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1/23word甲硫氨酸MethionineMetM纈氨酸valineValV異亮氨酸isoleucineIleI苯丙氨酸phenylaninePheF亮氨酸leucineLeuL色氨酸t(yī)ryptophanTryW蘇氨酸t(yī)hreoninethrT2/23酶活性單位:表示酶的相對(duì)含量,指在一定條件下,單位時(shí)間3酶促反響期Vv=max3/234/23 定時(shí)法是固定時(shí)間法的簡(jiǎn)稱,是指測(cè)定反響開始后一段時(shí)間〔t1~t2〕產(chǎn)物的增加量或底物的減少量以測(cè)定酶活性的方法。該方連續(xù)監(jiān)測(cè)法是指在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)連續(xù)測(cè)定產(chǎn)物〔或底物〕在線5/23word該方法是在一定的反響時(shí)間區(qū)段內(nèi)〔至少9~120s〕每隔一定時(shí)t.lVuu;裝置與自動(dòng)監(jiān)測(cè)功能,半自動(dòng)與全自動(dòng)生化分析儀都能滿足這些要6/23 性增強(qiáng),變性與二者的區(qū)別鹽析:在蛋白質(zhì)溶液中參加某些無機(jī)鹽的濃溶液,使蛋白質(zhì)的7/23變性:在熱、重金屬、酸、堿、某些有機(jī)物等作用下,蛋白質(zhì)照8/23word超二級(jí)結(jié)構(gòu):假如干相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)中的構(gòu)象單元彼此相互作合體9/23原理:蛋白質(zhì)在凝膠過濾層析柱中的洗脫體積Ve,與其分子量10/23word靠nm近。大多數(shù)蛋11/23word全抗原能引起機(jī)體的免疫反響,半抗原不能引起機(jī)體的免疫反—12/23word=1=K[Ab][Ag]k2=1=K[Ab][Ag]k2④用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分13/232洗滌3參加氯胺酮抗體和氯胺酮小分子4洗滌14/2366洗滌7加底物顯色、終止8觀察結(jié)果TRFIA所用的標(biāo)記物是鑭系元素螯合物,利用這類熒光物質(zhì)熒,15/23wordG-----CRNAA----UG-----C2.PCR的意義和簡(jiǎn)單操作流程↓DNA加熱變性+引物慢慢冷卻使其結(jié)合,形象地稱為退火↓↓第二輪:變性—退火—延伸呈指數(shù)增長16/2317/23word理論值:一輪一倍10輪103=1000倍20輪10630輪109反響原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保存復(fù)制原理,合成每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍.18/23 讀出序列.基序列.4.分子印記的原理和流程:19/23過瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)展別離,繼而將其變性并按其在凝膠中的位置轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素薄膜或尼龍膜上,固定后再與同位素或其它針互補(bǔ)的序列,如此二者通過堿基互補(bǔ)的原理進(jìn)展結(jié)合,游離探針洗滌后用自顯影或其它適宜的技術(shù)進(jìn)展檢測(cè),從而顯示出待檢的片段與其相對(duì)大小.A否有點(diǎn)突變、擴(kuò)增重排等.mRNA提取甲醛變性電泳印跡轉(zhuǎn)移預(yù)雜交洗膜放射自顯影或化學(xué)20/23 ②不同的蛋白質(zhì)在一樣流動(dòng)相中由于疏水基團(tuán)多少、種類以與外表分布情況不同,與填料的親合力也不同,從而得到別離.③結(jié)果:疏水性強(qiáng)的蛋白質(zhì)親合力大,出峰遲;疏水性小的蛋白質(zhì)就容易被洗脫.其別離蛋白質(zhì)和酶等生物大分子具有速度快、別離性能好,重復(fù)性好,溶劑和流動(dòng)相易除去等優(yōu)點(diǎn).在所有的液相色譜法中反相色譜的別離性能.把分子大小不同的物質(zhì)別離開的一種方法.其機(jī)理是分子篩效應(yīng)。在洗脫過程中,大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部,而沿凝膠顆粒間的空隙最先流出柱外;而小分子可以進(jìn)入21/23word凝膠顆粒內(nèi)部的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),路徑長、流速慢,以至最后流出柱外。因此,混合樣品如同“過篩〞一樣,因分子大小的不同得以彼此分開.它具有別離條件溫和,產(chǎn)品收率高,生物活性好,別離面寬等優(yōu)點(diǎn),廣泛用于蛋白質(zhì)或多肽物質(zhì)的別離純化中.a.沉淀法:沉淀是濃縮核酸最常用的方法.③去除溶液中某些鹽離子與雜質(zhì).機(jī)溶劑變性.常用的鹽:22/23一

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