級組織學技術(shù)演示文稿

級組織學技術(shù)演示文稿當前1頁，總共38頁。（優(yōu)選）級組織學技術(shù)當前2頁，總共38頁。當前3頁，總共38頁。HE染色，腦垂體當前4頁，總共38頁。掃描電鏡術(shù)（scanningelectronmicroscopy,SEM）：觀察組織細胞表面結(jié)構(gòu)電鏡技術(shù)透射電鏡術(shù)（transmissionelectronmicroscopy,TEM）：觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)當前5頁，總共38頁。TransmissionElectronMicroscope當前6頁，總共38頁。漿細胞當前7頁，總共38頁。血細胞當前8頁，總共38頁。組織化學技術(shù)一般組織化學（Classicalhistochemistry）免疫組織化學（immunohistochemistry）原位雜交（insituhybridization)兔肝PAS反應當前9頁，總共38頁。圖像分析術(shù)-形態(tài)計量術(shù)

應用數(shù)學或統(tǒng)計學原理對組織切片提供的平面圖像進行分析，從而獲得立體的組織和細胞內(nèi)各種有形成分的數(shù)量、體積、表面積等參數(shù)，從量的角度顯示結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系。當前10頁，總共38頁。細胞培養(yǎng)術(shù)和組織工程細胞培養(yǎng)術(shù)：把從機體取得的細胞在體外模擬體內(nèi)的條件下進行培養(yǎng)的技術(shù)。組織工程：細胞培養(yǎng)術(shù)在體外模擬構(gòu)建機體組織或器官的技術(shù)。實驗中的組織工程耳當前11頁，總共38頁。石蠟切片的制備基本操作步驟

取材、固定

洗滌、脫水

透明

浸蠟、包埋

切片

染色

脫水、透明、封片

當前12頁，總共38頁。一、取材、固定

1.動物致死法

麻醉空氣栓塞頸椎脫臼或斷頭股動脈放血

（一）取材

當前13頁，總共38頁。2.動物選擇根據(jù)教學或科研目的和要求確定。3.取材方法取材順序

先腹腔，后胸腔、盆腔，最后取神經(jīng)系統(tǒng)當前14頁，總共38頁。肌組織：縱切后結(jié)扎固定，以防因收縮而出現(xiàn)波浪形變化。取縱、橫切面；肝臟：右前葉或左外葉中部?？v切或冠狀切面；膽囊：取膽囊體部，附于濾紙，洗去膽汁后固定；組織、器官取材舉例當前15頁，總共38頁。胰腺：取含有較多胰島的胰尾部。胃：取胃底或胃體。附于濾紙，防止卷縮；腎臟：縱剖，再做扇形切面，皮、髓質(zhì)均有。當前16頁，總共38頁。當前17頁，總共38頁。4.外科活體組織取材臨床手術(shù)取材：多用于腫瘤組織。包括腫瘤及其周圍組織；活體小組織：包埋時注意切片的面，因體積較小，仔細操作當前18頁，總共38頁。5.取材注意事項動作輕、快，保證組織新鮮;保持組織清潔;力求組織塊小而薄;一刀切取，避免擠壓;盡量保持組織原有形狀;部位準確，切面合適;切除不需要的部分

當前19頁，總共38頁。（二）固定

1.意義和目的

使要觀察的組織結(jié)構(gòu)盡量接近于生前的正常狀態(tài)。

防止組織細胞死后的變化和自溶；使細胞內(nèi)的可溶成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì)；使細胞內(nèi)成分沉淀、凝固后產(chǎn)生不同的折射率和對染料的親和力；增加組織硬度，利于切片；防止組織過度收縮或膨脹

當前20頁，總共38頁。2.注意事項

動作迅速，保持組織新鮮；防止組織因固定而發(fā)生變形；使用新配制的固定劑；固定劑的用量:組織塊體積的10-15倍；

當前21頁，總共38頁。固定的時間依組織的種類、性質(zhì)、大小、固定劑的種類、性質(zhì)、滲透力而定；固定過程中時常搖動；作好記錄，組織名稱、固定液、時間等當前22頁，總共38頁。3.固定液的種類

單純固定液

甲醛、乙醇、苦味酸、丙酮、氯化汞、等

混合固定液

Carnoy液、Bouin液、Zenker液等

當前23頁，總共38頁。4.固定的方式

特殊固定法

灌注固定蒸氣固定常規(guī)固定法當前24頁，總共38頁。二、洗滌、脫水、透明、浸蠟、包埋

（一）洗滌

目的停止固定液對組織的作用，利于脫水、切片和染色。

當前25頁，總共38頁。方法固定液以水配制者——流水沖洗；固定劑含乙醇者——不沖洗，或用與固定劑中乙醇濃度相近的乙醇沖洗；特殊固定液洗滌法

當前26頁，總共38頁。（二）脫水目的和原則用某些溶劑逐步將組織塊吸收的水分置換出來，以利于透明劑和石蠟或火棉膠的滲入。

當前27頁，總共38頁。種類和效果

非石蠟溶劑的脫水劑：乙醇、丙酮等脫水兼石蠟溶劑的脫水劑：正丁醇和環(huán)氧六烷等

當前28頁，總共38頁。（三）透明目的便于透蠟包埋。大多數(shù)脫水劑與石蠟不相混合，通過透明劑的作用才能透蠟。

種類二甲苯、苯、甲苯、氯仿等。

當前29頁，總共38頁。（四）浸蠟（透蠟）目的和方法脫水、透明后的組織用石蠟、火棉膠、明膠等支持劑透入其內(nèi)部，替代組織中的透明劑，并滲入組織內(nèi)部使軟組織變?yōu)檫m當硬度的蠟塊，以利于切片和觀察。

浸蠟劑的種類石蠟、火棉膠、明膠等

當前30頁，總共38頁。（五）包埋1.石蠟包埋法—常用的方法浸蠟軟蠟I軟蠟II硬蠟54-56℃

56-58℃

當前31頁，總共38頁。2.快速石蠟包埋法—用于快速診斷包埋過程包埋注意事項3.火棉膠包埋法—用于大塊組織和眼球4.碳蠟包埋法、明膠包埋法—不常用當前32頁，總共38頁。三、組織制片法-切片

（一）石蠟切片法

1.切片前的準備工作

載波片的處理；防脫片劑的選擇；修塊；備刀

當前33頁，總共38頁。2.切片過程

3.石蠟切片常遇到的問題及解決的方法

4.切片注意事項

（二）冰凍切片法

當前34頁，總共38頁。1.制備石蠟切片的基本步驟。2.組織取材和固定的注意事項。思考當前35頁，總共38頁。四、染色

將染料配成溶液，將組織切片浸入染色劑中，使組織、細胞等成分被染上深淺不同的顏色，產(chǎn)生不同的折光率，便于在光鏡下觀察。

1.目的當前36頁，總共38頁。2.染料特性

染料是有機化合物，在其分子結(jié)構(gòu)中有特殊功能的基團，發(fā)色團和助色團。

3.染色原理