《實驗動物技術(shù)研究5300字（論文）》

實驗動物技術(shù)專業(yè)報告：實驗動物真菌病分析摘要：當前微生物學和流行病學的不斷發(fā)展使得真菌病在實驗動物中的發(fā)生逐漸受到廣泛的關(guān)注，我國動物真菌病的發(fā)病率急劇上升，給動物實驗室造成巨大財產(chǎn)損失，因而有必要加強臨床對于實驗動物真菌病的了解，以為該類疾病未來診療方向提供新思路。本研究通過查閱既往文獻，對實驗動物主要幾類真菌病進行了調(diào)查了解，并對各類疾病的發(fā)生現(xiàn)狀及診療現(xiàn)況進行了分析，現(xiàn)將其報道如下。關(guān)鍵詞：實驗動物；真菌??；獸醫(yī)一、引言真菌在自然界分布廣泛，種類繁多。到目前為止，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了超過10萬種真菌。大部分是無害的，只有少數(shù)(100多種)對人和動物有致病性。隨著微生物學和流行病學的不斷發(fā)展，病原真菌的問題越來越受到重視。致病真菌包括淺部真菌和深部真菌。然而在現(xiàn)代實驗動物的飼養(yǎng)環(huán)境下，深性侵害已經(jīng)很少發(fā)生。臨床報道表明，畜禽飼料中真菌的污染和在動物體內(nèi)的寄生現(xiàn)象相當嚴重，而抗生素、皮質(zhì)類固醇、免疫抑制劑等藥物的大量使用和放射醫(yī)學的快速發(fā)展，可促進致病真菌在動物體內(nèi)的生長繁殖機會[1]。因此，近年來我國動物真菌病的發(fā)病率急劇上升，引起了人們的高度重視和廣泛深入的研究。有毒真菌及其有毒代謝產(chǎn)物不僅引起動物生長遲緩、免疫力下降、器官功能障礙和中毒死亡，而且對動物具有強烈的致畸、致癌和致突變作用。因此，毒菌在危害動物健康的同時，往往直接或間接造成巨大的經(jīng)濟損失。本研究通過對當前實驗動物各類真菌病的發(fā)生進行介紹，從而為當前臨床診療和預防提供新思路，更好的改善當前實驗動物真菌感染疾病發(fā)生現(xiàn)狀。二、實驗動物真菌病的現(xiàn)狀及常見病原分類（一）實驗動物真菌病現(xiàn)狀我國實驗動物真菌病的研究始于20世紀50-60年代。近40年來，我國發(fā)現(xiàn)并深入研究了多種危害嚴重的動物真菌病，為保護畜禽健康積累了豐富的科學資料。真菌廣泛地分布于自然界中,大多數(shù)真菌不是致病菌﹐僅有少數(shù)對動物或人有害。據(jù)報道，能引起動物疾病并產(chǎn)生相應毒性代謝產(chǎn)物的有200多種，引起常見真菌疾病的有10多種[2]。致病真菌多為人畜共患病，不僅可以在實驗動物之間相互傳染，還可以傳染給與患病動物接觸的飼養(yǎng)者和動物實驗者。動物真菌病是由有毒真菌引起的傳染性疾病﹐世界各地及各種動物均有發(fā)生，發(fā)病率和死亡率都較高。已證實有318種真菌能引起動物疾病，并產(chǎn)生340多種有毒代謝產(chǎn)物。目前我國動物真菌病的研究遠遠落后于細菌、病毒性疾病，許多動物真菌病的研究尚未取得突破性進展，嚴重危害畜禽健康[3]。根據(jù)我國動物真菌病的研究進展與現(xiàn)狀，提出今后本學科的研究方向。（二）實驗動物常見病原分類小孢霉屬﹑毛癬菌屬﹑表皮癬菌屬，這些真菌都歸于不完全菌類，自然菌綱﹑粉狀型分孢生子群。其中一些為有性階段，在分類上其屬于子囊菌綱﹑裸囊菌亞綱等。在傳染病學上大致有嗜人體皮膚真菌﹑嗜動物皮膚真菌、嗜土壤皮膚真菌。實驗動物主要以嗜動物皮膚真菌感染為主，能引起實驗動物的皮膚真菌感染主要有以下幾種。須發(fā)蘚菌在豚鼠、小白鼠、大白鼠、兔、貓、犬等動物身上均有，黃蘚菌在大白鼠出現(xiàn)頻率高在豚鼠、兔、犬等動物中可見，犬小狍子菌在貓和犬等動物身上較為常見。三、實驗容物常見真菌病類型（一）禽曲霉菌病1959年，四川農(nóng)學院首次報道了我國雞的曲霉菌病。1961年，廣西獸醫(yī)研究所發(fā)表報告說，雞在實驗中患了煙曲霉病。此后，中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所(1962~1970)對我國禽曲霉菌病進行了詳細的調(diào)查和研究，發(fā)現(xiàn)這種病在我國廣泛流行，造成了巨大的經(jīng)濟損失，煙曲霉菌、黃曲霉菌、卵巢霉菌和黑曲霉菌為主要致病菌。這種疾病容易感染各種鳥類，尤其是幼鳥。在我國已發(fā)現(xiàn)多種家禽曲霉菌病，如珍珠雞、烏骨雞、七彩山雞、榛雞、鴨、鵝、天鵝、鸚鵡、野鶴、蠟嘴鳥、鴕鳥、鶴鶉、山雞、鷦鷯、水貂等，發(fā)病率和死亡率均較高。據(jù)調(diào)查(1963~1970年)，我國部分疫區(qū)雞的死亡率可達24/o~3.3%，而同期死于其他疾病的雞只有5/~1.9%。1987年3月，河南省通山縣獸醫(yī)醫(yī)院門診禽病病例中，曲霉菌占41.95%[4]。1月齡以內(nèi)幼鳥的曲霉病多為急性，呼吸狀態(tài)的改變是本病的特征。其特征是伸頸，張口吸氣，常發(fā)出羅音和口哨聲，最后窒息而死。已經(jīng)耐受的急性雛雞、中年鳥、成年鳥多為慢性。病變主要形成于呼吸系統(tǒng)，表現(xiàn)為包膜和肺表面灰白色、淡黃色、針尖大如豌豆的結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)中央常見曲霉菌孢子和菌絲。本病的診斷目前主要依據(jù)病原菌的分離鑒定、臨床癥狀、病理變化，流行病學和病史以及人工發(fā)病試驗等。國外已有采用血清免疫學診斷禽曲霉菌病的報道，而我國目前尚無這方面的研究。除了服用克霉唑、氟康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶等部分化學藥物和制霉菌素、兩性霉素B等抗生素藥物，以及硫酸銅、碘化鉀、亮綠、結(jié)晶紫等飲用水溶液外，主要采取對癥治療，中草藥配合使用。一般輕者可治愈，重者尤其是器官結(jié)節(jié)嚴重者，經(jīng)緊急治療無效。目前國內(nèi)缺乏安全有效的免疫疫苗，主要預防措施是防止飼料霉變，禁止飼喂被霉菌污染的家禽飼料。（二）動物念珠菌病念珠菌病的致病菌為念珠菌屬，共9種。在我國，對動物致病的以白色念珠菌最為多見，其次為熱帶念珠菌。這種疾病易感染多種動物，尤其是家禽。雞、鴨、鵝、鴿、珍珠雞、鷓鴣和牛犢的內(nèi)臟念珠菌病以及大熊貓和豹的皮膚念珠菌病在中國均有發(fā)現(xiàn)，尤以鴿子的粘膜和內(nèi)臟念珠菌病最為常見。1980年以后，廣西部分地區(qū)發(fā)生了一種牛腐蹄病，并呈逐年上升趨勢。既往研究對該病的流行病學、病原分離以及小鼠、家兔、火雞、鵝、山羊、牛、水牛等實驗動物進行了研究，最終確認白色念珠菌是牛腐蹄病的病原。禽念珠菌病主要表現(xiàn)在口腔及嗪囊粒膜上形成白膜,呈鵝口瘡樣,撕脫后可見潰瘍出血面。犢牛內(nèi)臟念珠菌病可伴發(fā)念珠菌性乳房炎,陰道炎、肺炎及全身性念珠菌病。皮膚念珠菌病表現(xiàn)局部背毛脫落,形成大小不等的丘疹等,牛表現(xiàn)患肢腫爛、運動障礙。本病的診斷主要依據(jù)病原分離鑒定、流行病學、臨床癥狀、病理變化和人工疾病試驗。本研究用直接熒光抗體法檢查了牛腐蹄病疫區(qū)的159頭牛，其中熒光陽性46頭，占28.9%，并認為體液白細胞熒光抗體陽性只出現(xiàn)在早期病例。另據(jù)報道，用試管凝集法測定了奶牛、狗、貓、兔、大鼠等動物的抗念珠菌病血清抗體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，白色念珠菌是一種完全抗原，可以刺激機體產(chǎn)生抗體。認為白色念珠菌抗體的檢測對本病的診斷有參考價值。與禽曲霉病一樣，克霉唑、酮康唑、5-氟胞苷、制霉菌素和兩性霉素B是治療該病的主要藥物。本研究選用牛胸腺素和豬胸腺素轉(zhuǎn)移因子三種免疫增強劑，比較其對白色念珠菌感染實驗小鼠的保護作用。發(fā)現(xiàn)兩種胸腺素制劑均能延長小鼠存活時間，減少體內(nèi)細菌數(shù)量，增加體重，尤以豬胸腺素為佳。轉(zhuǎn)移因子沒有上述有效作用。（三）動物毛霉菌病微小根毛霉(Mucorpusillus)、傘枝犁頭霉（Absidialichemi)和足樣根霉(Rhizopusrhizopodifoyms)為毛霉菌病的病原?；疾∧膛５牟±碜兓腥N類型，即急性早期以循環(huán)障礙為主；亞中期可見凝固性壞死和梗死。慢性疾病晚期，病變類似肉芽腫。認為該病的直接原因是飼料和奶牛毛霉屬病原真菌的嚴重感染，過量飼喂?jié)饪s飼料和長期抗生素治療引起的胃酸中毒是奶牛皺胃毛霉的誘發(fā)因素。況且國內(nèi)也沒有這方面的研究報道。實驗動物毛霉病的診斷也是根據(jù)病原菌的分離鑒定、臨床癥狀、病理變化和動物實驗。目前國內(nèi)尚無該病防治的研究報道。（四）流行性淋巴管炎有關(guān)本病的首次報道見于14世紀,第二次世界大戰(zhàn)期間傳播到世界各地,當時中國也受到本病傳染,其病原為偽皮疽組織胞漿菌。這種疾病主要發(fā)生在馬科動物中。所有年齡的馬和騾子都易受感染。發(fā)病率一般為2%o~5%，死亡率為20%~30%。病畜排泄物是主要傳染源，家畜與病原菌的直接或間接接觸是主要感染途徑。蚊子、蒼蠅和蛇等昆蟲是這種疾病病原體的機械傳播者。本病病灶最常見于四肢、頭部，特別是唇部，其次為頸、背腰、胸側(cè)和腹側(cè)，在這些部位形成結(jié)節(jié)，繼而形成膿腫，破潰后流出膿汁，遺留潰瘍，或病原菌從原發(fā)性病灶向外擴散，侵入淋巴管，使之發(fā)炎﹐腫脹，形成淋巴管索腫。本病的治療采用局部處理和全身療法相結(jié)合，常用的全身治療藥物有新腫凡納明，碘化鉀、美蘭、穿心蓮等。（五）真菌皮膚病皮膚病原真菌分屬三個屬：小孢子菌屬和表皮癬菌屬，為半知菌亞門、絲孢菌綱、絲孢菌目、從梗孢科中的兩個屬；毛癬菌屬，為半知菌亞門、梗絲孢菌綱、絲孢目﹑束梗孢科中的一個屬。其中引起實驗動物發(fā)病的約有12個種。羊毛狀小孢子菌，又稱犬小孢子菌，主要寄生于犬，還可引起貓、猴、兔、豚鼠、大小鼠、豬﹑羊等感染。本菌在沙氏瓊脂培養(yǎng)基室溫培養(yǎng)生長迅速。開始為黃色絨毛樣生長，2周后菌絲較多，呈羊毛狀，可充滿大部分斜面。大多在頭部，開始時為灰白色鱗屑斑，逐漸擴大。初發(fā)損害稱母斑，在母斑外圍可能有后發(fā)的、小片圓形的損害稱子斑。有時，母子斑融合成大片灰白色的鱗屑斑，引起毛發(fā)松動，在距發(fā)根2~4mm處折斷，外圍白套稱菌鞘，具很強的傳染性。石膏樣小孢子菌為親動物性皮膚癬菌，常引起嚙齒類、兔、犬和靈長類感染。感染后可在皮膚上引起強烈的炎癥反應，偶爾產(chǎn)生膿皰痂樣損害，有特殊的鼠尿味。也可導致毛發(fā)感染呈現(xiàn)膿皰樣表現(xiàn)。這種真菌引起的體癬類似于綿狀小孢子菌感染引起的體癬，鱗屑少，通常只有1-3片，炎癥現(xiàn)象相當明顯，除了環(huán)狀外，也可呈濕疹樣。石膏樣毛癬菌又稱須癬毛癬菌，為發(fā)外型親動物性皮膚癬菌。菌落形態(tài)多樣?？筛腥径喾N實驗動物和人,是最常見的一種皮膚病原真菌。本菌主要引起體股癬，四肢癬，頭癬，膿癬﹑須癬及皮膚肉芽腫性損害和癬菌疹。損害為環(huán)形或多環(huán)形，色紅，常有較急性的炎癥反應，中央皮膚正常，愈合傾向明顯，無色素沉著，皮損直徑較小，但數(shù)目較多，邊緣常有明顯的小的水皰。膿癬：皮損化膿。本菌是膿癬的首位病原菌，約占50%左右。癬菌疹：有以下幾種表現(xiàn)：苔蘚樣；蕁麻疹樣；丹毒疹樣；水皰樣。深部感染多引起膿腫和肉芽腫。四、實驗動物常見真菌病的臨床診療及預防（一）臨床診斷對本病的診斷可根據(jù)臨床病變癥狀和病原的分離鑒定加以確診，但本病常與體外寄生蟲﹑葡萄球菌病的臨床癥狀類似，且有混合或繼發(fā)感染，有可能在分離出寄生蟲或細菌后忽視皮膚病原真菌的情況在實際中應特別注意，避免產(chǎn)生誤診。實驗動物感染初期往往無癥狀，在到一定的階段后，會出現(xiàn)圓形、不規(guī)則形的被毛脫落及皮膚損傷，一般多見于頭頸部﹑背部以及全身各部位。有些還會出現(xiàn)紅斑丘疹﹑鱗屑等，但多數(shù)動物沒有癢感。由于皮膚毛囊的破壞，病變會慢慢地涉及到皮膚深層，這時會出現(xiàn)明顯的膿瘡和癡。在一些動物中本病常與疥螨﹑糯形螨混合感染剽，實驗動物也常因疥螨﹑糯形螨等體外寄生蟲的感染而誘發(fā)皮膚真菌感染。此外，微生物檢驗也是實現(xiàn)對患者診斷的重要途徑。刮取病畜頭、耳等易感部位的皮毛和新鮮碎屑放在載玻片上，滴加10%氫氧化鉀，處理后鏡檢可見許多大小約3um~5um的結(jié)節(jié)狀孢子附著在磚墻內(nèi)的皮毛上。磷碎片中可見葡聚糖凝膠。（二）臨床治療可以服用一些化學藥物和抗生素，如CuSO4KI、克霉唑、氟康唑、制霉菌素、兩性霉素B5-FC、撲爾敏等。但通常在發(fā)病初期和病情較輕時有效。而當疾病發(fā)展到中期，甚至是病原體侵入內(nèi)臟導致發(fā)病時，此時的治療就沒有效果了。對于在標準飼養(yǎng)環(huán)境下飼養(yǎng)的實驗動物，必須對患病動物進行隔離和消滅。根據(jù)衛(wèi)生部發(fā)布的相關(guān)規(guī)定，用于科學實驗的實驗動物感染皮膚真菌后不能作為實驗使用。但一些具有較大經(jīng)濟價值的實驗動物，如狗、兔、猴等，在感染初期是可以得到適當治療的。一般使用灰黃霉素、曲安奈德尿素軟調(diào)、利康唑。據(jù)報道，該混合物水楊酸鈉12g，苯甲酸6g，60%乙醇，連續(xù)使用8次，效果良好。二價滅活皮膚癬菌二次免疫可保護皮膚真菌達80%，免疫期至少半年。但處理后的動物只能用于教學和一般的預試驗，不能用于科學實驗。（三）預防建議動物真菌病不僅感染動物，感染患病動物的飼養(yǎng)者和實驗者，還會影響科學實驗的準確性。同時，一些真菌也會產(chǎn)生真菌毒素，對實驗動物的繁殖性能也會產(chǎn)生很大的影響，所以要引起足夠的重視。為了預防實驗動物患此病，應做好以下工作:(1)做好環(huán)境衛(wèi)生，對新引進動物嚴格進行真菌檢測，確認健康合格，同時建立核心種群，定期對動物進行微生物學監(jiān)測；(2)有條件的，保持實驗動物處于無特定病原體狀態(tài)，并對設施、器具、設備、飲用水、飼料等進行消毒滅菌。防止野鼠、昆蟲侵入飼養(yǎng)室，為飼養(yǎng)人員、實驗人員、參觀人員提供衛(wèi)生管理制度；(3)一旦發(fā)現(xiàn)患病動物，立即對同一單元飼養(yǎng)的動物進行處理和焚燒，并對周圍環(huán)境進行消毒。除上述外，根除動物攜帶者的目的是培育不育動物、SPF動物和原蟲。注射、藥物治療等。不適用于實驗動物。五、小結(jié)因為很多致病真菌都是條件致病菌，除了少數(shù)急性臨床病例外，其余都是慢性消耗性疾病，所以不像細菌和病毒性疾病那樣廣泛，危害性大，所以一直沒有引起人們的重視。然而，如上所述，隨著抗生素和皮質(zhì)類固醇的廣泛使用，近年來動物真菌病的發(fā)病率急劇上升，新的致病真菌和真菌不斷被發(fā)現(xiàn)。一些原本對畜禽無致病性或弱致病性細菌轉(zhuǎn)為疾病的病例頻頻發(fā)生。對動物健康的危害越來越嚴重，有必要進一步加強該學科的