標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 31795-2015 番茄黑環(huán)病毒檢疫鑒定方法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn),主要針對番茄黑環(huán)病毒(Tomato black ring virus, TBRV)的檢測與鑒定提供了科學(xué)的方法指導(dǎo)。該標(biāo)準(zhǔn)適用于進出口貿(mào)易中植物及其產(chǎn)品的檢驗檢疫工作,同時也可應(yīng)用于國內(nèi)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的病害監(jiān)測和防治。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容,TBRV的檢測主要包括樣品采集、處理及具體實驗操作步驟。首先,在樣品準(zhǔn)備階段,需要從疑似感染TBRV的植株上選取合適的樣本部位,如葉片或莖部,并按照規(guī)定的方式進行保存以保證后續(xù)測試的有效性。接下來是病毒RNA提取過程,通過使用適當(dāng)?shù)脑噭┖谢蚱渌行侄螐闹参锊牧现蟹蛛x出高質(zhì)量的RNA,為后續(xù)分析打下基礎(chǔ)。
對于TBRV的確診,本標(biāo)準(zhǔn)推薦采用RT-PCR技術(shù)。這一分子生物學(xué)方法能夠特異性地擴增目標(biāo)病毒序列,從而實現(xiàn)對TBRV存在的準(zhǔn)確判斷。此外,還介紹了如何通過電泳等手段來驗證PCR產(chǎn)物,確保結(jié)果的可靠性。
除了上述核心檢測流程外,《GB/T 31795-2015》還詳細列出了實驗所需的各種儀器設(shè)備、化學(xué)試劑及其配制方法,并給出了質(zhì)量控制的具體要求,比如陽性對照和陰性對照的選擇與設(shè)置,以及實驗室內(nèi)部質(zhì)量管理體系建立等方面的內(nèi)容,旨在提高檢測工作的規(guī)范性和準(zhǔn)確性。
該標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布實施對于加強我國植物檢疫體系、防止外來有害生物入侵具有重要意義,同時也能促進國際間農(nóng)產(chǎn)品安全交流與合作。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2015-07-03 頒布
- 2015-11-27 實施
文檔簡介
ICS6502001
B16..
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T31795—2015
番茄黑環(huán)病毒檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofTomatoblackringvirus
2015-07-03發(fā)布2015-11-27實施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
中華人民共和國
國家標(biāo)準(zhǔn)
番茄黑環(huán)病毒檢疫鑒定方法
GB/T31795—2015
*
中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行
北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號
2(100029)
北京市西城區(qū)三里河北街號
16(100045)
網(wǎng)址
:
服務(wù)熱線
:400-168-0010
年月第一版
20158
*
書號
:155066·1-49526
版權(quán)專有侵權(quán)必究
GB/T31795—2015
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫局中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫
:、
局中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局
、。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人楊翠云于翠郭京澤魏亞東鄧叢良喬艷艷崔學(xué)慧胡培龍孫娟
:、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T31795—2015
番茄黑環(huán)病毒檢疫鑒定方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了番茄黑環(huán)病毒的免疫磁珠實時熒光鑒
DAS-ELISA、RT-PCR、RT-PCR、RT-PCR、
別寄主檢測和免疫電鏡等檢疫鑒定方法
。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物材料包括無性繁殖材料種子和苗木中番茄黑環(huán)病毒的檢疫鑒定
,、。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
植物病毒免疫電鏡檢測方法
SN/T1840
進出境植物及植物產(chǎn)品檢疫抽樣
SN/T2122
3儀器設(shè)備設(shè)施用具和試劑
、、
31儀器設(shè)備
.
酶標(biāo)儀儀實時熒光儀超凈工作臺電子天平感量電泳儀電泳槽凝膠成
、PCR、PCR、、(0.001g)、、、
像系統(tǒng)電子透射顯微鏡水浴鍋高速冷凍離心機超低溫冰箱高壓滅菌鍋制冰機微波
、、、、(-80℃)、、、
爐渦旋振蕩器
、。
32設(shè)施
.
植物隔離檢疫圃
。
33用具
.
可調(diào)式微量移液器及相應(yīng)的無吸頭無離
(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL)RNase、RNase
心管管研缽樣品袋標(biāo)簽鑷子放大鏡磁力架等
、PCR、、、、、、。
34主要試劑
.
除有特殊說明外所有實驗用試劑均為分析純或生化試劑
,。
抗體磁珠具有超順磁性的聚苯乙烯珠子直徑表面標(biāo)記有甲苯磺?;?/p>
TBRV、(,280nm,)、Trizol、
焦碳酸二乙酯液氮三氯甲烷異戊醇異丙醇乙醇反轉(zhuǎn)錄酶酶抑制劑Taq
(DEPC)、、、、、、AMV、RNA、
聚合酶分子標(biāo)記溴化乙錠瓊脂糖溴酚藍等
DNA、DNA、、、。
血清學(xué)和分子生物學(xué)檢測試劑配制見附錄
B。
4癥狀觀察及抽樣
41癥狀觀察
.
現(xiàn)場檢疫主要觀察進境植物材料上病毒為害的癥
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