GB/T 38477-2020基因表達(dá)的測(cè)定蛋白印跡法

ICS07080

A21.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T38477—2020

基因表達(dá)的測(cè)定蛋白印跡法

Determinationofgeneexpression—Westernblot

2020-11-19發(fā)布2020-11-19實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T38477—2020

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位河北醫(yī)科大學(xué)中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院河北省食品檢驗(yàn)研究院中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)

:、、、

育生物學(xué)研究所農(nóng)業(yè)資源研究中心中國(guó)醫(yī)科大學(xué)河北師范大學(xué)

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人呂品馬愛(ài)進(jìn)張巖趙偉東曹鵬秀趙美丞王寧

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T38477—2020

基因表達(dá)的測(cè)定蛋白印跡法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用蛋白印跡法測(cè)定基因表達(dá)的方法原理試劑或材料儀器設(shè)備測(cè)

(Westernblot)、、、

定步驟和結(jié)果分析

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)植物組織或體外培養(yǎng)細(xì)胞目的基因表達(dá)測(cè)定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語(yǔ)定義和縮略語(yǔ)

、

31術(shù)語(yǔ)和定義

.

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

311

..

基因表達(dá)geneexpression

將儲(chǔ)存在分子中的遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子的過(guò)程

DNA,。

32縮略語(yǔ)

.

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

牛血清白蛋白

BSA:(BovineSerumAlbumin)

增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光

ECL:(EnhancedChemiluminescence)

十二烷基硫酸鈉

SDS:(SodiumDodecylSulfate)

十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳

SDS:-(SodiumDodecylSulfate-PolyacrylamideGel

Electrophoresis)

緩沖鹽溶液

TBS:Tris(TrisBufferedSaline)

吐溫緩沖鹽溶液

TBST:-20/Tris(Tween-20/TrisBufferedSaline)

4原理

分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到轉(zhuǎn)印膜上后先用抗目的蛋白質(zhì)的一抗與轉(zhuǎn)印膜上的蛋白質(zhì)反

SDS,

應(yīng)然后利用帶標(biāo)記的二抗與一抗反應(yīng)最后根據(jù)二抗標(biāo)記物的特性檢測(cè)微量蛋白質(zhì)