DB42T 1786.3-2023 生豬疫病防控技術(shù) 第3部分：非洲豬瘟監(jiān)測(cè)樣品采集技術(shù)規(guī)程

發(fā)布發(fā)布湖北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局2023030620230106Preventionandcontroltechnologyofswinedisease—Part3：TechnicalregulationsofsamplecollectionformonitoringafricanswinefevervirusICS65.020.30ICS65.020.30CCSB41湖 北 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB42/T1786.3—2023生豬疫病防控技術(shù)3DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023目 次前言 III引言 V1范引文件 1語(yǔ)定義 1品集理檢法 1采前備 1樣的集 2樣處、存輸 2檢方法 2場(chǎng)境測(cè)品集 2采位選原則 2環(huán)監(jiān)樣采法 2辦及活樣集 2豬內(nèi)境測(cè)采集 3豬外境測(cè)采集 3人監(jiān)樣采集 3車監(jiān)樣采集 4群測(cè)品集 4理案 4案錄 4附錄A（料） 車樣品集位意圖 6附錄B（料） 種群樣采數(shù)計(jì)公式 7附錄C（范） 群數(shù)量大采數(shù)表 8IIIIIIIIIII前 言本文按GB/T1.1—2020《準(zhǔn)工導(dǎo)則 第部分標(biāo)化件結(jié)和起規(guī)》起草。本文件是DB42/T1786《生豬疫病防控技術(shù)》的第3部分。DB42/T1786已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：偽狂犬病監(jiān)測(cè)評(píng)估技術(shù)規(guī)程；——第2部分：傳染性胸膜肺炎監(jiān)測(cè)評(píng)估技術(shù)規(guī)程；——第3部分：非洲豬瘟監(jiān)測(cè)樣品采集技術(shù)規(guī)程。本文件為首次發(fā)布。本文件實(shí)施應(yīng)用中的疑問(wèn)，可咨詢湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳，聯(lián)系電話bxms@163.com。IVIVVV引 言（OIE）DB42/T1786——第1部分：偽狂犬病監(jiān)測(cè)評(píng)估技術(shù)規(guī)程。目的在于對(duì)采用的檢測(cè)技術(shù)，監(jiān)測(cè)群體的規(guī)模以及監(jiān)測(cè)頻次提出相應(yīng)的規(guī)范要求?！?部分：傳染性胸膜肺炎監(jiān)測(cè)評(píng)估技術(shù)規(guī)程。目的在于對(duì)豬傳染性胸膜肺炎的檢測(cè)、預(yù)防和治療提出相應(yīng)的規(guī)范要求。——3DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—202311采樣前準(zhǔn)備4 監(jiān)測(cè)品 monitoringsample取自生豬或環(huán)境，擬通過(guò)檢測(cè)反映個(gè)體、群體或者環(huán)境有關(guān)狀況的材料或物料。監(jiān)測(cè) monitoring采用規(guī)定的方法，持續(xù)對(duì)特定群體中疫病的發(fā)生、流行、分布及相關(guān)因素進(jìn)行觀察和檢測(cè)的過(guò)程。非洲瘟 africanswinefever是由非洲豬瘟病毒（ASFV）感染家豬和野豬的一種急性、熱性、高度接觸性動(dòng)物傳染病，以高熱、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)出血和高死亡率為特征。[來(lái)源：SN/T1559-2010，3.1，有修改]下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3 GB/T27522 NY/T541 NY/T1948 SN/T1559-2010 生豬疫病防控技術(shù)第3部分:非洲豬瘟監(jiān)測(cè)樣品采集技術(shù)規(guī)程范圍（GB/T18648 GB 19489 GB/T25169 22采樣位置選擇原則工作中高頻率接觸點(diǎn)、不易清洗點(diǎn)等高風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)。環(huán)境監(jiān)測(cè)樣品采集方法戴一次性PE手套，將用生理鹽水充分浸濕的無(wú)菌棉拭子在物體表面涂抹3-5次后，放入裝有1-2ml滅菌PBS的離心管中。做好標(biāo)記后冷藏或冷凍狀態(tài)下保存或送檢。辦公及生活區(qū)樣品采集辦公及生活區(qū)各場(chǎng)所樣品采集按表1規(guī)定執(zhí)行。表1 辦公生區(qū)品集數(shù)及樣率采樣人員經(jīng)洗手消毒，穿戴好一次性手套、防護(hù)服、口罩、鞋套，攜帶采樣所需物品。PBS75樣品的采集NY/T541GB/T25169275222-5g6樣品處理、保存與運(yùn)輸樣品處理、保存及運(yùn)輸，應(yīng)符合NY/T541中的規(guī)定。檢測(cè)方法按GB/T18648中的非洲豬瘟病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法檢測(cè)非洲豬瘟病毒核酸。采樣區(qū)域采樣點(diǎn)樣品份數(shù)采樣頻率藥房地面、墻壁、門把手、藥品貨架、窗戶、桌椅每個(gè)采樣點(diǎn)采集3-5個(gè)樣品，每個(gè)采樣區(qū)域的樣品混1進(jìn)行檢測(cè)。每周1次庫(kù)房地面、墻壁、門把手、窗戶、墊板、貨架、維修工具把手辦公室地面、墻壁、門把手、窗戶、桌椅獸醫(yī)室門把手宿舍水孔門衛(wèi)房地面、墻壁、門把手、窗戶、桌椅、鑰匙33人員監(jiān)測(cè)樣品采集豬舍外環(huán)境監(jiān)測(cè)樣品采集豬舍外環(huán)境樣品采集按表3規(guī)定執(zhí)行。表3 豬舍環(huán)樣采點(diǎn)樣品集數(shù)采頻率表1 辦及活樣集份及樣率續(xù)）采樣區(qū)域采樣點(diǎn)樣品份數(shù)采樣頻率洗澡間地面、墻壁、門把手、窗戶、盥洗臺(tái)面、水龍頭把手、排水孔每個(gè)采樣點(diǎn)采集個(gè)樣品，每個(gè)采樣區(qū)域的樣1樣本進(jìn)行檢測(cè)。每周1次餐廳地面、墻壁、門把手、窗戶、桌椅化驗(yàn)室操作臺(tái)面、冰箱門外表面、地面、門把手、座椅、顯微鏡調(diào)焦把手廚房冰箱冰柜門把手、蔬菜筐外來(lái)物資表面飼料、獸藥、食材、果蔬、辦公用品及外包裝每次進(jìn)場(chǎng)前豬舍內(nèi)環(huán)境樣品采集按表2規(guī)定執(zhí)行。表2 豬舍環(huán)樣采點(diǎn)樣品集數(shù)采頻率采樣區(qū)域采樣點(diǎn)樣品份數(shù)采樣頻率豬舍欄位3盤、料桶每個(gè)采樣點(diǎn)域采集1-2份樣品，51份。每周1次舍內(nèi)過(guò)道豬舍內(nèi)每個(gè)過(guò)道，選取至少3處豬舍糞道側(cè)壁、糞溝內(nèi)水樣、生產(chǎn)工具(糞鏟或掃把)各2處通風(fēng)系統(tǒng)所有風(fēng)機(jī)葉片，防護(hù)網(wǎng)窗口各2處豬舍水源每棟豬舍采集2處采樣區(qū)域采樣點(diǎn)樣品份數(shù)采樣頻率主要道路（無(wú)交叉路面的為一段3個(gè)點(diǎn)采集混合樣品每個(gè)采樣點(diǎn)采集1-2份樣5每周1次出豬臺(tái)地面、墻壁、地磅、欄桿、擋板趕豬通道地面、欄桿、擋板豬舍外墻每棟舍每塊水簾縫隙、窗戶滑道，各3處無(wú)害化處理點(diǎn)地面、墻壁、門把手、窗戶糞污每棟的排污口、場(chǎng)區(qū)主排污口污水每棟的排污口、場(chǎng)區(qū)主排污口洗消點(diǎn)所有通道、墻壁、排污口冷庫(kù)墻壁、門把手、通道土壤主要道路邊、豬舍周邊裸露的土壤8 8 4按照本文件采樣方案檢測(cè)樣品中如非洲豬瘟病毒核酸出現(xiàn)陽(yáng)性，則按照國(guó)家現(xiàn)行非洲豬瘟疫情處19489和NY/T1948GB194897 表5 不同群樣例采頻率各類人員樣品采集按表4規(guī)定執(zhí)行。表4 各類員品集數(shù)采樣率人員分類采樣部位及份數(shù)采樣頻率豬場(chǎng)隔離點(diǎn)人員用生理鹽水浸濕的無(wú)菌棉拭子采集1每次入場(chǎng)前洗消人員、司機(jī)每隔3天1次生豬轉(zhuǎn)運(yùn)人員（司機(jī)、趕豬人員、司磅員等）每次入場(chǎng)前其他人員每次入場(chǎng)前場(chǎng)內(nèi)辦公及生產(chǎn)人員每月一次車輛監(jiān)測(cè)樣品采集2011。豬群監(jiān)測(cè)樣品采集時(shí)不同豬群的抽樣比例及采樣頻率按表5規(guī)定執(zhí)行。豬群抽樣比例（%）樣品類型采樣頻率新引種豬100扁桃體、口鼻拭子每次引種前種公豬100扁桃體、口鼻拭子每月一次后備種豬100扁桃體、口鼻拭子生產(chǎn)母豬B件下，不同預(yù)期流行率、不同可接受誤差的采樣數(shù)量參見(jiàn)附錄C?？诒鞘米涌诒鞘米涌诒鞘米颖Ｓi口鼻拭子育成豬口鼻拭子異常豬/病死豬100尾根血拭子、深部咽拭子、口腔液、腹股溝淋巴結(jié)隨時(shí)注：每5頭豬樣混成一份樣品檢測(cè)。55附錄A（資料性）車輛樣品采集部位示意圖小型車監(jiān)測(cè)樣品采集部位參見(jiàn)圖1。圖A.1小型車監(jiān)測(cè)樣品采集部位示意圖貨車等大型車監(jiān)測(cè)樣品采集部位參見(jiàn)圖2。圖A.2大型車監(jiān)測(cè)樣品采集部位示意圖6附錄B（資料性）種豬群樣品采集數(shù)量計(jì)算公式群內(nèi)個(gè)體數(shù)量大，對(duì)抽樣數(shù)量的影響可忽略不計(jì)時(shí)，采樣數(shù)量的公式如下：2??=??(1???)×??2 (B.1)2??式中：P——預(yù)期流行率；z——1-α/2z90%951.641.96e——可接受的最大絕對(duì)誤差。7式中：n7式中：n——無(wú)限群的抽樣數(shù)量；N——目標(biāo)群內(nèi)的個(gè)體數(shù)。一般