蟲草培養(yǎng)基制備操作細(xì)節(jié)分析_第1頁
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蟲草培育基制備操作細(xì)節(jié)解析天然冬蟲夏草是昆蟲和真菌的結(jié)合體,是蟲草菌寄生于鱗翅目蝙蝠蛾的幼蟲生長而成。生長在海拔3500—4000以上的頂峰草甸區(qū),對自然環(huán)境要求特別,所以產(chǎn)量低,再加上人們盲目的采伐,資源日益缺少,價格昂貴,是稀有的緊缺藥材。經(jīng)過用人工培育方法獲得更多的冬蟲夏草與天然冬蟲夏草成分基本一致,能夠代替天然冬蟲夏草。人工培育冬蟲夏草技術(shù),使其成分周邊,各種成分對機體的免疫調(diào)治功能已被廣泛證明,并且還大大的提升了產(chǎn)量,價格相對低價,能夠知足更多人需求。人工培育冬蟲夏草是在培育基中生長的,培育基是蟲草菌種生長的環(huán)境,也是菌種生長的必備營養(yǎng)物質(zhì),它的利害直接影響著菌絲的質(zhì)量。培育基的制備是整個操作過程中最基礎(chǔ)也是最重要的。培育基是微生物生長的基礎(chǔ),是用人工方法將多種營養(yǎng)物質(zhì)按微生物生長代謝的需要配制成的一種營養(yǎng)物質(zhì)。微生物種類眾多,對營養(yǎng)物質(zhì)的要求各異,再加上實驗和研究的目的不同樣,培育基的組成成分也有較大的差別。成分稱量與溶解百令膠囊的冬蟲夏草菌種比較喜愛半固體培育基。一般以玉米粉,葡萄糖為碳源;硝酸鈉為無機氮源;牛肉膏、蛋白胨為有機氮源;硫酸鎂為無機鹽;VB1、VB2為生長因子。依據(jù)培育基1/5配方,正確稱取各種成分,放入大批杯。將以量取好的純化水拿出少量,倒入大批杯中,用玻璃棒攪拌使其溶解。把節(jié)余的水倒入不銹鋼鍋加熱煮沸,倒入瓊脂粉5~10%持續(xù)加熱至瓊脂完整融化。在加熱過程中用玻璃棒不停攪拌,以防瓊脂積淀在鍋底燒焦,同時也促使它溶解。待瓊脂完整融化后,將大批杯中以溶解的原料倒入鍋中,持續(xù)加熱,使原料充分溶解,直到微沸為止。加熱時要控制火力,省得培育基爆騰而溢出容器。有些不易溶解的原料如牛肉膏,蛋白胨等可先在小容器中加少量水,加熱溶解后再倒入容器中。2調(diào)PH用30%NaOH溶液和30%HCL溶液調(diào)pH,用精美PH機進行測定。預(yù)熱、校準(zhǔn)儀器后,即可用來測定培育基。先測培育基溶液溫度,可否已降到與標(biāo)定溶液溫度同樣,若是還高于標(biāo)定溶液溫度,等培育基溶液降溫至標(biāo)定溶液溫度一致時再測定PH值。不然測定出的PH值是不正確的。用餾水洗電極頭部,用被培育基溶液沖刷一次,按“讀數(shù)”鍵,把電極浸入培育基溶液中,用玻璃棒攪拌溶液,使溶液平均,在顯示屏上讀出溶液的PH值。先測定培育基初始PH,如PH值偏酸,則加30%NaOH溶液,偏堿則加30%HCL溶液。屢次幾次調(diào)治至PH7。2/5其實這樣用酸堿屢次調(diào)PH的方法其實不好,會影響培育基的成分和質(zhì)量。培育基成分的原由,使培養(yǎng)基自己成酸性,所以直接用30%NaOH調(diào)PH。加NaOH時要慢慢地放,情愿少補,不可多。固然這個方法比較麻煩,但是它不影響培育基的成分和質(zhì)量,并且還節(jié)約了試劑。分裝趁熱按規(guī)定的量將培育基分裝到茄型瓶、試管中。一般裝容器的(20-30)%量。裝量過多,培育基是多種營養(yǎng)物質(zhì)的混懸液,多半擁有粘性,在分裝時要注意,不使培育基沾污瓶口或管口,省得污染棉塞,造成雜菌生長。滅菌冬蟲夏草培育基采納高壓蒸汽滅菌,主若是經(jīng)過升溫使蛋白質(zhì)變性進而達到殺死微生物的收效。滅菌的時間與溫度直接影響著培育基的利害。配制達成的培育基,因?qū)崟r進行滅菌操作,若耽誤了時間,會因雜菌生長,致使培育基變質(zhì)而不能夠使用。特別在氣溫高的狀況下,如不能夠?qū)崟r滅菌,數(shù)小時內(nèi)培育基便可能變質(zhì)。依據(jù)培育基的成分,用途等不同樣,滅菌的時間也不同樣。冬蟲夏草菌種用的培育基用高壓蒸汽滅菌鍋(118-122)℃滅菌(29-31)min。滅菌升溫與降溫時間不宜過長,會破壞培育基部分有效成分,3/5并使培育基顏色變黃紅色,影響菌種的生長。滅菌注意事項,滅菌前先要排冷空氣,能夠提升滅菌時升溫速度,省得升溫時間過長,培育基長時間悶于滅菌柜中,被破壞有效成分。滅菌柜內(nèi)不能夠放過多過擠培育基,省得部分培育基滅菌不完全。滅菌達成后,小排氣,省得培育基沖瓶口。等滅菌柜夾層溫度降至95℃,以防燙傷人員;壓力降到0KPa,方可開門去培育基。定型培育待滅菌拿出后,立刻輕搖試管或茄型瓶,將沾在瓶內(nèi)壁上的培育基輕搖洗下,并將瓶底結(jié)塊搖勻,分別稀罕放入多個筐中。待培育基冷卻至(35-45)℃,輕緩搖勻,管口或瓶口向上,以15℃角傾斜在木條上靜置,長度一般為試管長度的1/2—2/3,茄型瓶的2/3—3/4。擺放時注意不履行培育基沾污棉塞,冷凝過程中勿再搬動試管或茄型瓶冷卻至凝固。并在(30-35)℃生化培養(yǎng)箱內(nèi)培育三天,察看可否染菌。若無染菌則放入(11-15)℃生化培育箱保存?zhèn)溆?。?jīng)過人工培育技術(shù),獲取與天然冬蟲夏草成分周邊,免疫調(diào)治功能相似的人工冬蟲夏草,并且還大大的提升了產(chǎn)量,價格相對低價。固然人工培育技術(shù)已經(jīng)成功,但是還不夠成熟。在菌種培育的時候仍是常會出現(xiàn)很多問題。如菌種生長牢固性不高,斜面培4/5養(yǎng)生長不好,有時產(chǎn)量不高等。蟲草培育基就

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