儀器分析新2課件

尿微量清蛋白（MAU）——P205

Β2—微球蛋白（Β2—

MG）——P209α1—微球蛋白（α1—

MG）——P212

BJP——P202

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)溶菌酶尿淀粉酶(AMY)HCG

目前常見的臨床檢查模式干化學(xué)直接報告模式1干化學(xué)篩選，顯微鏡確認陽性標本后報告模式2干化學(xué)和沉渣流式分析儀篩選，顯微鏡確認陽性標本后報告模式3

?尿比重

?尿酸堿度

?尿白細胞

?尿蛋白質(zhì)

?尿亞硝酸鹽

?尿葡萄糖?尿酮體?尿膽原?尿膽紅素?尿紅細胞尿液干化學(xué)分析尿液的酸度(PH)比密(SG)蛋白質(zhì)(PRO)葡萄糖(GLU)酮體(KET)膽紅素(BIL)尿膽原(UBG)亞硝酸鹽(NIT)白細胞(LEU)紅細胞/隱血(Hb)維生素C(Vitc)尼龍膜：防止大分子物質(zhì)對反應(yīng)的污染；絨制層：包括碘酸鹽層和試劑層：碘酸鹽層可以破壞維生素C等干擾物質(zhì)，試劑層含有試劑成分，主要與尿液中測定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化；吸水層：可使尿液均勻快速的浸入，并能抑制尿液流到相鄰的反應(yīng)區(qū)；塑料底層：作支持體。

尼龍膜碘酸鹽層試劑層吸水層塑料底層空白塊：用于消除尿自身顏色在試劑塊上產(chǎn)生顏色的干擾。尿液分析試紙項目縮寫符號反應(yīng)原理酸堿度

pHpH指示劑蛋白質(zhì)

PROpH指示劑的蛋白質(zhì)誤差法葡萄糖

GLU葡萄糖氧化酶法隱血

BLDHb類過氧化物酶法膽紅素

BIL偶氮反應(yīng)法尿膽原

URO醛反應(yīng)法酮體

KET硝基鐵氰化鈉法亞硝酸

NIT亞硝酸鹽還原法白細胞

LEU酯酶法比密

d（SG）多聚電解質(zhì)離子解離法抗壞血酸

ASG吲哚酚法按檢測項目分

8項：pH、PRO、GLU、KET、

BIL、URO、BLD、NIT9項：8項+LEU10項：9項+SG11項：10項+VitC12項：11項+顏色或透明度組合型試帶腎病型四聯(lián)試帶：pH、蛋白、隱血、比密糖尿病型五聯(lián)試帶：pH、蛋白、葡萄糖、酮體、比密肝臟病型二聯(lián)試帶：膽紅素、尿膽原浸漬試帶條將多聯(lián)試帶完全浸入尿液1～2s，然后立即取出。瀝去多余尿液沿試管壁將試帶上多于尿液去盡。檢測標本將試帶置于儀器檢測槽內(nèi)，直至儀器自動打印出報告。各種尿干化學(xué)分析儀一、尿液分析儀儀器檢測原理

儀器采用球面積分儀接受雙波長反射光，測定試劑帶上的顏色變化進行半定量測定。試劑帶上有數(shù)個含各種試劑的試劑墊，各自與尿中相應(yīng)成分進行獨立反應(yīng)，而顯示不同顏色，顏色的深淺與尿液中某種成分的含量成比例關(guān)系。試劑帶中還有另一個“補償墊”，作為尿液本底顏色，對有色尿液所產(chǎn)生的誤差進行補償。計算原理

R(%):反射率Tm:試劑墊對測定波長的反射強度Ts:試劑墊對參考波長的反射強度Cs:標準墊對參考波長的反射強度Cm:標準墊對測定波長的反射強度尿液自動分析儀結(jié)構(gòu)圖CPU尿液分析儀由：機械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。光電管球面積分儀濾光片光源

（二）光電系統(tǒng)結(jié)構(gòu)圖四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)返回本節(jié)目錄光源接收器(二)試帶使用注意事項1.

嚴格按操作說明書要求進行操作；2.

試帶要在有效期內(nèi)使用；3.

試帶從冷藏變成室溫前不要打開瓶蓋，用后蓋緊瓶蓋；開過蓋的試帶瓶不建議放在冷藏溫度，可放陰涼、干燥、避光處。4.禁止用手觸摸試劑區(qū)，5.

不同廠家的同類試紙，其原理、方法、結(jié)果不相同，不可混用。三、

干化學(xué)分析儀的局限性

1.

試劑條的因素

2.

尿本身的因素：如標本采集不不合格等

3.

操作原因：如儀器的校準、維護、環(huán)境溫度。

4.

皆為定性分析，只能做過篩試驗。其次是不能檢測尿有形成分，因而不能代替尿沉渣檢查。尿液結(jié)果分析：干化學(xué)（+）鏡檢（-）干化學(xué)（-）鏡檢（+）WBC細胞破壞以淋巴細胞為主RBC為Hb、Mb尿，含熱不穩(wěn)定酶、菌尿大量VitC，試帶失效NIT標本放置時間過久或被污染尿路感染的病原微生物種類、無硝酸鹽的存在、尿液標本留取的時間、藥物尿沉渣分析儀

尿沉渣分析儀

尿沉渣分析儀是用顯微鏡或?qū)Ｓ迷O(shè)備對尿液有形成分檢查的儀器，擺脫了繁瑣和費時的操作程序，做到尿沉渣分析的標準化、自動化。目前使用的尿沉渣分析儀，主要有：圖像識別法、流式細胞儀法，以及尿液分析工作站等幾種類型。

運用流式細胞術(shù)及特殊熒光染色的原理，將尿標本染色后進入鞘液流動池時，每個有形成分單個縱列通過流動池中心軸線，每個粒子均被氬激光光束照射，并各自發(fā)出不同的熒光強度(信號)。信號表達為3類：即前向散射光、熒光和電阻抗。

（一）流式細胞式尿沉渣分析儀流式細胞式尿沉渣分析儀原理激光束(=488m)

熒光強度fl：前向散射光強度：細胞大小RND、DNA強度前向散射光脈沖寬度：細胞長度熒光脈沖寬度(F1w)：細胞染色質(zhì)長度電阻抗：反映細胞體積流式細胞式尿沉渣分析儀原理

前向散射光強度(Fsc)：細胞大小

前向散射光脈沖寬度(Fscw)：細胞長度熒光信號

熒光強度(Fl)：細胞染色質(zhì)(DNA/RNA)的強度熒光脈沖寬度(Flw)：細胞大小電阻抗：反映細胞體積前向散射光信號

儀器將這種熒光，散射光和電阻抗的信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，綜合分析這些電信號，得出細胞大小、長度、染色強度和染色部分長度以及細胞的體積資料，并給出每類細胞的散射圖和直方圖，并計算出每微升尿中各種細胞的數(shù)量進行報告。UF-100尿沉渣分析系統(tǒng)散點圖細胞大小細胞長度熒光脈沖寬度前向散射光脈沖寬度UF-100尿沉渣分析系統(tǒng)散點圖細胞大小染色質(zhì)強度前向散射光強度熒光強度

流式細胞術(shù)尿沉渣分析儀檢測參數(shù)紅細胞(RBC)

均一性紅細胞（IsomorphicRBC）%

非均一性紅細胞（DysmorphicRBC）%

非溶血性紅細胞數(shù)量（Non-LysedRBC#）非溶血性紅細胞百分比（Non-LysedRBC%）白細胞（WBC）上皮細胞（EC）、小圓上皮（SRC）管型（CAST）,病理管型（Path.CAST）細菌（BACT）酵母細胞（YLC）精子細胞（SPERM）結(jié)晶（X’TAL）尿液電導(dǎo)率（conductivity）RBCP7070%紅細胞位置

提示：以未溶解的RBC為100%時，70%紅細胞的平均體積。NLRBC%

未溶解RBC百分比

提示：完整RBC的百分比（不包含影形RBC，RBC碎片，皺縮紅細胞）。RBCINF

紅細胞信息

提示：RBC來源。Microcytic(不均一小紅細胞)?

提示紅細胞源于腎小球Normocytic(正常均一紅細胞)?

提示紅細胞非來源于腎小球Nonclassified(未分類型)?

提示混合型紅細胞細胞

Negative

提示紅細胞計數(shù)正常病例1：男，29歲，尿干化學(xué)檢查pH5.0蛋白質(zhì)PRO－葡萄糖GLU－酮體KET－尿膽原UBG－膽紅素BIL－亞硝酸鹽NIT－紅細胞ERY+++白細胞LEU－比密SG1.015VitC<0.6mmol尿流式沉渣檢查U-RBC1440.2U-WBC5.9U-EC1.5U-CAST0.13U-BACT132.6U-Path.CAST0.0U-SRC0.0U-YLC0.0U-X`TAL171.6U-RBCinfoIsomorphic?U-Nlysed#1431.3[/μL]

U-Nlysed%99.3[%]鏡檢結(jié)果WBC:0～3/HPRBC:滿視野/HP腎結(jié)石病例2：男，81歲，鏡檢結(jié)果WBC:滿視野/HPRBC:10～20/HPEC:2～8/HP急性膀胱炎尿干化學(xué)檢查pH7.0蛋白質(zhì)PRO+－葡萄糖GLU－酮體KET－尿膽原UBG+－膽紅素BIL－亞硝酸鹽NIT+紅細胞ERY+白細胞LEU+++比密SG1.010VitC<0.6mmol尿流式沉渣檢查U-RBC195.9

U-WBC1509.8U-EC74.3

U-CAST1.15U-BACT1025.0U-Path.CAST0.2U-SRC2.0U-YLC0.0U-X`TAL7.6U-RBCinfoIsomorphic?U-Nlysed#177.9[/μL]

U-Nlysed%90.8[%]病例3.男，25歲，鏡檢結(jié)果WBC:5～10/HPRBC:10～20/HPEC:滿視野/HP透明管型:滿視野/LP顆粒管型:滿視野/LP腎小球腎炎尿干化學(xué)檢查pH6.5蛋白質(zhì)PRO++葡萄糖GLU－酮體KET－尿膽原UBG+－膽紅素BIL－亞硝酸鹽NIT－紅細胞ERY+白細胞LEU+比密SG1.010VitC<0.6mmol尿流式沉渣檢查U-RBC141.5

U-WBC97.0U-EC602.3

U-CAST118.39U-BACT2090.7U-Path.CAST38.9U-SRC18.2U-YLC0.0U-X`TAL0.0

U-RBCinfoIsomorphic?U-Nlysed#14.8[/μL]

U-Nlysed%10.4[%]治療前后散點圖對比

病例張某，男，39歲，急性腎小球腎炎。圖示該患者尿液標本UF-100分析儀測試結(jié)果。尿干化學(xué)分析結(jié)果：

SG：1.025KET：negNIT：neg

LEU：25/μlBIL：negGLU：norm

PRO：5.0g/LpH：7.0UBG：normERY：250/μl

鏡檢結(jié)果：

WBC：5-10/HPRBC：滿視野/HPEC：0-2/HP

尿蛋白定量：2.20g/24h尿沉渣分析儀結(jié)果：紅細胞位于散射圖的左下方,非均一性紅細胞占99.7%;經(jīng)相差顯微鏡檢查證實為多形性紅細胞急性腎小球腎炎DysmorphicRBC

%99.7%方法學(xué)評價1.優(yōu)點：①不需離心尿液，可自動進樣；②所需標本量少；③檢測速度快，效率高，可報告多項參數(shù)；④檢測過程計數(shù)的粒子數(shù)0～40000，提高了準確性；⑤操作程序同一，易于標準化和質(zhì)量控制。2.局限性:①對尿液中的某些成分不能準確辨認，仍需顯微鏡進行分類和確認。②應(yīng)用時間短，普及面窄，臨床實際應(yīng)用經(jīng)驗欠缺；③尚未建立公認的參考范圍；

儀器采用流式細胞術(shù)、高速頻閃光源和電視攝相的光學(xué)系統(tǒng)，計算機對圖像進行分析等技術(shù)。

圖像識別尿沉渣分析儀圖像識別尿沉渣分析儀AVE-763尿沉渣智能分析儀

尿沉渣定量計數(shù)池圖像識別尿沉渣分析儀—方法學(xué)評價

國內(nèi)進入較晚，尚未普及，應(yīng)用經(jīng)驗少，試劑應(yīng)用效果尚待進一步探討。①使用光學(xué)流動計數(shù)池，體積準確恒定，視野清晰，由于是密閉的管道，標本不污染工作環(huán)境，安全性好。②由于尿液有形成分復(fù)雜，且易發(fā)生變形，有時圖像識別軟件難以識別。③不能識別的成分如何處理，是否刪除處理。如細胞管型、細胞重疊、模糊的圖像和碎片等④其誤差如何評估，如何去除干擾⑤如何合理的組合尿干化學(xué)與影像學(xué)的結(jié)果

尿干化學(xué)分析儀+UF-100尿沉渣分析儀

+顯微鏡檢查尿干化學(xué)分析儀+圖像識別尿沉渣分析儀（三）尿液自動化分析工作站急性膀胱炎（治療前）RBC：195.9[μL]WBC：1509.5[μL]EC：74.3[μL]BACT:1025.0[μL]急性膀胱炎（治療中）RBC：33.3[μL]WBC：284.8[μL]EC：76.4[μL]BACT:544[μL]腎結(jié)石病人RBC：1440.2[μL]WBC：5.9[μL]BACT:132.6[μL]DysmorphicRBC%：8.8%透明度顏色SG1.010PH5.5NIT+

LEU++150/uLPRO++1.0g/LGLU++5.5mmol/LKETnegBILnegUBGnormERY++150/uLCONDCT21.1mS/cmPCASTF0.3/uLN-WBC50/uLBACT8000/uLCAST0.5/uLSRC0.8/uLEC82/uLN-RBC50/uLRBC7088.6NLRBC%58.4RBCINFMicroyticYLC0.0/uLXTAC結(jié)果分析NIT+BACT>8000/uLWBC>10/uL尿細菌感染可能性大，尿培養(yǎng)陽性率高。ERY++150/uLN-RBC50/uL，ERY檢測的是Hb，而UF-100檢測的是完整的細胞，可能溶血，RBCINF為Microyt