硫酸軟骨素的提取

蛋殼膜硫酸軟骨素的提取工藝及其優(yōu)化胰蛋白酶、胃蛋白酶的用量分別為１．５％、０．８％，ｐＨ值分別為８．２和５．５，酶的各自最適條件作用時間均為２．０ｈ。關(guān)鍵詞：硫酸軟骨素；蛋殼膜；胰蛋白酶；胃蛋白酶OptimizationofExtractionTechnologyofChondroitinSulfatefromEggshellMembraneLIUGuo-qing，LINGQing-zhi，SUNJun-fei(School of Biotechnology and Food Engineering, Hefei University of Technology,Heifei230009,China)Abstract：Chondroitinsulfatewasextractedfromtheeggshellmembranewithamethodofdilutealkali-enzymehydrolysis.Theproductofchondroitinsulfatewasgottenafterethanoldispositionanddesiccationbyeliminatingtheproteinwithtrypsinandpepsin.Theresultsshowedtheoptimumconditionsofweightproportion1:1.5(material:liquid),alkaliconcentration5%,temperature40℃.Dosageoftrypsinandpepsin1.5%and0.8%respectively,pHvalue8.2and5.5respectivelyandreactiontime2.0hrespectively.Keywords：chondroitinsulfate；eggshellmembrane；trypsin；pepsin(chondroitin是來自于動物軟骨和鳥類卵的殼膜等組織的一類重要[1]80℃亦不分解。一般硫酸軟骨素約含有50～70個雙糖的基本結(jié)構(gòu)，按其化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)，可分為CSD三種同分異構(gòu)體，它們均由N-氨基半乳。研究發(fā)現(xiàn)，該物質(zhì)具有良好的抗衰老功能，可以制[1]源分散、不易收集、污染嚴(yán)重的現(xiàn)狀，同時也為生產(chǎn)硫酸軟骨素提供廣泛的原料來源。合考慮產(chǎn)率和純度，稀堿-酶解提取工藝是一種較實用的方法[2,4-6]。本實驗以蛋殼膜為原料，通過研究稀堿-酶解提取工藝得到一條優(yōu)化且實用的提取硫酸軟骨素的技術(shù)路線，為實際生產(chǎn)提供參考。材料鹽酸(儀器721分光光度計；PHS-25精密pH計；DZKW電熱恒溫水浴鍋；101-1干燥箱；JA2002電子天平。方法蛋殼膜分離100g1000ml12mol/L的濃鹽酸300ml，攪拌后放置30min，用清水洗滌，除去殘留的酸液，干燥得到蛋殼膜。分離提取硫酸軟骨素與蛋白質(zhì)等成分結(jié)合在一起，用堿解提取有利于破壞硫酸軟骨素與蛋白質(zhì)之間吸附法除雜蛋白6mol/LpH6.8～7.0，在攪拌下按1:1(W/V)加入顆粒3%～4%1h53pH6.8～7.01h6mol/LpH5.2～5.42%(W/V)，并繼續(xù)(85)并保溫30min8層紗布過濾，濾液再用濾紙過濾兩次得澄清的硫酸軟骨素液。純化,至乙醇濃度為68%～72%2～360～65℃的真空干燥箱中干燥，即得白色的硫酸軟骨素粉。工藝流程：蛋殼膜提取液精提取液澄清液體黏稠沉淀濕產(chǎn)品 成品堿提取乙醇過濾丙酮脫水活性炭吸附胰蛋白酶胃蛋白酶圖1 工藝流程Fig.1 Processofextractionchondroitinsulfateof fromtheeggshell membrane蛋殼膜堿解實驗中分解率的計算實驗中蛋殼膜分解率的計算主要是看1g干蛋殼膜經(jīng)堿解后殘留物的多少，為此首先要將堿解后殘留物的重量計算出來，主要操作：①按實驗號裁取9份4層紗布分別編號1～9；②將編號的紗布