高效毛細管電泳在生藥學中的應用課件

高效毛細管電泳在生藥學中的應用

1/4/2023引言中藥材鑒定研究中藥有效成分分離測定1/4/2023毛細管電泳(CapillaryElectrophoresis)又稱高效毛細管電泳(HPCE),是指以高壓電場為驅(qū)動力，以毛細管為分離通道，依據(jù)樣品中各組分之間濃度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的一類液相分離技術。高效毛細管電泳是近年來迅速發(fā)展起來的一種新的高效分離技術，與傳統(tǒng)的分離方法相比,毛細管電泳的顯著特點是簡單、高效、快速和微量。1/4/2023中藥材鑒定研究高效毛細管電泳技術可應用于中藥材的品種鑒定、同科同屬易混淆品種的鑒別及道地性中藥材的研究，為中藥的生藥鑒別及道地性研究提供了新的途徑。1/4/2023根莖類藥材侯連兵、許重遠等應用高效毛細管電泳法分別對三七、狗脊及混淆品蛋白多肽分析，結(jié)果表明它們之間高效毛細管電泳法譜圖吸收峰有明顯的差異，可有效地加以區(qū)分。葉類藥材王寅等采用毛細管區(qū)帶電泳法以大青葉藥材的酸性提取部位為分離對象，對不同居群大青葉藥材的理化特征差異進行了研究，結(jié)果表明異地栽培的不同居群大青葉藥材的化學成分及含量有顯著差別，依據(jù)電泳圖譜中特征峰的遷移時間和峰面積，能有效地鑒別不同居群大青葉藥材。1/4/2023花類藥材馬曉強等應用高效毛細管電泳法定性分析西紅花、紅花及偽品萱草、黃花菜的水溶性成分，結(jié)果顯示種間有明顯差別，可作為定性鑒別。果實類藥材謝立、陳志良、賈江濱等應用高效毛細管電泳法分別對龍眼肉、寧夏枸杞、烏梅及混淆品的蛋白多肽進行了分析鑒別，根據(jù)高效毛細管電泳法指紋圖譜的明顯差異可有效地加以區(qū)分。1/4/2023種子類藥材鑒定同屬不同種的中藥材在性狀和組織結(jié)構(gòu)上極為相似，采用高效毛細管電泳法能對其種子植物蛋白進行分析可有效地將其區(qū)分。胡平等應用高效毛細管電泳法對不同植物來源的菟絲子所含植物蛋白的提取和分離及所含植物蛋白間的差異進行了比較，根據(jù)所出峰的數(shù)目，相對含量及區(qū)間內(nèi)指紋圖譜有效地鑒別菟絲子類生藥。1/4/2023中藥有效成分分離測定一種中藥材含有多種有效成分，通常多為黃酮類、蒽醌類、生物堿類、有機酸類、及各種苷類等，通常各化學組分結(jié)構(gòu)比較復雜，種類多樣且在藥材中含量不高，用普通的分離方法難以完全分離和定量測定，而多味藥材組成的復方的成分測定，普通的分離方法就更加難以勝任了，毛細管電泳可以較好的解決這一問題。1/4/2023對于黃酮類成分對黃酮類化合物的CE分離，主要采用了MECC及CZE兩種方法。毛細管區(qū)帶電泳(CZE)是毛細管電泳中最基本也是應用最廣的一種操作模式。其介質(zhì)的選擇與控制也是其他分離模式的基礎。CZE的介質(zhì)實際上是一種具有pH緩沖能力的均勻的自由溶液，通常稱為電泳緩沖液，在采用CZE法分離天然黃酮類物質(zhì)時可利用黃酮上帶有的鄰羥基基團能與硼酸根形成配位鍵的性質(zhì)，使其帶上負電荷，從而達到分離的目的。因此，CZE法被廣泛用于中草藥中黃酮類化合物的測定。1/4/2023對于蒽醌類成分蒽醌類有羥基和羧基，用CZE、MECC都能分析，如以CZE分離測定狹葉番瀉和尖葉番瀉中的番瀉苷A、A1和B的含量；對于苷類成分，采用HPCE法可成功分離人參皂苷和柴胡皂苷。1/4/2023對于皂苷類和苷類成分皂苷類化合物不帶正電，一般采用MECC模式來分離。采用高效毛細管電泳法測定消炎抗菌膠囊中黃芩苷的含量，黃芩苷在9.7-76.8Lg/mL范圍內(nèi)線性關系良好，(r=0.19997)，加樣回收率為98.182%，RSD為2.132%。實驗結(jié)果高效毛細管電泳法用于消炎抗菌膠囊中黃芩苷的含量測定是可行的。1/4/2023含多糖類藥材謝立等測定不同產(chǎn)地長葉榧種子中多糖含量并建立其高效毛細管電泳指紋圖譜。研究發(fā)現(xiàn)長葉榧種子多糖含量較高且多糖組成較簡單，由此可為進一步提取、分離長葉榧種子多糖并進行相關藥理活性研究提供科學依據(jù)。同時在對甘草中甘草多糖進行質(zhì)量分析，經(jīng)電泳發(fā)現(xiàn)甘草多糖組分由鼠李糖、葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖組成，其中以葡萄糖為主。1/4/2023展望HPCE作為一種新的分離手段，在中藥材研究中已越來越廣泛?？梢灶A言，經(jīng)過科學工作者的不懈努力及深入研究，HPCE技術將得到不斷發(fā)展和完善，