紅細(xì)胞疾病的實(shí)驗(yàn)診斷(2008級7年制)

紅細(xì)胞疾病的實(shí)驗(yàn)診斷第一節(jié)概述一、貧血定義二、貧血程度三、貧血分類（一）按照紅細(xì)胞大小分類。

貧血形態(tài)學(xué)分類：

依據(jù)MCV、MCH、MCHC及外周血紅細(xì)胞形態(tài)分類貧血的形態(tài)學(xué)分類MCV80-94flMCH26-32pgMCHC31-35%病因正細(xì)胞性貧血80-9426-3231-35再障、急性失血、大多溶貧白血病大細(xì)胞性貧血大于100大于3231-35巨細(xì)胞性貧血、營養(yǎng)性貧血惡性貧血小細(xì)胞性貧血單純小性貧血小于80小于80小于26小于26小于30

31-35缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血慢性感染、炎癥、肝病、尿毒癥、惡性腫瘤等（二）按照骨髓增生程度1、增生性貧血2、增生不良性貧血（三）病因和發(fā)病機(jī)制分類1、紅細(xì)胞生成減少、破壞增多、紅細(xì)胞丟失過量；2、缺鐵性貧血；3、溶血性貧血。第二節(jié)紅細(xì)胞生成減少性貧血的實(shí)驗(yàn)室檢測一、再生障礙性貧血1、血象2、骨髓象二、缺鐵性貧血（一）血清鐵(serumiron,SI)測定與血清總鐵結(jié)合力(totalironbindingcapacitytest,TIBC)測定（二）血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(serumtransferritin)和轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度(transferritin

saturation,TS)測定（三）血清鐵蛋白測定(serumferritin

test,SF)成年男性成年女性體內(nèi)鐵總量50~55mg/kg35~40mg/kg分布：血紅蛋白66~70%66~70%肌紅蛋白15%15%細(xì)胞酶類1%1%貯存鐵（以鐵蛋白形式）700~1000mg200~400mg三、巨幼細(xì)胞性貧血1、血清葉酸測定2、血清維生素B12測定第三節(jié)溶血性貧血實(shí)驗(yàn)室檢查溶血性貧血:各種原因使紅細(xì)胞生存時(shí)間縮短，破壞增多或加速，而骨髓代償造血功能不足以補(bǔ)償其損耗時(shí)所發(fā)生的一類貧血。正常RBC生存時(shí)間為120天,體內(nèi)RBC每天有1/120衰老破壞。當(dāng)RBC生存時(shí)間縮短,破壞增加,骨髓將代償增生以維持其平衡。正常人骨髓具有6-8倍代償造血能力,當(dāng)溶血程度較輕,骨髓造血代償足以補(bǔ)償紅細(xì)胞的損耗時(shí),不出現(xiàn)貧血,為代償性溶血病。如紅細(xì)胞生存時(shí)間短至15-20天以下,破壞速度超過骨髓代償能力,才出現(xiàn)貧血,稱為溶血性貧血。溶血性疾病≠溶血性貧血溶血性貧血分類（病因分類）RBC內(nèi)在缺陷:膜結(jié)構(gòu)與功能缺陷：遺傳性球形RBC增多癥、橢圓形RBC增多癥、陣發(fā)性睡眠性Hb尿等;Hb珠蛋白肽鏈合成異常:量-海洋性貧血,質(zhì)-異常Hb綜合癥;代謝酶缺陷：ATP生成障礙至RBC壽命縮短、先天性非球型RBC貧血.RBC外在環(huán)境異常:自免疫性溶血病;新生兒溶血病;溶血性病原體：金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、瘧疾等;物理化因素和機(jī)械性破壞：脾亢、瓣膜移植、化學(xué)藥物、蛇毒等;異型輸血一、溶血性貧血的篩查檢測血漿游離Hb檢測RBC內(nèi)Hb游離至漿→游離Hb↑主要見于血管內(nèi)溶血血清結(jié)合珠蛋白檢測游離Hb↑→結(jié)合珠蛋白↓→血紅素↓各種溶血時(shí)血清血清結(jié)合珠蛋白均有減低；血管內(nèi)溶血減低最顯著；血漿高鐵血紅素清蛋白檢測血漿游離Hb轉(zhuǎn)變?yōu)楦哞FHb：高鐵血紅素清蛋白↑陽性表示為嚴(yán)重血管內(nèi)溶血。含鐵血黃素尿試驗(yàn)（ROUS試驗(yàn)）Hb經(jīng)腎小管上皮細(xì)胞吸收后分解血紅素為原卟啉+鐵，鐵升高以含鐵血紅素形式沉積在上皮細(xì)胞內(nèi)或游離在細(xì)胞外排出，經(jīng)普魯士藍(lán)反應(yīng)染深藍(lán)色，顯微鏡檢查可見。慢性血管內(nèi)溶血可呈持續(xù)陽性；常見于陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿。RBC壽命縮短正常紅細(xì)胞半衰期為25-32天；溶血性貧血時(shí)常<15天。二、紅細(xì)胞膜缺陷的檢查RBC滲透脆性試驗(yàn)（RBC膜抵抗力檢測）脆性增高：開始溶血>0.50%,完全溶血>0.38%;見于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。脆性減低：海洋性貧血溫育后滲透脆性試驗(yàn)較上試驗(yàn)敏感,常用于輕癥遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性非球形細(xì)胞溶血性貧血的診斷和鑒別診斷。脆性增加：見于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性非球形細(xì)胞溶血性貧血;脆性減低：見于珠蛋白生成障礙性貧血、缺鐵性貧血、鐮形細(xì)胞貧血、脾切除術(shù)后。自身溶血及糾正試驗(yàn)遺傳性球形RBC增多癥、先天性非球形RBC性溶貧的鑒別診斷。遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥孵育后溶血明顯增強(qiáng)，加入葡萄糖及ATP溶血均得到明顯糾正；I型先天性非球形紅細(xì)胞性溶血性貧血（G-6-PD缺陷）時(shí)自身溶血加重，加入葡萄糖及ATP溶血均得到明顯糾正；II型（丙酮酸激酶缺陷癥)自身溶血增強(qiáng)，加入葡萄糖孵育溶血不能糾正，只有加入ATP溶血才能糾正。三、紅細(xì)胞酶缺陷的檢測參與紅細(xì)胞代謝（主要是糖代謝）的酶由于基因缺陷導(dǎo)致活性改變而發(fā)生溶血的一組疾病。常見酶缺陷：G-6-PD缺陷PK缺陷常用檢查試驗(yàn)高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)紅細(xì)胞G-6-PD缺陷時(shí)，高鐵血紅蛋白還原率明顯下降；主要見于蠶豆病和伯氨喹啉型藥物溶血性貧血。氰化物-抗壞血酸試驗(yàn)紅細(xì)胞G-6-PD缺陷時(shí)，2-4h發(fā)生顏色改變；變形珠蛋白小體生成試驗(yàn)紅細(xì)胞G-6-PD缺陷、不穩(wěn)定Hb、HbH病等增高；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)和活性測定紅細(xì)胞G-6-PD缺陷時(shí)，熒光很弱或無熒光；活性降低。丙酮酸激酶熒光篩選試驗(yàn)和活性測定K嚴(yán)重四、珠蛋白生成異常的檢查血紅蛋白電泳HbA2增高：是診斷β-輕型地中海貧血的重要依據(jù);HbA2減低：見于缺鐵性貧血及鐵粒幼細(xì)胞貧血；胎兒血紅蛋白酸洗脫試驗(yàn)陽性主要見于地中海貧血。胎兒血紅蛋白測定或HbF堿變性試驗(yàn)β-輕型地中海貧血明顯增高。HbA2定量測定限制性內(nèi)切酶譜分析----Hb病的基因診斷第四節(jié)獲得性溶血性貧血的常用實(shí)驗(yàn)檢測抗人球蛋白試驗(yàn)antihumanglobulintest又稱Coombs試驗(yàn)原理：本試驗(yàn)是檢查不完全抗體的方法，是診斷自身免疫性溶血性貧血的試驗(yàn)。在AIHA病人血液中常含有抗自身RBC的不完全抗體，且多與表面含有相應(yīng)抗原的RBC結(jié)合，使之成為致敏RBC，這種不完全抗體是IgG，故在鹽水中并不形成凝集，當(dāng)加入抗人球蛋白血清后，抗人球蛋白+不完全抗體+RBC形成肉眼凝集，此即Coombs試驗(yàn)陽性，用以檢查RBC膜上不