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關(guān)于性病實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)及應(yīng)用第一頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一常見性傳播疾病的實(shí)驗(yàn)室診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”
淋病淋球菌培養(yǎng)梅毒暗視野檢查+TPPA(FTA-ABS,WB)
沙眼衣原體衣原體培養(yǎng)+核酸擴(kuò)增技術(shù)支原體感染支原體培養(yǎng)生殖器皰疹病毒培養(yǎng)+核酸擴(kuò)增技術(shù)尖銳濕疣核酸雜交和核酸擴(kuò)增技術(shù)
HIV/艾滋病蛋白印跡試驗(yàn)+HIV抗原檢測(cè)滴蟲性陰道炎濕片法+毛滴蟲培養(yǎng)細(xì)菌性陰道病G染色查線索細(xì)胞軟下疳細(xì)菌培養(yǎng)+核酸擴(kuò)增技術(shù)性病性淋巴肉芽腫衣原體培養(yǎng)+核酸擴(kuò)增技術(shù)
第二頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一一、梅毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)第三頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第四頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第五頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一
1、暗視野檢查/鍍銀染色法2、非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)3、梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(一)實(shí)驗(yàn)室診斷方法的臨床意義第六頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一暗視野顯微鏡法直接鏡檢圖像(×1000)第七頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一1、暗視野檢查臨床意義當(dāng)標(biāo)本陽(yáng)性時(shí),可確診梅毒。適宜于早期梅毒(一、二期),特別是早期一期梅毒、早期先天梅毒。暗視野顯微鏡檢查法被WHO確定為性病實(shí)驗(yàn)室的必備方法當(dāng)標(biāo)本陰性時(shí),不能排除梅毒診斷不適用于來至口腔的標(biāo)本暗視野顯微鏡檢查法是能夠立即在獲得性或先天性梅毒的早期進(jìn)行直接診斷的唯一標(biāo)準(zhǔn)第八頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一2、RPR類臨床意義RPR等試驗(yàn)一般認(rèn)為是梅毒初篩試驗(yàn)?陽(yáng)性者,均需作確證試驗(yàn)。VDRL用于神經(jīng)梅毒診斷。有些疾病可導(dǎo)致生物學(xué)假陽(yáng)性。復(fù)發(fā)或再感染可陽(yáng)轉(zhuǎn)或滴度升高。為療效觀察、判愈方法。早期梅毒治療后血清滴度應(yīng)下降4倍認(rèn)為治療有效。第九頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一3、TPPA(TPHA)臨床意義1、為梅毒確證試驗(yàn),其敏感性:一期梅毒76%(69%-90%)二期梅毒為100%潛伏梅毒為97%(97%-100%)晚期梅毒為94%其特異性:100%2、治療后可終生陽(yáng)性,不能作為療效指標(biāo)。3、IgM抗體可作為梅毒早期診斷或胎傳梅毒診斷。4、可有1%生物學(xué)假陽(yáng)性存在,如,SLE。第十頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一兩類血清學(xué)方法臨床意義的比較RPR類:RPR等試驗(yàn)可用于大標(biāo)本量的篩查?RPR定量可排除生物學(xué)假陽(yáng)性?RPR是療效判定的指標(biāo)RPR是療后隨訪的指標(biāo)RPR用于判定是否血清復(fù)發(fā)TPPA類:是金標(biāo)準(zhǔn)TPPA等試驗(yàn)是確診指標(biāo)在HIV感染者中,血清學(xué)試驗(yàn)可發(fā)生難于解釋的現(xiàn)象,若懷疑梅毒感染應(yīng)作HIV檢查第十一頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一(二)實(shí)驗(yàn)室診斷方法臨床應(yīng)用1、適用對(duì)象2、方法學(xué)的靈敏度3、不同病期方法學(xué)選擇4、血清學(xué)結(jié)果解釋5、RPR滴度與治療效果6、療后血清學(xué)隨訪7、生物學(xué)假陽(yáng)性8、胎傳梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)9、神經(jīng)梅毒實(shí)驗(yàn)室診標(biāo)準(zhǔn)第十二頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一1、適用對(duì)象皮膚、性病門診輸血前檢查手術(shù)前檢查入院檢查產(chǎn)前檢查檢驗(yàn)檢疫第十三頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一2、方法學(xué)的靈敏度病原學(xué)檢查:PCR鍍銀染色暗視野血清學(xué)方法:FTA-ABSTPPARPR抗體:IgMIgG第十四頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一3、不同病期方法學(xué)選擇一期二期三期暗視野、鍍銀染色、PCR、IgMFTA-ABS、TPPA、ELISA、CLIA、RT、WB、RPR、暗視野、鍍銀染色、PCR等FTA-ABS、TPPA、ELISA、CLIA、RT、WB、RPR、VDRL、病理等第十五頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一4、血清學(xué)結(jié)果解釋請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。?qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。?qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。?qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。?qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋尽5谑?yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一TPPA為什么做滴度?經(jīng)常有人提問第十七頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第十八頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一夫、妻、子結(jié)果不一致情況?第十九頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一5、RPR滴度與治療效果1、治療成功:早期梅毒患者在治療后6個(gè)月內(nèi)癥狀消失,且RPR滴度有至少4倍的下降。晚期梅毒或隱性梅毒患者在治療后12~24個(gè)月內(nèi)RPR滴度有至少4倍的下降。2、治療失?。褐委熀蟀Y狀持續(xù)或重新出現(xiàn);治療后RPR滴度反而上升了4倍或以上;RPR滴度較高(1:32或以上)但在六個(gè)月內(nèi)沒有達(dá)到4倍的下降??姑范局委熓〉牟∪藨?yīng)考慮合并HIV感染及神經(jīng)梅毒的可能性。3、血清固定:經(jīng)正規(guī)治療后,梅毒患者RPR一般都會(huì)轉(zhuǎn)為陰性,但有1~3%的病人即使經(jīng)足量抗梅治療,RPR滴度仍持續(xù)呈低滴度陽(yáng)性,這種現(xiàn)象稱為血清固定,其原因尚不明了。血清固定患者的滴度重又上升則提示再次感染梅毒。第二十頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一6、療后血清學(xué)隨訪方法:RPR時(shí)間:第1年,每3個(gè)月檢查1次第2年,每6個(gè)月檢查1次第3年,最后1個(gè)月檢查第二十一頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一7、生物學(xué)假陽(yáng)性常見原因大家忘掉只有梅毒才能達(dá)到1:8?第二十二頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第二十三頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一RPR在妊娠患者中,有28%的假陽(yáng)性發(fā)生第二十四頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第二十五頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一XX梅毒事件(華西都市報(bào))2012年8月,李冬梅(化名)懷孕。2012年12月26日,初檢胎檢篩查疑患梅毒。2013年1月4日(另一家機(jī)構(gòu)),夫妻再檢均呈陰性。2013年5月14日,待產(chǎn),第2天產(chǎn)檢結(jié)果被告之有梅毒。2013年5月16日,剖腹產(chǎn)。2013年5月21日(另一家機(jī)構(gòu)),李冬梅RPR(-)TPPA(+),雙女與母一致。2013年9月,前往重慶,RPR(-)TPPA(+)。第二十六頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一8、胎傳梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)暗視野檢查陽(yáng)性。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)持續(xù)陽(yáng)性。非梅毒螺旋體抗原血清抗體滴度是母親的4倍以上?;純?9S-IgM陽(yáng)性。隨訪18個(gè)月觀察。第二十七頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一9、神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒血清學(xué)試驗(yàn)(RPR、TPPA)陽(yáng)性。腦脊液異常(WBC計(jì)數(shù)≥10*10/L
蛋白量>500mg/L)3.
腦脊液VDRL試驗(yàn)陽(yáng)性(可FTA-ABS陽(yáng)性)。6第二十八頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一梅毒血清學(xué)檢測(cè)---策略一非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(RPR)陽(yáng)性陰性報(bào)告:RPR陰性梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(TPPA)RPR定量試驗(yàn)報(bào)告:RPR陰性滴度TPPA陽(yáng)性陽(yáng)性陰性報(bào)告:RPR陽(yáng)性TPPA陰性?前帶、早期第2次收費(fèi)?1:8習(xí)慣?第二十九頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一孕產(chǎn)婦梅毒檢測(cè)及服務(wù)流程接受初次產(chǎn)前保健的孕產(chǎn)婦采用RPR或TRUST等篩查采用TPPA等證實(shí)陽(yáng)性陰性診斷梅毒感染陽(yáng)性排除梅毒感染陰性繼續(xù)常規(guī)產(chǎn)前保健2個(gè)療程治療,RPR定量檢測(cè)和隨放?方法、前帶、早期?真陽(yáng)?真能排除?真梅毒第三十頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一梅毒血清學(xué)檢測(cè)---策略二梅毒螺旋體血清試驗(yàn)(ELISA)陽(yáng)性陰性報(bào)告:ELISA陰性推薦TPPA復(fù)檢RPR定性、定量試驗(yàn)報(bào)告:ELISA陽(yáng)性RPR陽(yáng)性及滴度陽(yáng)性陰性報(bào)告:ELISA陽(yáng)性,TPPA陰性,RPR陰性報(bào)告:ELISA陽(yáng)性RPR陰性陽(yáng)性陰性報(bào)告:ELISA陽(yáng)性,TPPA陽(yáng)性,RPR陰性?敏感性第2次收費(fèi)??收費(fèi)不?以誰(shuí)為準(zhǔn)第三十一頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一我室推薦的梅毒血清學(xué)試驗(yàn)---策略三
梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(TPPA等)TPPA-TPPA+陰性報(bào)告RPR-RPR+現(xiàn)癥梅毒抗梅治療療后觀察既往感染隨訪或抗梅治療第2次收費(fèi)?第三十二頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一我室推薦的梅毒血清學(xué)試驗(yàn)---策略四
梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(TPPA等)RPR滴度(1:32直到出現(xiàn)陰性)TPPA-RPR-陰性報(bào)告TPPA-RPR+生物學(xué)假陽(yáng)性TPPA+RPR-既往感染或隨訪TPPA+RPR+現(xiàn)癥病人抗梅治療療效隨訪面對(duì)當(dāng)前梅毒血清學(xué)檢測(cè)存在的問題,即將有策略五…第三十三頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一梅毒孕產(chǎn)婦所生兒童隨訪與先天梅毒感染狀態(tài)監(jiān)測(cè)流程梅毒產(chǎn)婦所生新生兒不能開展暗視野、IgM采靜脈血、RPR定量能開展暗視野、IgM陰性診斷先天梅毒感染陽(yáng)性滴度≧母親4倍,無論有無癥狀滴度﹤母親4倍,有癥狀滴度﹤母親4倍,無癥狀治療、隨訪18月TPPA陽(yáng)性預(yù)治療每3個(gè)月RPR定量,觀察癥狀陽(yáng)性陰性RPR滴度不下降或上升,結(jié)合癥狀6月后RPR未陰,滴度低水平連續(xù)2次陰性每3個(gè)月TPPA18月TPPA+連續(xù)2次陰性排除先天梅毒感染陰性無此線?第三十四頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一歐盟梅毒指南(2008年版)初篩試驗(yàn):選用EIA、TPPA/TPHA如果懷疑早期梅毒最好用TP特異性IgM檢測(cè),如果陰性,1~2周后重復(fù)檢測(cè)RPR/VDRL不推薦作為初篩試驗(yàn),但可作為有癥狀早期梅毒的快速檢測(cè)方法,需要同時(shí)檢測(cè)滴度。第三十五頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一確證試驗(yàn)初篩陽(yáng)性,應(yīng)用另外一種TP特異性試驗(yàn)確證?EIA用TPPA/TPHA確證?TPPA/TPHA用EIA確證然后再做滴度如果初篩和確證結(jié)果不一致,則做重組抗原免疫印跡試驗(yàn)初篩和確證試驗(yàn)陽(yáng)性,而RPR/TRUST陰性,推薦做IgM檢測(cè)。陽(yáng)性結(jié)果需要對(duì)第二份血樣進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)以確證。第三十六頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一判斷梅毒活動(dòng)性成功治療后,滴度≥32罕見。IgM檢測(cè),可以說明疾病的活動(dòng)性,但是晚期梅毒IgM可能為陰性。如果治療前RPR/TRUST為陰性,IgM檢測(cè)有助于判斷病情。第三十七頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一血清學(xué)試驗(yàn)選擇篩選試驗(yàn):1.EIA;2.TPPA;3.TPPA/TPHA加VDRL/RPR。疑似早期梅毒:EIA-IgM初篩陽(yáng)性,另一實(shí)驗(yàn)證實(shí)TPPA,EIA,RPR/VDRLEIA+:confirmwithTPPAorTPHA。2個(gè)試驗(yàn)不一致:免疫印跡。VDRL/RPR滴度1:16、IgM陽(yáng)性為梅毒活動(dòng)的標(biāo)志之一。治療當(dāng)天滴度為判斷療效的最佳依據(jù)。梅毒早期VDRL/RPR滴度可能較低。第三十八頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第三十九頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第四十頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第四十一頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第四十二頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第四十三頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第四十四頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一第四十五頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一二、淋病的實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)第四十六頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一淋病診斷標(biāo)準(zhǔn)-實(shí)驗(yàn)室方法1、顯微鏡檢查涂片、革蘭染色對(duì)男性病人有診斷價(jià)值(敏感性90~95%,特異性98~100%)對(duì)女性病人敏感性50~70%2、培養(yǎng)敏感性:80~100%特異性:100%3、核酸檢測(cè):熒光PCR、NG∕CT核酸TMA雙檢、NG∕CT∕Uu三檢等敏感性:100%,死菌活菌、尿液分泌物均可特異性:100%第四十七頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一有診斷意義的報(bào)告報(bào)告方式,要包含4個(gè)因素對(duì)男性單純性NG感染,敏感性可達(dá)95%對(duì)女性NG感染,敏感性只有50%不能作為診斷指標(biāo)不能作為判愈指標(biāo)顯微鏡檢查臨床意義第四十八頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一淋菌培養(yǎng)臨床意義是臨床診斷的金標(biāo)準(zhǔn),是WHO推薦的淋病篩查的唯一方法是判愈的指標(biāo)可以對(duì)疑似(或非生殖器部位標(biāo)本)NG的菌株作進(jìn)一步的鑒定可進(jìn)行NG耐藥監(jiān)測(cè),PPNG、TRNG、QRNG科研第四十九頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一三、生殖道沙眼衣原體感染的
診斷標(biāo)準(zhǔn)第五十頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一沙眼衣原體診斷標(biāo)準(zhǔn)-
實(shí)驗(yàn)室檢查方法1、培養(yǎng)法:McCoy細(xì)胞特異性高:100%敏感性低價(jià)昂、費(fèi)時(shí)、費(fèi)力設(shè)備2、抗原檢測(cè)①、直接免疫熒光試驗(yàn)(DFA):用種特異的沙眼衣原體主要外膜蛋白單克隆抗體用熒光素標(biāo)記染色。需熒光顯微鏡,檢查者要有經(jīng)驗(yàn),區(qū)別非特異性熒光。②、酶免疫吸附試驗(yàn)(ELISA):敏感性71~97,特異性97~99%,可成批檢測(cè)。③、快速免疫層析法:明窗試驗(yàn)等。第五十一頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一明窗試驗(yàn)(clearviewchlamydia)臨床意義此法診斷女性宮頸沙眼衣原體感染的敏感性為87%,特異性為98.8%簡(jiǎn)便、快速,醫(yī)生和病人都容易接受不是金標(biāo)準(zhǔn)注意事項(xiàng)標(biāo)本的量一定要夠、拭子要大一點(diǎn)、轉(zhuǎn)動(dòng)一圈、停留時(shí)間要長(zhǎng)一點(diǎn)男性若分泌物少,可用首段尿液沉淀注意Na離子或其它原因造成的假陽(yáng)性第五十二頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一3、核酸擴(kuò)增試驗(yàn)(NAAT)聚合酶鏈反應(yīng)與連接酶鏈反應(yīng)(PCR,LCR)、熒光定量PCR、NG∕CT核酸TMA雙檢、NG∕CT∕Uu三檢等。優(yōu)點(diǎn):1、敏感性:90~97%,特異性99~100%2、可以用尿液作檢查,非侵襲性方法3、篩查,無癥狀病人缺點(diǎn):1、價(jià)格昂貴需要貴重儀器、設(shè)備2、人員需要培訓(xùn)第五十三頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一200份標(biāo)本同時(shí)用3種方法檢測(cè)Ct結(jié)果
明窗試驗(yàn)
IDEIAPCE
FQ-PCR
陽(yáng)性47 62 66
陰性153138134
合計(jì)200200200第五十四頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一四、生殖器皰疹實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)第五十五頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一生殖器皰疹診斷標(biāo)準(zhǔn)-
實(shí)驗(yàn)室檢查方法1、病毒抗原檢測(cè):?jiǎn)慰寺】贵w免疫熒光試驗(yàn)(IFA)或酶免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)來檢測(cè)抗原。2、培養(yǎng):看特征性細(xì)胞病變,特異性100%,但敏感性不高。需設(shè)備條件、技術(shù)。
3、核酸檢測(cè):熒光PCR、雙檢、三聯(lián)檢4、抗體檢測(cè):IgM第五十六頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一其它方法介紹-復(fù)合PCR請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。?qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。?qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。?qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。?qǐng)?jiān)诖溯斎肽奈谋?。第五十七?yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一HSV快速檢查方法HSV-IDEIA(酶免疫放大)與金標(biāo)準(zhǔn)相比,其敏感性達(dá)93.6%,特異性達(dá)97.8%可同時(shí)檢測(cè)HSV-1和HSV-2型文獻(xiàn)報(bào)道,HSV-1致GH的比例在上升DAKO專利技術(shù)可成批,可單人份做2小時(shí)出結(jié)果可目測(cè),可上機(jī)第五十八頁(yè),共六十七頁(yè),編輯于2023年,星期一M-PCR與IDEIA檢測(cè)HSV比較
HSV
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