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文檔簡介
關于尿液理學蛋白本周蛋白尿糖檢測試驗第一頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一尿液形成過程示意圖第二頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一■容器1、
一般檢查:清潔干燥2、
細菌培養(yǎng):有蓋無菌大試管3、24小時尿:清潔干燥的大口瓶常規(guī)檢查可隨時留取,但晨尿較濃縮、偏酸性,病理成分多且完整,可提高檢查的陽性率?!瞿蛞罕4?、
冷藏2、
立即送檢,夏季<1h,冬季<2h3、不能及時送檢,以4℃6~8小時冷藏為宜尿液的容器要求保存條件第三頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一第一節(jié)尿液理學檢查尿量
(有刻度的容器)顏色及透明度(肉眼觀察)比重(尿比重計)第四頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一一、尿量測定第五頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一一、尿量取決于腎小球的濾過率和腎小管的重吸收正常成人:1000-2000ml/24h
兒童:大約為成人3~4倍二、幾個重要概念
多尿:>
2500ml/24h少尿:<400
ml/24h無尿:<100
ml/24h第六頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【注意事項】
1.每次留取標本必須排空膀胱。
2.氣溫過高時注意防腐。
3.測定尿量需準確,精確至毫升,誤差不得超過20ml。第七頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
二、尿顏色和透明度
第八頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一第九頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一■異?!鰸獠枭蜥u油色(血紅蛋白尿)
疾?。阂娪谘筒缓陷斞磻⒓毙匀苎载氀?、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿(PNH)等、■黃色
膽紅素定性(+)時,稱膽紅素尿
疾?。?/p>
阻塞性或肝細胞性黃疸■乳白色混濁
1、菌尿或膿尿:泌尿系統(tǒng)感染,如腎盂腎炎、膀胱炎2、脂肪尿:腎病、擠壓傷、骨折、腎病綜合征等
3、乳糜尿:絲蟲病、腫瘤、腹部創(chuàng)傷等所致淋巴循環(huán)受阻第十頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【注意事項】1.盛尿液的容器:必須干燥、清潔、透明。2.標本:新鮮尿液。3.鑒別渾濁尿:新鮮尿液含鹽類濃度過高,尤其是尿酸鹽排出時遇冷易析出結晶,使尿液渾濁。4.尿液顏色:易受某些食物或藥物的影響。第十一頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
三、尿液比重測定
(一)比重計法
【原理】尿比重計是一種液體比重計,可測定出規(guī)定溫度下的尿液比密。尿液比重與所含溶質成正比,溶質越多,尿比重越高,對浮標的浮力就越大,浸入尿液中的比重計部分則越小,讀數(shù)越大;反之,浸入部分越大,讀數(shù)越小。第十二頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一【操作】
1.加尿
2.放浮標
3.讀數(shù)
第十三頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一■參考值①晨尿>1.020,隨機尿1.003~1.030②新生兒:1.002~1.004
■臨床意義:反映腎小管的濃縮稀釋功能比重慢性腎衰竭、尿崩癥急性腎小球腎炎、心力衰竭、高熱、脫水、出汗過多尿少尿多糖尿病第十四頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【注意事項】
1.尿比重計通過校正后才能使用。
2.尿液要求新鮮;尿液過少不足以浮起比重計時。
3.因低溫所致的尿酸或其他鹽類沉淀可水浴(37℃)使其溶解,待尿液溫度降至比重計所標定的溫度時即可測定。
4.尿液面應消除泡沫;比重計浮標要垂直懸浮于尿液中;讀取比密值要準確。
5.校正結果要進行蛋白尿、糖尿和溫度的校正。
6.每次測定完畢都需用純凈水沖洗比重計,若有蛋白質及鹽類物質沉積時,需用清潔液洗凈后使用。第十五頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【原理】pH廣泛試紙是多種指示劑混合的試帶,靈敏度約為pH1.0,顯色范圍為棕紅至深黑色,試帶蘸取尿液后即可顯色,然后與標準色板比較即可測得尿液pH近似值
四、尿酸堿度pH試紙法測定第十六頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一【操作】
1.取試紙2.浸尿
3.讀取結果
4.報告方式第十七頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一■參考值①
新鮮晨尿pH值在5.5~6.5,平均值6.0②新鮮隨機尿pH值在4.5~8.0③久置可變堿性■臨床意義PH值酸中毒、發(fā)熱、糖尿病、痛風或服用氯化銨等藥物后堿中毒、尿潴留、腎小管酸中毒、服用堿性藥物后第十八頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【注意事項】1.試帶應避光,密封與干燥保存,遠離酸性和堿性物質,以防失效2.標本應新鮮,放置過久會因揮發(fā)性酸喪失或細菌繁殖而使pH增高,標本不能使用防腐劑,否則可能會影響檢測結果3.比色時間應在規(guī)定的時間內比色第十九頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一第二節(jié)尿蛋白定性檢查
【原理】生物堿試劑磺基水楊酸,在酸性條件下,其磺酸根陰離子與蛋白質氨基酸陽離子結合,形成不溶性蛋白鹽沉淀?;腔畻钏岱ǖ诙?,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【操作】
1.調pH:使尿液PH值在5~6
2.加尿液:取2支試管,加入1ml尿液
3.加試劑:第一支試管加試劑2滴,輕混
勻,另一支試管不加做對照
4.判斷結果:1min內觀察結果
1第二十一頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一①優(yōu)點:簡便快速,靈敏度高0.05-0.1g/L;
缺點:與清/球/本周蛋白反應;假陽性。②干化學法的參考方法,NCCLS推薦的確證實驗?!驹u價】①尿液中蛋白質含量>150mg/24h尿中蛋白質濃度>100mg/L②蛋白定性為陽性,即蛋白尿。1.蛋白尿
(proteinuria,PRO)
第二十二頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一【干擾因素】
干擾因素假陽性①高濃度尿酸、尿酸鹽、草酸鹽②碘造影劑、大劑量青霉素③混入生殖系統(tǒng)分泌物假陰性pH>9或<3第二十三頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【注意事項】1.標本:①尿液明顯混濁,先離心或過濾。
②患者應用大劑量青霉素鉀鹽、慶大霉素、磺胺、含碘造影劑時,應告知結果可能產(chǎn)生假陽性。
③正確采集中段尿,避免混有生殖系統(tǒng)分泌物。2.調pH
本法在尿液偏堿或偏酸時(pH>9,pH<3)可呈假陰性,檢測前先測試尿pH(5~6).3.掌握好結果判斷時間,對于微弱陽性的判斷,可選用黑色襯紙作背景,以提高分辨力。第二十四頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一第三節(jié)尿本周蛋白定性檢查一、凝溶法【原理】
本周蛋白在pH4.9±0.1條件下,加熱至40℃~60℃時可發(fā)生凝固,溫度升至90℃~100℃時沉淀消失,當溫度降低恢復至40℃~60℃時又可重新凝固。第二十五頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一【操作】(詳見實驗課本P90)
1.標本處理
2.加入試劑
3.觀察結果
4.驗證結果
第二十六頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【注意事項】
1.收集已診斷輕鏈疾病患者的尿液做此試驗。尿液新鮮,減少清蛋白、球蛋白分解變性產(chǎn)生的干擾?;鞚崮蛞喉毾入x心取上清液。
2.嚴格控制或調節(jié)pH,凝溶法最適pH為4.5~5.5。
3.煮沸過濾時,動作迅速,保持高溫,不要振蕩,防止BJP夾雜于其他沉淀蛋白中被過濾除掉而造成假陰性。過濾用漏斗、濾紙、試管等用品,需保持高溫狀態(tài),以避免溫度降低使BJP凝固。
4.凝溶法特異性高,操作繁瑣、費時,靈敏度低(0.3~2.0)g/L。
5.操作時一定注意安全!!
第二十七頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一二、對-甲苯磺酸法
【原理】
對-甲苯磺酸能沉淀相對分子質量較小的本周蛋白,而對相對分子質量較大的清蛋白和球蛋白不起反應。第二十八頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一【操作】
1.加尿液:取2支試管,分別加尿液1ml
2.加試劑:測定管加0.5ml試劑,對照管加0.5ml冰醋酸,輕混勻靜置5min
3.觀察結果:
①陽性:測定管渾濁加重或有沉淀,對照管清晰透明或輕度渾濁
②陰性:測定管清晰透明或與對照管相似第二十九頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【注意事項】
1.收集已診斷輕鏈疾病患者的尿液做此試驗。尿液應新鮮,混濁尿液須先行離心取上清液。服用利福平類抗結核藥物患者可能出現(xiàn)周蛋白假陽性。
2.尿液中其他球蛋白>5.0g/L可出現(xiàn)假陽性,需進行驗證。如果尿液中本周蛋白含量低,則需先對尿液進行濃縮。第三十頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一第四節(jié)尿葡萄糖班氏法定性檢查【原理】Cu2+-----------→Cu+藍色
黃色至磚紅色.△簡易步驟:班氏試劑1ml(煮沸不變色)+尿4滴→煮沸1-2min→冷卻后觀察.堿性條件+葡萄糖第三十一頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一?操作:1ml班氏試劑,加熱試管底部,煮沸,觀察,再加尿液2滴,繼續(xù)煮沸1~2min,冷卻后觀察結果。?結果判斷:1.藍色不變:
-2.藍中略帶綠無沉淀:+/-3.綠色有少許黃綠色沉淀:+4.較多黃綠色沉淀:++5.土黃色渾濁,大量沉淀:+++6.大量紅棕/磚紅色沉淀:++++第三十二頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一【干擾因素】標本因素假陽性:還原性糖假陰性:①大量銨鹽,預先加堿煮沸去氨后再檢驗;
②蛋白>0.5g/L,加熱乙酸法去蛋白取濾液檢驗;藥物因素假陽性:VitC,青/鏈霉素,頭孢菌素,異煙肼,水楊酸鹽,氨芐西林【評價】缺乏特異性,靈敏度低第三十三頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期一
【注意事項】1、試劑與尿液的比例為10︰1。2、煮混時應不時搖動試管以防爆沸噴出,試管口朝向無人處。3、檢驗糖尿病患者尿液中葡萄糖,空腹或餐后2h留取尿標本。4、大量銨鹽,易致假陰性,應預先加堿煮沸去氨后再檢驗。5、蛋白>0.5g/L,易致假陰性,加熱乙酸法去蛋白取濾液檢驗
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