人教版選修3現(xiàn)代生物科技專題

現(xiàn)代生物科技專題講授內(nèi)容一、基因工程二、細胞工程三、胚胎工程四、生物技術的安全性和倫理問題一、基因工程1、DNA重組的基本工具限制性內(nèi)切酶——“分子手術刀”分布：原核生物特點：特異性，一種限制酶只能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并在特定的切點上切割DNA分子。切點：磷酸二酯鍵舉例：EcoRⅠ限制酶只識別GAATTC，并在GA間切割SmaⅠ限制酶只識別CCCGGG，并在GC間切割。CTTCATGAATTCCGTACCCGGGCCTAA

GAAGTACTTAAGGCATGGGCCCGGATT

EcoRⅠ限制酶酶切位點GGCATGGGAATTCCGTACCC黏性末端CTTCATG

GAAGTACTTAA平末端SmaⅠ限制酶酶切位點

GGGCCTAA

CCCGGATT

原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，限制酶是一種防御工具，當外源DNA侵入時，會利用限制酶將外源DNA切割掉，使之失效，保證自身的安全。

因為含有某種限制酶的細胞，其DNA分子中或不具備這種限制酶的識別序列，或通過甲基化酶將甲基轉移到所識別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。1、限制酶在原核生物中的作用是什么嗎？2、為什么細菌中限制酶不剪切細菌本身的DNA？思考

DNA連接酶連接的是兩個脫氧核苷酸分子的什么部位？1.2“分子縫合針”-DNA連接酶CTTAAGAATTCG磷酸二酯鍵答：不一樣。DNA連接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二酯鍵,二者的差別主要表現(xiàn)在：（1）DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羥基上，形成磷酸二酯鍵；而DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，不是在單個核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。（2）DNA聚合酶是以一條DNA鏈為模板，將單個核苷酸通過磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補的DNA鏈；而DNA連接酶是將DNA雙鏈上的兩個缺口同時連接起來。因此DNA連接酶不需要模板。此外，二者雖然都是由蛋白質(zhì)構成的酶，但組成和性質(zhì)各不相同。DNA連接酶與DNA聚合酶一樣嗎？為什么？T4噬菌體大腸桿菌只能連接黏性末端既可連接黏性末端，又可連接平末端。這兩種連接酶催化反應基本相同，都是連接雙鏈DNA的缺口，而不能連接單鏈DNA。比較記憶質(zhì)粒，λ噬菌體的衍生物，動植物病毒等。1.3“分子運輸車”——載體載體必須具備的條件：3、具有某些標記基因，便于進行篩選。（如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應的基因等）2、具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接；1、能夠在宿主細胞中復制并穩(wěn)定地保存；4、對受體細胞無害。載體的作用：1、將外源基因轉移到受體細胞中去。2、利用載體在受體細胞內(nèi)對外源基因進行大量復制。常用的載體有：質(zhì)粒

質(zhì)粒是基因工程最常用的運載體，它廣泛地存在于細菌中，是細菌染色體外能夠自主復制的很小的環(huán)狀DNA分子，大小只有普通細菌擬核DNA的百分之一。要對天然質(zhì)粒進行人工改造質(zhì)粒病毒(噬菌體和動植物病毒)2、基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取第二步：基因表達載體的構建第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞第四步：目的基因的檢測與鑒定1）從基因所在的生物體直接獲取利用PCR技術擴增目的基因3）人工合成2）mRNA反轉錄成cDNA第一步、目的基因的獲取4)從基因文庫中獲取目的基因②用__________切割目的基因，使其產(chǎn)生

。①用一定的

切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切口，產(chǎn)生_________。(基因工程的核心)③將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_____處，再加入適量__________，形成了一個重組DNA分子(重組質(zhì)粒)。限制酶黏性末端同種限制酶同種黏性末端切口DNA連接酶第二步、基因表達載體的構建（一）構建目的

使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。（二）構建零件及其作用①目的基因②啟動子

基因表達載體的組成

RNA聚合酶識別和結合的一段特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，RNA聚合酶與之結合才能驅(qū)動基因轉錄出mRNA，進而獲得需要的蛋白質(zhì)。③終止子④標記基因

一段特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端，作用是使轉錄在所需要的地方停止。

鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的受體細胞：動植物細胞、大腸桿菌、土壤農(nóng)桿菌、枯草桿菌等。將目的基因?qū)胧荏w細胞的原理：借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。轉化——目的基因進入_________內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持_____和_____的過程。受體細胞穩(wěn)定表達第三步、將目的基因?qū)胧荏w細胞方法導入植物細胞導入動物細胞導入微生物細胞農(nóng)桿菌轉化法基因槍法花粉管通道法顯微注射法感受態(tài)細胞吸收DNA分子第三步、將目的基因?qū)胧荏w細胞(檢查是否成功)分子水平檢測個體水平鑒定：①檢測轉基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等DNA分子雜交DNA分子雜交抗原-抗體雜交第四步、目的基因的檢測與鑒定目的基因主要是指_____________________。編碼蛋白質(zhì)的結構基因供體生物細胞取出DNA用限制酶剪去多余部分目的基因即：將需要的基因從供體生物細胞內(nèi)提取出來從基因所在的生物體直接獲取mRNA互補DNA(cDNA)雙鏈DNA(即目的基因)反轉錄合成

以目的基因轉錄成的mRNA為模板，反轉錄成互補的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需的基因。逆轉錄酶DNA聚合酶mRNA反轉錄成cDNA蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列目的基因核苷酸序列目的基因化學合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA：人工合成目的基因推測推測從基因文庫中獲取目的基因1.基因組文庫

將含有某種生物不同基因的許多片段，導入受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為基因文庫。

受體菌包含了某種生物所有的基因，該受體菌群體稱為這種生物的基因組文庫。2.部分基因文庫

受體菌包含了一種生物部分基因，該受體菌群體稱為這種生物的部分基因文庫，如cDNA文庫。用適當限制酶切割與載體連接導入受體菌群與載體連接導入受體菌群基因文庫的構建（1）基因組文庫的構建提取某生物全部DNA許多DNA片段該生物基因組文庫（每個受體菌含有一段不同的DNA片段）（2）cDNA文庫的構建——mRNA反轉錄形成該生物cDNA文庫mRNA互補DNA(cDNA)雙鏈DNA(即目的基因)逆轉錄酶DNA聚合酶（PCR，polymerasechainreaction）PCR擴增儀DNA雙鏈復制的基本原理一段已知目的基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸一對引物熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶）DNA的兩條鏈為模板溫度控制原理：前提：條件：聚合酶鏈式反應PCR擴增過程①DNA變性(90℃-95℃)：雙鏈DNA模板在熱作用下，

斷裂，形成

。

②復性(55℃-60℃)：系統(tǒng)溫度降低，引物與DNA模板結合，形成局部

。③延伸(70℃-75℃)：在Taq酶的作用下，從引物的5′端→3′端延伸，合成與模板鏈互補的_______。氫鍵單鏈DNA雙鏈DNADNA鏈易感染雙子葉植物和裸子植物。Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉移至受體細胞的染色體上農(nóng)桿菌特點：農(nóng)桿菌轉化法顯微注射法含目的基因的表達載體動物的受精卵含目的基因的受精卵早期胚胎雌性動物輸卵管或子宮轉基因動物為什么將目的基因?qū)雱游锛毎Ｓ玫氖荏w細胞是受精卵？顯微注射分裂分化移植發(fā)育2.微生物作受體細胞原因：將目的基因?qū)胛⑸锛毎?.轉化方法：繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對少

處理細胞→

細胞→表達載體與感受態(tài)細胞混合→_______細胞吸收DNA分子。Ca2+感受態(tài)感受態(tài)1.常用菌：大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌等。

該方法是根據(jù)堿基互補配對原則，把互補的雙鏈DNA解開，把單鏈的DNA小片段用同位素、熒光分子或化學發(fā)光劑等進行標記，之后同被檢測的DNA中的同源互補序列雜交，從而檢出所要查明的DNA或基因。分子雜交技術1.檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因提取受體生物全部DNA適當限制酶切割DNA片段用同位素標記的目的基因片段雜交（表明目的基因已插入）分子雜交技術顯出雜交帶2.檢測目的基因是否轉錄出了mRNA用同位素標記的目的基因片段雜交顯出雜交帶（表明目的基因已轉錄出了mRNA）

檢測DNA利用的是DNA與DNA雜交，檢測mRNA利用的是DNA與mRNA雜交。提取受體生物的mRNA檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)抗原—抗體雜交提取受體生物的蛋白質(zhì)與相應抗體雜交顯出雜交帶（表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品）基因工程的應用一、植物基因工程1、抗蟲轉基因植物2、抗病轉基因植物3、抗逆轉基因植物4、利用轉基因改良植物的品質(zhì)二、動物基因工程1、用于提高動物生長速度2、用于改善畜牧業(yè)產(chǎn)品的品質(zhì)3、用轉基因動物生產(chǎn)藥品4、用轉基因動物作器官移植的供體三、轉基因藥物1.4蛋白質(zhì)工程基因DNA氨基酸序列多肽鏈蛋白質(zhì)三維結構mRNA預期功能生理功能DNA合成分子設計折疊轉錄翻譯二、細胞工程植物細胞工程1、基本技術植物組織形成愈傷組織長出從芽生根移栽成活

脫分化

再分化A、植物組織培養(yǎng)技術B、植物體細胞雜交技術（1）、操作流程（2）、注意事項雜交時間：植物細胞雜交是從細胞融合開始，到培育成的新植物體結束。a.原生質(zhì)體制備：用酶解法去除細胞壁（纖維素酶和果膠酶）b.原生質(zhì)體融合：膜融合（高鈣、高pH誘導融合）、核融合（雜種細胞第一次有絲分裂時融合）（3）、植物體細胞雜交技術的應用潛力

a.植物育種中的核質(zhì)替換b.細胞質(zhì)雜種的獲得c.遠緣雜交創(chuàng)造新物種d.細胞器的互作研究（4）、面臨的困難a.融合特性的高效性b.雜種細胞的培養(yǎng)和選擇c.雜種的遺傳穩(wěn)定性控制2、植物細胞工程的實際應用

一、植物繁殖的新途徑1、微型繁殖2、作物脫毒（植物的分生區(qū)附近病毒極少）3、神奇的人工種子注：人工種皮的材料：海藻酸鈉二、作物新品種的培育1、單倍體育種2、突變體的利用三、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)動物細胞技術

1、動物細胞培養(yǎng)（1）、概念：從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。（2）、操作方法：取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個細胞，將處理后的細胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時需要將出現(xiàn)接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外，原代培養(yǎng)就是從機體取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)。當細胞從動植物中生長遷移出來，形成生長暈并增大以后，科學家接著進行傳代培養(yǎng)，即將原代培養(yǎng)細胞分成若干份，接種到若干份培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長、增殖。通過一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞稱為細胞株。當培養(yǎng)超過50代時，大多數(shù)的細胞已經(jīng)衰老死亡，但仍有部分細胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變出現(xiàn)了無限傳代的特性，即癌變。此時的細胞被稱為細胞系。（3）動物細胞培養(yǎng)條件A、無菌、無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外應定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物防止細胞代謝產(chǎn)物累積對細胞自身產(chǎn)生危害。B、營養(yǎng)物質(zhì)：無機物（無機鹽、微量元素等），有機物（糖、氨基酸、促生長因子等）C、血清和血漿(提供細胞生長必須的營養(yǎng)成份)D、溫度和pH（36.5±0.5℃，7.2～7.4）E、氣體環(huán)境（95%的空氣+5%CO?的混合氣體）2、動物體細胞核移植技術和克隆動物（1）、概念：將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，并使其重組發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終將發(fā)育成為動物的個體。（2）、體細胞核移植過程(3)、應用前景加速家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜種繁育；治療人類疾病，器官移植；（4）存在問題成活率低；克隆技術不完善；安全性問題。3、動物細胞融合和單克隆抗體技術動物細胞融合（1）概念：是指兩個或多個動物細胞融合成一個細胞的過程，融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞。（2）誘導因素：PEG、滅活的病毒、電激（3）特點：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。（4）過程：A.細胞準備，分貼壁和懸浮細胞兩種。前者可直接將兩親本細胞混合培養(yǎng)，后者需制成一定濃度的細胞懸浮液。B.細胞融合，加促融因子于將行融合的細胞之中，誘導融合。C.雜種細胞選擇。利用選擇性培養(yǎng)基等，使親本細胞死亡，而讓雜種細胞存活。D.雜種細胞克隆。3.2單克隆抗體的制備（1）、過程獲取雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)提取單克隆抗體（2）、單克隆抗體的應用1、作為診斷試劑2、用于治療疾病和運載藥物將針對某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質(zhì)連接，利用單克隆抗體的導向作用，將藥物或放療物質(zhì)攜帶至靶器官，直接殺傷靶細胞，稱為腫瘤導向治療。另外，將放射性標記物與單克隆抗體連接，注入患者體內(nèi)可進行放射免疫顯像，協(xié)助腫瘤的診斷。3．蛋白質(zhì)的提純單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個惰性的固相基質(zhì)（如Speharose2B、4B、6B等）上，并制備成層析柱。當樣品流經(jīng)層析柱時，待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發(fā)生特異性結合，其余成分不能與之結合。將層析柱充分洗脫后，改變洗脫液的離子強度或pH，欲分離的抗原與抗體解離，收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。三、胚胎工程1、體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育1.1精子的發(fā)生哺乳動物精子的發(fā)生是在睪丸內(nèi)進行的。1.1.1精子發(fā)生過程精子細胞變形中的主要變化卵子的發(fā)生

1、場所：卵巢卵泡=卵泡細胞+初級卵母細胞卵子=次級（或初級）卵母細胞+透明帶+放射冠排卵：卵子從卵泡中排出卵原細胞有絲分裂多個卵原細胞染色體復制初級卵母細胞（被卵泡細胞包圍,形成卵泡）MⅠ（排卵前后完成）第一極體次級卵母細胞第二極體卵子MⅡ（在受精過程完成）初情期完成在輸卵管中完成受精過程過程：胎兒期完成注意：初生女嬰的兩個卵巢中共有初級卵母細胞(初級卵泡)約兩百萬個，它們都已進入了第一次減數(shù)分裂的前期，并停留在前期不再發(fā)育。直到女孩進入性成熟時期。此時約有400000個初級卵母細胞保留下來。初級卵母細胞受性激素的刺激才蘇醒過來，重新繼續(xù)發(fā)育。只有420個能發(fā)育成卵。在這420個有幸發(fā)育成卵的初級卵母細胞中，最早的一個是等待15年，而最后的一個是等待了50年才重新發(fā)育的。

初情期胎兒期1.一個卵泡中能形成幾個成熟的卵子？2.排卵是指卵子從卵泡中排出，還是指卵泡從卵巢中排出？思考題提示：正常情況下，一個卵泡只能形成一個成熟的卵子。提示：是指卵子從卵泡中排出。精子和卵細胞發(fā)生過程的比較睪丸曲細精管(惟一）卵巢（M1)輸卵管(M2)初情期以后胎兒時期4個精子細胞1個卵細胞3個極體是否蝌蚪形圓形哺乳動物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲備是在出生前完成的；精子是從初情期開始的連續(xù)不連續(xù)1.3受精2.地點雌性的輸卵管1.概念：是精子和卵子結合形成合子（即受精卵）的過程。過程受精前的準備階段受精階段精子獲能即精子必須在雌性動物生殖道內(nèi)發(fā)生相應生理變化后，才能獲得受精能力的現(xiàn)象卵子的準備即卵子在輸卵管內(nèi)達到減數(shù)第二次分裂中期（MII）時，才具備受精能力包括精子穿越放射冠和透明帶，進入卵黃膜，原核形成和配子結合1.什么叫頂體反應？2.什么叫透明帶反應？3.什么叫卵黃膜的封閉作用？①透明帶反應②卵黃膜封閉作用4.防止多精入卵受精有哪些生理反應？第一道屏障第二道屏障放射冠（卵丘細胞）透明帶卵黃膜細胞核第一極體發(fā)生頂體反應，穿越放射冠頂體反應：主要釋放頂體內(nèi)的酶，溶解卵丘細胞之間的物質(zhì)，形成精子穿越放射冠的通路。

穿過透明帶發(fā)生透明帶反應：精子觸及卵黃膜的瞬間會阻止后來的精子進入透明帶的生理反應。形成受精卵精子進入卵子后，其細胞核變大形成雄原核，與此同時，精子入卵后被激活的卵子完成減數(shù)第二次分裂，形成雌原核。雌雄原核充分發(fā)育后同時向細胞中部靠攏，并相互融合成一個細胞核，這時稱為受精卵卵子完成受精的標志在卵黃膜和透明帶之間可以觀察到兩個極體透明帶卵黃膜精、卵相遇頂體反應頂體酶釋放溶解卵丘細胞之間物質(zhì)穿越放射冠接觸透明帶頂體酶溶解透明帶穿越透明帶接觸卵黃膜產(chǎn)生透明帶反應形成第一道屏障精子被微絨毛抱合精子外膜與卵黃膜融合精子注入卵精子注入卵后變化①變化②變化③產(chǎn)生卵黃膜封閉作用形成第二道屏障尾部脫離核膜破裂形成雄原核激活卵子完成減數(shù)第二次分裂，排出第二極體形成雌原核發(fā)育移動接觸合并形成受精卵精子穿越和受精過程小結：受精前的準備階段受精階段受精過程精子獲能準備階段1：卵子的準備準備階段2：放射冠雌雄原核形成和透明帶配子的結合精子進入卵黃膜1.4胚胎的發(fā)育胚胎發(fā)育的早期有一段時間是在透明帶內(nèi)進行的，這一時期稱為卵裂期。特點：細胞分裂方式為有絲分裂，細胞數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體積并不增加，或略有縮小。根據(jù)胚胎形態(tài)的變化，分幾個階段：受精卵

卵裂（包括2細胞期、4細胞期、8細胞、16細胞期、32細胞期）桑椹胚

囊胚期

原腸胚期（包括內(nèi)、中、外三胚層和原腸腔）幼體1.4.1胚胎發(fā)育的過程桑椹胚當胚胎細胞數(shù)目達到32個左右時，胚胎形成致密的細胞團，形似桑椹，叫做桑椹胚。桑椹胚中的每個細胞都屬于全能細胞。滋養(yǎng)層：發(fā)育成胎膜和胎盤，胚胎可通過這些組織從母體中獲得正常發(fā)育所需的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)內(nèi)細胞團細胞：即胚胎干細胞，是一種未分化的細胞，具有全能性，能發(fā)育成完整的胎兒的各種組織滋養(yǎng)層內(nèi)細胞團囊胚腔囊胚細胞開始分化囊胚腔：孵化：胚胎從透明帶中伸展出來的過程內(nèi)部含有液體的囊腔原腸胚內(nèi)細胞團表層的細胞外胚層內(nèi)胚層內(nèi)細胞團下方的細胞中胚層原腸腔內(nèi)胚層包圍的囊腔受精卵卵裂期桑椹胚囊胚（內(nèi)含囊胚腔）原腸胚（內(nèi)含原腸腔）胎兒形成：在透明帶內(nèi)進行有絲分裂，細胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積并不增加，或略有減少。：由具有全能性細胞構成，細胞數(shù)在32個左右，排列緊密，形似桑椹內(nèi)細胞團：發(fā)育成胎兒各組織滋養(yǎng)層細胞：發(fā)育成胎膜和胎盤：最初發(fā)育在輸卵管進行有絲分裂胚胎發(fā)育小結滋養(yǎng)層--發(fā)育成胎膜和胎盤外胚層--發(fā)育成的組織、器官和系統(tǒng)中胚層--分化形成了絕大多數(shù)的組織和器官內(nèi)胚層--發(fā)育成消化道上皮，呼吸道上皮和肝臟及胰腺原腸腔課堂練習2．下列最能表現(xiàn)細胞全能性的細胞是()A．桑椹胚期細胞B．囊胚期細胞

C．外胚層細胞D．滋養(yǎng)層細胞1.下圖表示蛙的受精卵發(fā)育至囊胚過程中，DNA總量、每個細胞體積、所有細胞體積之和、有機物總量的變化趨勢(橫坐標為發(fā)育時間)。其中正確的是()A．①②B．①③C．②④D．③④AA3、關于桑椹胚和囊胚的比較,以下說法不正確的是()A.囊胚期細胞分化是由于遺傳物質(zhì)突變引起的B.囊胚期的細胞出現(xiàn)了細胞分化,但遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變C.桑椹胚的各細胞結構功能基本相同D.囊胚期內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)層細胞差異不是復制水平上的差異，而是轉錄水平上的差異引起的。A4.桑椹胚是指（）A．含有一個充滿液體的腔B．總體積大于受精卵C．受精卵不斷分裂后形成D．外面無透明帶C體外受精和早期胚胎的培養(yǎng)1、體外受精、卵母細胞的培養(yǎng)與采集（1）采集：對于實驗動物用促性腺激素處理（超數(shù)排卵）、精子的采集與獲能（1）采集方法：假陰道法、手握法、電刺激法等（2）體外獲能的方法：培養(yǎng)法、化學誘導法對于嚙齒類動物、家兔和豬等采用培養(yǎng)法；對于牛、羊等家畜的精子采用化學誘導法；將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體的A23187溶液中。、哺乳動物的體外受精1.3胚胎的早期培養(yǎng)（1）培養(yǎng)液中的成分：無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等物質(zhì)。3.3胚胎工程應用前景1、胚胎移植（1）概念：將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術。（2）胚胎移植的生理學基礎A、同種動物的供，受體的生殖器官的生理變化是相同的，為供體胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境。B、早期胚胎在一定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)，為胚胎