選修三專題物細(xì)胞工程唐海

細(xì)胞工程專題22011年上學(xué)期大慶實(shí)驗(yàn)中學(xué)制作唐海第1頁/共289頁第一頁，共290頁。1996年7月5日，世界上第一只體細(xì)胞克隆動(dòng)物-----克隆羊多利誕生于英國，標(biāo)志著一種新的生物技術(shù)---動(dòng)物體細(xì)胞克隆技術(shù)面世，也揭開細(xì)胞工程更深層次發(fā)展的序幕!第2頁/共289頁第二頁，共290頁。什么叫細(xì)胞工程？第3頁/共289頁第三頁，共290頁。

細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上的操作，按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。什么叫細(xì)胞工程？第4頁/共289頁第四頁，共290頁。

細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上的操作，按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。什么叫細(xì)胞工程？按操作對(duì)象分類植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程第5頁/共289頁第五頁，共290頁。第6頁/共289頁第六頁，共290頁。

思考

1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是什么？第7頁/共289頁第七頁，共290頁。細(xì)胞的全能性

思考

1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是什么？第8頁/共289頁第八頁，共290頁。

2.什么叫做細(xì)胞全能性？動(dòng)物細(xì)胞具有全能性嗎？

3.生物體所有細(xì)胞全能性都一致嗎？第9頁/共289頁第九頁，共290頁。

2.什么叫做細(xì)胞全能性？動(dòng)物細(xì)胞具有全能性嗎？具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能，即每個(gè)細(xì)胞都具有全能性。

3.生物體所有細(xì)胞全能性都一致嗎？第10頁/共289頁第十頁，共290頁。

2.什么叫做細(xì)胞全能性？動(dòng)物細(xì)胞具有全能性嗎？具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能，即每個(gè)細(xì)胞都具有全能性。

3.生物體所有細(xì)胞全能性都一致嗎？受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞;

植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞第11頁/共289頁第十一頁，共290頁。

細(xì)胞的全能性1、定義：

指已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。2、原因：

生物體的任何一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因，從理論上講，生物體的每一個(gè)活細(xì)胞都應(yīng)該具有全能性。

3、大?。?/p>

植物細(xì)胞的全能性受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞＞＞第12頁/共289頁第十二頁，共290頁?？茖W(xué)利用菊花花瓣培養(yǎng)的菊花第13頁/共289頁第十三頁，共290頁。第14頁/共289頁第十四頁，共290頁。第15頁/共289頁第十五頁，共290頁。怎樣才能由一塊組織通過培養(yǎng)得到一株完整植株，應(yīng)該如何操作?第16頁/共289頁第十六頁，共290頁。一、植物組織培養(yǎng)技術(shù)(一)植物組織培養(yǎng)的過程請(qǐng)根據(jù)書上實(shí)驗(yàn)過程，討論并概括出植物組織培養(yǎng)技術(shù)的流程簡圖。第17頁/共289頁第十七頁，共290頁。想一想2.在植物組培過程中，為什么要進(jìn)行一系列的消毒，滅菌，并且要求無菌操作？1.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件有哪些？第18頁/共289頁第十八頁，共290頁。細(xì)胞離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件想一想2.在植物組培過程中，為什么要進(jìn)行一系列的消毒，滅菌，并且要求無菌操作？1.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件有哪些？第19頁/共289頁第十九頁，共290頁。避免雜菌在上面迅速生長消耗營養(yǎng)，且有些雜菌會(huì)危害培養(yǎng)物的生長。想一想2.在植物組培過程中，為什么要進(jìn)行一系列的消毒，滅菌，并且要求無菌操作？1.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件有哪些？細(xì)胞離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件第20頁/共289頁第二十頁，共290頁。

3.為什么切取胡蘿卜根的形成層，其他部分也能培養(yǎng)成小植株嗎？第21頁/共289頁第二十一頁，共290頁。胡蘿卜根形成層容易誘導(dǎo)成愈傷組織，其他部分如葉、花也能培養(yǎng)成小植株，只是稍微困難些。

3.為什么切取胡蘿卜根的形成層，其他部分也能培養(yǎng)成小植株嗎？第22頁/共289頁第二十二頁，共290頁。愈傷組織第23頁/共289頁第二十三頁，共290頁。愈傷組織是一種由相對(duì)沒有分化的活的薄壁細(xì)胞團(tuán)組成的新生細(xì)胞。第24頁/共289頁第二十四頁，共290頁。想一想1.產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞與葉細(xì)胞在染色體的數(shù)目上是否相同？2.染色體上所含的遺傳物質(zhì)與葉細(xì)胞是否相同？3.細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與葉細(xì)胞是否相同？第25頁/共289頁第二十五頁，共290頁。想一想1.產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞與葉細(xì)胞在染色體的數(shù)目上是否相同？2.染色體上所含的遺傳物質(zhì)與葉細(xì)胞是否相同？3.細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與葉細(xì)胞是否相同？相同第26頁/共289頁第二十六頁，共290頁。想一想1.產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞與葉細(xì)胞在染色體的數(shù)目上是否相同？2.染色體上所含的遺傳物質(zhì)與葉細(xì)胞是否相同？3.細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與葉細(xì)胞是否相同？相同相同第27頁/共289頁第二十七頁，共290頁。想一想1.產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞與葉細(xì)胞在染色體的數(shù)目上是否相同？2.染色體上所含的遺傳物質(zhì)與葉細(xì)胞是否相同？3.細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與葉細(xì)胞是否相同？相同相同不同第28頁/共289頁第二十八頁，共290頁。

4.為什么誘導(dǎo)愈傷組織的過程中應(yīng)避光培養(yǎng)？第29頁/共289頁第二十九頁，共290頁。在有光時(shí)，往往容易形成維管組織，而不易形成愈傷組織。

4.為什么誘導(dǎo)愈傷組織的過程中應(yīng)避光培養(yǎng)？第30頁/共289頁第三十頁，共290頁。在有光時(shí)，往往容易形成維管組織，而不易形成愈傷組織。

5.請(qǐng)同學(xué)們根據(jù)上述過程概括出植物組織培養(yǎng)技術(shù)的流程圖，并與同學(xué)交流。

4.為什么誘導(dǎo)愈傷組織的過程中應(yīng)避光培養(yǎng)？第31頁/共289頁第三十一頁，共290頁。切取形成層第32頁/共289頁第三十二頁，共290頁。切取形成層無菌接種第33頁/共289頁第三十三頁，共290頁。切取形成層無菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的形成脫分化第34頁/共289頁第三十四頁，共290頁。切取形成層無菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的形成試管苗的形成脫分化再分化第35頁/共289頁第三十五頁，共290頁。切取形成層無菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的形成試管苗的形成培養(yǎng)室脫分化再分化第36頁/共289頁第三十六頁，共290頁。切取形成層無菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的形成試管苗的形成培養(yǎng)室移栽脫分化再分化第37頁/共289頁第三十七頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)過程第38頁/共289頁第三十八頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)離體的植物器官、組織或細(xì)胞過程外植體第39頁/共289頁第三十九頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織脫分化過程外植體第40頁/共289頁第四十頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織脫分化過程外植體根、芽再分化第41頁/共289頁第四十一頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織脫分化過程植物激素：細(xì)胞分裂素、生長素外植體根、芽再分化第42頁/共289頁第四十二頁，共290頁。過程名稱過程形成體特點(diǎn)條件脫分化再分化植物體離體部分愈傷組織排列疏松、具分生能力的薄壁細(xì)胞團(tuán)愈傷組織幼苗或胚狀結(jié)構(gòu)有根、芽或有生根發(fā)芽能力（已分化細(xì)胞失去特有結(jié)構(gòu)功能成為未分化細(xì)胞）（未分化細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異）離體、恒溫、避光、激素、營養(yǎng)等恒溫、見光、激素、營養(yǎng)第43頁/共289頁第四十三頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織脫分化過程植物激素：細(xì)胞分裂素、生長素外植體根、芽植物體再分化植物組織培養(yǎng)條件：

含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等。第44頁/共289頁第四十四頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)條件：第45頁/共289頁第四十五頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)條件：

含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等。第46頁/共289頁第四十六頁，共290頁。根據(jù)上述過程，請(qǐng)同學(xué)們討論歸納出組織培養(yǎng)的概念。第47頁/共289頁第四十七頁，共290頁。根據(jù)上述過程，請(qǐng)同學(xué)們討論歸納出組織培養(yǎng)的概念。

植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。第48頁/共289頁第四十八頁，共290頁。

例1：某組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的愈傷組織被真菌嚴(yán)重污染，為查找污染原因設(shè)計(jì)了4個(gè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)條件除圖示外其他均相同。下列各圖表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，據(jù)圖可得出的初步結(jié)論是什么？第49頁/共289頁第四十九頁，共290頁。污染主要不是培養(yǎng)基滅菌時(shí)間短造成的；污染主要來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織；調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH不能解決污染問題；調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問題。第50頁/共289頁第五十頁，共290頁。例2：資料一:植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基基本成分：

無機(jī)營養(yǎng)成分：C、H、O等大量元素及部分微量元素。有機(jī)營養(yǎng)成分：含N物質(zhì)包括維生素和氨基酸；碳源：2%—5%的蔗糖。瓊脂起支持作用。相關(guān)激素：生長素，細(xì)胞分裂素和赤霉素等。PH值調(diào)整如5.0－6.0。第51頁/共289頁第五十一頁，共290頁。資料二:在生長素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。使用順序影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果：先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素細(xì)胞既分裂也分化；同時(shí)使用分化頻率提高。激素用量的比例影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果：生長素用量比細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的生長。第52頁/共289頁第五十二頁，共290頁。思考：利用以上資料概括脫分化和再

分化需要考慮什么外界條件？第53頁/共289頁第五十三頁，共290頁。思考：利用以上資料概括脫分化和再

分化需要考慮什么外界條件？

愈傷組織的形成需要有外界刺激因素和激素誘導(dǎo)，需要加入適當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)和植物生長調(diào)節(jié)劑，如無機(jī)鹽、糖類、植物激素等。并用適當(dāng)比例的營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)愈傷組織形成和分化。第54頁/共289頁第五十四頁，共290頁。培養(yǎng)過程中，在培養(yǎng)基上需加入蔗糖，培養(yǎng)時(shí)需要光照，那么，培養(yǎng)的植物到底是自養(yǎng)型還是異養(yǎng)型？光的作用是什么？對(duì)于上述疑問，某研究性學(xué)習(xí)小組進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)：一組在培養(yǎng)基中加30%的蔗糖，另一組不加蔗糖，接種后，每組再分成兩個(gè)小組，分別在光下和暗中培養(yǎng)。1個(gè)月后，觀察植物體生長、分化情況，結(jié)果為下表：例3：第55頁/共289頁第五十五頁，共290頁。培養(yǎng)條件

加蔗糖不加蔗糖光正常生長，分化不生長，死亡暗只生長，不分化不生長，死亡你能得出什么結(jié)論？

第56頁/共289頁第五十六頁，共290頁。培養(yǎng)條件

加蔗糖不加蔗糖光正常生長，分化不生長，死亡暗只生長，不分化不生長，死亡你能得出什么結(jié)論？

蔗糖為生長、分化的必需成分(提供能量)，光促進(jìn)細(xì)胞分化。第57頁/共289頁第五十七頁，共290頁。

這幅番茄—馬鈴薯圖利用傳統(tǒng)有性雜交方法能實(shí)現(xiàn)嗎？為什么？第58頁/共289頁第五十八頁，共290頁。

不能。因?yàn)椴煌N生物之間存在著生殖隔離，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點(diǎn)的。

這幅番茄—馬鈴薯圖利用傳統(tǒng)有性雜交方法能實(shí)現(xiàn)嗎？為什么？第59頁/共289頁第五十九頁，共290頁。要想讓兩個(gè)來自不同植物的體細(xì)胞融合在一起，遇到的第一個(gè)障礙是什么？

第60頁/共289頁第六十頁，共290頁。要想讓兩個(gè)來自不同植物的體細(xì)胞融合在一起，遇到的第一個(gè)障礙是什么？

細(xì)胞壁的阻礙第61頁/共289頁第六十一頁，共290頁。有沒有一種溫和的去除細(xì)胞壁的方法？第62頁/共289頁第六十二頁，共290頁。有沒有一種溫和的去除細(xì)胞壁的方法？有，用酶纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁第63頁/共289頁第六十三頁，共290頁。過程2誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合第64頁/共289頁第六十四頁，共290頁。過程2誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合是關(guān)鍵環(huán)節(jié)第65頁/共289頁第六十五頁，共290頁。過程2誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合是關(guān)鍵環(huán)節(jié)根據(jù)的原理是:細(xì)胞膜的流動(dòng)性第66頁/共289頁第六十六頁，共290頁。過程2誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合是關(guān)鍵環(huán)節(jié)根據(jù)的原理是:細(xì)胞膜的流動(dòng)性方法：物理方法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)方法：聚乙二醇(PEG)作誘導(dǎo)劑第67頁/共289頁第六十七頁，共290頁。過程2誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合是關(guān)鍵環(huán)節(jié)根據(jù)的原理是:細(xì)胞膜的流動(dòng)性方法：物理方法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)方法：聚乙二醇(PEG)作誘導(dǎo)劑成功標(biāo)志是:雜種細(xì)胞產(chǎn)生了新的細(xì)胞壁第68頁/共289頁第六十八頁，共290頁。有沒有一種溫和的去除細(xì)胞壁的方法？如果兩個(gè)來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生融合形成了雜種細(xì)胞，下一步該對(duì)此細(xì)胞做何種處理？有，用酶纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁第69頁/共289頁第六十九頁，共290頁。有沒有一種溫和的去除細(xì)胞壁的方法？如果兩個(gè)來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生融合形成了雜種細(xì)胞，下一步該對(duì)此細(xì)胞做何種處理？有，用酶纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁通過植物組織培養(yǎng)培育成新的植物體第70頁/共289頁第七十頁，共290頁。二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)第71頁/共289頁第七十一頁，共290頁。二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1.過程第72頁/共289頁第七十二頁，共290頁。植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B第73頁/共289頁第七十三頁，共290頁。植物細(xì)胞A去壁去壁植物細(xì)胞B第74頁/共289頁第七十四頁，共290頁。植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A去壁去壁植物細(xì)胞B第75頁/共289頁第七十五頁，共290頁。植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第76頁/共289頁第七十六頁，共290頁。融合的原生質(zhì)體AB植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第77頁/共289頁第七十七頁，共290頁。融合的原生質(zhì)體AB再生

出細(xì)

胞壁植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第78頁/共289頁第七十八頁，共290頁。融合的原生質(zhì)體AB再生

出細(xì)

胞壁植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第79頁/共289頁第七十九頁，共290頁。融合的原生質(zhì)體AB再生

出細(xì)

胞壁脫分化植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第80頁/共289頁第八十頁，共290頁。融合的原生質(zhì)體AB再生

出細(xì)

胞壁脫分化愈傷組織植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第81頁/共289頁第八十一頁，共290頁。融合的原生質(zhì)體AB再生

出細(xì)

胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第82頁/共289頁第八十二頁，共290頁。雜種植株融合的原生質(zhì)體AB再生

出細(xì)

胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第83頁/共289頁第八十三頁，共290頁。雜種植株融合的原生質(zhì)體AB再生

出細(xì)

胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B植物細(xì)胞的融合第84頁/共289頁第八十四頁，共290頁。雜種植株融合的原生質(zhì)體AB再生

出細(xì)

胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞B第85頁/共289頁第八十五頁，共290頁。去分化激素再生細(xì)胞壁去壁去壁纖維素酶果膠酶原生質(zhì)體植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合離心、振動(dòng)、電刺激、聚乙二醇雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株篩選等量激素再分化植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)1.過程第86頁/共289頁第八十六頁，共290頁。白菜甘藍(lán)白菜－甘藍(lán)第87頁/共289頁第八十七頁，共290頁。二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)2.概念第88頁/共289頁第八十八頁，共290頁。二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)2.概念將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。第89頁/共289頁第八十九頁，共290頁。3.成果和未解決的問題二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)第90頁/共289頁第九十頁，共290頁。3.成果和未解決的問題成果：克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙，出現(xiàn)自然界沒有的新品種。二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)第91頁/共289頁第九十一頁，共290頁。3.成果和未解決的問題成果：

克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙，出現(xiàn)自然界沒有的新品種。未解決的問題：

未能讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀。二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)第92頁/共289頁第九十二頁，共290頁。植物細(xì)胞工程小結(jié)第93頁/共289頁第九十三頁，共290頁。所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞工程小結(jié)第94頁/共289頁第九十四頁，共290頁。所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞的全能性小結(jié)第95頁/共289頁第九十五頁，共290頁。所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞工程通常采用的技術(shù)手段植物細(xì)胞的全能性小結(jié)第96頁/共289頁第九十六頁，共290頁。所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞工程通常采用的技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物細(xì)胞的全能性小結(jié)第97頁/共289頁第九十七頁，共290頁。例4.為什么“番茄—馬鈴薯”超級(jí)雜種植株沒有如科學(xué)家所想像的那樣，地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯？第98頁/共289頁第九十八頁，共290頁。

例4.為什么“番茄—馬鈴薯”超級(jí)雜種植株沒有如科學(xué)家所想像的那樣，地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯？

生物基因的表達(dá)不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，馬鈴薯—番茄雜交植株的細(xì)胞中雖然具備兩個(gè)物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物質(zhì)的表達(dá)受到相互干擾，不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達(dá)，雜交植株不能地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯就是很自然的了。第99頁/共289頁第九十九頁，共290頁。自我評(píng)價(jià)1.不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法是

A.振動(dòng)

B.電刺激

C.PEG試劑

D.重壓第100頁/共289頁第一百頁，共290頁。自我評(píng)價(jià)1.不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法是

A.振動(dòng)

B.電刺激

C.PEG試劑

D.重壓第101頁/共289頁第一百零一頁，共290頁。2.植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志的是

A.產(chǎn)生新的細(xì)胞壁

B.細(xì)胞膜發(fā)生融合

C.細(xì)胞質(zhì)發(fā)生融合

D.細(xì)胞核發(fā)生融合第102頁/共289頁第一百零二頁，共290頁。2.植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志的是

A.產(chǎn)生新的細(xì)胞壁

B.細(xì)胞膜發(fā)生融合

C.細(xì)胞質(zhì)發(fā)生融合

D.細(xì)胞核發(fā)生融合第103頁/共289頁第一百零三頁，共290頁。3.有關(guān)全能性的表述中，不正確的是

A.受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體，因此全能性最高

B.生物體內(nèi)細(xì)胞由于分化全能性不能表達(dá)

C.卵細(xì)胞和受精卵一樣，細(xì)胞未分化，全能性很高

D.植物細(xì)胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出全能性第104頁/共289頁第一百零四頁，共290頁。3.有關(guān)全能性的表述中，不正確的是

A.受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體，因此全能性最高

B.生物體內(nèi)細(xì)胞由于分化全能性不能表達(dá)

C.卵細(xì)胞和受精卵一樣，細(xì)胞未分化，全能性很高

D.植物細(xì)胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出全能性第105頁/共289頁第一百零五頁，共290頁。自我評(píng)價(jià)4.關(guān)于愈傷組織形成過程的正確敘述是

A.愈傷組織的形成是離體植物細(xì)胞分化的結(jié)果

B.愈傷組織的形成是離體植物細(xì)胞分裂的結(jié)果

C.愈傷組織的形成是離體動(dòng)物細(xì)胞分化的結(jié)果

D.愈傷組織的形成是離體植物細(xì)胞脫分化的結(jié)果第106頁/共289頁第一百零六頁，共290頁。自我評(píng)價(jià)4.關(guān)于愈傷組織形成過程的正確敘述是

A.愈傷組織的形成是離體植物細(xì)胞分化的結(jié)果

B.愈傷組織的形成是離體植物細(xì)胞分裂的結(jié)果

C.愈傷組織的形成是離體動(dòng)物細(xì)胞分化的結(jié)果

D.愈傷組織的形成是離體植物細(xì)胞脫分化的結(jié)果第107頁/共289頁第一百零七頁，共290頁。5.下列屬于組織培養(yǎng)的是（）

A.花藥離體培養(yǎng)成單倍體植株

B.芽發(fā)育成枝條

C.根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)

D.利用桑枝條扦插大田并發(fā)育成完整植株第108頁/共289頁第一百零八頁，共290頁。5.下列屬于組織培養(yǎng)的是（）

A.花藥離體培養(yǎng)成單倍體植株

B.芽發(fā)育成枝條

C.根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)

D.利用桑枝條扦插大田并發(fā)育成完整植株第109頁/共289頁第一百零九頁，共290頁。6.若用“①②③④”表示植物組織培養(yǎng)的過程。請(qǐng)回答：(1)①表示__________________________，能被培養(yǎng)成為④的根本原因是

______________________________(2)②表示_________，其細(xì)胞特點(diǎn)是_________________薄壁細(xì)胞。脫分化再分化第110頁/共289頁第一百一十頁，共290頁。6.若用“①②③④”表示植物組織培養(yǎng)的過程。請(qǐng)回答：(1)①表示__________________________，能被培養(yǎng)成為④的根本原因是

______________________________(2)②表示_________，其細(xì)胞特點(diǎn)是_________________薄壁細(xì)胞。脫分化再分化離體的植物組織器官、組織或細(xì)胞第111頁/共289頁第一百一十一頁，共290頁。6.若用“①②③④”表示植物組織培養(yǎng)的過程。請(qǐng)回答：(1)①表示__________________________，能被培養(yǎng)成為④的根本原因是

______________________________(2)②表示_________，其細(xì)胞特點(diǎn)是_________________薄壁細(xì)胞。脫分化再分化離體的植物組織器官、組織或細(xì)胞植物細(xì)胞具有全能性第112頁/共289頁第一百一十二頁，共290頁。6.若用“①②③④”表示植物組織培養(yǎng)的過程。請(qǐng)回答：(1)①表示__________________________，能被培養(yǎng)成為④的根本原因是

______________________________(2)②表示_________，其細(xì)胞特點(diǎn)是_________________薄壁細(xì)胞。脫分化再分化離體的植物組織器官、組織或細(xì)胞植物細(xì)胞具有全能性愈傷組織第113頁/共289頁第一百一十三頁，共290頁。6.若用“①②③④”表示植物組織培養(yǎng)的過程。請(qǐng)回答：(1)①表示__________________________，能被培養(yǎng)成為④的根本原因是

______________________________(2)②表示_________，其細(xì)胞特點(diǎn)是_________________薄壁細(xì)胞。脫分化再分化離體的植物組織器官、組織或細(xì)胞植物細(xì)胞具有全能性具有分生能力的愈傷組織第114頁/共289頁第一百一十四頁，共290頁。2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用第115頁/共289頁第一百一十五頁，共290頁。一、植物繁殖的新途徑1、微型繁殖

(1)微型繁殖技術(shù)：快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)。

(2)特點(diǎn):

保持優(yōu)良品種的遺傳特性；高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。第116頁/共289頁第一百一十六頁，共290頁。第117頁/共289頁第一百一十七頁，共290頁。2、作物脫毒(1)材料：無病毒的莖尖

(2)脫毒苗：切取莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得(3)優(yōu)點(diǎn)：提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)第118頁/共289頁第一百一十八頁，共290頁。

一粒種子能長成一棵植物的奧秘究竟在哪里？3、神奇的人工種子第119頁/共289頁第一百一十九頁，共290頁。雙子葉植物種子---菜豆種子的結(jié)構(gòu)第120頁/共289頁第一百二十頁，共290頁。單子葉植物種子----玉米種子的結(jié)構(gòu)第121頁/共289頁第一百二十一頁，共290頁。使芽軸伸長幼葉葉莖側(cè)芽枝條葉芽第122頁/共289頁第一百二十二頁，共290頁。（1）人工種子

人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。第123頁/共289頁第一百二十三頁，共290頁。1）天然種子由于在遺傳上具有因減數(shù)分裂引起的重組現(xiàn)象，因而會(huì)造成某些遺傳性狀的改變；天然種子在生產(chǎn)上受季節(jié)限制，一般每年只繁殖1～2次，有些甚至十幾年才繁殖一次。而人工種子則可以完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，生產(chǎn)上也不受季節(jié)的限制。

人工種子之所以神奇，是由于它具有天然種子不可比擬的特點(diǎn)，想一想它們具有哪些優(yōu)點(diǎn)？第124頁/共289頁第一百二十四頁，共290頁。2）試管苗的大量貯藏和運(yùn)輸也是相當(dāng)困難的。人工種子則克服了這些缺點(diǎn)，人工種子外層是起保護(hù)作用的薄膜，類似天然種子的種皮，因此，可以很方便地貯藏和運(yùn)輸。第125頁/共289頁第一百二十五頁，共290頁。（2）人工種皮是保證包裹在其中的胚狀體順利生長成小植株的關(guān)鍵部分，請(qǐng)?zhí)接懭斯しN皮中應(yīng)該具有的有效成分是什么？為了促進(jìn)胚狀體的生長發(fā)育，我們還可以向人工種皮中加入哪些物質(zhì)？第126頁/共289頁第一百二十六頁，共290頁。

針對(duì)植物種類和土壤等條件，在人工種子的包裹劑中還可以加入適量的養(yǎng)分、無機(jī)鹽、有機(jī)碳源以及農(nóng)藥、抗生素、有益菌等。為了促進(jìn)胚狀體的生長發(fā)育，還可以向人工種皮中加入一些植物生長調(diào)節(jié)劑。第127頁/共289頁第一百二十七頁，共290頁。3、神奇的人工種子

(1)特點(diǎn)：后代無性狀分離；不受氣候，季節(jié)和地域限制。(2)技術(shù)：(3)結(jié)構(gòu)：植物組織培養(yǎng)。人工薄膜胚狀體或不定芽或頂芽或腋芽。第128頁/共289頁第一百二十八頁，共290頁。二、作物新品種的培育1、單倍體育種(1)方法：花藥的離體培養(yǎng)

(2)優(yōu)點(diǎn)：后代穩(wěn)定遺傳，都是純合子；明顯縮短育種年限。第129頁/共289頁第一百二十九頁，共290頁。2、突變體的利用三、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)1、種類：蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等。

(1)產(chǎn)生：植物組織培養(yǎng)

(2)利用：篩選對(duì)人們有利突變體，進(jìn)而培育新品種2、技術(shù)：植物的組織培養(yǎng)。第130頁/共289頁第一百三十頁，共290頁。第一步:

選擇人參根作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織，經(jīng)過培養(yǎng)選擇找到增殖速度快而且細(xì)胞內(nèi)人參皂甙含量高的細(xì)胞作為種質(zhì)，其中一部分作為種保存用，以備下一次生產(chǎn)用，一部分進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。第二步：將第一步選擇到的細(xì)胞在發(fā)酵罐中的適合培養(yǎng)液進(jìn)行液體培養(yǎng)，增加細(xì)胞數(shù)量。第三步：將發(fā)酵罐中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行破碎，從中提取人參皂甙。第131頁/共289頁第一百三十一頁，共290頁。問：為什么“番茄—馬鈴薯”超級(jí)雜種植株沒有如科學(xué)家所想像的那樣，地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯？第132頁/共289頁第一百三十二頁，共290頁。問：為什么“番茄—馬鈴薯”超級(jí)雜種植株沒有如科學(xué)家所想像的那樣，地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯？

生物基因的表達(dá)不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，馬鈴薯—番茄雜交植株的細(xì)胞中雖然具備兩個(gè)物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物質(zhì)的表達(dá)受到相互干擾，不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達(dá)，雜交植株不能地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯就是很自然的了。第133頁/共289頁第一百三十三頁，共290頁。第134頁/共289頁第一百三十四頁，共290頁。動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)第135頁/共289頁第一百三十五頁，共290頁。動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。第136頁/共289頁第一百三十六頁，共290頁。動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。如克隆動(dòng)物第137頁/共289頁第一百三十七頁，共290頁。動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。如克隆動(dòng)物如制備單克隆抗體第138頁/共289頁第一百三十八頁，共290頁。2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)第139頁/共289頁第一百三十九頁，共290頁。2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它們分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。1.1概念第140頁/共289頁第一百四十頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程第141頁/共289頁第一百四十一頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官第142頁/共289頁第一百四十二頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官比老齡動(dòng)物的組織細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛。分化程度越低，繁殖能力越強(qiáng)，越容易培養(yǎng)。第143頁/共289頁第一百四十三頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官剪碎胰蛋白酶第144頁/共289頁第一百四十四頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官剪碎胰蛋白酶動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。第145頁/共289頁第一百四十五頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官剪碎胰蛋白酶

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)適宜的PH為7.2—7.4，此環(huán)境下胃蛋白酶（1.5）沒有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性較高。第146頁/共289頁第一百四十六頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶第147頁/共289頁第一百四十七頁，共290頁。細(xì)胞貼壁過程第148頁/共289頁第一百四十八頁，共290頁。第149頁/共289頁第一百四十九頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養(yǎng)貼壁生長接觸抑制第150頁/共289頁第一百五十頁，共290頁。3.有關(guān)概念:原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。第151頁/共289頁第一百五十一頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養(yǎng)貼壁生長接觸抑制原代細(xì)胞第152頁/共289頁第一百五十二頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養(yǎng)貼壁生長接觸抑制傳代培養(yǎng)洗滌、稀釋、分離原代細(xì)胞第153頁/共289頁第一百五十三頁，共290頁。原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。3.有關(guān)概念:第154頁/共289頁第一百五十四頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養(yǎng)貼壁生長接觸抑制傳代培養(yǎng)洗滌、稀釋、分離原代細(xì)胞傳代細(xì)胞第155頁/共289頁第一百五十五頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養(yǎng)貼壁生長接觸抑制傳代培養(yǎng)洗滌、稀釋、分離原代細(xì)胞傳代細(xì)胞10代以內(nèi)，保持正常二倍體核型第156頁/共289頁第一百五十六頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養(yǎng)貼壁生長接觸抑制傳代培養(yǎng)洗滌、稀釋、分離細(xì)胞增殖緩慢，核型可能變化原代細(xì)胞傳代細(xì)胞第157頁/共289頁第一百五十七頁，共290頁。1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養(yǎng)貼壁生長接觸抑制傳代培養(yǎng)洗滌、稀釋、分離動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體原代細(xì)胞傳代細(xì)胞第158頁/共289頁第一百五十八頁，共290頁。第159頁/共289頁第一百五十九頁，共290頁。原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)(細(xì)胞株和細(xì)胞系)細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)多數(shù)組織細(xì)胞固定在表面生長和分裂隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖細(xì)胞株細(xì)胞系第160頁/共289頁第一百六十頁，共290頁。討論多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考以下問題：

1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？

2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？第161頁/共289頁第一百六十一頁，共290頁。多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考以下問題：

1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？

2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、促生長因子、微量元素等。討論第162頁/共289頁第一百六十二頁，共290頁。多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考以下問題：

1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？

2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、促生長因子、微量元素等。適宜溫度、PH和氣體環(huán)境；無菌無毒環(huán)境討論第163頁/共289頁第一百六十三頁，共290頁。1.3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件第164頁/共289頁第一百六十四頁，共290頁。1.3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1.無菌、無毒的環(huán)境2.必須的營養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、激素、促生長因子、動(dòng)物血清等。）3.適宜的溫度:36.5±0.5度4.充足的氧氣和適宜的酸堿度:O2和CO2（95%空氣和5%CO2

）第165頁/共289頁第一百六十五頁，共290頁。思考：為什么對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)通常要添加血清？

第166頁/共289頁第一百六十六頁，共290頁。思考：為什么對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)通常要添加血清？

血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等。有些氨基酸（必需氨基酸）動(dòng)物細(xì)胞本身不能合成必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子。血清中還含有多種未知的活性物質(zhì)，能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和貼附。因此，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞能夠順利生長和增殖，一般須添加10%～20%的血清。第167頁/共289頁第一百六十七頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的第168頁/共289頁第一百六十八頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的第169頁/共289頁第一百六十九頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的第170頁/共289頁第一百七十頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖

植物激素葡萄糖

動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的第171頁/共289頁第一百七十一頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖

植物激素葡萄糖

動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞群體培養(yǎng)目的第172頁/共289頁第一百七十二頁，共290頁。植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖

植物激素葡萄糖

動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞群體培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株等獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白等第173頁/共289頁第一百七十三頁，共290頁。問題3：為什么用胰蛋白酶處理？問題1：、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？因?yàn)槠浼?xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)，分化程度低。問題2、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？擴(kuò)大細(xì)胞與培養(yǎng)液的接觸面積，利與細(xì)胞吸收營養(yǎng)。動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，可以使動(dòng)物組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì)和細(xì)胞外的其他成分酶解，獲得單個(gè)細(xì)胞。問題4：為什么用胰蛋白酶處理而不用胃蛋白酶？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的最適PH值為7.2-7.4，胰蛋白酶作用的適宜PH為7.2-8.4，胃蛋白酶適宜PH為2.胃蛋白酶在PH為7.2-7.4的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中無活性。問題5：用胰蛋白酶處理不會(huì)把所培養(yǎng)的細(xì)胞消化掉嗎？控制好時(shí)間！長時(shí)間處理當(dāng)然會(huì)損傷細(xì)胞。第174頁/共289頁第一百七十四頁，共290頁。問題6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？問題7、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？主要成分：（葡萄糖、氨基酸）、（水、無機(jī)鹽）、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基2、成分中有動(dòng)物血清等不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體問題8、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理：細(xì)胞增殖。問題9、目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常在10代以內(nèi)，為什么？10代以內(nèi)的細(xì)胞遺傳物質(zhì)不改變，保持正常二倍體核型。第175頁/共289頁第一百七十五頁，共290頁。1.4動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用1.蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)

如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體2.應(yīng)用于基因工程

主要用于作為受體細(xì)胞3.檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性4.細(xì)胞的生理、藥理、病理研究

如用于篩選抗癌藥物第176頁/共289頁第一百七十六頁，共290頁。2.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物2.1動(dòng)物細(xì)胞核移植概念：第177頁/共289頁第一百七十七頁，共290頁。2.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體（克隆動(dòng)物）。2.1動(dòng)物細(xì)胞核移植概念：第178頁/共289頁第一百七十八頁，共290頁。分類胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：第179頁/共289頁第一百七十九頁，共290頁。分類胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易第180頁/共289頁第一百八十頁，共290頁。分類胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性不容易第181頁/共289頁第一百八十一頁，共290頁。2.2體細(xì)胞核移植的過程：請(qǐng)看教材P48圖2-21思考：1.核移植的受體細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？2.通過什么手段激活受體細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎？第182頁/共289頁第一百八十二頁，共290頁。2.2體細(xì)胞核移植的過程：請(qǐng)看教材P48圖2-21思考：1.核移植的受體細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？2.通過什么手段激活受體細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎？MⅡ中期卵母細(xì)胞第183頁/共289頁第一百八十三頁，共290頁。2.2體細(xì)胞核移植的過程：請(qǐng)看教材P48圖2-21思考：1.核移植的受體細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？2.通過什么手段激活受體細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎？MⅡ中期卵母細(xì)胞誘導(dǎo)方法：物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。第184頁/共289頁第一百八十四頁，共290頁。

1.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？第185頁/共289頁第一百八十五頁，共290頁。培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至10～50代左右時(shí)，部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變，而10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細(xì)胞核移植中，為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。

1.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？第186頁/共289頁第一百八十六頁，共290頁。多莉羊的培育過程卵細(xì)胞A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠融合后的卵細(xì)胞第187頁/共289頁第一百八十七頁，共290頁。

2.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？第188頁/共289頁第一百八十八頁，共290頁。

2.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？絕大部分DNA來自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少量的DNA，即線粒體中的DNA是來自于受體卵母細(xì)胞。第189頁/共289頁第一百八十九頁，共290頁。此外，即便動(dòng)物的遺傳基礎(chǔ)完全相同，但動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系，核供體動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動(dòng)物完全相同，從這一角度看，克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100%的復(fù)制。第190頁/共289頁第一百九十頁，共290頁。2.3體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：第191頁/共289頁第一百九十一頁，共290頁。2.3體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：1.在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的

進(jìn)程第192頁/共289頁第一百九十二頁，共290頁。2.3體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：1.在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的

進(jìn)程2.保護(hù)瀕危物種第193頁/共289頁第一百九十三頁，共290頁。第194頁/共289頁第一百九十四頁，共290頁。2.3體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：1.在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的

進(jìn)程2.保護(hù)瀕危物種3.醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織

器官的移植第195頁/共289頁第一百九十五頁，共290頁。2.3體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：1.在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的

進(jìn)程2.保護(hù)瀕危物種3.醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織

器官的移植4.了解胚胎發(fā)育和衰老過程；追蹤研究

疾病的發(fā)展過程和治療疾病第196頁/共289頁第一百九十六頁，共290頁。2.4體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：成功率非常低絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問題對(duì)克隆動(dòng)物食品的安全性問題也存在爭議第197頁/共289頁第一百九十七頁，共290頁。思考與探究

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過脫分化的過程嗎？為什么？第198頁/共289頁第一百九十八頁，共290頁。思考與探究

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過脫分化的過程嗎？為什么？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過脫分化過程。因高度分化的動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄，失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力，所以，動(dòng)物細(xì)胞也就沒有類似植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過程了。要想使培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞定向分化，通常采用定向誘導(dǎo)動(dòng)物干細(xì)胞，使其分化成所需要的組織或器官。第199頁/共289頁第一百九十九頁，共290頁。

3.1997年，美國威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)（Lucinda）的奶牛，年產(chǎn)奶量為30.8t，創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛，年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸，而我國奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3～4t。第200頁/共289頁第二百頁，共290頁。（1）能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說明理由。第201頁/共289頁第二百零一頁，共290頁。（1）能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說明理由。可以。盧辛達(dá)有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ)，利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來自該奶牛，其克隆牛也具有高產(chǎn)奶的遺傳基因。第202頁/共289頁第二百零二頁，共290頁。（2）如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你，你將如何對(duì)它進(jìn)行克?。繌谋R辛達(dá)耳朵（也可用別的組織、器官，耳朵在活體上容易?。┥霞羧∫恍K組織，在體外培養(yǎng)獲得該組織（如軟骨組織）的細(xì)胞。取牛卵巢，抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微操作去除卵母細(xì)胞的核，再將耳細(xì)胞核注入卵母細(xì)胞，用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合，第203頁/共289頁第二百零三頁，共290頁。再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育過程。核移植胚胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后，挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。第204頁/共289頁第二百零四頁，共290頁。

4.自然界中有一種含有葉綠體的原生動(dòng)物──眼蟲，說明植物的細(xì)胞器同樣可以在某些動(dòng)物細(xì)胞中存活，請(qǐng)?zhí)接懀簞?dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞之間可以實(shí)現(xiàn)雜交嗎？如果理論上可行，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)出具體實(shí)驗(yàn)方案。第205頁/共289頁第二百零五頁，共290頁。第206頁/共289頁第二百零六頁，共290頁。思考題1、在進(jìn)行體細(xì)胞核移植之前，為何要去掉受體卵母細(xì)胞的核？卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性得以表達(dá)；卵母細(xì)胞體積比較大，容易操作；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富，能為早期胚胎的形成提供營養(yǎng)。2、為什么選卵母細(xì)胞作核移植的受體細(xì)胞？為使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞。第207頁/共289頁第二百零七頁，共290頁。3.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，為什么？10代以內(nèi)的細(xì)胞保持一般保持正常二倍體的核型，未突變.思考題二倍體的核型：是指染色體組在有絲分裂中期的表型，是染色體數(shù)目、大小、形態(tài)特征的總和第208頁/共289頁第二百零八頁，共290頁。思考題4.細(xì)胞核移植生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？不是，克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自供體細(xì)胞核，但核外還有少部分DNA（如線粒體DNA）來自受體卵母細(xì)胞.第209頁/共289頁第二百零九頁，共290頁。一、動(dòng)物細(xì)胞融合第210頁/共289頁第二百一十頁，共290頁。一、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A第211頁/共289頁第二百一十一頁，共290頁。一、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B第212頁/共289頁第二百一十二頁，共290頁。一、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種

細(xì)胞第213頁/共289頁第二百一十三頁，共290頁。一、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種

細(xì)胞物理法化學(xué)法第214頁/共289頁第二百一十四頁，共290頁。一、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種

細(xì)胞滅活的病毒物理法化學(xué)法第215頁/共289頁第二百一十五頁，共290頁。1.概念：2.結(jié)果：3.原理：4.誘導(dǎo)方式一、動(dòng)物細(xì)胞融合第216頁/共289頁第二百一十六頁，共290頁。1.概念：2.結(jié)果：3.原理：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。4.誘導(dǎo)方式一、動(dòng)物細(xì)胞融合第217頁/共289頁第二百一十七頁，共290頁。1.概念：2.結(jié)果：3.原理：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞4.誘導(dǎo)方式一、動(dòng)物細(xì)胞融合第218頁/共289頁第二百一十八頁，共290頁。1.概念：2.結(jié)果：3.原理：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性4.誘導(dǎo)方式一、動(dòng)物細(xì)胞融合第219頁/共289頁第二百一十九頁，共290頁。1.概念：2.結(jié)果：3.原理：4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理法：離心、振動(dòng)、電激一、動(dòng)物細(xì)胞融合第220頁/共289頁第二百二十頁，共290頁。1.概念：2.結(jié)果：3.原理：4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)一、動(dòng)物細(xì)胞融合第221頁/共289頁第二百二十一頁，共290頁。一、動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念：2.結(jié)果：3.原理：4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒第222頁/共289頁第二百二十二頁，共290頁。5.過程：第223頁/共289頁第二百二十三頁，共290頁。5.過程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B第224頁/共289頁第二百二十四頁，共290頁。5.過程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合第225頁/共289頁第二百二十五頁，共290頁。5.過程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合1個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB第226頁/共289頁第二百二十六頁，共290頁。5.過程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合1個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB注意：動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起，讓它們隨機(jī)融合后，再從中篩選雜交細(xì)胞第227頁/共289頁第二百二十七頁，共290頁。6.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。第228頁/共289頁第二百二十八頁，共290頁。6.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。7.應(yīng)用：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體第229頁/共289頁第二百二十九頁，共290頁。植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合得比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)方法用途意義細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性去處細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理（離心、振蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒獲得雜種植株制備單克隆抗體解決遠(yuǎn)源雜交不親和的問題第230頁/共289頁第二百三十頁，共290頁。1.什么是抗體？2.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？第231頁/共289頁第二百三十一頁，共290頁。1.什么是抗體？2.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？抗體是具有免疫作用的蛋白質(zhì)。第232頁/共289頁第二百三十二頁，共290頁。1.什么是抗體？2.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？抗體是具有免疫作用的蛋白質(zhì)。B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。第233頁/共289頁第二百三十三頁，共290頁。B淋巴細(xì)胞與抗體的關(guān)系：第234頁/共289頁第二百三十四頁，共290頁。B淋巴細(xì)胞與抗體的關(guān)系：

1.B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。

2.每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。第235頁/共289頁第二百三十五頁，共290頁。B淋巴細(xì)胞與抗體的關(guān)系：

1.B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。

2.每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？怎樣解決這個(gè)問題？第236頁/共289頁第二百三十六頁，共290頁。常規(guī)抗體的缺陷第237頁/共289頁第二百三十七頁，共290頁。常規(guī)抗體的缺陷動(dòng)物體內(nèi)刺激漿細(xì)胞

抗體抗原第238頁/共289頁第二百三十八頁，共290頁。常規(guī)抗體的缺陷動(dòng)物體內(nèi)刺激漿細(xì)胞

抗體抗原不純抗體不純抗原第239頁/共289頁第二百三十九頁，共290頁。常規(guī)抗體的缺陷動(dòng)物體內(nèi)刺激漿細(xì)胞

抗體抗原不純抗體不純特異性差、純度低；抗原第240頁/共289頁第二百四十頁，共290頁。常規(guī)抗體的缺陷動(dòng)物體內(nèi)刺激漿細(xì)胞

抗體抗原不純抗體不純篩選單一漿細(xì)胞特異性差、純度低；抗原第241頁/共289頁第二百四十一頁，共290頁。常規(guī)抗體的缺陷動(dòng)物體內(nèi)刺激漿細(xì)胞

抗體抗原不純抗體不純篩選單一漿細(xì)胞特異性差、純度低；不能增殖產(chǎn)生大量抗體抗原第242頁/共289頁第二百四十二頁，共290頁。常規(guī)抗體的缺陷動(dòng)物體內(nèi)刺激漿細(xì)胞

抗體抗原不純抗體不純篩選單一漿細(xì)胞特異性差、純度低；產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏不能增殖產(chǎn)生大量抗體抗原第243頁/共289頁第二百四十三頁，共290頁。一、單克隆抗體的概念由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克?。?，形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。第244頁/共289頁第二百四十四頁，共290頁。2.怎樣才能獲得單克隆抗體？第245頁/共289頁第二百四十五頁，共290頁。2.怎樣才能獲得單克隆抗體？提示1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？第246頁/共289頁第二百四十六頁，共290頁。2.怎樣才能獲得單克隆抗體？提示1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無

限增殖的？第247頁/共289頁第二百四十七頁，共290頁。2.怎樣才能獲得單克隆抗體？提示1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無

限增殖的？提示3：有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體

的能力和腫瘤細(xì)胞無限增殖能

力同時(shí)具備呢？第248頁/共289頁第二百四十八頁，共290頁。2.怎樣才能獲得單克隆抗體？設(shè)計(jì)方案：第249頁/共289頁第二百四十九頁，共290頁。2.怎樣才能獲得單克隆抗體？設(shè)計(jì)方案：一個(gè)B淋巴細(xì)胞

——只分泌一種特異性抗體第250頁/共289頁第二百五十頁，共290頁。2.怎樣才能獲得單克隆抗體？設(shè)計(jì)方案：一個(gè)B淋巴細(xì)胞

——只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞

——能無限增殖第251頁/共289頁第二百五十一頁，共290頁。2.怎樣才能獲得單克隆抗體？設(shè)計(jì)方案：一個(gè)B淋巴細(xì)胞

——只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞

——能無限增殖雜交細(xì)胞第252頁/共289頁第二百五十二頁，共290頁。

單克隆抗體制備過程第253頁/共289頁第二百五十三頁，共290頁。注射抗原

單克隆抗體制備過程第254頁/共289頁第二百五十四頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞

單克隆抗體制備過程第255頁/共289頁第二百五十五頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞骨髓瘤

細(xì)胞

單克隆抗體制備過程第256頁/共289頁第二百五十六頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞骨髓瘤

細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選

單克隆抗體制備過程第257頁/共289頁第二百五十七頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞骨髓瘤

細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞

單克隆抗體制備過程第258頁/共289頁第二百五十八頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞骨髓瘤

細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)

單克隆抗體制備過程第259頁/共289頁第二百五十九頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞骨髓瘤

細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)

單克隆抗體制備過程第260頁/共289頁第二百六十頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞骨髓瘤

細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群

單克隆抗體制備過程第261頁/共289頁第二百六十一頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞骨髓瘤

細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群

單克隆抗體制備過程體

外

培

養(yǎng)注

射

到

小

鼠

腹

腔第262頁/共289頁第二百六十二頁，共290頁。注射抗原B淋巴

細(xì)胞骨髓瘤

細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群單克隆抗體

單克隆抗體制備過程體

外

培

養(yǎng)注

射

到

小

鼠

腹

腔第263頁/共289頁第二百六十三頁，共290頁。雜交細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體第264頁/共289頁第二百六十四頁，共290頁。動(dòng)物特異性免疫分離B淋巴細(xì)胞（B）；找到骨髓瘤細(xì)胞（G）。注意B淋巴細(xì)胞是一個(gè)系列。（B1,B2,B3,---Bn）細(xì)胞融合——三種融合方式:（BB;BG;GG）第一次篩選：在“選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)”上培養(yǎng)篩選雜交瘤細(xì)胞（只有BG雜交瘤細(xì)胞存活。但BG雜交瘤細(xì)胞也是一個(gè)系列：如B1G,B2