臨床血液學(xué)檢驗技術(shù)：1血發(fā)生及其調(diào)控

《臨床血液學(xué)檢驗技術(shù)》是以血液學(xué)的理論為基礎(chǔ)，以臨床血液病為研究對象，以化學(xué)、物理、免疫和分子生物學(xué)等檢驗技術(shù)和方法為手段，來分析和研究血液、造血器官的病理變化，從而為臨床血液病的診斷、治療和預(yù)后提供實驗依據(jù)。既屬于血液學(xué)，又屬于檢驗醫(yī)學(xué)。理論課：36學(xué)時，1-16周，每周一下午。實驗課：64學(xué)時，1-16周，每周四下午。帶上理論教材和實驗指導(dǎo)！造血及造血調(diào)控第一節(jié)血細胞的起源與造血器官血液學(xué)發(fā)展史microscop－RBC1673y

－WBC1749y

－PLT1842y19世紀60年代認識到骨髓有幼稚血細胞，成熟后進入血液。骨髓穿刺術(shù)－1929y正常成人外周血象、髓象一個50Kg體重的成年人每天約生成：1400億個RBC750億個WBC1200億個PLT造血---hematopoiesis定義：造血是指血細胞在造血系統(tǒng)生成和發(fā)育的過程，是生命活動的重要部分。造血主要涉及造血器官、造血干/祖細胞以及造血調(diào)控等。造血器官定義：能夠生成并支持造血細胞分化、發(fā)育和成熟的組織器官稱為造血器官，主要包括骨髓、胸腺、淋巴結(jié)、肝、脾等。造血器官的演變造血過程分：1.胚胎期造血2.出生后造血

胚胎期造血器官

1.中胚葉造血：卵黃囊，2w-9w2.肝臟造血：肝、脾、淋巴結(jié)，6w-7m3.骨髓造血：14w-出生后胚胎期造血特點胎兒發(fā)育時期不同，造血器官不同。經(jīng)歷了卵黃囊造血期－肝造血期－骨髓造血期各器官造血不是截然分開，而是此消彼長，互為交替。血細胞生成順序：紅系粒系巨核系淋巴系和單核系。出生后造血器官1.骨髓造血2.淋巴造血骨髓:骨骼內(nèi)海綿狀組織骨髓－出生后最重要的造血器官功能：骨髓是出生后唯一產(chǎn)生紅、粒、血小板的場所，也可產(chǎn)生淋巴、單核細胞。結(jié)構(gòu)：骨髓分紅髓和黃髓。P12圖1-3紅髓的特點（1）分布（2）結(jié)構(gòu)1.胸腺2.脾3.淋巴結(jié)淋巴器官造血P12髓外造血P13在某些病理情況下，胎兒出生2個月后其骨髓以外的肝、脾、淋巴結(jié)等組織又恢復(fù)其制造紅、粒和血小板的造血功能。髓外造血多見于兒童，是機體對血細胞需求特別增高或?qū)撬柙煅系K的一種代償。第二節(jié)造血干細胞和造血祖細胞P15一切血細胞都來源于造血干細胞

什么是干細胞？干細胞(stemcells)

：是一類具有多向分化潛能和自我復(fù)制功能的早期未分化細胞,在特定的條件下,它可以分化成不同的功能細胞,形成多種組織和器官。ExamplesofStemCellsFoundinAdultSomaticTissues

按照生存階段干細胞分為：

胚胎干細胞(embryonicstemcell,ESC)

成體干細胞(adultstemcell,ASC)。造血干細胞間充質(zhì)干細胞血管干細胞造血干細胞來自胚胎干細胞

胚胎干細胞是胚胎發(fā)育早期囊胚（受精后約5－7天）的內(nèi)細胞團中未分化的細胞，它具有高度的分化潛能，可進一步分裂、分化發(fā)育成為完整個體，可以無限增殖并分化成為多種細胞類型，從而可以進一步形成機體的任何組織或器官。一、造血干細胞

(hemotopoieticstemcell,HSC)小鼠HSC的研究人類HSC的研究

HSC的定義小鼠造血干細胞的研究1961年由Till&McCulloch建立的小鼠脾結(jié)節(jié)實驗技術(shù)等一系列小鼠體內(nèi)實驗證明了小鼠體內(nèi)存在造血干細胞。小鼠HSC體內(nèi)實驗的研究（一）結(jié)論：小鼠骨髓中存在血液細胞的祖先，在特殊情況下，可先在脾內(nèi)形成造血結(jié)節(jié)（CFU-S），而后促進照射小鼠造血功能的恢復(fù)。小鼠HSC體內(nèi)實驗的研究（二）結(jié)論：轉(zhuǎn)移的脾結(jié)節(jié)生成細胞（CFC-S）具有重建照射小鼠全部造血功能的能力。脾結(jié)節(jié)實驗中相關(guān)名稱的介紹（CFU-S:ColonyFormingUnit－Spleen）脾結(jié)節(jié)生成單位：代表每一個脾結(jié)節(jié)（CFC-S:ColonyFormingCell－Spleen）脾結(jié)節(jié)生成細胞：能夠生成脾結(jié)節(jié)的原始細胞拉斯克獎素有“美國的諾貝爾獎”之美譽，是美國最具聲望的生物醫(yī)學(xué)獎項。

2005年的拉斯克獎

BasicMedicalResearch:Foringeniousexperimentsthatfirstidentifiedastemcell-theblood-formingstemcell-whichsetthestageforallcurrentresearchonadultandembryonicstemcells.

UniversityofToronto,OntarioCancerInstitute,Ontario,Canada

人類造血干細胞的實驗研究體外半固體培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)人造血祖細胞CFU-GM用流式細胞儀測CD34+細胞（CD34抗原：是分離純化HSC的主要標志，見P16－17

）。免疫缺陷小鼠體內(nèi)重建造血。什么是造血干細胞？造血干細胞是由胚胎干細胞發(fā)育而來，具有高度自我更新和多向分化能力，并且在造血組織中含量極少，形態(tài)難以辨認，外觀似小淋巴細胞的一群異質(zhì)性的細胞群體。P16造血干細胞含量CD34＋細胞占有核細胞比例：骨髓：0.5％－1.5％外周血：0.05％－0.15％臍血：0.1％每10000到15000個骨髓細胞中才能找到

1個干細胞；在血液中則降到1/100000。造血干細胞的性質(zhì)Self-renewal－自我更新MultilineageDifferentiation－多向分化G0phase－G0期造血干細胞的造血功能自我更新能力保持了干細胞自身數(shù)量和質(zhì)量的相對穩(wěn)定，維持正常機體造血功能的恒定，保證血細胞的不斷更新。多向分化能力補充了外周血循環(huán)中衰老和死亡的各系血細胞數(shù)量。血細胞生成增殖分化干細胞增殖：保證干細胞數(shù)量分化：形成各系血細胞干細胞Happenningofacuteleukemia白血病骨髓象指一類由造血干細胞分化而來但失去了自我更新能力的過渡性、增殖性細胞群。它介于造血干細胞與形態(tài)學(xué)可辨認的前體細胞之間的由多向分化到單向分化的過渡階段細胞。

二、造血祖細胞

(hematopoieticprogenitorcell,HPC)CFU-ColonyFormingUnit

集落形成單位CFU-GMCFU-E

1.多向祖細胞：CFU-HPP，LTCIC，CFU-GEMM（CFU-MIX），CFU-GM2.單向祖細胞：BFU-E，CFU-E，

CFU-G，CFU-M，CFU-Eo，CFU-Bas,CFU-Meg,CFU-TL，CFU-BL造血祖細胞的種類粒系：CD33、CD13單核系：CD14淋巴系：CD19、CD7NK細胞系：CD56紅系：CD71巨核系：CD41、CD61造血祖細胞表面標志:CD34+Lin＋三、骨髓間充質(zhì)干細胞Mesenchymalstemcell,MSC分化為：成骨細胞，脂肪細胞，心肌細胞和血管內(nèi)皮細胞等。自學(xué)P17第三節(jié)血細胞的發(fā)育P18造血干細胞造血祖細胞骨髓細胞髓血屏障

血細胞

骨髓外周血

造血細胞的生長發(fā)育包括：增殖分化成熟釋放1.增殖：通過有絲分裂增加細胞數(shù)量除HSC外各階段細胞皆為對稱性地有絲分裂巨核細胞：多倍體2.分化：是發(fā)育過程中失去某些潛能同時又獲得新功能的過程。3.成熟指由原始經(jīng)幼稚到成熟細胞的發(fā)育過程

4.血細胞的釋放髓血屏障：marrowbloodbarrier,MBBMBB結(jié)構(gòu)：內(nèi)皮層、基膜和外膜層。MBB功能：成熟血細胞出髓干細胞回髓（homing,歸巢）血細胞的命名P201.紅細胞系統(tǒng)2.粒細胞系統(tǒng)3.巨核細胞系統(tǒng)4.單核細胞系統(tǒng)5.淋巴細胞系統(tǒng)6.漿細胞系統(tǒng)血細胞發(fā)育成熟的一般規(guī)律1.血細胞形態(tài)演變規(guī)律（實驗課體會）胞體、胞漿、胞核、核仁、核染色質(zhì)、顆粒。2.血細胞免疫表型分化特征（了解）

P20：CD分子

一、造血微環(huán)境(HIM)P13

由骨髓基質(zhì)細胞和細胞外基質(zhì)構(gòu)成，包括骨髓微血管系統(tǒng)、末梢神經(jīng)、骨髓基質(zhì)細胞以及基質(zhì)細胞分泌的細胞因子，是造血干細胞生長、分化和自我更新的場所。

HIM:hematopoieticmicroenvironment第三節(jié)造血調(diào)控

HIM組成1.骨髓微血管系統(tǒng)：調(diào)控血細胞的釋放。

2.基質(zhì)細胞：黏附造血干細胞并支持和調(diào)控造血細胞定居、分化、增殖、成熟的重要場所。

3.細胞外基質(zhì)：糖蛋白，蛋白多糖和膠原。調(diào)節(jié)細胞黏附和增殖分化。

4.基質(zhì)細胞分泌因子：因子-受體

骨髓血竇及造血微環(huán)境模式圖1.造血生長因子：SCF(干細胞因子)Flt-3配體（FL）集落刺激因子（CSF）

EPO

白介素（IL）

TPO二、造血的體液調(diào)控P30造血負調(diào)控：

TGF-β