人體解剖生理學實驗

試驗二：神經(jīng)--肌肉標本的制備與骨骼肌收縮[試驗內容]坐骨神經(jīng)—排腸肌標本的制備刺激強度與骨骼肌收縮反響的關系骨骼肌單收縮的分析骨骼肌收縮的總和與強直收縮[目的要求]學習蛙類動物單毀髓與雙毀髓的方法。學習并把握蛙類坐骨神經(jīng)－排腸肌標本的制備方法。學習肌肉試驗的電刺激方法及肌肉收縮的記錄方法。觀看刺激強度與肌肉收縮反響的關系。3個時期。式的轉變。[根本原理]蛙類的一些根本生命活動和生理功能與恒溫動物相像，假設將蛙的神經(jīng)-肌肉說明神經(jīng)和肌肉產生了一次興奮。在生理學試驗中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本爭辯神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性；刺激與反響的規(guī)律和肌肉收縮的特征等，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標本是生理學試驗的一項根本操作技術。度為最適刺激強度。3個時期：埋伏期、收縮期和舒張期。直收縮。[動物與器材]蛙或蟾蜍、常用手術器械(手術剪、手術鑷、手術刀、金冠剪、眼科剪、眼科鑷、毀髓針和玻璃分針)、蠟盤、蛙板(木質或硬泡沫塑料)、玻璃板、同定針、鋅銅弓、培育皿或不銹鋼盤、污物缸、滴管、紗布、粒棉線、任氏液。計算機采集系統(tǒng)、張力傳感器(100g)[試驗方法與步驟]一、神經(jīng)－肌肉標本的制備破壞腦、脊髓取蟾蜍一只，用自來水沖洗干凈〔勿用手搓〕。左手握右手持探針由頭顱后緣的枕骨大孔處垂直刺入椎管〔5.1-1〕。然后將探針改2～3有碰及顱底骨的感覺。呼吸運動消逝,四肢完全松軟，失去一切反射活動。此時可將探針反向捻動，退出椎管。如蟾蜍仍有反射活動，表示腦和脊髓破壞不徹底，應重破壞。剪除軀干上部、皮膚及內臟用左手捏住蟾蜍的脊柱，右手持粗剪刀在柱兩側將腹壁及內臟剪去(留意避開坐骨神經(jīng)),并剪去肛門四周的皮膚，留下脊柱和后肢。剝皮一只手捏住脊柱的斷端〔留意不要捏住脊柱兩側的神經(jīng)〕，另一只手捏住其皮膚的邊緣,向下剝去全部后肢的皮膚〔圖5.1-2〕。將標本放在干凈的任氏液中。將手及使用過的探針、剪刀全部沖洗干凈。分別兩腿用鑷子取出標本,左手捏住脊柱斷端,使標本反面朝上，右手〔也可不進展此步〕。然后將脊柱腹側向上，左手的兩剪刀沿正中線將脊柱盆骨分為兩半(留意，勿傷坐骨神經(jīng))。將一半后肢標本置于盛有任氏液中備用,另一半放在蛙板上進展以下操作。7、8、9〔肛門處〕繞過坐骨聯(lián)到達膝關節(jié)腘窩處有分支進入腓腸肌〔5.1-3〕。游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌用蛙釘或左手的兩個手指將標本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標本的背側于股二頭肌與半在其跟腱處穿線、結扎。剪去其它不用的組織操作從脊柱向小腿方向進展。①剪去多余的脊柱和肌肉 將后肢標本腹面對上，將坐骨神經(jīng)連同2～3節(jié)脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來再將標本反面對上用鑷子輕輕提起脊椎上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支，直至腘窩〔圖5.1-4(A)〕，并搭放在1/3〔2/3〕，制成坐骨神經(jīng)-小腿的標本。肌的結扎線剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關節(jié)以下部位，便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本〔5.1-4(B)〕。檢驗標本用沾有任氏液的鋅銅弓觸及一下〔或電刺激刺激〕坐骨神經(jīng)用熱玻棒、食鹽〔或1%HSO濾紙〕刺激坐骨神經(jīng)中樞端〔或肌肉〕，觀看肌肉2 4程中肌肉收縮有何變化?二、刺激強度與骨骼肌收縮反響的關系試驗儀器用品的預備(100g)見圖。調整好扎線的張力，不行過松或過緊，以使肌肉自然拉平為宜(保證肌肉一旦收縮，即可牽動張力傳感器的應變梁)。計算機采集系統(tǒng)的預備即可進展試驗。試驗觀看啟動刺激圖標，觀看肌肉收縮反響。假設肌肉無收縮反響，則適當增度。同法漸漸增加刺激強度，觀看刺激強度與肌肉收縮反響的關系。3－4次同等高度的收縮曲線和刺激強度。將試驗結果填入表。表 刺激強度與收縮反響的關系試驗次數(shù)試驗次數(shù)刺激強度〔mV〕收縮幅度〔mm〕三、骨骼肌單收縮的分析試驗儀器用品的預備〔見上〕試驗觀看刺激腓腸肌選用單刺激方式，調整刺激強度、使肌肉收縮的幅度適中(30mm左右)。將試驗3個時程：埋伏朋、收縮期與舒張期。〔2〕刺激坐骨伸經(jīng)將神經(jīng)搭在肌槽的刺激電極上，刺激輸出與肌槽上的刺激電極連接(圖2－。在刺激參數(shù)部不變的狀況下，比較刺激神經(jīng)與刺激腓腸肌的單收縮曲線。四、骨骼肌收縮的總和與強直收縮試驗儀器用品的預備〔見上〕試驗觀看收縮的總和變化。強直收縮3－5mm調整1.5次/s(5)、6次/s(10)、10次(2—9)有間歇，使肌肉休息片刻。[留意事項]用金屬器械觸碰神經(jīng)干。標本的興奮性。制備標本時，神經(jīng)纖維應盡可能長一些，將附著于神經(jīng)干上的結締組織使標本興奮性穩(wěn)定,再開頭試驗效果會較好。各儀器應妥當接地，儀器之間、標本與電極之間應接觸良好。經(jīng)常滴加任氏液，保持標本潮濕[思考題]?為什么??如何保持標本的機能正常？是什么？及生理過程？刺激骨骼肌與刺激神經(jīng)的單收縮曲線有何不同？完全強直收縮的條件與機制。試驗三：影響神經(jīng)沖動傳導的因素觀看試驗目的：備方法?！舶p相和單相動作電位〕。學習和把握神經(jīng)干動作電位傳導速度測定的原理和方法。何種影響？試驗原理：蛙類的一些根本生命活動和生理功能與恒溫動物相像，假設將蛙的神經(jīng)-肌肉說明神經(jīng)和肌肉產生了一次興奮。在生理學試驗中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本爭辯神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性；刺激與反響的規(guī)律和肌肉收縮的特征等，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標本是生理學試驗的一項根本操作技術。奮過程所發(fā)生的這種電位變化稱神經(jīng)干動作電位。假設將兩個引導電極置于正常完整的神經(jīng)干外表，當神經(jīng)干的一端興奮之后，興奮波會先后通過兩個引導電極(r1r1’,5.5-1)，可記錄到兩個相反方一個方向的電位偏轉波形，稱為單向動作電位。化而轉變，這一點不同于單根神經(jīng)纖維的動作電位。傳導速度各不一樣。蛙類坐骨神經(jīng)干中以Aα類纖維為主，傳導速度(V)大約為35～40m/s。測定神經(jīng)沖動在神經(jīng)干上傳導的距離(d)與通過這段距離所需的時(t)，V=d/tt1，t2，t2～t1動作電位起點的間隔時間)；然后再測量標本屏蔽盒中兩對引導電極起始電極之d(5.5–15.5-2r1～r2速度(V)＝d/(t2～t1)?m?s-1。動作電位的傳導速度與動作電位產生的速度親熱相關,都是以離子運動為根底動作電位在神經(jīng)干上傳導的速度產生影響。儀器與試劑及材料：蟾蜍或青蛙、神經(jīng)標本屏蔽盒、電子刺激器、示波器或計算機生物信號采集〔或尖頭無齒鑷〕、金屬探針〔解剖針〕、玻璃分針、蛙板〔或玻璃板〕、蛙釘、細線、培育皿、滴管、雙凹夾、培育皿、倍氯化鉀任氏液、0.5試驗方法與步驟：神經(jīng)－肌肉標本的制備坐骨神經(jīng)標本的制備定后開頭試驗。儀器及標本的連結用浸有任氏液的棉球擦拭神經(jīng)標本屏蔽盒上的電極，標本盒內放置一遠中端置于引導電極上。假設使用刺激器、示波器進展試驗，則參照圖5.5-1連接儀器。Hz，0.1～0.2ms，強度依據(jù)標本興2ms/cm。外觸發(fā)輸入接刺激器的觸發(fā)輸出端。觸發(fā)選擇置于外觸發(fā)同步。開啟至熒光屏中間。5.5-2CH1、CH2觀測和測定雙相動作電位緩慢增大刺激強度，在偽跡后消滅的先上(負相波)后下(正相波)的電作電位波形的變化。讀出波寬為某一數(shù)值時的閾刺激。增大刺激強度的過程中，偽跡和動作電位均隨之加大，但當強度加大加大。這是區(qū)分刺激偽跡與動作電位的牢靠方法之一。5.5-3)電位上下相的振幅和整個動作電位持續(xù)時間數(shù)值。將神經(jīng)干標本放置的方向倒換后，雙相動作電位的波形有無變化？5．觀看單相動作電位用鑷子將兩個引導電極r1,r13mol/L數(shù)值。6．動作電位傳導速度的測定換一根坐骨神經(jīng)，按步驟3〔1〕搭放在神經(jīng)屏蔽盒的電極上。進入“神經(jīng)干〔則可在一個通道內顯示兩個通道的圖形個通道中〔或示波器的上、下線〕觀看到先后形成的兩個雙向動作電位波形。t1，下線為t2(t2～t1d(即測定r1～r25min導速度。5min的傳導速度。試驗結果：V＝d/(t2～t1)(m/s)。留意事項：用金屬器械觸碰神經(jīng)干。標本的興奮性。制備標本時，神經(jīng)纖維應盡可能長一些，將附著于神經(jīng)干上的結締組織使標本興奮性穩(wěn)定,再開頭試驗效果會較好。各儀器應妥當接地，儀器之間、標本與電極之間應接觸良好。經(jīng)常滴加任氏液，保持神經(jīng)標本潮濕，但要用濾紙片吸去神經(jīng)干上過多上，以免影響動作電位的波形。測定動作電位傳導速度時，兩對引導電極間的距離應盡可能大。思考題：神經(jīng)被夾傷或經(jīng)KCl溶液處理后，動作電位的其次相為何消逝?特性有沖突嗎？為什么?引導電極調換位置后，動作電位波形有無變化?為什么?t1算神經(jīng)動作電位傳導速度?用一對引導電極能否測定神經(jīng)動作電位傳導速度?的？4℃附：刺激偽跡漸漸增大刺激強度時，在屏幕的左側基線上第一個波即為偽它的產生氣制有二，一是通過刺激電極與記錄電極之間的電容偶合進入放大器，激器、示波器功能狀態(tài)的標志。但偽跡太大，會使動作電位發(fā)生畸變。細胞膜的電纜學說細胞外液和細胞內液均為含電解質的液體，可以看作為兩個導體，有肯定的電阻；細胞膜是含脂質的膜，相對地視作絕緣體，與前變小，是膜外電阻、膜電阻及膜內電阻引起的后果。雙極記錄法本試驗使用的記錄方法為雙極記錄法，所記錄到的電位變反映了膜外電位的轉變。刺激的極性法則以直流電作用于神經(jīng)時，在通電、斷電時均可產生興時發(fā)生興奮的緣由；陽極下的興奮性降低，稱為陽極電緊急．斷電后，陰極下的興奮性降低，稱為陰極后壓抑；陽極下的興奮性上升，稱為陽極后加強，是斷電時發(fā)生興奮的緣由，通常所說的刺激發(fā)生在陰極下，刺激時陰極下的外向電流，指的就是通電的狀況而言的。記錄介質通常所說雙相動作電位的波形，其記錄介質是空氣或油。假設上滴過多的任氏液。試驗四：蛙類離體心臟灌流及藥物影響〔綜合設計性試驗〕試驗目的：學習離體蛙心灌流的試驗方法，了解離體器官的爭辯方法。了解腎上腺素、乙酰膽堿等激素、神經(jīng)遞質對心臟活動的調整意義。。試驗原理：壞，例如酸堿度及離子濃度的急劇轉變等，心臟的活動就會受到影響。釋放乙酰膽堿，使心肌收縮力氣減弱，心率減慢。的影響與其內部所含物質的成份有關。動物與器材：蛙心夾,計算機采集系統(tǒng),張力傳感器,滴管,培育皿,污物缸,紗布,棉線,橡皮泥,,0.65%NaCl1%CaCl1%KCl3%2.5%NaHCO1:50002方法與步驟：取一只蛙或蟾蜍,雙毀髓后背位于蠟盤中,認真識別心臟四周的大血管。在左動脈下方穿一線,于動脈圓錐處結扎,再從左右兩動脈下方穿一線,并打一活蛙心套管,然后將盛有少量任氏液的斯氏蛙心套管,由開口處插入動脈圓錐.當套管進到大動脈圓錐基部時,應將套管稍稍后退,提取蛙心夾連線并使蛙心套管尖端向動脈圓錐的背部后下方及心尖方向推動,經(jīng)動脈瓣插入心室腔內。此時可見吸去套管中的血液,更換穎任氏液。穩(wěn)定套管后,輕輕提起備用線,將左右動脈連同插入的套管用雙結扎緊(不得漏液),再將結線固定在套管的小玻璃鉤上,然心室內余血,使血管內灌流液不再有殘留血液,保持套管內液面高度全都,進展試驗。將插好的離體心臟套管固定在支架上,用蛙心夾住少許的心尖部肌肉.再傳感器上,調整顯示器的心臟收縮的曲線幅度適中。試驗觀看度。試驗工程設計及結果觀看溫度對無機離子蛙心活動的影響A0.65%NaClB0.65%NaCl1%CaCl2心跳變化。

1～2C1%CaCl1～21%KCl1～22觀看心跳變化。0.012～3觀看心跳變化。遞質和激素對蛙心活動的影響A0.01%1～2滴，觀看心跳變化。B3%1～2察心跳變化。待心跳變化明顯時，馬上參加2.5%NaHCO3逐步恢復。心血管藥物對蛙心活動的影響

溶液1～2滴，觀看心跳試驗結果。觀看自己提取的植物制劑和人民常飲用的化合物對例題蛙心的活動影響有機化合物：乙醇、甲醇等?！蝉r組織用量多些泡冷卻后備用。設計試驗觀看的工程數(shù)量10進展試驗。留意事項：3復正常后再進展下一項試驗。錯。響試驗結果。蛙心插管內液面應保持恒定高度。保持記紋鼓轉速均勻全都。思考題：本試驗說明心肌的那些生理特征？用試驗說明內環(huán)境相對恒定的意義。試分析任氏液中適量離子,鈣離子,鉀離子對心肌的影響。為何強調試驗保持灌流液面的恒定?灌流量對心臟活動的有什么影響？試想,活的機體在心交感神經(jīng)興奮時或迷走神經(jīng)興奮時對心臟有何影響？附：離子和藥物對離體蛙心活動的影響的解釋K＋對心臟活動的影響：總體看來心肌對細胞外K＋濃度變化比較敏感；但是不同部位心肌的敏感性細胞外液鉀濃度增高時，對興奮性的影響與其濃度增高的程度有關。當K＋濃度輕度或者中度上升時，細胞內外K＋的濃度梯度減小，K＋外流的力氣減弱,靜〔RP〕確實定值減小,和閾電位(TP)差值減小,細胞的興奮性增高；當K＋的濃度大幅度的上升，RP〔膜內－55mv〕時，鈉通道的開放舒張狀態(tài)。此時，僅由Ca2＋的內流來構成動作電位，故上升支小而緩慢，使興奮傳導速度減慢，傳導性降低。程加速，平臺期縮短，不應期也縮短。K＋Ca2＋在細胞膜上有競爭性抑制；因此當膜外K＋的濃度上升時，平臺期內流的Ca2＋削減，心肌細胞內。4Ca2＋對心臟活動的影響：Na＋用。因此，細胞外Ca2＋濃度發(fā)生變化時，與Ca2＋Na＋