氣相色譜法測定乙烯(ethylene)含量

氣相色譜法測定乙烯（ethylene）含量乙烯（ethylene）是植物內源激素之一。以氣體形式存在。準確測定乙烯釋放量，對認識乙烯在植物抗逆生理、發(fā)育生理、開花生理中的作用有著重要的意義。一、原理：氣相色譜具有靈敏度高，穩(wěn)定性好等優(yōu)點。色譜儀中的分離系統(tǒng)包括固定相和流動相。由于固定相和流動相對各種物質的吸附或溶解能力不同，因此各種物持的分配系數（或吸附能力）不一樣。當含混合物的待測樣（含乙烯的混合氣）進入固定相以后，不斷通以流動相（通常為N2或H2），待測物不斷地再分配，最后，依照分配系數大小順序依次被分離，并進入檢測系統(tǒng)得到檢測。檢測信號的大小反映出物質含量的多少，在記錄儀上就呈現色譜圖。要使待測物得到充分的分離，就需要一種合適的固定相。乙烯往往與乙炔、乙烷難以分離，而采用GDX502作為固定相則可有比較滿意的效果。二、材料、儀器設備及試劑（一）材料：水稻幼苗（或蘋果、香蕉等）若干。（二）儀器設備：1.密封裝置為帶空心橡皮塞的三角瓶，或真空干燥器。2.氣相色譜儀。（三）試劑：標準乙烯。三、實驗步驟將試驗材料進行不同的處理（如離體、傷害、發(fā)芽、黑暗、輻射、冷藏、催熟等），然后置于密封裝置中若干時間。將色譜儀啟動。啟動步驟如下：（1）檢測儀器各部件是否復位。若沒有，需復位。（2）打開流動相（N2），將壓力調至（5kg/cm2）。然后打開儀器上的N2閥，將流速調至25m/min（管道1,2—樣）。（3）插上電源，打開儀器上電源開關。（4）調節(jié)柱溫至60°C，將進樣口溫度調至100C（乙烯為氣體，進樣口溫度不需太高）。（5）打開點火裝置電源及空氣壓縮機開關、調節(jié)適當的量程和衰減（rangeandattenuation）（關機時，量程應打至1，衰減為°°）o（6）打開鋼瓶氫氣閥，調壓力為1.0kg/cm2）（兩管道一樣），同時將空氣壓力調至0.5kg/cm2o打開記錄儀電源，并選擇10mV的輸出電壓和適當的走紙速度（10nm/min）o（7）點火：空氣和氫氣調好后，將選擇鍵打到ON位置。按點火鍵10S左右，氫氣既可在燃燒室燃燒，在點火并點著時，可以看到記錄筆向上移動。（8）條件選擇：將選擇鍵打到2,并將空氣壓力調至1.0kg/cm2，氫氣調至0.5~0.7kg/cm2之間（兩管道一樣）。待基線穩(wěn)定后即可正式測定。測定（1）取一定濃度（ul/L，以N2作為稀釋劑），一定量（100?1000ul）的標準乙烯進樣，并注意出峰時間。待乙烯峰至頂端時即為乙烯的保留時間，重復3?4次，得到平均值。該平均值即作為樣品中乙烯定性的依據之一。（2）取同樣量的待測樣品，注入色譜柱（進樣）。待樣品峰全部出完后，即可做下一個樣品。（3）定性：A.外標法定性：樣品中與標準乙烯保留時間相同的峰，即為樣品乙烯峰。B.內標法定性：在得到某一樣品的色譜圖后，向該樣品中加入一定量的標準乙烯進樣，若某峰增高，該峰即為樣品中乙烯峰。4.待得到所有樣品色譜圖后，可關機，關機步驟：（1）關掉氫氣總閥或氮氣總閥。（2）關掉空氣壓縮機。（3）將量程或衰減復位，選擇鍵打到OFFo（4）關掉記錄儀。（5）待H2、N2全部排完后，將所有閥復位。（6）關主機電源，并拔下插頭。四、結果計算樣品中乙烯濃度（ul/