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關(guān)于實驗血清甘油三酯含量測定第一頁,共八頁,編輯于2023年,星期一實驗?zāi)康牧私庋甯视腿ズ繙y定的正常值與臨床意義掌握血清甘油三酯化學(xué)法測定的基本原理及主要技術(shù)方法第二頁,共八頁,編輯于2023年,星期一甘油三酯KOH60-70℃20min鉀皂甘油++HIO4+NH4+甲醛乙酰丙酮3,5-二乙酰-1,4二氫-2,6二甲基吡啶(黃色帶熒光)甘油甲醛皂化氧化顯色32實驗原理第三頁,共八頁,編輯于2023年,星期一實驗步驟取3(或4)只小試管,依次加入蒸餾水、標(biāo)準(zhǔn)液、樣品,抽提劑及硫酸,邊加邊搖,用力振搖10min,靜置10min分層注意:試管必須干燥吸取上層液體0.5ml,加入對應(yīng)的3(或4)只大試管中,加入異丙醇、皂化試劑,充分混勻,65℃水浴5min注意:吸上層液時,務(wù)必當(dāng)心,絕對不可吸入下層液體(分光光度計預(yù)熱)加入氧化試劑,充分混勻后,加入乙酰丙酮和氨的混合液,搖勻,65℃水浴15min取出試管,流水/室溫冷卻,測420nm的吸光度抽提皂化氧化顯色比色第四頁,共八頁,編輯于2023年,星期一拉桿,0-4檔樣品池讀數(shù)波長毛面1、分清光面、毛面。手應(yīng)接觸毛面,光從光面通過2、用溶液潤洗2-3次,裝至2/3至4/5體積3、粗紙吸水、柔紙擦亮光面比色杯的使用分光光度計的使用1.打開電源,調(diào)節(jié)旋鈕至需要的波長,預(yù)熱20~30min2.1檔(空白管),T模式調(diào)100%,顯示“Blank”、“100”3.拉桿拉至1.5檔,T模式調(diào)0%,顯示“0.00”4.換到A模式,拉至2、3、4檔,讀取各個樣品的吸光度光面第五頁,共八頁,編輯于2023年,星期一Lambert-Beer定律正常參考值為0.30~1.7mmol/Lmg/mlmmol/L國際單位mg/ml—————————×1000摩爾質(zhì)量g/mol(885)實驗結(jié)果A1c1m1標(biāo)準(zhǔn)管法——=——=——(終體積相同時)A2c2m2A樣品———×m標(biāo)準(zhǔn)品A標(biāo)準(zhǔn)品樣品TG濃度=————————V樣品A樣品———×1mg/ml×0.2mlA標(biāo)準(zhǔn)品=————————————0.2ml第六頁,共八頁,編輯于2023年,星期一注意事項抽提時搖勻靜置,待完全分層后才能吸取上層液,吸取上層液時不能吸入下層液;實驗完成后,試管和比色杯必須用皂粉洗干凈,不能有油污,將水甩干,倒置晾干;槍頭必須清洗干凈,甩干選用
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