免疫發(fā)光技術(shù)

檢驗(yàn)科WXBY免疫學(xué)技術(shù).JYK12021/4/26

全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀CL-2000i

免疫知識(shí)免疫學(xué)檢驗(yàn)方法22021/4/2632021/4/26免疫的概念免疫：是機(jī)體識(shí)別和排除異物的功能，識(shí)別自我和非我，自我防護(hù)的功能（人體對(duì)外的部隊(duì)和對(duì)內(nèi)的警察）但在某些條件下可對(duì)機(jī)體有害組成：免疫器官（胸腺、淋巴結(jié)）、免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞)、免疫分子（抗體）凡自己的耐受；凡非己的排斥。。。。42021/4/26什么是抗原？抗原（Ag）：是一類能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)使之產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答并能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。分類：異種抗原、同種異型抗原、自身抗原、異嗜性抗原一種抗原可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗不同部位的多種抗體抗體相對(duì)于不同個(gè)體也是抗原免疫的要素52021/4/26抗原（Ag）6病毒異物性和復(fù)雜結(jié)構(gòu)細(xì)菌 藥物微生物及其成分、蛋白質(zhì)、多肽、多糖。。。2021/4/26免疫的要素抗體（Ab）：是B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的能與抗原分子上相應(yīng)表位發(fā)生特異性結(jié)合的、具有免疫功能的球蛋白? 抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的蛋白質(zhì)? 能和相應(yīng)刺激物(抗原)結(jié)合? 結(jié)合產(chǎn)生一定效果抗體是相對(duì)的72021/4/26抗體（Ab）

特異性：相對(duì)的一一對(duì)應(yīng)，一種抗原可以有多種抗體與之結(jié)合可逆性：非共價(jià)結(jié)合階段性：反應(yīng)階段和結(jié)果階段

82021/4/26免疫學(xué)檢驗(yàn)方法92021/4/26免疫分析技術(shù)：利用抗原、抗體之間的特異性結(jié)合來測(cè)定、分析特定物質(zhì)的方法——上帝的饋贈(zèng)。Ag+Ab

AgAb102021/4/269、人的價(jià)值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2月-232月-23Friday,February3,202310、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。16:42:4316:42:4316:422/3/20234:42:43PM11、人總是珍惜為得到。2月-2316:42:4316:42Feb-2303-Feb-2312、人亂于心，不寬余請(qǐng)。16:42:4316:42:4316:42Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來懲罰自己。2月-232月-2316:42:4316:42:43February3,202314、抱最大的希望，作最大的努力。03二月20234:42:43下午16:42:432月-2315、一個(gè)人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。。二月234:42下午2月-2316:42February3,202316、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2023/2/316:42:4316:42:4303February202317、一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。4:42:43下午4:42下午16:42:432月-23免疫分析和生化分析特點(diǎn)生 化免疫分析基本原理朗伯比爾定律免疫測(cè)試基于抗原抗體的非特異性結(jié)合；測(cè)試模式簡(jiǎn)單流程復(fù)雜，所需試劑種類多，孵育時(shí)間更長(zhǎng)；分離方式不需要非均相測(cè)試，需要磁分離；均相測(cè)試，不需要分離。信號(hào)檢測(cè)方式不同比色法，朗伯-比爾定律，需要光源；化學(xué)反應(yīng)發(fā)光，光子計(jì)數(shù)法真正的化學(xué)發(fā)光不需要光源測(cè)試項(xiàng)目微量，超微量，激素，微生物等122021/4/26免疫標(biāo)記檢測(cè)實(shí)現(xiàn)方式

第一種，雙抗體夾心法：多用來檢測(cè)抗原。Eg:乙肝表面抗原132021/4/26免疫標(biāo)記檢測(cè)實(shí)現(xiàn)方式

第二種，競(jìng)爭(zhēng)法：抗原、抗體的檢測(cè)均有利用，eg:乙肝e抗體142021/4/26免疫標(biāo)記檢測(cè)實(shí)現(xiàn)方式

第三種，間接法：多用于檢測(cè)抗體，例如：乙肝表面抗體的檢測(cè)152021/4/26化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)發(fā)光原理:是指分子或原子中的電子吸收能量后，由基態(tài)（較低能級(jí)）躍遷到激發(fā)態(tài)（較高能級(jí)），然后再返回到基態(tài)，并釋放光子的過程。根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的能量來源不同可分為:光照發(fā)光、生物發(fā)光、化學(xué)發(fā)光等。162021/4/26化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)常用發(fā)光劑（底物or標(biāo)記物）

異魯米諾

（Diasorin、新產(chǎn)業(yè)）

堿性環(huán)境中，閃光型（3s）；吖啶脂 （BAYER、ABBOTT

I系列)

吖啶脂標(biāo)記，堿性環(huán)境中直接發(fā)閃光（10s）；

魯米諾+HRP（強(qiáng)生OCD）

HRP標(biāo)記，魯米諾在增強(qiáng)劑作用下發(fā)光，輝光型（2h）；AMPPD+ALP

（BECKMAN、DPC、OLYMPUS）

ALP標(biāo)記，AMPPD做底物，輝光型（N小時(shí)）；三聯(lián)吡啶釕+TPA（ROCHE）

三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記，電化學(xué)發(fā)光，應(yīng)用于Roche儀器172021/4/26間接化學(xué)發(fā)光（酶促發(fā)光、輝光）-

邁瑞、貝克曼、西門子DPC堿性磷酸酶(ALP)：ALP標(biāo)記抗體(或抗原)，形成固相包被抗體-待測(cè)抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)加入AMPPD(螺旋金剛烷)發(fā)光劑，ALP使AMPPD脫去磷酸根基團(tuán)而發(fā)光。182021/4/26檢測(cè)流程輝光發(fā)光時(shí)間長(zhǎng)（數(shù)時(shí)分鐘）無需原位進(jìn)樣，速率法分析ALP+AMPPD(間接發(fā)光、酶促)192021/4/26謝謝大家202021/4/26謝謝再見觀賞212021/4/269、人的價(jià)值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2月-232月-23Friday,February3,202310、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。16:42:4316:42:4316:422/3/20234:42:43PM11、人總是珍惜為得到。2月-2316:42:4316:42Feb-2303-Feb-2312、人亂于心，不寬余請(qǐng)。16:42:4316:42:4316:42Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來懲罰自己。2月-232月-2316:42:4316:42:43February3,202314、抱最大的希望，作最大的努力。03二月20234:42:43下午16:42:432月-2315、一個(gè)人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。。二月234:42下午2月-2316:42February3,202316、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2023/2/316:42:4316:42:4303February202317、一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。4:42:43下午4:42下午16:42:432月-23謝謝大家222021/4/269、人的價(jià)值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2月-232月-23Friday,February3,202310、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。16:42:4316:42:4316:422/3/20234:42:43PM11、人總是珍惜為得到。2月-2316:42:4316:42Feb-2303-Feb-2312、人亂于心，不寬余請(qǐng)。16:42:4316:42:4316:42Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來懲罰自己。2月-232月-2316:42:4316:42:43February3,202314、抱最大的希望，作最大的努力。03二月20234:42:43下午16:42:432月-2315、一個(gè)人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。。二月