標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 20396-2006 是一項(xiàng)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)，全稱為《三系雜交水稻及親本真實(shí)性和品種純度鑒定 DNA分析方法》。這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)于2006年發(fā)布，旨在為三系雜交水稻及其親本的真實(shí)性與品種純度提供一套科學(xué)、統(tǒng)一的DNA分析鑒定規(guī)程，確保水稻種子的質(zhì)量控制和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的安全性。

標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容概覽

  1. 適用范圍：標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用DNA分子標(biāo)記技術(shù)對三系雜交水稻（包括保持系、恢復(fù)系和不育系）及其親本進(jìn)行真實(shí)性與品種純度鑒定的方法。適用于水稻種子生產(chǎn)、銷售、科研及質(zhì)量監(jiān)督等領(lǐng)域。

  2. 術(shù)語和定義：明確了與DNA分析相關(guān)的專業(yè)術(shù)語，如SSR（簡單序列重復(fù)）、RAPD（隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA）等分子標(biāo)記技術(shù)的基本概念，以及三系雜交水稻各系別的定義。

  3. 原理：基于不同水稻品種間存在的遺傳差異，通過特定的DNA分子標(biāo)記檢測這些差異，從而實(shí)現(xiàn)品種的區(qū)分和純度鑒定。此方法利用PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段，隨后通過電泳分離、熒光標(biāo)記等手段進(jìn)行檢測分析。

  4. 試劑與材料：詳細(xì)列出了進(jìn)行DNA提取、PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物分析所需的化學(xué)試劑、儀器設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)品的具體要求。

  5. 樣品處理與DNA提取：規(guī)范了水稻種子或植株樣本的采集、保存、研磨及DNA提取的操作步驟，確保提取的DNA質(zhì)量滿足后續(xù)分析需求。

  6. PCR擴(kuò)增與電泳分析：提供了詳細(xì)的PCR反應(yīng)體系構(gòu)建、擴(kuò)增條件設(shè)定及電泳分離等實(shí)驗(yàn)操作指南，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

  7. 數(shù)據(jù)處理與分析：闡述了如何根據(jù)電泳圖譜或測序結(jié)果，利用特定軟件分析DNA片段大小、比較遺傳標(biāo)記的差異，以此來判斷品種的真實(shí)性和純度。

  8. 結(jié)果判定：根據(jù)分析結(jié)果，制定了品種真實(shí)性與純度的判定標(biāo)準(zhǔn)和閾值，幫助用戶明確樣品是否符合要求。

  9. 質(zhì)量控制：強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)采取的質(zhì)量控制措施，包括陰性對照、陽性對照的設(shè)置，以及實(shí)驗(yàn)重復(fù)性的要求，以確保鑒定結(jié)果的可靠性。

實(shí)施意義

該標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施，對于提高我國水稻種子的質(zhì)量控制水平，促進(jìn)優(yōu)良水稻品種的選育、推廣與保護(hù)，保障農(nóng)業(yè)生物多樣性，以及維護(hù)農(nóng)民利益和糧食安全具有重要意義。它不僅為種子企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)提供了統(tǒng)一的技術(shù)指導(dǎo)，也為市場監(jiān)管部門提供了科學(xué)依據(jù)，有助于打擊假冒偽劣種子，推動水稻產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。


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  • 廢止
  • 已被廢除、停止使用，并不再更新
  • 2006-05-25 頒布
  • 2006-11-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
GB/T 20396-2006三系雜交水稻及親本真實(shí)性和品種純度鑒定DNA分析方法_第1頁
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文檔簡介

ICS65.020.20B22中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T20396—2006三系雜交水稻及親本真實(shí)性和品種純度鑒定DNA分析方法ldentificationofgenuinenessandvarietalpurityofthree-linehybridriceanditsparents-DNAanalysismethod2006-05-25發(fā)布2006-11-01實(shí)施中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T20396-2006三次前言引言1范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語和定義4原理5儀器6試劑和溶液7實(shí)驗(yàn)程序89結(jié)果報(bào)告附錄A（規(guī)范性附錄)水稻基因組DNA的提取附錄B（規(guī)范性附錄）DNA的純化及定量·附錄C（規(guī)范性附錄)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳附錄D（規(guī)范性附錄）王瓊脂糖凝膠電泳附錄E（資料性附錄）用于雜交水稻鑒定的SSR標(biāo)記L附錄F（資料性附錄)）用于雜交水稻不育、保持和恢復(fù)特征基因檢測的分子標(biāo)記附錄G（資料性附錄）相關(guān)統(tǒng)計(jì)參數(shù)及計(jì)算………參考文獻(xiàn)

GB/T20396—2006前本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C、附錄D是規(guī)范性附錄，附錄E、附錄F、附錄G是資料性附錄本標(biāo)準(zhǔn)由國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國農(nóng)作物種子標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所、安徽國家農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化與監(jiān)測中心、安徽省種子管理總站、合肥豐樂種業(yè)股份有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：楊劍波、趙偉、陳萍、李莉、汪秀峰、宋豐順、宣云、張士勝、易成新、孔令傳、盛海平、王春生、向太和、本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。

GB/T20396—2006在雜交水稻品種審定、生產(chǎn)、制種和銷售等過程中，往往需要對品種的真實(shí)性和雜交稻種子純度進(jìn)行鑒定，常規(guī)的方法為種植鑒定、生化檢測等.本標(biāo)準(zhǔn)提供的DNA分析方法具有準(zhǔn)確度高、時間短、受環(huán)境影響小等優(yōu)點(diǎn)。本標(biāo)準(zhǔn)的制定和實(shí)施將對我國雜交水稻種子質(zhì)量控制起到積極作用隨著雜交水稻新品系、新組合、新類型的選育及DNA分析理論和技術(shù)的不斷進(jìn)步,本標(biāo)準(zhǔn)尚需不時進(jìn)行修訂。

GB/T20396—2006三系雜交水稻及親本真實(shí)性和品種純度鑒定DNA分析方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用DNA分析技術(shù)進(jìn)行三系雜交水稻及其親本真實(shí)性和品種純度鑒定的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于三系雜交水稻及其親本真實(shí)性和品種純度的驗(yàn)定。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件.其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T3543.1農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程總則GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程開樣GB/T3543.4農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程發(fā)井試驗(yàn)GB/T3543.5農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程真實(shí)性和品種純度鑒定GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法術(shù)語和定義GB/T3543.2、GB/T3543.5中確立的及下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)polymerasechainreaction.PCR一種利用酶促反應(yīng)對特定DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增的技術(shù).該技術(shù)以短核音酸序列作為引物.并使用一種耐高溫的DNA聚合酶,只需非常少量(通常在納克級范圍內(nèi))的DNA樣品,在短時間內(nèi)以樣品DNA為模板合成上億個烤貝。32引物primer一條互補(bǔ)結(jié)合在模板DNA鏈上的短的單鏈,提供30H末端作DNA合成的起點(diǎn)，延伸合成模板DNA的互補(bǔ)鏈3.3SSR標(biāo)記simplesequencercpeat,SSR由幾個核昔酸（一般為2個～6個)為重復(fù)單元的長達(dá)幾十至幾百個核苣酸的串聯(lián)重復(fù)序列：由于基本單元重復(fù)次數(shù)的不同，而形成SSR座位的多態(tài)性：根據(jù)SSR座位兩側(cè)保守的單拷貝序列設(shè)計(jì)一對特異引物來擴(kuò)增SSR序列.即可揭示其多態(tài)性。34三

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