《藥物分析》芳酸及其酯類課件

第六章芳酸及其酯類藥物的分析Chemicalstructure&featureIdentificationDetectionofspecificimpuritiesinAnalysisofAromaticcarboxylicacids&estersAssayAspirin,Sodiumaminosalicylate&Clofibrate⊙Aromaticcarboxylicacids水楊酸類水楊酸SAsalicylicacid阿司匹林aspirin對氨基水楊酸鈉PAS-Na貝諾酯benorilate雙水楊酯salsalate⊙苯甲酸類羥苯乙酯ethylparoben丙磺舒probenecid苯甲酸benzoicacid甲芬那酸mefenamicacidsodiumbenzoate⊙特點均有苯環(huán)、羧酸或其酯水楊酸類和苯甲酸類結構中的羧基直接與苯環(huán)相連除了酸性基團外，各自具有本身的官能團分子中苯環(huán)、羧酸和取代基的相互影響，使芳酸的酸性強度各有不同紫堇色赭色↓米黃色↓pH5.0~6.0T.S.FeCl3pH4~6中性溶液鑒別三氯化鐵反應堿式苯甲酸鐵鹽（赭色沉淀）加稀HCl，沉淀分解，生成游離白色⊙重氮化偶合反應具體方法見芳香胺類藥物的鑒別⊙氧化反應⊙異羥肟酸鐵反應甲芬那酸＋H2SO4深藍色△黃色并產(chǎn)生綠色熒光隨即變?yōu)樽鼐G色Fe/3紫色⊙水解產(chǎn)物的反應⊙分解產(chǎn)物的反應⊙UV特征吸收⊙IR吸收光譜SA溶液的澄清度

酚類和酯類其他副反應產(chǎn)生酯類易碳化物熾灼殘渣重金屬⊙PAS-Na間氨基酚Ch.P

樣品3.0g用乙醚提取，加入H2O，用HCl滴定液（0.02mol/L)滴定，生成雜質·HCl（轉溶入H2O相，甲基橙指示劑）。滴定液不得過0.30mlUSPHPLC法

C18NaH2PO4(0.05mol/L)-Na2HPO4(0.05mol/L)-CH3OH(含氫氧化四丁基銨1.9g)(425：425：150)254nm檢測內標：磺胺

a.雜質對照品法

方法：供試品→供試品溶液雜質對照品→對照品溶液

供試品對照品

判斷：供試品中所含雜質斑點不得超過相應的雜質對照斑點。優(yōu)點：同一物質，同一Rf值比較，準確度高、直觀性強。缺點：需要雜質對照品。

供試品對照品判斷：

②供試品溶液所顯雜質斑點不得深于對照溶液的主斑點（或熒光強度）

①控制雜質斑點個數(shù)，控制雜質種類⊙氯貝丁酯對氯酚（0.0025%）揮發(fā)性雜質（0.5%）GC法5%SE-302m160℃，N2FID

雜質以歸一化法求得直接滴定法

pKa3~6

的藥物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定pKa6~9

的藥物要用非水溶液滴定法中性乙醇：對指示劑(酚酞)而言為中性，可消除滴定誤差乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定過程易水解本法特點：簡單注意點：若SA不合格，不宜采用本法Aspirin丙磺舒(Ch.P.BP.JP等)苯甲酸(Ch.P等)均采用本法水解后剩余滴定法

ResidualtitrationafterhydrolysisUSP23方法：取本品約1.5g，精密稱定，準確加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞為指示劑，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并將滴定結果用空白試驗校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相當于45.04mg的C9H9O4☆滴定度計算0.5規(guī)定的硫酸濃度為0.25mol/LT毫摩爾質量兩步滴定法

Two-steptitration用于Aspirin片測定片劑中有穩(wěn)定劑水解產(chǎn)物水楊酸SAHAc枸櫞酸Citricacid酒石酸Trataricacid為了避免這些酸類的干擾，采用兩步滴定法Ch.P.阿司匹林片

取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于阿司匹林0.3g)，置錐形瓶中，加中性乙醇(對酚酞指示劑顯中性)20ml，振搖使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至顯粉紅色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱15min，并時時振搖，迅速放冷至室溫，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相當于18.02mg的C9H8O4第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc第二步放冷后，用H2SO4滴定液滴定剩余的NaOHV；

空白滴定消耗H2SO4

V0；(V0-V)

H2SO4則為用于中和水解ASA所需的NaOH☆計算：稱取10片重1.8240gCNaOH0.1032mol/L片粉重0.5312gC0.05120mol/L標示量0.1g

V3.02ml

V020.18ml

直接水解后兩步

滴定法剩余滴定法滴定法

優(yōu)點

操作簡便水楊酸干擾少

結果準確，避免了游離SA以及片劑中穩(wěn)定劑的干擾缺點游離水楊酸不能完全不合格時結排除干擾果偏高Ch.P氯貝丁酯的Assay采用兩步滴定法⊙雙相滴定法Titrimetryintwophases

Ch.P2005用于苯甲酸鈉的測定

苯甲酸鈉為芳酸堿金屬鹽，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于終點的正確判斷因此，利用苯甲酸能溶于有機溶劑的性質，采用雙相滴定法HCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸鈉)0.5mol/L25ml1.5g50ml2d甲基橙

橙紅色分出H2O層，置具塞錐形瓶，乙醚層用H2O5ml洗滌，洗液并入錐形瓶，加乙醚20ml，繼續(xù)用HCl滴定，至水層顯持續(xù)的橙紅色⊙柱分配色譜-紫外分光光度法

ColumnPartitionChromatogr.

ASAcapsule

等制劑除用上述兩步滴定法外，最好用色譜法，可以分離酸性雜質和輔料以及穩(wěn)定劑等，經(jīng)分離后同時測定ASA與SA如USP用柱分配色譜-UV測定ASACapsuleColumnPartitionChromatography,CPC擔體：硅藻土(Celite545)固定相：一定pH的緩沖水溶液流動相：與水不相混溶的有機溶劑(洗脫前必須先用水飽和)200~300mm60mm4mm22mm層析柱玻棉壓榨棒350mm21mmCPC-UV法測定ASACapsule

SA測定供試液制備用CHCl350ml洗滌，棄去(洗去ASA)10ml冰HAc-水飽和乙醚液(1→10)(使紫色配位化合物被分解，SA析出)洗脫液收集于已盛有10ml甲醇和2滴HCl的50ml量瓶中，繼用30mlCHCl3洗，并稀釋至刻度SA對照品溶液：75μg/ml，取10ml

50ml量瓶中盛有：10ml甲醇，2滴HCl和10ml冰HAc-水飽和乙醚液(1→10)，CHCl3至刻度測定：306nm測定供試液和SA對照品液﹡SA與試劑生成紫色水楊酸鐵配位化合物，在柱上移動慢，帶窄，色澤較深﹡﹡若有Fe3+洗下，黃色影響測定結果

消除干擾方法：迂底部拌有磷酸的硅藻土，生成不溶解的FePO4↓A供試液＜A對照品液L=75(μg/ml)×10m100mg×1000×100%＝0.75%ASA+SA測定供試液制備洗脫5,25mlCHCl3，棄去CHCl3洗脫10ml冰HAc-CHCl3(1→10)**；85ml冰HAc-CHCl3(1→100)，并稀釋至100ml對照品溶液50μg/ml

冰HAc-CHCl3(1→100)CPC-UV法測定ASACapsule

測定：280nm空白：CHCl3

﹡NaHCO3使ASA和SA成鹽保留于柱上

用CHCl3洗脫的目的：

去除中性或堿性雜質﹡﹡冰HAc酸化的目的：

使ASA游離，易被

CHCl3洗脫含量測定計算公式所取膠囊細粉中ASA(mg)供試品溶液吸收度對照品溶液吸收度CPC技術的類型利用固定相酸堿性的不同進行分離利用藥物和固定相起化學反應而進行分離利用生成離子對進行層析分離單純靠選擇流動相進行分離阿司匹林栓Aspirinsuppositories測定法咖啡因乙醇溶液4mg/ml對照品溶液：ASA對照品(約0.15g)50.0ml內標5.0ml供試品溶液：取本品5粒，精密稱定()，40~50℃微溫熔融，不斷攪拌下冷卻至室溫，精密稱取適量(ASA約0.15g)(W)內標5.0ml50.0ml乙醇50.0ml2.0ml↓2.0ml乙醇50.0ml⊙HPLC血清中ASA&SA的測定

色譜條件C18

5μm150×4.6mm

甲醇-水-正丁醇(30:20:1)經(jīng)0.5μm濾膜減壓過濾后5μlH3PO4超聲脫氣237nm內標：苯甲酸血清樣品的處理血清樣品100μl→加入HClO4(30%)50μl、不同濃度ASA&SA對照品稀釋液、內標(各濃度均為10μg/ml→混合2min→離心→進樣血清ASA，SA和內標物對照品色譜圖1032