金標快速檢測檢測試劑卡檢測技術(shù)專業(yè)課件

--克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇的檢測--農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗測試中心（石家莊）飼料中添加β-興奮劑的原因β-興奮劑的危害中國政府監(jiān)控情況β-興奮劑的使用現(xiàn)狀β-興奮劑檢測方法檢測方法對比檢測方法樣品處理是否需標準品測量耗時優(yōu)點缺陷液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用最復(fù)雜是定量24小時結(jié)果準確，檢測精度高，靈敏度高儀器價格昂貴且方法操作復(fù)雜，存在檢測成本高、檢測周期長、對檢測人員的技術(shù)要求較高，需要較復(fù)雜的樣品處理過程酶聯(lián)免疫法（ELISA）較復(fù)雜是定性2小時操作簡單，使用方便適于實驗室檢測快速檢測條無需處理否定性5分鐘具有良好的特異性，操作簡單方便，一步測試，用時只需5分鐘適于現(xiàn)場檢測,，不受環(huán)境約束。確認方法篩選方法檢測方法標準農(nóng)業(yè)部1025號公告-11-2021豬尿中β-受體激動劑多殘留檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法農(nóng)業(yè)部1063號公告-3-2021動物尿液中11種β-受體激動劑的檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法農(nóng)業(yè)部1025號公告-16-2021動物尿液中鹽酸克侖特羅殘留檢測氣相色譜-質(zhì)譜法NY/T933-2021尿液中鹽酸克侖特羅的測定農(nóng)牧發(fā)[2021]38號文件豬尿中鹽酸克侖特羅檢測方法-酶聯(lián)免疫吸附測定法農(nóng)業(yè)部1025號公告-6-2021動物性食品中萊克多巴胺殘留檢測酶聯(lián)免疫吸附法NY/T1460-2022飼料中鹽酸克侖特羅的測定酶聯(lián)免疫吸附法農(nóng)業(yè)部1025號公告-18-2021動物源食品中β-受體激動劑殘留檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法農(nóng)業(yè)部1063號公告-6-2021飼料中13種β-受體激動劑的檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法克倫特羅金標檢測試劑條

的原理和使用9、人的價值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2023/2/32023/2/3Friday,February3,202310、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。2023/2/32023/2/32023/2/32/3/20234:37:34PM11、人總是珍惜為得到。2023/2/32023/2/32023/2/3Feb-2303-Feb-2312、人亂于心，不寬余請。2023/2/32023/2/32023/2/3Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯的事來懲罰自己。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/32/3/202314、抱最大的希望，作最大的努力。03二月20232023/2/32023/2/32023/2/315、一個人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。。二月232023/2/32023/2/32023/2/32/3/202316、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2023/2/32023/2/303February202317、一個人即使已登上頂峰，也仍要自強不息。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/3一、鹽酸克倫特羅簡介二、金標免疫試劑條原理三、金標快速檢測試劑條檢測操作步驟四、注意事項五、樣品的提取方法六、其它類金標速測試劑條簡述9、人的價值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2023/2/32023/2/3Friday,February3,202310、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。2023/2/32023/2/32023/2/32/3/20234:37:34PM11、人總是珍惜為得到。2023/2/32023/2/32023/2/3Feb-2303-Feb-2312、人亂于心，不寬余請。2023/2/32023/2/32023/2/3Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯的事來懲罰自己。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/32/3/202314、抱最大的希望，作最大的努力。03二月20232023/2/32023/2/32023/2/315、一個人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。。二月232023/2/32023/2/32023/2/32/3/202316、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2023/2/32023/2/303February202317、一個人即使已登上頂峰，也仍要自強不息。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/3一、鹽酸克倫特羅簡介何為“瘦肉精”？鹽酸克倫特羅（ClenbuterolHydrochloride，CL）4-氨基-α-（叔丁胺甲基）-3，5-二氯苯甲醇鹽酸鹽

1、藥理作用克倫特羅又名雙氯醇胺，氨哮素，克喘素，是一種人工合成的β2-腎上腺素受體激動劑（β2-激動劑）。白色或類白色的結(jié)晶粉末，無臭、味苦，熔點161℃，溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。

具有強效松弛支氣管平滑肌，擴張支氣管的作用，常用來防治哮喘、肺氣腫等肺部疾病。當(dāng)其應(yīng)用劑量達到治療量的5~10倍時，又具有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉積減少，因此將其俗稱為“瘦肉精”。β2-腎上腺素受體激動劑β2-腎上腺素受體激動劑（β2-激動劑）包括：克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林、西馬特羅、菲諾特羅、氯丙那林、妥布特羅、噴布特羅、奇帕特羅、西布特羅、馬布特羅、溴布特羅、班布特羅等十幾種。我們目前監(jiān)測的主要是克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇（有快速檢測方法的）。動物種類體增重（%）采食量（%）肉料比（%）肌肉增加（%）脂肪減少（%）牛＋10－5＋15＋10－30雞＋2—＋2＋2－7豬＋4－5＋5≥＋18－20綿羊＋15＋2＋15＋25－25注：+表示增加，－表示減少。β-激動劑對畜禽生長作用的影響2、克倫特羅（瘦肉精）的同化作用瘦肉精等非法使用途徑1、養(yǎng)殖環(huán)節(jié)：拌入飼料中和飲水中添加，用以增重、增加瘦肉率、改善毛色和體型；2、收購、販賣中注射或飲水中添加，導(dǎo)致生豬大量飲水，以保持體重、改善毛色等；3、部分違法分子收羊后，秘密集中飼養(yǎng)20-30天，大劑量添加、飼喂。4、部分違法分子專門加價收購添加、飼喂瘦肉精的肉畜。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中一些非法使用者將其作為一種生長促進劑添加到動物飼料中，用以改善胴體的品質(zhì)；同時也造成動物性食品中鹽酸克倫特羅（瘦肉精）的殘留。當(dāng)人們食用含有鹽酸克倫特羅（瘦肉精）殘留的產(chǎn)品后會產(chǎn)生一定的中毒癥狀。3、克倫特羅的毒性心血管系統(tǒng)：

心悸、心慌、頭暈頭痛等臨床癥狀

神經(jīng)系統(tǒng)

惡心、嘔吐、肌肉疼痛、肌肉顫抖、興奮、不自主地顫抖、運動障礙禁忌癥

心臟病、糖尿病、高血壓、青光眼、甲亢

中毒劑量人醫(yī)用藥量：

0.02~0.5μg/kg中毒一般含量：肝臟100~500μg/kg中毒極端含量：肝臟19~5395μg/kg4、代謝和殘留狀況樣品尿液肌肉肝臟眼球含量47±37ng/ml6.1ng/g39ng/g118ng/g與血漿的比例40倍3~15倍20~90倍107倍半衰期第一半衰期：10h第二半衰期：64.8h（2.5d）用藥劑量：16μg/(kg.d)持續(xù)時間：20d停藥與殘留：停藥時間肝臟殘留濃度

0d73.8ng/g15d2.4ng/g35d0.7ng/g用藥劑量停藥時間（d）CL濃度（ng/mL）2mg/kg拌料0.5181.15±7.39185.45±5.26232.11±2.4449.9±1.2383.19±0.27161.15±0.33220.95±0.28250.48±0.21日糧中添加2mg/kgCL停藥后豬尿液中CL濃度變化豬尿中CL的消除曲線5、中毒事件

在互聯(lián)網(wǎng)上用“瘦肉精中毒”搜索，可以查到有6710項的相關(guān)報道。世界上最早的“瘦肉精”中毒事件于1990年3月在西班牙發(fā)生。我國則于1998年5月在香港最早出現(xiàn)。1、2021年8月22日，廣東信宜市發(fā)生530人瘦肉精集體中毒事件2、2021年2月浙江省平湖市170余名群眾發(fā)生瘦肉精中毒3、2021年11月2日，北京發(fā)生14人瘦肉精中毒4、2021年11月，廣東河源市發(fā)生484人食用含瘦肉精的豬肉后集體中毒的事件，聞名全國5、1999年10月，浙江嘉興市發(fā)生57人“瘦肉精”（含鹽酸克倫特羅)集體中毒事件6、1998年，廣東高明市發(fā)現(xiàn)有7例因喝豬肺湯致人中毒事件二、金標免疫試劑條原理介紹

利用了免疫層析的技術(shù)特點：1：檢測速度快，5－15分鐘就可知道結(jié)果。2：不需要任何儀器設(shè)備；3：操作簡便；4：靈敏度高，可達到ng級水平兩種金標檢測試劑：1、金標檢測試劑條2、金標檢測卡1、金標檢測試劑的歷史★1971年由Faulk和Taytor發(fā)明，目前在醫(yī)學(xué)方面得到了日益廣泛的應(yīng)用?！?0年代傳入我國，已經(jīng)用于檢測HBsAg（乙肝）、HCG（早孕）、HIV（艾滋?。?、梅毒等疾病，具有簡單、快速、準確和無污染等優(yōu)點，我國已經(jīng)有幾十家藥廠生產(chǎn)醫(yī)學(xué)檢驗用的金標試紙?！锬壳埃擁椉夹g(shù)已開始應(yīng)用于藥物殘留和疫病等的檢測。幾個概念：1、什么是抗原

抗原是能刺激機體產(chǎn)生抗體（免疫球蛋白，Ig）,并能與產(chǎn)生的抗體發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。

醫(yī)學(xué)上重要的抗原有細菌（如NGH），病毒（如HBV、HCV、HIV），螺旋體（如TP），蛋白質(zhì)（如AFP）等。

2、什么是抗體？

抗體是能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白，是免疫應(yīng)答的產(chǎn)物。它與相對應(yīng)的抗原能發(fā)生特異性的結(jié)合（如鎖與鑰匙的關(guān)系一樣，一把鑰匙開一把鎖），與其他抗原不發(fā)生結(jié)合。

臨床上的免疫學(xué)檢測方法就是根據(jù)抗原抗體高度特異性結(jié)合的原理設(shè)計?？梢杂靡阎目乖瓩z測未知的抗體，也可用已知的抗體檢測未知的抗原。2、金標檢測技術(shù)的基本原理金標免疫檢測試紙條系統(tǒng)使用一種特殊的多孔膜（NC膜）作為固相載體。該膜具有很強的蛋白吸附功能，抗體抗原吸附于NC膜并經(jīng)干燥處理后即作為固相，可與液相中的相應(yīng)標記了膠體金的抗原抗體快速結(jié)合。

在濕潤狀態(tài)下，液相中的抗原抗體免疫金可因“燈芯引流現(xiàn)象”作快速定向泳動并與固相另一抗原決定簇單抗結(jié)合，形成特異的金標記抗體－抗原－抗體紅色沉積線，表現(xiàn)出抗原抗體的特征反應(yīng)。金標試紙條工作原理

是將各種反應(yīng)試劑以條帶狀固定在同一試紙條上，待檢標本加在試紙條的一端，將一種試劑溶解后，通過毛細作用在層析條上滲濾、移行并與膜上另一種試劑接觸，樣品中的待測物同層析材料上針對待測物的受體（如抗原或抗體）發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。層析過程中免疫復(fù)合物被截留、聚集在層析材料的一定區(qū)域（檢測帶），通過可目測的膠體金標記物得到直觀的顯色結(jié)果。而游離標記物則越過檢測帶，達到與結(jié)合標記物自動分離之目的。金標免疫檢測試紙條的結(jié)構(gòu)主體的膜反應(yīng)體系由以下部分組成：

1：高蛋白親和性的高分子纖維素膜（NC膜），為反應(yīng)膜用來作為系統(tǒng)反應(yīng)的載體和顯示反應(yīng)結(jié)果。

2：選用有較強吸水能力的玻璃纖維，經(jīng)特殊處理后，為反應(yīng)系統(tǒng)提供適合的反應(yīng)條件，并幫助吸水。

3：吸附力較強的玻璃纖維，作為金標記物的固相載體。

4：吸收墊，吸水，牽引反應(yīng)物的運動。

5：塑料基板，作為反應(yīng)體系的支撐物。

金標檢測技術(shù)的基本原理

氯金酸(HAuCl4)在還原劑（檸檬酸）作用下，可使金離子還原成金原子，并聚合成一定大小的金顆粒，形成一種膠體溶液。把這種溶液稱為膠體金。膠體金具有很大的表面積，可將抗原、抗體等蛋白質(zhì)吸附到膠體金顆粒表面。

吸附的機理是膠體金顆粒表面帶負電荷，與蛋白質(zhì)的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固的結(jié)合。用還原法可以方便地把氯金酸制備成各種不同大小直徑的金顆粒、金顆粒的大小不同，顏色也不同。金溶膠顏色藍紫紫紅紅橙紅橙

吸收峰(nm)220240535525522518

直徑(nm)14797.571.54124.515

一般使用40nm的金顆粒，因為靈敏度較高。塑料底板樣品吸收墊玻纖纖維素膜濾紙金標試劑條示意圖金顆粒上標記抗原克倫特羅分子BSA金顆粒在玻纖上噴抗原標記的金顆粒標記抗原的金顆粒玻纖在纖維素膜上噴克倫特羅抗體纖維素膜抗體試劑條組裝被標記的金顆粒抗體樣品墊濾紙克倫特羅金標試紙條的工作原理加入樣品樣品流動樣品中沒有克倫特羅時：T線金顆粒上的克倫特羅和纖維素膜上的抗體結(jié)合，金顆粒聚集在一起，形成紅色的條帶，結(jié)果為陰性。樣品中有高濃度的克倫特羅時：由于樣品中克倫特羅的分子數(shù)量很多，大大多于金顆粒上的克倫特羅，抗體上都結(jié)合了樣品中的克倫特羅，而金顆粒不能結(jié)合到抗體上，造成金顆粒穿過抗體條帶到濾紙上，纖維素膜上為白色?？藗愄亓_分子T線樣品中含有少量的克倫特羅時：如5ppb以下樣品中克倫特羅分子較少時，和交聯(lián)在金顆粒上的克倫特羅互相競爭，有少量的金顆粒吸附在纖維素膜上，行成顏色較淺的T線。T線因此，隨著樣品中克倫特羅濃度由高到低，試紙上T線上的顏色由淺到深：>5ppb1ppb0.5ppb0ppb

在醫(yī)學(xué)上使用的各種金標試紙條，如艾滋病、乙肝、海洛因等檢測試紙條，要求非常嚴格。纖維素膜上除噴上抗體形成T線（Test）外，還噴有形成C線（Control）的抗體。

C線應(yīng)在檢測過程中的任何情況下都應(yīng)該出現(xiàn)，否則就證明試紙條在運輸、保存等過程中發(fā)生了意外情況，如高溫、潮濕等，導(dǎo)致試劑條失效。這樣就有了一個試劑本身質(zhì)量的判定標準，避免由于試劑保存等原因造成的假陽性或假陰性等情況的出現(xiàn)。T線C線

這樣，在高濃度的情況下，即使T線不出現(xiàn)，只要C線出現(xiàn)，就知道試劑沒有問題。而如果連C線都沒有，則可知道是試劑有問題，該包裝的試劑應(yīng)該棄用。這樣就避免了假陽性的結(jié)果。檢測原理示意圖樣品

質(zhì)控線

待檢藥物膠體金顆粒

檢測線膠體金顆粒表面包被有可以識別待測藥物的抗體檢測線包被有藥物-BSA偶聯(lián)物，可以識別膠體金上的抗體質(zhì)控線包被有可結(jié)合膠體金顆粒的抗體三、克倫特羅金標試劑的使用

(杭州迪恩科技公司產(chǎn)品)產(chǎn)品包裝：每個錫箔袋中裝5個測試卡；兩袋干燥劑防止試劑受潮;每盒中裝有12個錫箔袋，共60個測試卡，另外還裝有60個塑料吸管。產(chǎn)品可于室溫下陰涼避光干燥處貯存，有效期12個月（無需在冰箱中保存）。

檢測閾值：3ng/mL檢測不需要其它任何的輔助儀器操作步驟

1.

檢測準備（1）

根據(jù)檢測樣品和標準品的數(shù)量確定需要的試紙條數(shù)量，并取出；（2）在金標試劑空白處寫上樣品編號。寫編號2、操作步驟第一步：在室溫下，將測試卡平放在桌面上；第二步：用試劑包裝中所帶的塑料吸管吸取尿液或其它提取樣品；第三步：在加樣孔中滴三滴樣品，5分鐘內(nèi)判讀結(jié)果。3.

結(jié)果判定陽性（+）：僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色帶，在測試區(qū)（T）內(nèi)無紫紅色條帶出現(xiàn)。表明尿液中的克倫特羅殘留物大于3ppb。

陰性（-）：兩條紫紅色條出現(xiàn)。一條位于測試區(qū)（T）內(nèi)，另一條位于質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）。表明尿液中不含克倫特羅殘留物或尿液中的克倫特羅殘留物小于3ppb。

陰性陽性未加樣操作示意圖結(jié)果判讀陰性（－）：T線和C線都顯色，表示樣品中鹽酸克倫特羅濃度低于檢測限。陽性（＋）：T線無顯色C線顯色，表示樣品中鹽酸克倫特羅濃度高于檢測限。無效：未出現(xiàn)C線，表明不正確的操作過程或試紙卡已變質(zhì)失效。在此情況下，應(yīng)再次仔細閱讀說明書，并用新的試紙卡重新測試。金標讀數(shù)儀：美國產(chǎn)品可以進行定性和定量的檢測分析；體積小，重量輕，便于攜帶；適合于基層應(yīng)用單位使用

四、

注意事項

1.檢測前請詳細閱讀說明書并做好準備工作；

2.每加完一個樣品必須更換移液槍吸頭或滴管；

3.本試劑的檢測結(jié)果僅作為篩查，對于判定為陽性或者可疑的樣本應(yīng)該用另外的檢測方法（如LC/MS/MS或GC/MS）作進一步的確定；

4.本產(chǎn)品提供的各種物品及試劑只供本檢測試驗用，不能作為其他用途；

5.做多個樣品檢測時，試紙條加入檢測樣品的量盡量一致；6.在加樣孔中滴三滴樣品，3-5分鐘內(nèi)判讀結(jié)果，不要延長時間。7.注意試紙條的干燥保存，避免受潮，切忌冷凍；打開包裝后，應(yīng)在1小時內(nèi)盡快使用。

8.每條試紙只能使用一次，請在有效期內(nèi)使用；

9.多個樣品同時檢測時請做好標記；10.本產(chǎn)品僅作為篩查，對于判定為陽性或者可疑陽性樣本應(yīng)該用另外的檢測方法作進一步確定（如GC/MS或LC/MS/MS）。五、樣品的提取方法

一、尿液現(xiàn)場檢測一般無需前處理過程，直接點樣。尿液樣品必須收集在潔凈干燥，不含任何防腐劑的塑料尿杯或玻璃容器中。若不能現(xiàn)場檢測，可封樣帶回實驗室檢測，尿樣在2-8℃冷藏可保存4小時，長期保存需冷凍-20℃，嚴禁反復(fù)凍融。檢測前尿樣需回溫到室溫，如尿樣渾濁，需3000rpm以上離心5min后檢測。二、組織提取方法方法1：

1.1、用刀具粉碎組織樣品

1.2、用適量粉碎后樣品置于離心管中

1.3、于沸水中煮泡5分鐘，取出離心管室溫放置10-15分鐘

1.4、用滴管吸取離心管中的組織滲出液，加1滴在檢測卡的加樣孔中

1.5、再用滴管加入緩沖液2滴，5分鐘后判斷結(jié)果

方法2：

2.1、用超聲儀或類似儀器將樣品均質(zhì)化（或簡單用刀具粉碎組織樣品）。

2.2、取約5g均質(zhì)化后的樣品置于10ml試管中。

2.3、加約5ml3%三氯乙酸。

2.4、渦旋混勻后抽提10min（間隔震蕩2-3次）。2.5、離心3000rpm5分鐘。

2.6、用滴管取10滴（約250ul）上清液轉(zhuǎn)移入小離心管中。

2.7、加入1滴（約25ul）1NNaOH調(diào)整PH至7左右。

2.8、用滴管加入3滴提取液在檢測卡的加樣孔中，5分鐘后判定結(jié)果。

三、飼料提取方法

1、用刀具粉碎飼料樣品；

2、用1g粉碎后樣品置于試管中，加入3ml蒸餾水；

3、50度左右溫浴5分鐘，靜置5-10分鐘使不溶物完全沉淀（為節(jié)省時間，也可離心加速不溶物完全沉淀）；

4、用滴管加入3滴上清液在檢測卡的加樣孔中，5分鐘后判斷結(jié)果。國家標準

2021年國家頒布了GB/T5009.192-2021《動物食品中克倫特羅殘留測定，液相色譜法》六、其它類金標速測試劑條簡述

萊克多巴胺金標檢測試劑條沙丁胺醇金標檢測試劑條萊克多巴胺金標檢測試劑條

萊克多巴胺(RCT)·鹽酸是一種苯酚胺類β腎上腺素激動劑，能選擇性激動支氣管平滑肌的β2受體，臨床上普遍用于支氣管哮喘治療。

20世紀80年代的動物試驗表明，當(dāng)用藥量為治療劑量的5-10倍時，牛、豬、羊和家禽等多種動物體內(nèi)的營養(yǎng)成分由脂肪向肌肉轉(zhuǎn)移，表現(xiàn)為營養(yǎng)“再分配效應(yīng)”，可以增強脂肪分解代謝，顯著增加酮體瘦肉率，提高飼料轉(zhuǎn)化率，因此作為一種新型促生長添加劑可能在畜產(chǎn)品生產(chǎn)中使用，但人類食用含有該殘留的畜產(chǎn)品會引發(fā)食物中毒。

目前除了美國批準其可為豬的飼料添加劑，在歐洲，中國禁止使用，但事實上常有非法使用情況的報道。在體育比賽中，RCT可增強運動員、動物(如馬)肌肉，提高運動成績，國際奧委會已將其列為禁用藥物。因此，不論從食品安全檢測還是體育賽事興奮劑檢測方面對萊克多巴胺的檢測都具有重要意義。技術(shù)指標靈敏度：本品肉眼判定靈敏度為5ng/ml。結(jié)合金標讀數(shù)儀，判定檢測靈敏度為1ng/ml。產(chǎn)品可于室溫下陰涼避光干燥處貯存，有效期24個月。忌冷凍或在已過有效期后使用。國家標準2021年國家頒布了GB/T20219-2021《飼料中萊克多巴胺藥物殘留測定，采用高效液相色譜》2022年國家農(nóng)業(yè)部頒布了958號公告-4-2022《動物組織及動物尿液中萊克多巴胺殘留檢測，采用高效液相色譜》檢測原理萊克多巴胺免疫金標速測卡應(yīng)用競爭抑制免疫層析的原理，樣本中的萊克多巴胺在側(cè)向移動的過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體結(jié)合，抑制了抗體和NC膜檢測線上萊克多巴胺－BSA偶聯(lián)物的結(jié)合。如果樣本中萊克多巴胺含量大于5ng/mL，檢測線不顯顏色，結(jié)果為陽性；反之，檢測線顯紅色，結(jié)果為陰性。樣品處理豬尿：用干燥、潔凈的離心管或適當(dāng)容器采集50mL左右尿液。如果不立即檢測，可將尿樣冷凍保存；短期可進行冷藏保存，要注意避免腐敗造成失效或污染。如果尿樣出現(xiàn)沉淀或渾濁物，請離心后再檢測。出現(xiàn)陽性結(jié)果時應(yīng)按法定程序分瓶封裝樣品用于確證法檢測。樣品處理組織樣（畜禽肉）應(yīng)當(dāng)避光冷藏保存。1、取去脂肪組織樣本于均質(zhì)機中均質(zhì)1min（10000r/min），2、稱取2.5g均質(zhì)物于15ml離心管中，加入5mL0.1MHCl，振蕩混勻10min；3、加入100μL4MNaOH，劇烈振蕩30秒后，室溫下4000r/min離心15min；4、轉(zhuǎn)移全部上清于離心管中，加入50μL4MNaOH，振蕩混勻，再加入8ml乙酸乙酯，振蕩5min；5、取上層有機相6mL于試管中，65℃氮(空)氣吹干；6、向吹干的試管中依次加入0.3mL正己烷和0.3mLPBS，充分溶解試管壁上殘留物，靜置分層后，吸取至少100μL下層溶液檢測。使用步驟測試前請完整閱讀使用說明書，并將試劑板和待檢樣本溶液恢復(fù)至常溫。從包裝袋中取出試劑板后請盡快使用；用滴管吸取待檢樣品溶液，于加樣孔中滴加3滴，加樣后開始計時；結(jié)果應(yīng)在3~5分鐘讀取，其他時間判讀無效；讀取結(jié)果時，試劑板水平置于觀察者正面。結(jié)果判斷陰性（－）：T線（測試線，靠近加樣孔一端）比C線（對照線）深或一樣深，表明樣品中萊克多巴胺濃度低于

5μg/kg或不含萊克多巴胺殘留。陽性（＋）：T線比C線淺，或T線無顯色，表明樣品中萊克多巴胺濃度高于5μg/kg；T線相比C線越淺，表明樣品中萊克多巴胺濃度越高。無效：未出現(xiàn)C線，可能操作不當(dāng)或試劑板已失效。在此情況下，應(yīng)再次仔細閱讀說明書，并用新的試劑板重新測試。注意事項請勿觸摸試劑板中央的白色膜面；請勿使用過期的試劑板；本公司提供的滴管請勿重復(fù)使用；本公司提供的試劑請勿食用；若需直接檢測標準品，請用我方提供的PBS緩沖液進行配制。特異性使用本產(chǎn)品檢測100ng/mL沙丁胺醇標準品，結(jié)果顯示為陰性。本產(chǎn)品與鏈霉素、四環(huán)素、氯霉素、磺胺類等藥物無交叉反應(yīng)。精密度同時用本產(chǎn)品和萊克多巴胺ELISA檢測試劑盒對包括146份陰性樣本和140份陽性樣本的286份樣品進行檢測，結(jié)果表明本產(chǎn)品與萊克多巴胺ELISA檢測試劑盒的結(jié)果符合率為94.4％。沙丁胺醇沙丁胺醇為選擇性β2受體激動劑，能有效地抑制組胺等致過敏性物質(zhì)的釋放，防止支氣管痙攣。適用于支氣管哮喘、喘息性支氣管炎、支氣管痙攣、肺氣腫等癥。沙丁胺醇不良反應(yīng)較常見的不良反應(yīng)有：震顫、惡心、心率增快或心搏異常強烈。較少見的不良反應(yīng)：頭暈、目眩、口咽發(fā)干。逾量中毒的早兆表現(xiàn)：胸痛，頭暈，持續(xù)嚴重的頭痛，嚴重高血壓，持續(xù)惡心、嘔吐，持續(xù)心率增快或心博強烈，情緒煩躁不安等。檢測原理沙丁胺醇免疫金標速測卡應(yīng)用競爭抑制免疫層析的原理，樣本中的沙丁胺醇在側(cè)向移動的過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體結(jié)合，抑制了抗體和NC膜檢測線上沙丁胺醇－BSA偶聯(lián)物的結(jié)合。如果樣本中沙丁胺醇含量大于5ng/mL，檢測線不顯顏色，結(jié)果為陽性；反之，檢測線顯紅色，結(jié)果為陰性。樣品處理豬尿：用干燥、潔凈的離心管或適當(dāng)容器采集50mL左右尿液。如果不立即檢測，可將尿樣冷凍保存；短期可進行冷藏保存，要注意避免腐敗造成失效或污染。如果尿樣出現(xiàn)沉淀或渾濁物，請離心后再檢測。出現(xiàn)陽性結(jié)果時應(yīng)按法定程序分瓶封裝樣品用于確證法檢測。樣品處理組織樣（畜禽肉）應(yīng)當(dāng)避光冷藏保存。1、取去脂肪組織樣本于均質(zhì)機中均質(zhì)1min（10000r/min），2、稱取2.5g均質(zhì)物于15ml離心管中，加入5mL0.1MHCl，振蕩混勻10min；3、加入100μL4MNaOH，劇烈振蕩30秒后，室溫下4000r/min離心15min；4、轉(zhuǎn)移全部上清于離心管中，加入50μL4MNaOH，振蕩混勻，再加入8ml乙酸乙酯，振蕩5min；5、取上層有機相6mL于試管中，65℃氮(空)氣吹干；6