慮換血的成分種類、血型表型、分布頻率等多種因素。54共29頁輸血策略ABOHDN:O型Rh陽性洗滌紅細(xì)胞+AB型血漿5輸血策略RhHDN患兒輸注與母親血清相合的血液不需要Rh表型完全相同O型ccdee不是萬能的，但臨床適用性是最高的換血的策略較輸血更寬松：臨床常有用Rh陽性血換血成功的報(bào)道55共29頁輸血策略RhHDN患兒輸注與母親血清相合的血液55共29頁換血策略首選：三天內(nèi)新鮮全血血鉀濃度：如換血用保存期較長的血液，血鉀會(huì)偏高，可引起心室顫動(dòng)甚至心臟停搏。血漿：促進(jìn)血清膽紅素的排泄備選：洗滌紅細(xì)胞物理性溶血：洗滌后脆性增加，換血過程中機(jī)械性破壞都使紅細(xì)胞破壞，血清膽紅素升高。56共29頁換血策略首選：三天內(nèi)新鮮全血56共29頁謝謝57共29頁謝謝57共29頁ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

58共29頁ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病1共29頁輸血前免疫學(xué)檢測輸血前檢測：血型鑒定：ABO血型（正反定型）、RhD血型抗體篩選交叉配血：主側(cè)、次側(cè)目的：準(zhǔn)確定型，選擇相容血液。意義：輸血安全、及時(shí)、有效。59共29頁輸血前免疫學(xué)檢測輸血前檢測：2共29頁人類血型系統(tǒng)30個(gè)血型系統(tǒng)目前被識(shí)別的血型抗原的總數(shù)達(dá)到328個(gè)，其中有284個(gè)抗原分別屬于30個(gè)血型系統(tǒng)60共29頁人類血型系統(tǒng)30個(gè)血型系統(tǒng)3共29頁

紅細(xì)胞血型系統(tǒng)最具臨床意義：ABO、Rh臨床意義：輸血安全、器官移植、新生兒溶血病。急性溶血性輸血反應(yīng)：ABO抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，能夠激活補(bǔ)體，導(dǎo)致紅細(xì)胞在血管內(nèi)立即被破壞。輕癥：發(fā)熱、腰背痛、血紅蛋白尿或手術(shù)創(chuàng)口滲血。重癥：DIC、休克、急性腎衰竭，甚至死亡。61共29頁紅細(xì)胞血型系統(tǒng)最具臨床意義：ABO、Rh4共29頁ABO血型系統(tǒng)抗原抗體相對(duì)應(yīng)：紅細(xì)胞上缺乏相應(yīng)抗原，血清中有相應(yīng)抗體，組織細(xì)胞分泌液中有ABH抗原。其它血型系統(tǒng)沒有的特性。免疫原性最強(qiáng)的血型系統(tǒng)，抗體主要是IgM性質(zhì)，可引起急性溶血性輸血反應(yīng)，在臨床輸血中的作用最重要。

62共29頁ABO血型系統(tǒng)抗原抗體相對(duì)應(yīng)：紅細(xì)胞上缺乏相應(yīng)抗原，血清中有ABO血型分子基礎(chǔ)ABO基因組DNA長度約30Kb，由7個(gè)外顯子組成。A和B基因編碼的蛋白都是353個(gè)氨基酸，O基因編碼的蛋白只有115個(gè)氨基酸。B基因在cDNA上有七個(gè)核苷酸與A1基因不同，其中四個(gè)核苷酸的變化造成了氨基酸序列的變化。O基因有兩種：①O1基因：最常見的O基因，在cDNA的第261位G缺失，提前終止轉(zhuǎn)移酶的翻譯，使其編碼的蛋白只有115個(gè)氨基酸。②O2基因：261位G不缺失，很少見的O基因。63共29頁ABO血型分子基礎(chǔ)ABO基因組DNA長度約30Kb，由7個(gè)外ABO抗原的發(fā)育胚胎期開始產(chǎn)生，出生時(shí)還未發(fā)育完全，其抗原數(shù)只有成人的25～50％，與抗A和抗B血型試劑的反應(yīng)也較成人弱。新生兒ABO抗體也很弱，故新生兒定ABO血型是不需要反定型，通常在三個(gè)月后才進(jìn)行反定型。64共29頁ABO抗原的發(fā)育胚胎期開始產(chǎn)生，出生時(shí)還未發(fā)育完全，其抗原數(shù)

ABO血型鑒定方法玻片法：瓷板、紙片試管法：經(jīng)典的試管離心方法仍被認(rèn)為是最可靠的ABO定型方法。微量板法(U型或V型板)：大量標(biāo)本微柱凝膠法（卡式）：混合外觀mf分子生物學(xué)方法65共29頁ABO血型鑒定方法玻片法：瓷板、紙片8共29頁

ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗A1A1BOA1++++0++++0++++0++++0A/HA2++++0+++++++00/+++++0A/HAint+++0++++++++0++++0A/HA3mf0mf+++00++++0A/HAel000++++00/+++++0H66共29頁ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗A1A1BOAy000++++00++++0A/HAm0/±00/±++++00++++0A/HAx0/±0+++++00/+++++0HAendmf0mf++++00++++0HAfinn±0±++++0++++++0H67共29頁ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗A1

ABO亞型B亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗HABOB10++++++++++++++00B/HBint0++++++++++++++00B/HB30mfmf++++++++00B/HBx00/±0/+++++++++w0HBm00/±0/±+++++++00B/HBel000+++++++w0H68共29頁ABO亞型B亞型正定型反定型分泌抗A抗B抗AB抗HAB紅細(xì)胞混合凝集(mf)特征：有部分凝聚細(xì)胞，周圍有大量游離細(xì)胞類型：按抗原來源分，可分為外源性和內(nèi)源性ABO亞型：A3、B3嵌合體：孿生子、雙精嵌合造血干細(xì)胞移植、異型輸血、胎母出血檢測技術(shù)：分子生物學(xué)技術(shù)69共29頁紅細(xì)胞混合凝集(mf)特征：有部分凝聚細(xì)胞，周圍有大量游離cisABcisAB的血清學(xué)特征：與抗A的反應(yīng)強(qiáng)度：和A1細(xì)胞接近；與抗B的反應(yīng)強(qiáng)度：弱于正常B，易被誤定為B3/Bx,可顯混合外觀凝集血清常含有弱抗BH抗原性強(qiáng)家系調(diào)查和分子生物學(xué)方法確認(rèn)cisAB表型70共29頁cisABcisAB的血清學(xué)特征：13共29頁ABO正反定型不符合原因假陰性結(jié)果沒有加抗體試劑忽視溶血結(jié)果試劑和細(xì)胞比例不當(dāng)離心時(shí)間、速度不足試劑失效、用法錯(cuò)誤記錄或結(jié)果判讀錯(cuò)誤假陽性結(jié)果離心時(shí)間、速度過大試劑、細(xì)胞、鹽水污染實(shí)驗(yàn)容器不潔記錄或結(jié)果判讀錯(cuò)誤71共29頁ABO正反定型不符合原因假陰性結(jié)果14共29頁ABO正反定型不符合原因正定型：抗原ABO亞型、cisAB疾病致抗原減弱：白血病、淋巴瘤紅細(xì)胞被自身抗體致敏紅細(xì)胞被細(xì)菌污染造成多凝集現(xiàn)象獲得性B抗原：胃腸道疾病、酸化試劑臍帶血中有Wharton膠混合外觀凝集：亞型、骨髓移植、異型輸血、嵌合體72共29頁ABO正反定型不符合原因正定型：抗原15共29頁ABO正反定型不符合原因反定型：抗體緡錢狀凝集：球蛋白過高自身抗體：冷凝集素疾?。喊籽　盒粤馨土?、骨髓移植、使用免疫抑制劑、免疫缺陷、低丙種球蛋白血癥年齡因素：新生兒、老年人近期內(nèi)血漿置換同種抗體：通常IgM性質(zhì)73共29頁ABO正反定型不符合原因反定型：抗體16共29頁ABO疑難血型鑒定方法了解樣本情況：病史、采樣進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)重新采樣紅細(xì)胞洗滌后配成3～5%濃度用試管法，實(shí)驗(yàn)管在室溫和4℃放置30分鐘，陰性者用顯微鏡觀察結(jié)果。更換新的試劑更換試驗(yàn)方法74共29頁ABO疑難血型鑒定方法了解樣本情況：病史、采樣17共29頁ABO疑難血型鑒定方法增加試劑：抗A1、抗H、抗AB增加細(xì)胞：自身、O細(xì)胞、臍血細(xì)胞(i抗原)唾液血型物質(zhì)鑒定吸收放散試驗(yàn)直接抗球蛋白試驗(yàn)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)75共29頁ABO疑難血型鑒定方法增加試劑：抗A1、抗H、抗AB1ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc04＋4＋000分析：血型可能是B型、A亞B型抗體：患者年齡（老人/嬰兒）、疾病診斷（白血病、MM、免疫球蛋白缺乏等）基因檢測

76共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗A1AcBcOc4+04+00/+4＋0分析：血型可能是A2亞型，血清中常有抗A1抗體。

77共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗A1ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc0/+0±/+04＋0分析：患者血型可能是A亞型。 如果是血液病患者，抗原減弱的可能性很大。78共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc2＋4＋4＋4＋2＋2＋分析：患者血型可能是B型。有自身抗體：冷凝集素79共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗HAcBcOc4＋2+/mf4＋3+0＋0分析：患者血型可能是cisAB型、AB亞型?；驒z測、家系分析

80共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗HABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc00/+0/+4＋0/+0分析：患者血型可能是B亞型。吸收放散試驗(yàn)、血型基因81共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc0004＋4＋2＋分析：患者血型可能是O型，血清中有意外抗體。82共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc自身4＋2＋4＋04＋00分析：患者血型可能是A型，獲得性B。了解疾病，酸化試劑83共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB2＋2＋2＋分析：患者是新生兒，只做正定型。血型可能是O型，臍帶血中有Wharton膠。洗滌被檢細(xì)胞。84共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc4＋04＋2＋4＋2＋分析：患者的血型可能是A型。緡錢狀凝集：多發(fā)性骨髓瘤或巨球蛋白血癥患者。85共29頁ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB新生兒溶血病新生兒溶血病(HDN)的定義HDN的主要分類HDN的檢測HDN的治療輸血指征輸血策略86共29頁新生兒溶血病新生兒溶血病(HDN)的定義29共29頁新生兒溶血病的定義

新生兒溶血病(hemolyticdiseaseofnewborn，HDN)是母嬰血型不合引起的同種免疫性溶血性疾病，胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體循環(huán)致使母體產(chǎn)生相應(yīng)的IgG類抗體，孕期母親的IgG血型抗體通過胎盤與胎兒紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生不同程度溶血的疾病。87共29頁新生兒溶血病的定義新生兒溶血病(hemol新生兒溶血病的癥狀流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎黃疸、貧血、肝脾腫大膽紅素腦病(核黃疸）：智力發(fā)育不全或死亡HDN檢測已被列為孕婦圍產(chǎn)期保健的重要內(nèi)容。88共29頁新生兒溶血病的癥狀流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎31共29頁高膽紅素血癥指新生兒血清總膽濃度超過220μmol/L(13mg/dL)，以間膽升高為主，是新生兒期常見疾病之一。重者產(chǎn)生核黃疸,可損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成智力發(fā)育不全甚至危及生命。按《實(shí)用新生兒學(xué)》的診斷標(biāo)準(zhǔn)分度:220～277μmol/L為輕度277～342μmol/L為中度>342μmol/L為重度89共29頁高膽紅素血癥指新生兒血清總膽濃度超過220μmol/L(13高膽紅素血癥感染、圍產(chǎn)因素、母乳性黃疸敗血癥、肺炎、早產(chǎn)、新生兒溶血病等90共29頁高膽紅素血癥感染、圍產(chǎn)因素、母乳性黃疸33共29頁新生兒溶血病的分類ABOHDN：第1胎即可發(fā)病，通常臨床癥狀較輕。RhHDN：一般發(fā)生在第2胎或多次妊娠后,黃疸出現(xiàn)早、發(fā)展迅速，臨床癥狀重。MNHDN：臨床上少見，病情較輕。

91共29頁新生兒溶血病的分類ABOHDN：第1胎即可發(fā)病，通常臨床ABO新生兒溶血病母嬰ABO血型不合母血清IgG抗A/抗B抗體效價(jià)越高，發(fā)病率越高，發(fā)生黃疸的時(shí)間越早。病情較輕：常用藍(lán)光照射、輸注白蛋白輸血：糾正貧血換血：極少92共29頁ABO新生兒溶血病母嬰ABO血型不合35共29頁ABO新生兒溶血病母血型子血型母抗體子抗體(IgG)OA/B抗A、抗B、抗AB抗A、抗AB/抗B、抗ABAB/AB抗B抗BBA/AB抗A抗A93共29頁ABO新生兒溶血病母血型子血型母抗體子抗體(IgG)OA

ABO新生兒溶血病ABO血型不合對(duì)Rh血型不合的妊娠有保護(hù)作用。Rh陰性母親的胎兒如同時(shí)ABO+Rh血型不合,胎兒Rh陽性紅細(xì)胞進(jìn)入母體后，立即被母親血中的抗A/抗B抗體致敏后破壞,就不能作為抗原刺激母體產(chǎn)生抗D抗體。94共29頁ABO新生兒溶血病ABO血型不合對(duì)Rh血型不合的妊娠有保護(hù)Rh血型系統(tǒng)概述ISBT符號(hào)：RH,數(shù)字：004Rh基因：主要是RHD和RHCE(高度同源、緊密連鎖)，均為10個(gè)外顯子編碼D和C、c、E、e抗原。染色體定位：1p36.13-34.3（短臂）95共29頁Rh血型系統(tǒng)概述ISBT符號(hào)：RH,數(shù)字：00438共2染色體上位置：

1p36.13-34.396共29頁染色體上位置：1p36.13-34.339共29頁Rh血型的遺傳主要抗原：D、C、E、c、e5種（其它：Cw、Cx、G、es、CG、Dw......）父母的基因組合決定了其子女的基因組合（孟德爾遺傳定律）遺傳的不對(duì)等性：某些組合比另一些組合常見CDe/CDe>cDE/cDE>cde/cde>CDE/CDE最重要的是有無D基因（D抗原最具免疫原性）97共29頁Rh血型的遺傳主要抗原：D、C、E、c、e5種（其它：CwRhD抗原RhD陽性：遺傳到了D基因，有D抗原，紅細(xì)胞與抗D試劑反應(yīng)陽性，稱為RhD陽性。RhD陰性：沒有遺傳到D基因或無效D基因，無D抗原，紅細(xì)胞與抗D試劑反應(yīng)陰性，稱為RhD陰性。不同說法：RhD陰性＝Rh陰性＝D陰性RhD陽性＝Rh陽性＝D陽性98共29頁RhD抗原RhD陽性：遺傳到了D基因，有D抗原，紅細(xì)胞與抗DRh抗原的發(fā)育和分布

與ABO抗原不同，Rh抗原在胎兒早期就得到了充分的發(fā)育，并在整個(gè)成年期都維持這種狀態(tài)。臍血或新生兒紅細(xì)胞的Rh血型與成人一樣強(qiáng)。只存在于紅細(xì)胞膜（包括臍血紅細(xì)胞）不存在于其它組織細(xì)胞、體液、分泌液血小板、白細(xì)胞上無Rh抗原99共29頁Rh抗原的發(fā)育和分布與ABO抗原不同，Rh抗原在胎兒早期就RhD血型的孟德爾遺傳100共29頁RhD血型的孟德爾遺傳43共29頁人群RhD陰性頻率中國人群大部分民族<1%中國漢族：0.3％--0.5%左右一些少數(shù)民族（哈薩克、烏茲別克、塔塔爾及柯