植物組織培養(yǎng)期末復(fù)習(xí)題

某培養(yǎng)基的配方是MS+BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+2.5%蔗糖+0.7%瓊脂粉。MS母液的濃度分別是大量元素20倍，微量500倍，鐵鹽100倍，有機(jī)物50倍；BA母液濃度1.0mg/mL,NAA母液濃度0.1mg/mL，要配置400mL該培養(yǎng)基，需要吸取各種母液各多少mL?分別稱取蔗糖、瓊脂多少克？大量元素：1000/20*1*0.4=20mL微量1000/500*1*0.4=0.8mL鐵鹽1000/100*1*0.4=4mL有機(jī)物1000/50*1*0.4=8mLBA2.0*0.4=1.0*VBAVBA=0.8mLNAA0.5*0.4=0.1*VNAAVNAA=2mL蔗糖2.5%*400=10g瓊脂0.7%*400=2.8g簡述MS培養(yǎng)基的基本特點(diǎn)無機(jī)鹽濃度高，元素平衡較好，緩沖性能好，微量元素和有機(jī)成分含量齊全且較豐富簡述外植體消毒的一般步驟1、先用清水沖洗，茸毛較多的外植體用皂液洗滌后再用清水沖洗，用吸水紙吸干表面水分；2、將外植體浸泡在0.1%-0.2%的氯化汞溶液中2-19min,或先在70%酒精中浸泡數(shù)秒，然后再10%次氯酸鈣中浸泡10-20min,或先在70%酒精中浸泡數(shù)秒，再2%次氯酸鈉溶液中浸泡15-30min進(jìn)行滅菌；3、滅菌后倒掉滅菌液，無菌水沖洗外植體3-5次，置外植體于無菌濾紙上吸干表面水分，適當(dāng)分割后接種植物組織培養(yǎng)：在無菌和人工控制的條件下，利用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，使植物的離體器官、組織、細(xì)胞及原生質(zhì)體生長和發(fā)育的所有培養(yǎng)技術(shù)的總稱。細(xì)胞脫分化：離體培養(yǎng)條件下生長的細(xì)胞、組織或器官經(jīng)過細(xì)胞分裂或不分裂逐漸失去原來的結(jié)構(gòu)和功能而恢復(fù)分生狀態(tài)，形成無組織結(jié)構(gòu)的細(xì)胞團(tuán)或愈傷組織或成為未分化細(xì)胞特性的細(xì)胞的過程外植體：植物組織培養(yǎng)過程中使用的各種器官、組織和細(xì)胞人工種子：植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的胚狀體或不定芽，被包裹在含有養(yǎng)分和保護(hù)功能的人工胚乳和人工種皮中，從而形成能發(fā)芽出苗的顆粒體胚狀體：在離體培養(yǎng)條件下，植物離體培養(yǎng)的細(xì)胞、組織、器官產(chǎn)生的類似胚的結(jié)構(gòu)愈傷組織：外植體因受傷或在離體培養(yǎng)時(shí)，其未分化的細(xì)胞和已分化的細(xì)胞進(jìn)行活躍的分裂增殖而形成的一種無特定結(jié)構(gòu)和功能的組織植物細(xì)胞全能性：植物體的每個(gè)生活細(xì)胞都具有該植物機(jī)體的全部遺傳信息，具有發(fā)育完整個(gè)體的性能原球莖：是蘭花種子萌發(fā)形成的一種形態(tài)學(xué)構(gòu)造，是短縮的，呈珠粒狀，類似嫩莖的器官再分化：離體培養(yǎng)的植物細(xì)胞和組織可以由脫分化狀態(tài)重新進(jìn)行分化，形成一種或幾種類型的細(xì)胞、組織、器官，甚至形成完整植株的過程10叢生芽：指外植體攜帶的頂芽或腋芽在適宜培養(yǎng)環(huán)境中不斷發(fā)生腋芽而呈叢生狀態(tài)11培養(yǎng)基：是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料培養(yǎng)基制作程序并畫圖表示確定培養(yǎng)基配放用量---稱取蔗糖、瓊脂---熬培養(yǎng)基---定容---PH調(diào)整---分裝---封口---標(biāo)識、記錄---高壓滅菌如何減輕植物組織中試管苗玻璃化現(xiàn)象1、兩個(gè)增加：增加瓊脂濃度，增加蔗糖含量2、連個(gè)增強(qiáng)：增強(qiáng)容器通風(fēng)，增強(qiáng)光照3、連個(gè)加入：加入滲透劑，加入ABA4、一個(gè)減少：減少培養(yǎng)基氮素含量，特別是NH4-N試管苗繁殖的一般程序：初代培養(yǎng)-繼代培養(yǎng)-生根培養(yǎng)-移栽馴化植物組培中影響器官分化的因素有哪些？IAA和CTK的比值和絕對含量對器官分化的影響IAA/CTK高:有利于形成根適中:維持原組織生長而不分化低:有利于形成芽試敘述植物脫毒的機(jī)理，常用的脫毒方式有哪些？1、病毒在植物體內(nèi)的分布是不均勻的，在莖尖中呈梯形分布2、植物病毒自身不具有主動(dòng)轉(zhuǎn)移的能力，病毒的移動(dòng)都是被動(dòng)的3、在旺盛分裂的細(xì)胞中，代謝活性很高，使病毒無法進(jìn)行復(fù)制4、在植物體內(nèi)可能存在病毒鈍化系統(tǒng)5、在莖尖中存在高水平內(nèi)源生長素可抑制病毒的增值方法：1、物理方法2、化學(xué)方法3、生物化學(xué)方法4、綜合脫毒法填空題脫毒苗的檢測方法有：（直接測定法）（指示植物法）（血清鑒定法）（核酸分析法）（電鏡鑒定法）培養(yǎng)基有（基本培養(yǎng)基）（完全培養(yǎng)基）外植體的選擇原則（再生能力強(qiáng)）（遺傳穩(wěn)定性好）（外植體來源豐富）（外植體滅菌容易）植物離體培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生胚狀體的過程即（植物胚胎發(fā)生）植物快速繁殖初代培養(yǎng)物形成有5種類型（段枝發(fā)生型）（叢生芽發(fā)生型）（不定芽發(fā)生型）（胚狀體發(fā)生型）（原球莖發(fā)生型）造成組培過程中發(fā)生污染的原因有哪些？如何有效控制污染細(xì)菌污染原因：工具消毒不徹底，人呼吸引起，手接觸材料或器皿控制措施：戴口罩，不講話，用酒精棉球擦雙手真菌污染原因：接種室空氣污染，超凈工作臺(tái)運(yùn)行不良所致控制措施：1、紫外燈照射接種室30min以上2、超凈工作臺(tái)提前20min開機(jī)3、培養(yǎng)瓶應(yīng)拿成斜角，放在酒精燈火焰上方若以上三項(xiàng)措施無效，需對接種室進(jìn)行熏蒸植物離體快速繁殖有哪些方面的應(yīng)用1、良種的快速繁殖新育成的新引進(jìn)的新發(fā)現(xiàn)的稀缺良種的快速繁殖2、少量脫毒良種苗的快速繁殖和無病毒苗的快速繁殖3、特殊育種材料的快速繁殖4、制種材料的快速繁殖5、基因工程植株的快速繁殖6、自然和人工誘變有用突變體的快速繁殖7、離體保存種質(zhì)8、瀕危植物的繁殖植物組織培養(yǎng)的基本特點(diǎn)：1整個(gè)過程都是在無菌條件下進(jìn)行的在多數(shù)情況下是利用完全確定的人工培養(yǎng)基進(jìn)行的，在組織培養(yǎng)中的植物材料不需依靠自身，光合作用提供養(yǎng)分材料可以是植物的器官，組織，也可以是單個(gè)細(xì)胞，他們都處于離體狀態(tài)通過連續(xù)培養(yǎng)，可以不斷增殖，形成克隆在封閉的容器中進(jìn)行，組培苗葉片表面一般都無角質(zhì)層或蠟質(zhì)層，氣孔始終張開環(huán)境濕度，光照強(qiáng)度和時(shí)間都是人為設(shè)定的應(yīng)用：1植物離體快繁培育無病毒苗木培育新品種或創(chuàng)制新物種1）選育雜交品種2）離體選擇突變體3）單倍體育種（花藥培養(yǎng)）次生代謝物產(chǎn)生（天然有機(jī)化合物）植物種質(zhì)自愿的離體保存人工種子用于基因工程組培過程中發(fā)生褐變現(xiàn)象的原因及防治方法原因：酚類在完整的細(xì)胞中單獨(dú)存在，不與多酚氧化酶接觸，較穩(wěn)定，外植體切口受損