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胚胎工程(gōngchéng)的應(yīng)用及前景第一頁(yè),共37頁(yè)。如何將這種優(yōu)質(zhì)(yōuzhì)的牛進(jìn)行快速、大量的繁殖呢?日本(rìběn)神戶牛肉(雪花牛肉)第二頁(yè),共37頁(yè)。1.胚胎移植(yízhí)概念將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎(pēitāi),或者通過(guò)體外受精及通過(guò)其他方式得到的胚胎(pēitāi),移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。供體:受體:實(shí)際上:提供胚胎(pēitāi)的個(gè)體。
接受胚胎的個(gè)體。生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過(guò)程胚胎移植是胚胎工程其他技術(shù)的最后一道工序第三頁(yè),共37頁(yè)。.第四頁(yè),共37頁(yè)。請(qǐng)閱讀課本P75、圖3-17“胚胎(pēitāi)移植的現(xiàn)狀和意義”,優(yōu)勢(shì):可充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體(gètǐ)的繁殖潛力第五頁(yè),共37頁(yè)。3.胚胎移植(yízhí)的生理學(xué)基礎(chǔ)請(qǐng)認(rèn)真閱讀課本P76,思考討論(P76):胚胎(pēitāi)移植的生理學(xué)基礎(chǔ)的四點(diǎn)內(nèi)容是什么?第六頁(yè),共37頁(yè)。生理學(xué)基礎(chǔ)意義同種動(dòng)物(dòngwù)的供體和受體排卵后,生殖器官的是相同的。生理(shēnglǐ)變化為供體的胚胎移入受體提供(tígōng)相同的。生理環(huán)境早期胚胎形成后,在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立組織上的聯(lián)系,而是處于
狀態(tài)。為胚胎的收集提供了可能游離受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生
。免疫排斥反應(yīng)供體胚胎可與受體子宮建立正常的
和
聯(lián)系,但其
不受影響。生理組織遺傳特性為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能為移植后的胚胎繼續(xù)發(fā)育提供了營(yíng)養(yǎng)等方面的保障胚胎移植能否成功,與供體和受體的生理狀況有關(guān)第七頁(yè),共37頁(yè)。討論(P76):1、在胚胎移植操作中,怎樣才能使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致?例如,供、受體的發(fā)情時(shí)間要一致嗎?供體胚胎移入受體子宮的位置,應(yīng)與在供體內(nèi)(tǐnèi)的位置相同或相似嗎?應(yīng)對(duì)供體和受體母畜進(jìn)行同期發(fā)情處理,使它們(tāmen)的生理?xiàng)l件達(dá)到同步后一致,這樣才能使供體的胚胎移入受體后有相同或相似的生存條件,這是胚胎移植成功與否的關(guān)鍵。因此,必須做到供、受體母畜的發(fā)情時(shí)間一致。同時(shí)還要做到移入受體子宮胚胎的位置應(yīng)該與其在供體內(nèi)的位置相同或相似,移入胚胎一側(cè)的受體子宮對(duì)應(yīng)的卵巢必須有黃體存在。第八頁(yè),共37頁(yè)。2、胚胎移植實(shí)質(zhì)你認(rèn)為這樣(zhèyàng)的概括正確嗎?是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置(wèizhi)的轉(zhuǎn)移。正確(zhèngquè)。第九頁(yè),共37頁(yè)。請(qǐng)認(rèn)真閱讀課本P77,圖3-19,思考討論:(1)胚胎移植的基本(jīběn)程序包括哪些?(2)每一步技術(shù)是如何進(jìn)行操作的?(3)思考:為什么要進(jìn)行這些操作?胚胎(pēitāi)移植的基本程序第十頁(yè),共37頁(yè)。選擇及同期發(fā)情(fāqíng)處理超數(shù)排卵處理(chǔlǐ)配種(pèizhǒng)或人工授精胚胎收集胚胎檢查胚胎保存胚胎移植妊娠檢查分娩胚胎移植的基本程序第十一頁(yè),共37頁(yè)。(1)對(duì)供體、受體進(jìn)行選擇(xuǎnzé)及處理供體:遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的個(gè)體;受體:健康和正常繁殖能力的個(gè)體處理:同期發(fā)情(fāqíng)具體做法:用相關(guān)激素處理。第十二頁(yè),共37頁(yè)。(2)超數(shù)排卵處理(chǔlǐ)具體做法:注射促性腺激素第十三頁(yè),共37頁(yè)。(3)配種(pèizhǒng)或人工授精精子來(lái)源:同種優(yōu)良(yōuliáng)的雄性動(dòng)物。第十四頁(yè),共37頁(yè)。(4)胚胎(pēitāi)的收集在配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)(chūlái)。沖卵是把母牛的卵子沖出來(lái)(chūlái)嗎?第十五頁(yè),共37頁(yè)。(5)對(duì)胚胎(pēitāi)進(jìn)行質(zhì)量檢查你知道檢查的目的嗎?此時(shí)胚胎處于(chǔyú)什么時(shí)期?檢查胚胎(pēitāi)的發(fā)育狀況,處于桑椹胚或囊胚第十六頁(yè),共37頁(yè)。(6)胚胎(pēitāi)的保存胚胎(pēitāi)保存的條件是什么?—196℃的液氮中保存(bǎocún)液氮罐第十七頁(yè),共37頁(yè)。(7)胚胎(pēitāi)的移植方法一:手術(shù)法具體做法:引出受體子宮和卵巢,將胚胎注入(zhùrù)子宮角,縫合創(chuàng)口。方法二:非手術(shù)法將裝有胚胎的移植管送入受體母牛子宮的相應(yīng)部位,注入(zhùrù)胚胎。第十八頁(yè),共37頁(yè)。(8)妊娠(rènshēn)檢查第十九頁(yè),共37頁(yè)。(9)受體母牛產(chǎn)下胚胎移植(yízhí)的犢牛第二十頁(yè),共37頁(yè)。完成(wánchéng)流程圖第二十一頁(yè),共37頁(yè)。例1:下列有關(guān)動(dòng)物胚胎移植的敘述(xùshù)中,不正確的是()A.從受孕母畜體內(nèi)取出的受精卵或胚胎均能移植B.受體母畜必須處于與供體母畜同步發(fā)情狀態(tài)C.超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定的激素D.試管嬰兒技術(shù)只有受精及早期卵裂過(guò)程在體外進(jìn)行A第二十二頁(yè),共37頁(yè)。二、胚胎分割閱讀課本,找出并掌握以下問(wèn)題:(1)胚胎分割的概念(2)胚胎分割所得后代的特點(diǎn)(tèdiǎn)(3)胚胎分割的理論基礎(chǔ)(4)胚胎分割所需的主要儀器(5)胚胎分割操作過(guò)程(6)胚胎分割的缺陷第二十三頁(yè),共37頁(yè)。1.概念:采用機(jī)械(jīxiè)方法將早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。第二十四頁(yè),共37頁(yè)。2.特點(diǎn):后代具有相同的遺傳物質(zhì),因此胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。3、理論基礎(chǔ)動(dòng)物胚胎細(xì)胞(xìbāo)的全能性。所以胚胎分割的時(shí)期為:囊胚或桑椹胚。第二十五頁(yè),共37頁(yè)。4、使用的主要儀器:實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀。5、具體操作選擇發(fā)育良好(liánghǎo)形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚,將其移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中,用分割針進(jìn)行分割。用分割針或分割刀片將胚胎切開,吸出其中的半個(gè)胚胎,注入預(yù)先準(zhǔn)備好的空透明帶中,或直接將裸半胚移植給受體。第二十六頁(yè),共37頁(yè)。.切幾份,之間關(guān)系,有什么方法,目前主要是2份,原因(yuányīn)概念.切什么(shénme)時(shí)期胚胎分割移植的顯微(xiǎnwēi)操作圖3-23第二十七頁(yè),共37頁(yè)。..性別(xìngbié)鑒定2第二十八頁(yè),共37頁(yè)。操作注意事項(xiàng):①對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。原因(yuányīn):內(nèi)細(xì)胞團(tuán)一般到囊胚階段才出現(xiàn),它是發(fā)育為胚胎本身的基礎(chǔ)細(xì)胞,其他細(xì)胞為滋養(yǎng)細(xì)胞,只為胚胎和胎兒發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)。若分割時(shí)不能將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,會(huì)出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)多的部分正常發(fā)育的能力強(qiáng),少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良,甚至不能發(fā)育等問(wèn)題。第二十九頁(yè),共37頁(yè)。②胚胎分割的份數(shù)越多,操作的難度會(huì)越大,移植的成功率也越低。早期胚胎的體積很小,只有在顯微鏡下才能看到;再者,細(xì)胞數(shù)目是有限的。分割的份數(shù)越多,不但難以做到均等分割,每一份的細(xì)胞數(shù)會(huì)越少,而且作為囊胚期的胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞所受的影響會(huì)更大。因此,分割的份數(shù)越多,技術(shù)的難度會(huì)越大,移植后的恢復(fù)(huīfù)和發(fā)育的難度會(huì)越大,移植成功率自然會(huì)降低。第三十頁(yè),共37頁(yè)。6、胚胎分割技術(shù)的缺陷(1)剛出生動(dòng)物的體重偏低,毛色和斑紋還存在差異;(2)采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胎(duōtāi)的可能性是有限的。常見(jiàn)的是同卵雙胎第三十一頁(yè),共37頁(yè)。專能干細(xì)胞多能(duōnénɡ)干細(xì)胞全能(quánnéng)干細(xì)胞特點(diǎn)(tèdiǎn)只能分化成一種類型或功能密切相關(guān)的兩種類型的細(xì)胞能分化成多種細(xì)胞或組織,但不能發(fā)育成完整個(gè)體能形成機(jī)體的所有組織器官,發(fā)育成完整個(gè)體舉例上皮組織基底層的干細(xì)胞,神經(jīng)干細(xì)胞造血干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞受精卵干細(xì)胞分類第三十二頁(yè),共37頁(yè)。1、概念:簡(jiǎn)稱(jiǎnchēng)ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞。2、特點(diǎn):(1)形態(tài):體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯。(2)功能:具有發(fā)育的全能性??煞只癁槌赡陝?dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞.(3)在體外培養(yǎng)的條件下,ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化。對(duì)它可以進(jìn)行冷凍保存,也可以進(jìn)行遺傳改造。第三十三頁(yè),共37頁(yè)。全能細(xì)胞囊胚胎兒內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞生殖腺細(xì)胞受精胚胎干細(xì)胞分離培養(yǎng)分離(fēnlí)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)胰蛋白酶(yídànbáiméi)處理轉(zhuǎn)入(zhuǎnrù)培養(yǎng)皿中培養(yǎng)不加飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞分化飼養(yǎng)層的細(xì)胞一般是胚胎成纖維細(xì)胞,因?yàn)榕咛コ衫w維細(xì)胞可以分泌一些能抑制細(xì)胞分化的物質(zhì),滿足促進(jìn)干細(xì)胞生長(zhǎng)的同時(shí)抑制干細(xì)胞分化的條件。EK細(xì)胞加飼養(yǎng)層細(xì)胞
培養(yǎng)ES
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