腫瘤微環(huán)境與抑制劑

關(guān)于腫瘤微環(huán)境與抑制劑第一頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

主要內(nèi)容腫瘤微環(huán)境CD13CD13抑制劑—烏苯美司烏苯美司雙重作用機(jī)制的基礎(chǔ)研究第二頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三3腫瘤微環(huán)境微環(huán)境（tumormicroenvironment）：腫瘤局部浸潤(rùn)的免疫細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞及所分泌的活性介質(zhì)等與腫瘤細(xì)胞共同構(gòu)成的局部?jī)?nèi)環(huán)境。腫瘤微環(huán)境，即腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生和生活的內(nèi)環(huán)境，其中不僅包括了腫瘤細(xì)胞，還有其周圍的成纖維細(xì)胞、免疫和炎性細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞等各種細(xì)胞，同時(shí)也包括附近區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞間質(zhì)、微血管以及浸潤(rùn)在其中的生物分子。第三頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三4腫瘤微環(huán)境腫瘤微環(huán)境是在腫瘤在生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞外間質(zhì)相互作用后形成的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的特殊環(huán)境。腫瘤微環(huán)境中的各種成份相互作用，通過(guò)多種途徑刺激腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。第四頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三5腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵——腫瘤微環(huán)境侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程包括細(xì)胞增生、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、微環(huán)境、血管生成、基質(zhì)重塑、粘附分子、機(jī)體免疫、代謝壓力,干預(yù)任何一個(gè)環(huán)節(jié)，都有可能影響侵襲轉(zhuǎn)移進(jìn)程。腫瘤微環(huán)境腫瘤血管腫瘤淋巴管基質(zhì)降解粘附分子第五頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三6腫瘤微環(huán)境與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移第六頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三7降解基板和細(xì)胞外基質(zhì)是腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟纖溶酶原(組織液中高濃度存在)纖溶酶原激活劑纖溶酶降解細(xì)胞外基質(zhì)和基板基質(zhì)金屬蛋白酶前體基質(zhì)金屬蛋白酶降解基板和細(xì)胞外基質(zhì)所涉及的蛋白酶第七頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三8粘附因子：在介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用

細(xì)胞間的粘附力下降，有助于腫瘤細(xì)胞與原發(fā)瘤分離而遷移；腫瘤細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)后，與血小板、血管內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附力增強(qiáng)，

有助于腫瘤細(xì)胞成活；腫瘤細(xì)胞與血管壁和細(xì)胞外基質(zhì)之間的粘附力增強(qiáng)，有助于穿出血

管壁，形成轉(zhuǎn)移灶；腫瘤細(xì)胞粘附能力的高低對(duì)腫瘤的作用是雙向的，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞粘

附就是增強(qiáng)同質(zhì)性粘附而降低異質(zhì)性粘附，以阻止腫瘤細(xì)胞從母體

脫落及與宿主各種成分的粘附。第八頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三9細(xì)胞互相粘附以及與細(xì)胞外基質(zhì)粘附的分子類型1、2、3、黏多糖細(xì)胞表面蛋白多糖核心蛋白質(zhì)矩陣蛋白多糖核心蛋白質(zhì)多黏基質(zhì)蛋白膠原纖維細(xì)胞矩陣粘附細(xì)胞支架蛋白細(xì)胞內(nèi)附件蛋白細(xì)胞粘附分子細(xì)胞間粘附第九頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三10腫瘤血管生成是腫瘤微環(huán)境中的重要環(huán)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞周細(xì)胞成纖維細(xì)胞基底膜細(xì)胞外間質(zhì)免疫細(xì)胞腫瘤微環(huán)境中的各個(gè)成份通過(guò)多種途徑調(diào)節(jié)腫瘤血管的生長(zhǎng)和形態(tài)腫瘤微脈管系統(tǒng)是決定其內(nèi)部微環(huán)境的主要因素血管內(nèi)血管生成調(diào)節(jié)因子...................................................................................................................................................VEGF第十頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三11血管生成對(duì)于腫瘤發(fā)展是必需的血管生成在腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮作用的階段惡變前期惡性腫瘤腫瘤生長(zhǎng)血管侵襲處于休眠的微轉(zhuǎn)移灶明顯的轉(zhuǎn)移灶(未血管化的腫瘤)(血管生成開(kāi)關(guān))(血管化的腫瘤)(腫瘤細(xì)胞內(nèi)滲入血管)(定植于遠(yuǎn)處器官)(繼發(fā)性血管生成)AdaptedfromPoon,etal.JCO2001第十一頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三12Folkman,J.Tumorangiogenesis:therapeuticimplication.N.Engl.J.Med.1971.285：1182-1186.腫瘤血管生成理論JudahFolkman教授1971年，提出“腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管生成”這一觀點(diǎn)，開(kāi)創(chuàng)了一個(gè)新的研究領(lǐng)域。腫瘤的生長(zhǎng)有兩個(gè)明顯不同的階段，即無(wú)血管的緩慢生長(zhǎng)階段和有血管的快速增殖階段。大部分實(shí)體瘤可長(zhǎng)期處于無(wú)血管的休眠(dormant)狀態(tài),腫瘤細(xì)胞依靠被動(dòng)擴(kuò)散獲得營(yíng)養(yǎng),最大直徑小于2mm。波士頓兒童醫(yī)院醫(yī)療中心外科教授第十二頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三13腫瘤的生長(zhǎng)有賴于新生血管第十三頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三14阻斷新生血管，抑制腫瘤生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的腫瘤血管生長(zhǎng)因子(tumorangiogenesisfactor,TAF)能觸發(fā)腫瘤血管生成。觸發(fā)了血管生成，腫瘤就會(huì)進(jìn)入快速增值階段，此外，血管還是腫瘤轉(zhuǎn)移的途徑之一。阻斷新生血管生成，就有可能控制腫瘤生長(zhǎng)，遏制腫瘤侵襲、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移。第十四頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三T細(xì)胞:TIL/CTLNK單核巨噬細(xì)胞腫瘤轉(zhuǎn)移微環(huán)境腫瘤微環(huán)境—腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵內(nèi)皮細(xì)胞降解周圍基質(zhì)血管生成因子血小板、血管內(nèi)皮細(xì)胞血管壁和細(xì)胞外基質(zhì)第十五頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

主要內(nèi)容腫瘤微環(huán)境CD13CD13抑制劑—烏苯美司烏苯美司雙重作用機(jī)制的基礎(chǔ)研究第十六頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三金屬蛋白酶——氨肽酶N，CD13

氨肽酶N(APN，CD13)屬于結(jié)合Zn的金屬蛋白酶超家族，廣泛分布于造血細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、腦細(xì)胞和腸、腎、肝細(xì)胞等，參與蛋白水解，參與細(xì)胞和器官的正常蛋白代謝。在多種腫瘤細(xì)胞表面高水平表達(dá)，如白血病、前列腺癌、結(jié)腸癌、非小細(xì)胞肺癌等，被稱作腫瘤細(xì)胞標(biāo)記物。第十七頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三子宮內(nèi)膜腺癌、卵巢癌組織中APN/CD13的表達(dá)

子宮內(nèi)膜腺癌粘液性囊腺癌漿液性囊腺癌陰性對(duì)照APN/CD13在腫瘤細(xì)胞表達(dá)較強(qiáng)，間葉組織較弱

Int.J.Cancer.2007,120,2243–2250第十八頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三氨肽酶N——CD13作用一、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移CD13通對(duì)基底膜成分(基膜和Ⅳ型膠原蛋白)的水解作用,進(jìn)行組織消化穿透;一種輔助的粘附分子，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞附著，參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、炎癥驅(qū)化；促進(jìn)腫瘤新生血管的形成：

在血管形成刺激因素如缺氧、VEGF作用下,新生血管內(nèi)皮CD13mRNA及表達(dá)上調(diào),而成熟血管內(nèi)皮無(wú)CD13表達(dá)。第十九頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三氨肽酶N——CD13作用CD13連續(xù)降解：多的肽調(diào)節(jié)因子，其中包括免疫活性物質(zhì)，從而降低了機(jī)體免疫；抑制免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞表面抗原的識(shí)別和直接殺傷細(xì)胞的能力。二、

免疫負(fù)調(diào)節(jié)第二十頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三胰腺癌患者體內(nèi)CD13的表達(dá)量

與腫瘤血管密度的關(guān)系IMD：intratumormicrovesseldensity(腫瘤內(nèi)微血管密度)結(jié)論：CD13的表達(dá)與腫瘤血管生成成正相關(guān)IkedaN,etal.ClinCancerRes,2003,9∶1503第二十一頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三CD13表達(dá)陰性(-)胰腺患者生存期

明顯延長(zhǎng)IkedaN,etal.ClinCancerRes,2003,9∶1503第二十二頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三CD13表達(dá)低的NSCLC患者總生存率顯著延長(zhǎng)A：90例NSCLC患者生存期CD13表達(dá)量關(guān)系B：40例Ⅳ期NSCLC患者生存期與CD13表達(dá)量關(guān)系HaruyasuMurakami，ClinCancerRes

,2005，11：

8674第二十三頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三24CD13通過(guò)降解IL-8，抑制白血病細(xì)胞凋亡血管內(nèi)皮細(xì)胞互相接觸釋放（凋亡因子）高表達(dá)CD13抵抗誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡作用被

IL-8是CD13/APN

的底物，很可能CD13／APN通過(guò)降解IL-8，抑制血細(xì)胞凋亡，起到促進(jìn)血細(xì)胞增殖發(fā)育的作用。MishimaY.etal.JNatlCancerInst,2002,94:1020—1028第二十四頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

主要內(nèi)容腫瘤微環(huán)境CD13CD13抑制劑—烏苯美司烏苯美司雙重作用機(jī)制的基礎(chǔ)研究第二十五頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三CD13抑制劑——烏苯美司

1976年,日本的梅澤濱夫等人從網(wǎng)狀橄欖鏈霉菌培養(yǎng)液中發(fā)現(xiàn)了一種具有抗菌作用和免疫增強(qiáng)作用的小分子二肽化合物,為氨基肽酶N的特異性抑制劑，具有直接和以宿主為中介的抗腫瘤活性作用。

萬(wàn)樂(lè)烏苯美司片（專利創(chuàng)新劑型）于2009年上市。第二十六頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三27烏苯美司目前研究較為成熟的CD13抑制劑是從網(wǎng)狀橄欖鏈霉菌培養(yǎng)液中發(fā)現(xiàn)的一種低分子二肽化合物——烏苯美司，作為免疫增強(qiáng)劑上市。烏苯美司成為一類新型的治療藥物，主要用于預(yù)防和治療腫瘤。第二十七頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三28烏苯美司雙重作用機(jī)制

-改善腫瘤微環(huán)境靶向抗癌作用提高機(jī)體免疫力第二十八頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三烏苯美司—CD13抑制劑

提高機(jī)體免疫力抑制CD13123123第二十九頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三免疫調(diào)節(jié)劑在微環(huán)境中的作用第三十頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三不同蛋白酶抑制劑對(duì)ATRA誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化的作用(*P<0.05)只有Ube在1ng/ml濃度下可增強(qiáng)ATRA對(duì)NB4細(xì)胞的分化作用不加10-7MATRA加10-7M

ATRAAmastatinA:抑氨肽酶AAntipain:抗蛋白酶素Chymostatin:糜蛋白酶抑制素Leupeptin:亮肽酶素Pepstatin:胃酶抑素UbenimexUbenimex第三十一頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

主要內(nèi)容腫瘤微環(huán)境CD13CD13抑制劑—烏苯美司烏苯美司雙重作用機(jī)制的基礎(chǔ)研究第三十二頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三烏苯美司體外作用

金屬蛋白酶CD13抑制劑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制腫瘤新血管的形成

提高機(jī)體免疫力第三十三頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

金屬蛋白酶CD13抑制劑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制腫瘤新血管的形成

提高機(jī)體免疫力第三十四頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三不同細(xì)胞株CD13金屬蛋白酶的活性RichardA.etal.Blood,1990,75(2):pp462-469第三十五頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三烏苯美司對(duì)細(xì)胞表面CD13活性的抑制UbenimexRichardA.etal.Blood,1990,75(2):pp462-469phosp、D,L、N-carb:CD10抑制第三十六頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

金屬蛋白酶CD13抑制劑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制腫瘤新血管的形成

提高機(jī)體免疫力第三十七頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三烏苯美司抑制K562細(xì)胞，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡SawafujiK,etal.Leukemia&Lymphoma2003;44(11):1987-1996第三十八頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

金屬蛋白酶CD13抑制劑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制腫瘤新生血管的形成

提高機(jī)體免疫力第三十九頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三烏苯美司對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的影響（相差顯微鏡圖）血管生成是腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟，CD13/APN是重要調(diào)節(jié)因子，Ube作為CD13的功能性抑制劑，與CD13單抗相似，可抑制HUVEC的生長(zhǎng)，與對(duì)照組有顯著差異。UBETheangiogenicregulatorCD13/APNisatranscriptionaltargetofRassignalingpathwaysinendothelialmorphogenesisBhagwatSV,etal.Blood.2003

;101(5)

:1818-1826第四十頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

金屬蛋白酶CD13抑制劑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制腫瘤新血管的形成

提高機(jī)體免疫力第四十一頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三42激活單核細(xì)胞，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞活性沈煒明,等.中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,1995,26(9):397-400結(jié)論:Ube激活單核細(xì)胞，合成并分泌IL-1等細(xì)胞因子發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。Ube體外對(duì)人單核細(xì)胞合成和分泌IL-1的影響（N=8，X±S）Ube(μg/ml)IL-1細(xì)胞外細(xì)胞內(nèi)01084±108965±1710.013592±430*1382±2650.14150±348**2104±346*14451±419**3874±401**103572±335**4359±824*1002576±306*3656±439*第四十二頁(yè)，共四十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三增強(qiáng)NK細(xì)胞活性——提高機(jī)體免疫BS濃度在0.01-1ug/ml范圍內(nèi)，對(duì)NK細(xì)胞活性的影響不明顯（P﹥0.05）當(dāng)BS濃度大于10ug/ml時(shí)，能顯著增強(qiáng)小鼠脾NK細(xì)胞活性，并隨濃度提高而增強(qiáng)。烏苯美司對(duì)小鼠脾臟天然殺傷細(xì)胞活性的增強(qiáng)作用.中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，1995，26（6）：255-257濃度（ug/ml)NK細(xì)胞活性（%）E/T100:150:1037.45±5.824.09±7.50.0136.91±8.724.81±9.50.138.57±9.626.50±8.4139.73±11.227.41±12.31058.32±14.8※※46.89±18.9※※10065.73±17.4※※52.75±15