標準解讀
《GB/T 19438.2-2004 H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》這一標準詳細規(guī)定了利用熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Fluorescent Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)技術(shù)對H5亞型禽流感病毒進行檢測的操作流程、試劑配制、質(zhì)量控制及結(jié)果判定方法。然而,您提供的對比信息不完整,沒有明確指出與之比較的另一個標準或版本。因此,直接對比具體變更點較為困難。但可以一般性地討論此類標準更新時可能包含的變動方向:
- 技術(shù)改進:新標準可能會采納最新的科研進展,比如更敏感的引物設(shè)計、優(yōu)化的反轉(zhuǎn)錄和擴增條件,以提高檢測的靈敏度和特異性。
- 操作流程簡化:為了提高實驗室工作效率,新標準可能會簡化操作步驟,減少手動操作環(huán)節(jié),或是引入自動化處理流程。
- 試劑與耗材更新:隨著生物技術(shù)的發(fā)展,更穩(wěn)定、高效的酶制劑、熒光探針等試劑可能會被推薦或要求使用,同時考慮兼容性和可獲取性。
- 質(zhì)量控制標準提升:新標準可能強化了內(nèi)部質(zhì)控和外部質(zhì)控的要求,確保檢測結(jié)果的準確性和可重復(fù)性。
- 結(jié)果判定標準調(diào)整:可能根據(jù)大量實驗驗證數(shù)據(jù),調(diào)整Ct值(循環(huán)閾值)或其他參數(shù)作為陽性判定的標準,以適應(yīng)不同樣本類型和病毒載量的變化。
- 安全與生物防護:考慮到實驗室操作安全,新標準可能會加強對操作人員的生物安全指導和防護措施要求。
- 適用范圍擴展:可能擴大了該檢測方法的應(yīng)用范圍,比如增加了新的樣本類型,或者適用于不同階段的病毒流行監(jiān)測。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2004-02-14 頒布
- 2004-02-15 實施
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文檔簡介
ICS11.220B41中華人民共和國國家標準GB/T:19438.2-一2004H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法Methodofthereal-timeRT-PCRforthedetectionofavianinfluenzavirussubtypeH52004-02-14發(fā)布2004-02-15實施中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布中國國家標準化管理委員會
GB/T19438.2—2004前GB/T19438-2004《禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》分為以下四個部分:GB/T19438.1-2004《禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法》:-GB/T19438.2—2004《H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》B/T19438.3—2004《H7亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》;-GB/T19438.4—2004《H9亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》本部分的附錄A是資料性附錄。本部分由中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局提出本部分起草單位:中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局、深圳市匹基生物工程股份有限公司本部分主要起草人:劉環(huán)、張鶴曉、賴平安、周琦、劉寧。
GB/T19438.2—2004H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法范圍本部分規(guī)定了H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR操作方法本部分適用于活禽及其產(chǎn)品中H5亞型禽流感病毒的檢測規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件.其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分然而,鼓勵根據(jù)本部分達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件.其最新版本適用于本部分。GB/T19438.1—2004禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法縮略語下列縮略語適用于本部分3.1熒光RT-PCR熒光反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)3.2C值每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達到設(shè)定的閩值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)3.3RNA核糖核酸3.4Ta酶T4gDNA聚合酶。3.5PBS磷酸鹽緩沖生理鹽水3.6DEPC焦碳酸乙二酯原理采用TaqMan方法·在比對禽流感病毒血凝素基因的基礎(chǔ)上.設(shè)計一對僅在H5亞型禽流感病毒血凝素基因間保守的特異性引物和一條特異性的熒光雙標記探針。該探針的結(jié)合部位位于目的擴增片段內(nèi)部。其中5°端標記FAM熒光素為報告熒光基團(用R表示).3"端標記TAMRA熒光素為澤滅熒光基團(用Q表示),它在近距離內(nèi)能吸收5"端熒光基團發(fā)出的熒光信號。反應(yīng)進人退火階段時,引物和探針同時與目的基因片段結(jié)合.此時探針上R基團發(fā)出的熒光信號被Q基團所
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