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關(guān)于生物物理技術(shù)應(yīng)用第一頁,共十五頁,2022年,8月28日結(jié)構(gòu)化學(xué)概論物理化學(xué)由化學(xué)熱力學(xué)、化學(xué)動力學(xué)、結(jié)構(gòu)化學(xué)三大部分組成。其中結(jié)構(gòu)化學(xué)研究化學(xué)體系的微觀結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。它以量子理論為理論基礎(chǔ),研究原子和分子的結(jié)構(gòu),物體的體相中原子和分子的空間結(jié)構(gòu)、表面相的結(jié)構(gòu),以及結(jié)構(gòu)與物性的規(guī)律性。X射線衍射方法與譜學(xué)方法是結(jié)構(gòu)化學(xué)的重要組成部分。第二頁,共十五頁,2022年,8月28日結(jié)構(gòu)化學(xué)于生物學(xué)的應(yīng)用推測有機化合物的結(jié)構(gòu)e.g.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)測定溶液的成分及各組分濃度e.g.分光光度計測定溶液葉綠素含量第三頁,共十五頁,2022年,8月28日推測有機化合物的結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)化學(xué)方法的應(yīng)用大大推進了近現(xiàn)代生物學(xué)的發(fā)展。尤其是X射線晶體衍射法在生物大分子結(jié)構(gòu)推斷上的應(yīng)用,使生物學(xué)研究從細(xì)胞水平進入到了分子水平上。1951年,Pauling通過研究血紅蛋白X射線晶體衍射圖像,提出蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)——α螺旋。第四頁,共十五頁,2022年,8月28日推測有機化合物的結(jié)構(gòu)1953年,Watson與Crick通過對Franklin制作的DNA分子X射線晶體衍射圖像進行分析,發(fā)現(xiàn)了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。使得生物學(xué)研究進入了新次元。至今,X射線晶體衍射法仍為生物大分子結(jié)構(gòu)推斷的首選方法。而后來一并應(yīng)用的核磁共振譜等譜學(xué)方法,也成為了生物大分子結(jié)構(gòu)推斷的重要方法。第五頁,共十五頁,2022年,8月28日X射線晶體衍射法原理:從衍射花樣(衍射線的方向和強度)推算生物大分子的三維結(jié)構(gòu)(也常稱空間結(jié)構(gòu)、立體結(jié)構(gòu)或構(gòu)象)。X射線衍射技術(shù)能夠精確測定原子在晶體中的空間位置﹐是迄今研究生物大分子結(jié)構(gòu)的主要技術(shù)。
第六頁,共十五頁,2022年,8月28日譜學(xué)方法分子振動光譜(如:紅外光譜)紫外-可見光譜核磁共振譜順磁共振譜電子能譜質(zhì)譜旋光譜……譜學(xué)方法可輔助甚至主導(dǎo)針對生物大分子的研究。第七頁,共十五頁,2022年,8月28日紅外光譜原理:當(dāng)一束具有連續(xù)波長的紅外光通過物質(zhì),物質(zhì)分子中某個基團的振動頻率或轉(zhuǎn)動頻率和紅外光的頻率一樣時,分子就吸收能量由原來的基態(tài)振(轉(zhuǎn))動能級躍遷到能量較高的振(轉(zhuǎn))動能級,分子吸收紅外輻射后發(fā)生振動和轉(zhuǎn)動能級的躍遷,該處波長的光就被物質(zhì)吸收。紅外吸收峰的位置與強度反映了分子結(jié)構(gòu)上的特點,可以用來鑒別未知物的結(jié)構(gòu)組成或確定其化學(xué)基團;而吸收譜帶的吸收強度與化學(xué)基團的含量有關(guān),可用于進行定量分析和純度鑒定。第八頁,共十五頁,2022年,8月28日紫外-可見光譜原理:利用特定物質(zhì)的分子吸收特定波長的能量用于電子能級間的躍遷來進行分析測定。應(yīng)用:測定未知溶液的成分及各組分濃度*分光光度計的應(yīng)用,其基本原理便脫胎于紫外-可見光譜法。第九頁,共十五頁,2022年,8月28日核磁共振譜核磁共振波譜法(NuclearMagneticResonanceSpectroscopy,NMR)NMR是研究原子核對射頻輻射(Radio-frequencyRadiation)的吸收,它是對各種有機和無機物的成分、結(jié)構(gòu)進行定性分析的最強有力的工具之一,有時亦可進行定量分析。核磁共振現(xiàn)象于1946年由E.M.珀塞耳和F.布洛赫等人發(fā)現(xiàn)。目前核磁共振迅速發(fā)展成為測定有機化合物結(jié)構(gòu)的有力工具。目前核磁共振與其他儀器配合,已鑒定了十幾萬種化合物。70年代以來,使用強磁場超導(dǎo)核磁共振儀,大大提高了儀器靈敏度,在生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用迅速擴展。第十頁,共十五頁,2022年,8月28日質(zhì)譜法質(zhì)譜分析是一種測量離子荷質(zhì)比(電荷-質(zhì)量比)的分析方法,其基本原理是使試樣中各組分在離子源中發(fā)生電離,生成不同荷質(zhì)比的帶正電荷的離子,經(jīng)加速電場的作用,形成離子束,進入質(zhì)量分析器。在質(zhì)量分析器中,再利用電場和磁場使發(fā)生相反的速度色散,將它們分別聚焦而得到質(zhì)譜圖,從而確定其質(zhì)量。與色譜法、計算機聯(lián)用,可快速簡便地分析混合物成分、含量并推斷各組分結(jié)構(gòu)等第十一頁,共十五頁,2022年,8月28日旋光譜許多有機化合物具有光學(xué)活性,能使偏振光的偏振平面發(fā)生旋轉(zhuǎn),這種現(xiàn)象稱為旋光?;衔锏男舛群凸獾牟ㄩL有關(guān),亦即一個化合物的比旋度隨著波長而改變。測定在紫外及可見光(200-700nm)內(nèi)的旋光,然后將比旋度對波長作圖,所得的譜線即旋光譜。對于類似的化合物,若對應(yīng)的電子躍遷顯出類似的旋光色散行為,得出類似的旋光色散曲線,則它們就有同樣的光學(xué)構(gòu)型。第十二頁,共十五頁,2022年,8月28日穆斯堡爾譜學(xué)穆斯堡爾效應(yīng):一個自由原子核發(fā)射或吸收γ光子時,原子核都要受到反沖。若原子核被束縛在晶體點陣上,則發(fā)射或吸收γ光子時,整個晶體反沖,容易觀察到共振吸收現(xiàn)象。應(yīng)用穆斯堡爾效應(yīng),利用多普勒速度掃描實現(xiàn)共振吸收測量,可以研究原子核與周圍環(huán)境的超精細(xì)相互作用,是一種非常精確的測量手段。生物工作者利用穆斯堡爾譜學(xué)研究了血紅素蛋白、鐵硫蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等含金屬元素蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。第十三頁,共十五頁,2022年,8月28日小結(jié)結(jié)構(gòu)化學(xué)方法應(yīng)用于生物學(xué),為生物學(xué)的發(fā)展做出了巨大貢獻(xiàn),甚至引領(lǐng)了生物學(xué)研究從細(xì)胞亞細(xì)胞水平進入了分子水平。結(jié)
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