油菜苗期菌核病抗性鑒定

油菜苗期菌核病抗性鑒定第一頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)室苗期菌絲接種鑒定法方法簡(jiǎn)單易行，鑒定周期短，不受自然環(huán)境影響，適于對(duì)大量材料的篩選。另?yè)?jù)初步研究，苗期菌絲接種鑒定表現(xiàn)抗菌材料，在花期仍表現(xiàn)抗病。在本實(shí)驗(yàn)中只學(xué)習(xí)和掌握苗期菌絲塊接種鑒定法。二、內(nèi)容說(shuō)明第二頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（一）用品油菜不同品種種子（包括抗病品種如中油821，感病品種如84039的種子）、生長(zhǎng)室、平底塑料盤（60×30×4cm）、園土、綠高一號(hào)液（北京北農(nóng)綠高科技發(fā)展有限公司出產(chǎn)）、馬鈴薯、紗布、葡萄糖、瓊脂膠、試管、三角瓶、解剖刀、接種環(huán)等。三、所需用品和操作方法

第三頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（1）土壤準(zhǔn)備：取較肥沃的菜園土，清除石塊，曬干敲碎，然后裝入塑料盤中（需裝滿）。（二）、主要作法－－1.供試苗的種植第四頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（2）油菜播種：保證出苗后能保留生長(zhǎng)一致苗30株。每10個(gè)品種設(shè)對(duì)照。（二）、主要作法－－1.供試苗的種植第五頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（3）土壤消毒：播種后用2000—3000倍的綠亨一號(hào)溶液澆透土壤進(jìn)行消毒。（二）、主要作法－－1.供試苗的種植第六頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（4）播后管理：播后將塑料盤放于生長(zhǎng)室內(nèi)，在出苗期間，室內(nèi)溫度控制在20℃以下，在出真葉后，控制20—24℃左右，每2天噴水一次。（二）、主要作法－－1.供試苗的種植第七頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日生長(zhǎng)室第八頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日生長(zhǎng)室外管理第九頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（1）PDA培養(yǎng)基的制作：取馬鈴薯200g，洗凈去皮切碎，加水1000mL，煮沸30min，用紗布過(guò)濾，將濾液加水補(bǔ)足到1000mL，加葡萄糖10—20g和瓊脂膠17—20g，加熱溶化，用紗布過(guò)濾。然后依需要，分別裝入試管（用作貯藏菌種），或裝入培養(yǎng)皿（用作培養(yǎng)菌絲接種菌），然后在高壓滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌。（二）、主要作法－－2.菌絲的培養(yǎng)第十頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（2）菌絲的培養(yǎng)：取貯存平板菌核病的菌絲，在無(wú)菌條件下移下裝有PDA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿上，每皿一小塊，放在培養(yǎng)皿中間，在22—25℃下培養(yǎng)3—4天，以菌絲長(zhǎng)滿，而又沒(méi)有結(jié)核為宜。（二）、主要作法－－2.菌絲的培養(yǎng)第十一頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（1）接種：待油菜苗3—5片真葉時(shí)，將菌絲平板以無(wú)菌解剖刀切成0.5×0.5cm小塊，將有菌絲的一面貼于葉片上（注意不要貼在葉脈上），每株接種1片葉，每葉接種1小塊。

見下圖

（二）、主要作法－－3.菌絲塊的接種與管理第十二頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十三頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（2）管理：接種后在23—26℃溫度和85%—95%相對(duì)濕度下培養(yǎng)5—7天后即可調(diào)查（注意接種后前2天相對(duì)濕度應(yīng)保持95%以上，以確保發(fā)病，后3—5天保持85%左右，使接種菌不致于腐爛）。（二）、主要作法－－3.菌絲塊的接種與管理第十四頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十五頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十六頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十七頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十八頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日第十九頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日

在試驗(yàn)中當(dāng)感病品種的發(fā)病率超過(guò)40%以上方為有效鑒定。一般將病害等級(jí)分為5個(gè)等級(jí)，即：0級(jí)：無(wú)病。1級(jí)：病斑面積占接種葉面積10%以下。2級(jí)：病斑面積占接種葉面積10—30%。3級(jí)：病斑面積占接種葉面積30—50%。4級(jí)：病斑面積占接種葉面積50%以上。（二）、主要作法－－4.病害等級(jí)調(diào)查第二十頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（1）計(jì)算發(fā)病率（二）、主要作法－－5.統(tǒng)計(jì)方法和抗性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

第二十一頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（2）計(jì)算病情指數(shù)式中：Gi為病害級(jí)別；Ni為調(diào)查株數(shù)；i為0、1、2…k,GK為最高級(jí)別。（二）、主要作法－－5.統(tǒng)計(jì)方法和抗性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

第二十二頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（3）計(jì)算相對(duì)抗性指數(shù)（RRI）式中：m為供試材料；CK為對(duì)照。

RRI，即Relativeresistantindex（二）、主要作法－－5.統(tǒng)計(jì)方法和抗性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

第二十三頁(yè)，共二十五頁(yè)，2022年，8月28日（4）抗性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：RRI≤-1.2≤-0.7<0≥0>0.9>2.0抗性分?jǐn)?shù)高抗中抗低抗低感中感高感代號(hào)HRMRLRLSMSHS（二）、主要作法－－5.統(tǒng)計(jì)方法和抗性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

第二十四頁(yè)，共二十